Комплект реагентов для выделения ДНК (ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА) — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
| RCF | - от англ. relative centrifugal force, относительное ускорение центри- фуги | | ДНК | - дезоксирибонуклеиновая кислота | | ДНКазы | - дезоксирибонуклеазы | | К- | - отрицательный контрольный образец | | НК | - нуклеиновые кислоты (РНК и ДНК) | | ПЦР | - полимеразная цепная реакция | | РНКазы | - рибонуклеазы | | ЭДТА | - этилендиаминтетраацетат | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 2 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ В настоящей инструкции используются следующие сокращения и обозначения: ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 3 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 1 ПРЕДНАЗНАЧЕННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ 1.1 Полное наименование комплекта реагентов: Комплект реагентов для выделения ДНК (ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА), далее по тексту – комплект реагентов. 1.2 Назначение: комплект реагентов предназначен для выделения ДНК из биологиче- ского материала (амниотическая жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, везикуляр- ная жидкость, ликвор (спинномозговая жидкость), мазки с эндотрахеальных трубок, мазки/соскобы (отделяемое) из урогенитального тракта, мазки/соскобы из дыхатель- ных путей, мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта, мазки/соскобы с пора- женных участков кожи и эрозивно-язвенных элементов, раневое отделяемое, мок- рота, молоко, моча, образцы тканей (биопсийный (в т.ч. аутопсийный), хирургиче- ский материал, пунктаты), периферическая/пуповинная кровь (цельная), перифери- ческая/пуповинная кровь (лейкоциты крови), периферическая/пуповинная кровь (плазма крови), плевральная жидкость, секрет предстательной железы, синовиальная жидкость, слюна, смывы из ротоглотки и полости носа, смывы с эндотрахеальных трубок, соскобы эпителиальных клеток (отделяемое) с конъюнктивы глаза, фекалии (или меконий), экссудаты, эндотрахеальный и назофарингеальный аспираты, эяку- лят (сперма)), а также из культур микроорганизмов, полученных из этого биомате- риала, для последующего анализа методом полимеразной цепной реакции. 1.3 Функциональное назначение: вспомогательное средство для диагностики in vitrо. 1.4 Популяционные и демографические аспекты: применение комплекта реагентов не зависит от популяционных и демографических аспектов. Противопоказаний к применению нет. 1.5 Область применения: комплект реагентов может быть использован в клинико-ди- агностических лабораториях медицинских учреждений. 1.6 Потенциальные пользователи: квалифицированный персонал, осуществляющий взятие и предобработку клинического материала, а также специалисты, обученные методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории в установленном порядке: врач клинико-диагностической лаборатории, фельдшер-лаборант (медицинский лабораторный техник). 1.7 Применять комплект реагентов строго по назначению согласно данной инструкции по применению. | | P-003/1 | | | | | Наименование компонента | | Внешний вид | Количество флако- нов/пробирок | Номинальный объём компонента | | Лизирующий раствор | | Прозрачная бесцветная пенящаяся жидкость | 1 флакон | 15 мл | | Сорбент | | Жидкость с осадком, образующим взвесь ко- ричневого цвета при встряхивании | 2 пробирки | по 1,0 мл | | Промывочный раствор №1 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 20 мл | | Промывочный раствор №2 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 20 мл | | Промывочный раствор №3 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 20 мл | | Элюирующий раствор | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 10 мл | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 4 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 2 ХАРАКТЕРИСТИКА КОМПЛЕКТА РЕАГЕНТОВ Комплект реагентов выпускается в следующих комплектациях: ПРОБА-ГС; ПРОБА-ГС-ПЛЮС; ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА. ВНИМАНИЕ! 1. Комплектации ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС используется для получения препарата ДНК из биологического материала (всех видов биоматериала, кроме цельной периферической/пуповинной крови) для последующего анализа методом полимеразной цепной реакции. 2. Комплект реагентов в комплектации ПРОБА-ГС-ПЛЮС применяется для получения большего объёма ДНК (300 мкл) по сравнению с комплектацией ПРОБА-ГС (100 мкл) с целью проведения в дальнейшем большего числа ПЦР–исследований. 3. Комплектацию ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА используется для получения препарата ДНК из цельной периферической/пуповинной крови для последующего проведения генетических исследований выделенной ДНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени. 2.1 Состав комплекта реагентов 2.1.1 Комплектация ПРОБА-ГС | | P-003/2 | | | | | Наименование компонента | | Внешний вид | Количество флако- нов/пробирок | Номинальный объём компонента | | Лизирующий раствор | | Прозрачная бесцветная пенящаяся жидкость | 1 флакон | 7,5 мл | | Сорбент | | Жидкость с осадком, образующим взвесь ко- ричневого цвета при встряхивании | 1 пробирка | 1,0 мл | | Промывочный раствор №1 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 10 мл | | Промывочный раствор №2 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 10 мл | | Промывочный раствор №3 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 10 мл | | Элюирующий раствор | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 15 мл | | | P-023/4 | | | | | Наименование компонента | | Внешний вид | Количество флако- нов/ пробирок | Номинальный объём компонента | | Лизирующий раствор | | Прозрачная бесцветная пенящаяся жидкость | 1 флакон | 7,2 мл | | Сорбент | | Жидкость с осадком, об- разующим взвесь корич- невого цвета при встря- хивании | 1 пробирка | 960 мкл | | Промывочный раствор №1 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 19,2 мл | | Промывочный раствор №2 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 9,6 мл | | Промывочный раствор №3 | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 9,6 мл | | Элюирующий раствор | | Прозрачная бесцветная жидкость | 1 флакон | 14,4 мл | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 5 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 2.1.2 Комплектация ПРОБА-ГС-ПЛЮС 2.1.3 Комплектация ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Все компоненты комплекта реагентов готовы к применению и не требуют дополнительной подготовки к работе. Комплектность: Комплект реагентов в одной из комплектаций – 1 шт.; Инструкция по применению – 1 экз.; Паспорт – 1 экз. ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 6 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 2.2 Количество анализируемых образцов Комплект реагентов в комплектации ПРОБА-ГС рассчитан на выделение нуклеино- вых кислот из 100 анализируемых образцов (не более 33 постановок), включая отрицатель- ные контрольные образцы. Комплект реагентов в комплектации ПРОБА-ГС-ПЛЮС рассчитан на выделение нуклеиновых кислот из 50 анализируемых образцов (не более 16 постановок), включая отри- цательные контрольные образцы. Комплект реагентов в комплектации ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА рассчитан на выделе- ние нуклеиновых кислот из 48 анализируемых образцов (не более 16 постановок), включая отрицательные контрольные образцы. 2.3 Принцип метода Принцип метода основан на использовании для лизиса клеток сильного хаотроп- ного агента - гуанидина тиоционата (GuSCN), и последующей сорбции ДНК на носителе (стеклянные бусы, диатомовая земля, стеклянное «молоко» и т.д.). После отмывок в образце остается ДНК, сорбированная на носителе, с которого она легко снимается с помощью элюирующего раствора. Метод удобен, технологичен и пригоден для подготовки образца к амплификации. Однако возможны потери ДНК вследствие необратимой сорбции на носителе, а также в про- цессе многочисленных отмывок. Особенно большое значение это имеет при работе с неболь- шими количествами ДНК в образце. Кроме того, даже следовые количества GuSCN могут ингибировать ПЦР. Поэтому при использовании этого метода очень важно тщательное со- блюдение инструкции по применению. Следует отметить, что из-за большого количества стадий добавления и удаления рас- творов при работе с образцом требуется аккуратность, т.к. возможна перекрестная контами- нация между образцами образующейся аэрозолью ДНК. | Биоматериал | Минимальное количество | | Амниотическая жидкость | 500 мкл | | Бронхоальвеолярный лаваж | 500 мкл | | Везикулярная жидкость1 | 50 мкл | | Ликвор (спинномозговая жидкость) | 500 мкл | | Мазки1 с эндотрахеальных трубок | 50 мкл | | Мазки/соскобы (отделяемое)1 из урогенитального тракта | 50 мкл | | Мазки/соскобы1 из дыхательных путей | 50 мкл | | Мазки/соскобы1 из желудочно-кишечного тракта | 50 мкл | | Мазки/соскобы1 с пораженных участков кожи и эро- зивно-язвенных элементов, раневое отделяемое | 50 мкл | | Мокрота (способ 1) | 500 мкл | | Мокрота (способ 2) | 1,0 мл | | Молоко | 50 мкл | | Моча | 1,0 мл | | Образцы тканей (биопсийный (в т.ч. аутопсийный), хи- рургический материал, пунктаты) | Образец диаметром до 5,0 мм (50 - 100 мг) | | Периферическая/пуповинная кровь (цельная)2 | 100 мкл | | Периферическая/пуповинная кровь (лейкоциты крови) | 50 мкл3 | | Периферическая/пуповинная кровь (плазма крови) | 50 мкл3 | | Плевральная жидкость | 500 мкл | | Секрет предстательной железы | 100 мкл | | Синовиальная жидкость | 500 мкл | | Слюна | 500 мкл | | Смывы из ротоглотки и полости носа | 300 мкл | | Смывы с эндотрахеальных трубок | 50 мкл | | Соскобы эпителиальных клеток (отделяемое) 1 с конъ- юнктивы глаза | 50 мкл | | Фекалии (или меконий) | 100 мкл/мг | | Экссудаты1 | 50 мкл | | Эндотрахеальный и назофарингеальный аспираты | 1,0 мл | | Эякулят (сперма) | 100 мкл | | Культуры микроорганизмов, выделенные из биоматери- ала4 | 50 мкл | | Примечания к таблице: 1 – после проведения подготовки к выделению ДНК образцов биологического материала, взятых в Транспортную среду для биопроб СТОР-Ф, ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ № РЗН 2020/9640 2 - только для комплектации ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 3 - полученные из 1,5 мл цельной крови 4 - взятые в физиологический раствор | | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 7 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 3 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1 Минимальное количество биоматериала, из которого может производиться выде- ление ДНК: | Вид биоматериала | Интерферирующее вещество | Исследованная концен- трация в образце | | Эндогенные вещества | | | | Амниотическая жидкость, брон- хоальвеолярный лаваж, везикуляр- ная жидкость, ликвор (спинномозго- вая жидкость), лейкоциты крови, мазки с эндотрахеальных трубок, мазки/соскобы (отделяемое) из уро- генитального тракта, мазки/соскобы из дыхательных путей, мазки/со- скобы из желудочно-кишечного тракта, мазки/соскобы с пораженных участков кожи и эрозивно-язвенных элементов, раневое отделяемое, мок- рота, молоко, моча, образцы тканей (биопсийный (в т.ч. аутопсийный), хирургический материал, пунктаты), плевральная жидкость, синовиаль- ная жидкость, секрет предстатель- ной железы, слюна, смывы из рото- глотки и полости носа, смывы с эн- дотрахеальных трубок, соскобы эпи- телиальных клеток (отделяемое) с конъюнктивы глаза, фекалии (или меконий), экссудаты, эндотрахеаль- ный и назофарингеальный аспираты, эякулят (сперма) | Цельная кровь | 5,0 % v/v | | Амниотическая жидкость, брон- хоальвеолярный лаваж, везикуляр- | Слизь (муцин) | 5,0 % v/v | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 8 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 3.2 Функциональные характеристики комплекта реагентов: Выход ДНК (эффективность) составляет 700 - 2500 нг1; Объём получаемого препарата ДНК: от 100 до 300 мкл. 3.3 Интерферирующие вещества Наличие ингибиторов ПЦР в образце биологического материала может быть причи- ной сомнительных (неопределённых/недостоверных) результатов. Признаком полного инги- бирования ПЦР является одновременное отсутствие амплификации внутреннего контроля и специфического продукта. Для оценки возможной интерференции были выбраны эндогенные и экзогенные ве- щества, которые потенциально могут присутствовать в биологических образцах, взятых из соответствующих исследуемых биотопов. Оценка влияния интерферирующих веществ в образцах биологического материала на результаты исследования, представлены в таблице ниже. 1 - выход ДНК приведен для выделения из крови объёмом 100 мкл с содержанием лейкоцитов от 5,5 х 109/л до 7,8 х109/л. | Вид биоматериала | Интерферирующее вещество | Исследованная концен- трация в образце | | ная жидкость, ликвор (спинномозго- вая жидкость), мазки с эндотрахе- альных трубок, мазки/соскобы (от- деляемое) из урогенитального тракта, мазки/соскобы из дыхатель- ных путей, мазки/соскобы из желу- дочно-кишечного тракта, мазки/со- скобы с пораженных участков кожи и эрозивно-язвенных элементов, ра- невое отделяемое, мокрота, молоко, моча, плевральная жидкость, об- разцы тканей (биопсийный (в т.ч. аутопсийный), хирургический мате- риал, пунктаты), секрет предстатель- ной железы, синовиальная жидкость, слюна, смывы из ротоглотки и поло- сти носа, смывы с эндотрахеальных трубок, соскобы эпителиальных кле- ток (отделяемое) с конъюнктивы глаза, фекалии (или меконий), экссу- даты, эндотрахеальный и назофа- рингеальный аспираты, эякулят (сперма) | | | | Экзогенные вещества | | | | Периферическая/пуповинная кровь (цельная), периферическая/пуповин- ная кровь (плазма) | ЭДТА | до 2,0 мг/мл | | Бронхоальвеолярный лаваж, мазки/соскобы из дыхательных пу- тей, мазки с эндотрахеальных тру- бок, мокрота, смывы из ротоглотки и полости носа, смывы с эндотрахе- альных трубок, эндотрахеальный и назофарингеальный аспираты | Лазолван® РИНО, РИНОФЛУИМУЦИЛ®, Тизин® Классик, Спрей Тантум® Верде, Гексорал® Раствор, Беродуал®, Сальбутамол- Тева, Гриппферон® Капли назальные | 10 % v/v | | Амниотическая жидкость, брон- хоальвеолярный лаваж, везикуляр- ная жидкость, ликвор (спинномозго- вая жидкость), мазки/соскобы (отде- ляемое) из урогенитального тракта, мазки/соскобы из дыхательных пу- тей, мазки/соскобы из желудочно- кишечного тракта, мазки/соскобы с пораженных участков кожи и эро- зивно-язвенных элементов, раневое отделяемое, мазки с эндотрахеаль- ных трубок, мокрота, молоко, моча, плевральная жидкость, образцы тка- ней (биопсийный (в т.ч. аутопсий- ный), хирургический материал, пунктаты), смывы из ротоглотки и полости носа, смывы с эндотрахе- альных трубок, синовиальная жид- кость, секрет предстательной же- | Хлоргексидина биглюконат | 10 % v/v | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 9 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 10 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Интерферирующее Исследованная концен- Вид биоматериала вещество трация в образце лезы, слюна, соскобы эпителиаль- ных клеток (отделяемое) с конъюнк- тивы глаза, фекалии (или меконий), экссудаты, эндотрахеальный и назо- фарингеальный аспираты, эякулят (сперма) При добавлении гепарина в образцы биоматериала (кровь) ингибирование ПЦР наблюдалось при минимально исследованной концентрации интерферента, равной 110 МЕ/дл. 3.4 Наборы реагентов, совместно с которыми может быть использован комплект реагентов для выделения ДНК: Сведения о совместимости приведены в инструкциях по применению наборов/ком- плектов реагентов, предназначенных для последующего анализа ДНК методом ПЦР и заре- гистрированных в установленном порядке в Российской Федерации. 3.5 Эффективность комплекта реагентов Эффективность комплекта реагентов установлена в ходе проведения клинических испытаний с использованием дополнительных наборов реагентов для амплификации при ис- следовании образцов биологического материала. Эффективность комплекта реагентов составила 100% (95 % ДИ: 99,39 % – 100 %). 3.6 Воспроизводимость и повторяемость Воспроизводимость составляет 100 % Повторяемость составляет 100 %. ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 11 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 4 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Организация работы ПЦР-лаборатории, оборудование и материалы должны соответ- ствовать требованиям ГОСТ Р ИСО 15190-2023, методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кис- лот, при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности», с со- блюдением санитарных правил и норм СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней». Неизвестные образцы рассматриваются как потенциально-опасные. При работе с комплектом реагентов следует надевать одноразовые перчатки без талька. При работе с мик- роорганизмами I-IV групп патогенности выбор типа защитного костюма (рабочей одежды и средств индивидуальной защиты) проводится в строгом соответствии с СанПиН 3.3686-21 и определяется видом возбудителя, рабочей зоной, оснащением ее боксами биологической без- опасности. Следует использовать только одноразовые наконечники и пробирки. Не допускается использование одних и тех же наконечников при обработке различных об- разцов биологического материала. К работе с комплектом реагентов допускается персонал, обученный методам моле- кулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории. Подготовку и проведение исследования биоматериала с использованием комплекта реагентов следует проводить в боксах биологической безопасности II класса. Запрещается перемещение лабораторного оборудования, в том числе дозаторов, штативов, лабораторной посуды, халатов, головных уборов и пр., а также растворов реаген- тов из одного помещения в другое. Дозаторы должны быть соответствующим образом поверены (в аккредитованных лабораториях) и промаркированы. Использованные одноразовые принадлежности (пробирки, наконечники и др.) должны сбрасываться в контейнер для медицинских отходов, содержащий дезинфицирую- щий раствор. Поверхности рабочих столов, а также помещений, в которых проводится выделе- ние НК и постановка ПЦР, следует обязательно, до и после проведения работ, облучать с помощью бактерицидных установок в течение 30 мин. Все поверхности в лаборатории (рабочие столы, штативы, оборудование и др.) еже- дневно подвергают влажной уборке с применением дезинфицирующих/моющих средств, ре- гламентированных санитарными правилами СанПиН 3.3686-21. Отходы биоматериала (инфицированные или потенциально инфицированные), об- разцы после пробоподготовки, образующиеся в клинико-диагностических лабораториях, от- носятся к классу В и утилизируются в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 | Компонент комплекта реаген- тов | Наличие/отсутствие опас- ного компонента | Указание на риски | | Лизирующий раствор | Гуанидина тиоционат Тритон X-100 | H302, H312, H314, H332, H412 H302, H314, H319, H412 | | Промывочный раствор №1 | Гуанидина тиоционат | H302, H312, H314, H332, H412 | | Промывочный раствор №2 | Изопропанол | Н225, Н319, Н336 | | Промывочный раствор №3 | Метилацетат | Н225, Н319, Н336 | | Элюирующий раствор | Азид натрия менее 0,1% | Не классифицируется как опасный для здоровья человека и окружающей среды | | Сорбент | Азид натрия менее 0,1% | Не классифицируется как опасный для здоровья человека и окружающей среды | | Расшифровка обозначений: Н302 – Вредно при проглатывании; Н312 – Вредно при контакте с кожей; Н314 – При попадании на кожу и глаза вызывает химические ожоги; H319 – Вызывает раздра- жение глаз; Н225 – Легковоспламеняющиеся жидкость. Пары образуют с воздухом взрывоопасные смеси; Н332 – Вредно при вдыхании; Н336 – Может вызывать сонливость и головокружение; Н412 – Вредно для водных организмов с долгосрочными последствиями. | | | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 12 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА «Санитарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сель- ских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосфер- ному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактиче- ских) мероприятий» и МУ 1.3.2569-09. Опасные компоненты в комплекте реагентов При работе с комплектом реагентов следует использовать средства индивидуальной защиты для предотвращения контакта с организмом человека. После окончания работы тща- тельно вымыть руки. Избегать контакта с кожей, глазами и слизистыми оболочками, не гло- тать. При аварийных ситуациях возможно следующее: раздражение кожи и слизистой обо- лочки глаз у чувствительных лиц. При контакте промыть пораженное место большим коли- чеством воды и обратиться за медицинской помощью. При использовании по назначению и соблюдении мер предосторожности, контакт с организмом человека исключен. Не использовать комплект реагентов: при нарушении условий транспортирования и хранения; при несоответствии внешнего вида компонентов, указанного в паспорте к комплекту реагентов; при нарушении внутренней упаковки компонентов комплекта реагентов; по истечению срока годности комплекта реагентов. Примечание – Комплект реагентов не содержит материалов биологического происхождения, ве- ществ в концентрациях, обладающих канцерогенным, мутагенным действием, а также влияющих на репродуктивную функцию человека. При использовании по назначению и соблюдении мер предосто- рожности является безопасным. ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 13 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 5 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ При работе с комплектом реагентов требуются следующие оборудование, реагенты и расходные материалы: бокс биологической безопасности II класса; термостат твердотельный, поддерживающий температуру от 50 °С; центрифуга для пробирок объёмом 1,5 мл, обеспечивающая RCF(g) 16000; электрический лабораторный аспиратор с колбой-ловушкой для удаления надосадоч- ных жидкостей; одноразовые наконечники без фильтра, свободные от РНКаз и ДНКаз, для электриче- ского лабораторного аспиратора (при необходимости удаления надосадочной жидкости); микроцентрифуга-вортекс1; холодильник с морозильной камерой; одноразовые пластиковые пробирки объёмом 1,5 мл, свободные от РНКаз и ДНКаз; штатив «рабочее место» для пробирок объёмом 1,5 мл; дозаторы механические или электронные переменного объёма одноканальные, позво- ляющие отбирать объёмы жидкости от 20 до 200 мкл, от 200 до 1000 мкл; одноразовые наконечники с фильтром для полуавтоматических дозаторов, свободные от ДНКаз и РНКаз, объёмом 200 мкл, 1000 мкл; штатив для дозаторов; одноразовые перчатки медицинские, без талька, текстурированные; ёмкость для сброса использованных наконечников и других расходных материалов; дезинфицирующий раствор; физиологический раствор (0,9% NaCl) стерильный (при необходимости); транспортная среда, предназначенная для транспортирования и хранения образцов биологического материала для ПЦР-исследований (при необходимости), рекомендуется транспортная среда для биопроб СТОР-Ф, ООО «ДНК-Технология ТС», РУ № РЗН 2020/9640. Дополнительно для выделения ДНК из периферической/пуповинной крови: вакуумные пластиковые пробирки типа Vacuette с ЭДТА или цитратом натрия; центрифуга для пробирок типа Vacuette. 1 - рекомендуется Встряхиватель лабораторный медицинский «ДТспин» по ТУ 32.50.50-003-96301278-2024, ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ № РЗН 2024/24070 ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 14 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Дополнительно для выделения нуклеиновых кислот из плазмы перифериче- ской/пуповинной крови: вакуумные пластиковые пробирки типа Vacuette с ЭДТА или цитратом натрия; центрифуга для пробирок типа Vacuette, обеспечивающая RCF(g) от 800 до 1600. Дополнительно для выделения ДНК из лейкоцитов периферической/пуповин- ной крови: вакуумные пластиковые пробирки типа Vacuette с ЭДТА или цитратом натрия; центрифуга для пробирок объёмом 2,0 мл, обеспечивающая RCF(g) от 50 до 10000; пробирки микроцентрифужные объёмом 2,0 мл, свободные от РНКаз и ДНКаз; штатив «рабочее место» для пробирок объёмом 2,0 мл. Дополнительно при выделении ДНК из мокроты (способ 1): центрифуга, обеспечивающая RCF(g) 900; 10% раствор трёхзамещенного фосфорнокислого натрия х 12Н О; 2 1,0 M раствор HCl; 5,0% раствор хлорамина; вода дистиллированная. Дополнительно при выделении ДНК из мокроты (способ 2): муколизин, например Реагент для предобработки слизистого материала «МУКОЛИ- ЗИН» по ТУ 9398-159-01897593-2011, ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, РУ № ФСР 2011/12082. Дополнительно при выделении ДНК из фекалий: центрифуга для пробирок объёмом 1,5 мл, обеспечивающая RCF(g) 10000 или 13000; Набор реагентов для предобработки биоматериала лизоцимом при выделении ДНК (ПРОБА-Л) по ТУ 21.20.23-134-46482062-2021, ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ № РЗН 2022/16776 (при необходимости). ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 15 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 6 АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ 6.1 Материал для выделения ДНК Для выделения ДНК используют: для комплектаций ПРОБА-ГС и ПРОБА-ГС-ПЛЮС - периферическую/пуповинную кровь (плазму крови), периферическую/пуповинную кровь (лейкоциты крови), слюну, мочу, эякулят (сперму), секрет предстательной железы, ликвор (спинномозговую жидкость), мазки/соскобы из дыхательных путей, мазки/соскобы (отделяемое) из уро- генитального тракта, амниотическую жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, везику- лярную жидкость, , мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта, мазки/соскобы с пораженных участков кожи и эрозивно-язвенных элементов, раневое отделяемое, мазки с эндотрахеальных трубок, мокроту, молоко, плевральную жидкость, образцы тканей (биопсийный (в т.ч. аутопсийный), хирургический материал, пунктаты), сино- виальную жидкость, смывы из ротоглотки и полости носа, смывы с эндотрахеальных трубок, соскобы эпителиальных клеток (отделяемое) с конъюнктивы глаза, фекалии (или меконий), экссудаты, эндотрахеальный и назофарингеальный аспираты, а также культуры микроорганизмов, полученные из этого биоматериала; для комплектации ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА – цельную периферическую/пуповинную кровь. Примечание – Взятие, предварительную обработку, хранение и перевозку, передачу исследуе- мого материала в другие организации осуществляют согласно инструктивно-методическим докумен- там, регламентирующим выполнение исследований в соответствии с требованиями МУ 1.3.2569-09 и СанПиН 3.3686-21. 6.2 Общие требования 6.2.1 Исследование методом ПЦР относится к прямым методам лабораторного исследо- вания, поэтому взятие биологического материала человека необходимо проводить из места локализации инфекционного процесса. Решение о необходимости исследо- вать ту или иную локализацию принимает лечащий врач на основании собранного анамнеза и клинической картины заболевания. 6.2.2 Для получения корректных результатов большое значение имеет качество взятия об- разца биоматериала для исследования, его хранение, транспортирование и предва- рительная обработка. Неправильное взятие биоматериала может привести к получению недостоверных ре- зультатов и, вследствие этого, необходимости его повторного взятия. 6.2.3 При необходимости взятия биоматериала из нескольких биотопов повторите проце- дуру, каждый раз забирая материал в отдельную транспортную ёмкость. ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 16 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 6.2.4 На этапах подготовки биоматериала используйте одноразовые наконечники, свобод- ные от РНКаз и ДНКаз (с фильтром, за исключением этапа отбора надосадочной жидкости с использованием аспиратора). 6.2.5 При добавлении раствора в пробирку, содержащую биологический материал, акку- ратно вносите жидкости, не касаясь стенок пробирок. При касании к стенке про- бирки смените наконечник. Наконечник следует менять при каждом удалении рас- твора из образца. 6.2.6 Для предотвращения контаминации открывайте крышку только той пробирки, в ко- торую будете вносить образец/реагент или забирать жидкость, и закрывайте ее перед работой со следующей пробиркой. Не допускается работать одновременно с не- сколькими пробирками с открытыми крышками. 6.3 Взятие материала для выделения ДНК ВНИМАНИЕ! Перед выделением ДНК может потребоваться подготовка образцов био- логического материала (6.5). Взятие материала проводится в соответствии с таблицей А.1 (Приложение А). В случае если взятие образцов биоматериала проводится в транспортную среду, пред- назначенную производителем для транспортирования и хранения образцов биологического материала для ПЦР-исследований, взятие материала проводится в соответствии с инструк- циями по применению используемых для транспортирования и хранения образцов транс- портных сред. 6.4 Транспортирование и хранение образцов биологического материала Транспортирование и хранение образцов биологического материала проводится в со- ответствии с таблицей 1. В случае если взятие образцов биоматериала проводилось в транспортную среду, предназначенную производителем для транспортирования и хранения образцов биологиче- ского материала для ПЦР-исследований, условия транспортирования и хранения образцов биологического материала определяются инструкциями по применению используемых для транспортирования и хранения образцов транспортных сред. ВНИМАНИЕ! Следует избегать повторного замораживания и оттаивания образцов. ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 17 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Таблица 1 – Условия транспортирования и хранения образцов биологического материала перед выделением ДНК Температура транспортирования и хранения Биоматериал минус от минус 22 °С от 2 °С до 8 °С от 18 °С до 25 °С 70 °С до минус 18 °С Амниотическая жидкость длительно не более 7 суток не более 24 часов - Бронхоальвеолярный лаваж - не более 7 суток не более 24 часов - Везикулярная жидкость - не более 1 месяца не более 24 часов - Ликвор - - не более 6 часов не более 2 часов (спинномозговая жидкость) Мазки/соскобы - не более 1 месяца не более 24 часов - из дыхательных путей Мазки/соскобы из желудочно-кишечного - не более 1 месяца не более 24 часов - тракта Мазки/соскобы (отделяемое) - не более 1 месяца не более 24 часов - из урогенитального тракта Мазки/соскобы с пораженных участков кожи - не более 1 месяца не более 24 часов - и эрозивно-язвенных элемен- тов, раневое отделяемое Мазки с эндотрахеальных тру- не более - не более 1 месяца - бок 24 часов Мокрота - - не более 3 суток не более 6 часов Молоко - не более 1 месяца не более 24 часов - Моча - не более 7 суток не более 24 часов - Образцы тканей (биопсийный (в т.ч. аутопсийный), хирурги- длительно не более 7 суток не более 24 часов - ческий материал, пунктаты) Периферическая/пуповинная - - не более 6 часов не более 2 часов кровь Плевральная жидкость - не более 7 суток не более 24 часов - Секрет предстательной железы - не более 1 месяца не более 24 часов - Синовиальная жидкость - не более 1 месяца не более 24 часов - Слюна - не более 1 месяца не более 24 часов - Смывы из ротоглотки и поло- длительно не более 7 суток не более 24 часов - сти носа Смывы с эндотрахеальных тру- - не более 1 месяца не более 24 часов бок Соскобы эпителиальных кле- ток (отделяемое) с конъюнк- - не более 1 месяца не более 24 часов - тивы глаза Фекалии (или меконий) - - не более 3 суток не более 6 часов Экссудаты - не более 1 месяца не более 24 часов - Эндотрахеальный и назофарин- - не более 7 суток не более 24 часов - геальный аспираты Эякулят (сперма) - не более 1 месяца не более 24 часов - Культуры микроорганизмов1, длительно не более 7 суток не более 24 часов - выделенных из биоматериала Примечание к таблице: 1 – для бактериальных культур допускается многократное замораживание-оттаивание ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 18 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 6.5 Подготовка биологического материала для выделения ДНК Подготовка образцов биологического материала проводится в соответствии с табли- цей А.2 (Приложение А). В случае если взятие образцов биоматериала проводилось в транспортную среду, предназначенную производителем для транспортирования и хранения образцов биологиче- ского материала для ПЦР-исследований, подготовка материала проводится в соответствии с инструкциями по применению используемых для транспортирования и хранения образцов транспортных сред. . ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 19 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 7 ПРОВЕДЕНИЕ ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК ВНИМАНИЕ! 1. Для внесения и добавления реагентов и образцов используйте наконечники с филь- тром, свободные от РНКаз и ДНКаз. 2. При работе с аспиратором используйте наконечники без фильтра, свободные от РНКаз и ДНКаз. 3. Используемые наконечники меняйте при каждом удалении раствора из пробирки. 4. Для предотвращения контаминации всегда открывайте крышку только той про- бирки, с которой идёт работа (внесение образца/реактива, удаление надосадочной жидкости), и закрывайте её после этого. Не допускается работать одновременно с несколькими пробирками с открытыми крышками. 5. При добавлении раствора в пробирку, содержащую биологический материал, вно- сите раствор аккуратно, не касаясь стенок пробирки. При касании стенки пробирки смените наконечник. 6. Одновременно с выделением ДНК из биологического материала необходимо подго- товить отрицательный контрольный образец и провести его через все этапы пробо- подготовки. Для подготовки отрицательного контрольного образца рекомендуется применять ис- пользуемую транспортную среду или физиологический раствор. 7. Неизвестные образцы и контрольные образцы необходимо обрабатывать по единой схеме одновременно согласно данной инструкции. 8. Перед началом работы необходимо включить термостат для прогревания до 50 °С. 9. В лизирующем растворе и в промывочном растворе №1 допускается выпадение осадка. В случае выпадения осадка необходимо прогреть флаконы с растворами на термостате при температуре 50 °С до полного растворения осадка. Затем следует пе- ремешать растворы переворачиванием флакона вверх дном 5–10 раз, избегая пенооб- разования. Перед использованием охладите растворы до комнатной температуры (от 18 °С до 25 °С). Осадок также можно растворить при комнатной температуре (от 18 °С до 25 °С) в течение приблизительно 12 часов. 7.1 Проведение выделения ДНК Подготовка и проведение выделения ДНК с использованием комплекта реагентов ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА производится в зависимости от биоматериала, комплектации и применяемой методики (таблица 2): | | | | ПРОБА-ГС | | | | ПРОБА-ГС- ПЛЮС | | | ПРОБА-ГС- ГЕНЕТИКА | | | | | Стандартная | | | Для биоптатов | | | | | | | | | | Пункт инструкции с методикой выделения | | | | | | | | | Амниотическая жидкость | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | | Бронхоальвеолярный лаваж | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Везикулярная жидкость | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Ликвор (спинномозговая жидкость) | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Мазки/соскобы из дыхательных путей | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Мазки/соскобы (отделяемое) из урогенитального тракта | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Мазки/соскобы с поражен- ных участков кожи и эрозивно-язвенных элемен- тов, раневое отделяемое | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Мазки с эндотрахеальных трубок | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Мокрота | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Молоко | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Моча | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Образцы тканей (биопсийный (в т.ч. аутопсийный), хирур- гический материал, пунктаты) | | | - | | | 7.1.2 | - | | | - | | Периферическая/пуповинная кровь (цельная) | | | - | | | - | - | | | 7.1.4 | | Периферическая/пуповинная кровь (плазма крови) | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Периферическая/пуповинная кровь (лейкоциты крови) | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Плевральная жидкость | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Секрет предстательной же- лезы | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Синовиальная жидкость | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Слюна | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Смывы из ротоглотки и поло- сти носа | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Смывы с эндотрахеальных трубок | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Соскобы эпителиальных кле- ток (отделяемое) с конъюнк- тивы глаза | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Фекалии (или меконий) | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Экссудаты | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Эндотрахеальный и назофа- рингеальный аспираты | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | | Эякулят (сперма) | | | | 7.1.1 | | - | | 7.1.3 | | - | | Культуры микроорганизмов, выделенных из биоматериала | | | 7.1.1 | | | - | 7.1.3 | | | - | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 20 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Таблица 2 – Методики выделения в зависимости от используемого биоматериала ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 21 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 7.1.1 Подготовка и проведение выделения ДНК с использованием комплекта реаген- тов в комплектации ПРОБА-ГС. Стандартная методика выделения ДНК из биологиче- ского материала1 7.1.1.1 Промаркируйте необходимое количество одноразовых пластиковых пробирок объё- мом 1,5 мл с учётом пробирки для отрицательного контрольного образца (K-). Примечание – Для образцов, прошедших предобработку с получением осадка и надосадочной жидкости (Приложение А, таблица А.2), маркируются пробирки с подготовленным для исследования материалом в объёме 50 мкл. 7.1.1.2 Тщательно ресуспендируйте сорбент на микроцентрифуге-вортексе. Перевернув пробирку вверх дном, убедитесь, что сорбент не остался на дне пробирки. При необ- ходимости повторите перемешивание сорбента. 7.1.1.3 Приготовьте смесь лизирующего раствора с сорбентом. Для этого смешайте в отдель- ной одноразовой пробирке: 150 х (N+1) мкл лизирующего раствора; 20 х (N+1) мкл предварительно ресуспендированного сорбента, где N – количество анализируемых образцов с учётом «K-». 7.1.1.4 Закройте пробирку с приготовленной смесью лизирующего раствора и сорбента и перемешайте содержимое пробирки на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с или переворачиванием пробирки 5-10 раз, затем центрифугируйте на микроцентри- фуге-вортексе в течение 1–3 с. 7.1.1.5 Добавьте во все промаркированные пробирки (включая «K-») по 170 мкл полученной смеси. 7.1.1.6 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки по 50 мкл исследуемого материала (за исключением пробирок с образцами, прошедшими предобработку с получением осадка (см. таблицу 3), и пробирки «К-»). 7.1.1.7 Внесите в пробирку, промаркированную «K-», 50 мкл транспортной среды или сте- рильного физиологического раствора. 7.1.1.8 Плотно закройте пробирки, встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.1.9 Термостатируйте пробирки при температуре 50 °С в течение 20 мин. 7.1.1.10 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 1 - виды биоматериала приведены в таблице 2 ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 22 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 7.1.1.11 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.1.12 Добавьте к осадку 200 мкл промывочного раствора №1, закройте пробирки, встрях- ните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.1.13 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.1.14 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.1.15 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №2, плотно закройте про- бирки, встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.1.16 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.1.17 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №3, плотно закройте про- бирки, встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.1.18 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.1.19 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.1.20 Откройте пробирки и высушите осадок при температуре 50 °С в течение 5 мин. 7.1.1.21 Добавьте к осадку 100 мкл элюирующего раствора, плотно закройте пробирки, встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 5–10 с. 7.1.1.22 Термостатируйте пробирки при температуре 50 °С в течение 5 мин. 7.1.1.23 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. Надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, готова к внесению в реак- ционную смесь для ПЦР. 7.1.2 Подготовка и проведение выделения ДНК с использованием комплекта реаген- тов в комплектации ПРОБА-ГС. Методика выделения ДНК из биоптатов и аналогич- ных видов биологического материала1 7.1.2.1 Промаркируйте по одной одноразовой пластиковой пробирке объёмом 1,5 мл для каждого неизвестного образца и для отрицательного контрольного образца (К-). 7.1.2.2 Добавьте в пробирки с подготовленными образцами (Приложение А, таблица А.2) и в пробирку «К-» по 150 мкл лизирующего раствора (не смешивая с сорбентом), не касаясь края пробирок. 7.1.2.3 Внесите в пробирку, промаркированную «К-», 50 мкл транспортной среды или сте- рильного физиологического раствора (см.7). 1 - виды биоматериала приведены в таблице 2 ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 23 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 7.1.2.4 Плотно закройте пробирки, встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.2.5 Термостатируйте пробирки при температуре 50 °С в течение 30 мин, центрифуги- руйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.2.6 Перенесите в соответствующие промаркированные пробирки для неизвестных об- разцов надосадочную жидкость. Для пробирки «К-» переносить надосадочную жид- кость не требуется. 7.1.2.7 Тщательно ресуспендируйте сорбент на микроцентрифуге-вортексе. Перевернув пробирку вверх дном, убедитесь, что сорбент не остался на дне пробирки. При необ- ходимости повторите перемешивание сорбента. 7.1.2.8 Добавьте во все пробирки (включая «К-») по 20 мкл предварительно ресуспендиро- ванного сорбента, не касаясь края пробирки, плотно закройте пробирки, встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с. 7.1.2.9 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.2.10 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.2.11 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №1, не касаясь края пробирки, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.2.12 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.2.13 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.2.14 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №2, не касаясь края пробирки, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.2.15 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.2.16 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №3, не касаясь края пробирки, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.2.17 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.2.18 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.2.19 Откройте крышки пробирок и высушите осадок при 50 °С в течение 5 мин. 7.1.2.20 Добавьте к осадку по 100 мкл элюирующего раствора, не касаясь края пробирки, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 24 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 5–10 с. 7.1.2.21 Термостатируйте пробирки при температуре 50 °С в течение 5 мин. 7.1.2.22 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. Надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, готова к внесению в реак- ционную смесь для ПЦР. 7.1.3 Подготовка и проведение выделения ДНК с использованием комплекта реаген- тов в комплектации ПРОБА-ГС-ПЛЮС. Стандартная методика выделения ДНК из биологического материала1 7.1.3.1 Промаркируйте необходимое количество одноразовых пластиковых пробирок объё- мом 1,5 мл с учётом пробирки для отрицательного контрольного образца (K-). Примечание - Для образцов, прошедших предобработку с получением осадка и надосадочной жидкости (Приложение А, таблица А.2), маркируются пробирки с подготовленным для исследования материалом в объёме 50 мкл. 7.1.3.2 Тщательно ресуспендируйте сорбент на микроцентрифуге-вортексе. Перевернув пробирку вверх дном, убедитесь, что сорбент не остался на дне пробирки. При необ- ходимости повторите перемешивание сорбента. 7.1.3.3 Приготовьте смесь лизирующего раствора с сорбентом. Для этого смешайте в отдель- ной одноразовой пробирке: 150 х (N+1) мкл лизирующего раствора; 20 х (N+1) мкл предварительно ресуспендированного сорбента, где N – количество анализируемых образцов с учётом «K-». 7.1.3.4 Плотно закройте пробирку с приготовленной смесью лизирующего раствора и сор- бента и перемешайте содержимое пробирки на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с или переворачиванием пробирки 5-10 раз, затем центрифугируйте на микро- центрифуге-вортексе в течение 1–3 с. 7.1.3.5 Добавьте во все промаркированные пробирки (включая «K-») по 170 мкл полученной смеси. 7.1.3.6 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки по 50 мкл исследуемого материала (за исключением пробирок с образцами, прошедшими предобработку с получением осадка (см. таблицу А.2), и пробирки «К-»). 7.1.3.7 Внесите в пробирку, промаркированную «K-», 50 мкл транспортной среды или сте- рильного физиологического раствора. 1 - виды биоматериала приведены в таблице 2 ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 25 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 7.1.3.8 Плотно закройте пробирки, встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.3.9 Термостатируйте пробирки при температуре 50 °С в течение 20 мин. 7.1.3.10 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.3.11 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.3.12 Добавьте к осадку 200 мкл промывочного раствора №1, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.3.13 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.3.14 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.3.15 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №2, плотно закройте про- бирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.3.16 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.3.17 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №3, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.3.18 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.3.19 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.3.20 Откройте пробирки и высушите осадок при температуре 50 °С в течение 5 мин. 7.1.3.21 Добавьте к осадку 300 мкл элюирующего раствора, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 5–10 с. 7.1.3.22 Термостатируйте пробирки при температуре 50 °С в течение 5 мин. 7.1.3.23 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. Надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, готова к внесению в реак- ционную смесь для ПЦР. 7.1.4 Подготовка и проведение выделения ДНК с использованием комплекта реаген- тов в комплектации ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА. Стандартная методика выделения ДНК из биологического материала1 7.1.4.1 Промаркируйте необходимое количество одноразовых пластиковых пробирок объё- мом 1,5 мл с учётом пробирки для отрицательного контрольного образца (K-). 7.1.4.2 Тщательно ресуспендируйте сорбент на микроцентрифуге-вортексе. Перевернув 1 - виды биоматериала приведены в таблице 2 ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 26 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА пробирку вверх дном, убедитесь, что сорбент не остался на дне пробирки. При необ- ходимости повторите перемешивание сорбента. 7.1.4.3 Приготовьте смесь лизирующего раствора с сорбентом. Для этого смешайте в отдель- ной одноразовой пробирке: 150 х (N+1) мкл лизирующего раствора; 20 х (N+1) мкл предварительно ресуспендированного сорбента, где N – количество анализируемых образцов с учётом «K-». 7.1.4.4 Плотно закройте пробирку с приготовленной смесью лизирующего раствора и сор- бента и перемешайте содержимое пробирки на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с или переворачиванием пробирки 5-10 раз, затем центрифугируйте на микро- центрифуге-вортексе в течение 1–3 с. 7.1.4.5 Добавьте во все промаркированные пробирки (включая «K-») по 170 мкл полученной смеси. 7.1.4.6 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки по 100 мкл цельной крови. В пробирку, промаркированную «K-», кровь не вносится. 7.1.4.7 Внесите в пробирку, промаркированную «К-», 100 мкл стерильного физиологиче- ского раствора. 7.1.4.8 Плотно закройте пробирки, встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.4.9 Термостатируйте пробирки при температуре 50 °С в течение 10 мин. 7.1.4.10 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.4.11 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.4.12 Добавьте к осадку 400 мкл промывочного раствора №1, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.4.13 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.4.14 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.4.15 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №2, плотно закройте про- бирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.4.16 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. 7.1.4.17 Добавьте к осадку по 200 мкл промывочного раствора №3, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 3–5 с. 7.1.4.18 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 27 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 7.1.4.19 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость (отдельным наконеч- ником из каждой пробирки). 7.1.4.20 Откройте пробирки и высушите осадок при температуре 50 °С в течение 5 мин. 7.1.4.21 Добавьте к осадку 300 мкл элюирующего раствора, плотно закройте пробирки и встряхните на микроцентрифуге-вортексе в течение 5–10 с. 7.1.4.22 Термостатируйте пробирки при температуре 50 °С в течение 5 мин. 7.1.4.23 Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. Надосадочная жидкость, содержащая выделенную ДНК, готова к внесению в реак- ционную смесь для ПЦР. 7.2 Хранение и использование препарата ДНК Полученный препарат ДНК можно хранить до 7 суток при температуре от 2 °С до 8 °С. Перед использованием препарата ДНК для постановки ПЦР необходимо: 1. Термостатировать пробирки при 50 °С в течение 5 мин. 2. Центрифугировать пробирки при RCF(g) 16000 в течение одной минуты. Препарат ДНК готов к внесению в реакционную смесь для ПЦР. Если препарат ДНК предполагается хранить более 7 суток, перенесите надосадоч- ную жидкость в отдельную одноразовую пробирку. Более 7 суток препарат ДНК следует хра- нить при температуре от минус 22 °С до минус 18 °С. Срок хранения препарата ДНК при температуре от минус 22 °С до минус 18 °С - не более 6 месяцев. Перед использованием препарата ДНК для постановки ПЦР после хранения необхо- димо разморозить препарат ДНК и отрицательный контрольный образец при комнатной тем- пературе (от 18 °С до 25 °С) или при температуре от 2 °С до 8 °С, затем встряхнуть пробирки с препаратом ДНК и отрицательным контрольным образцом на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугировать на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с. ВНИМАНИЕ! Для препарата ДНК допускается только однократное размораживание! Препарат ДНК готов к внесению в реакционную смесь для ПЦР. ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 28 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 8 ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ, ХРАНЕНИЕ И ЭКСПЛУАТАЦИЯ 8.1 Транспортирование 8.1.1 Транспортирование комплекта реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хла- доэлементами всеми видами крытого транспорта при температуре внутри термокон- тейнера, соответствующей условиям хранения компонентов, входящих в состав ком- плекта реагентов. 8.1.2 Комплекты реагентов, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не подлежат. 8.2 Хранение 8.2.1 Все компоненты комплекта реагентов следует хранить при температуре от 2 °С до 25 °С в течение всего срока годности комплекта реагентов. При хранении допускается выпадение небольшого осадка в лизирующем раствореи в промывочном растворе №1. 8.2.2 Комплекты реагентов, хранившиеся с нарушением регламентированного режима, применению не подлежат. 8.3 Указания по эксплуатации 8.3.1 Комплект реагентов должен применяться согласно действующей версии утвержден- ной инструкции по применению. 8.3.2 Для получения достоверных результатов необходимо строгое соблюдение инструк- ции по применению комплекта реагентов. 8.3.3 После вскрытия упаковки компоненты комплекта реагентов следует хранить при следующих условиях: все компоненты комплекта реагентов следует хранить при температуре от 2 °С до 25 °С в течение всего срока годности комплекта реагентов; лизирующий раствор и промывочный раствор №1 следует хранить в защищённом от света месте в течение всего срока годности комплекта реагентов. 8.3.4 Комплекты реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежат. | | Медицинское изделие для диагностики in vitro | | Обратитесь к инструкции по применению или к инструкции по применению в электронном виде | | | Температурный диапазон | | Номер по каталогу | | | Содержимого достаточно для проведения ˂n˃ тестов | | Изготовитель | | | Использовать до | —- —А=®,Х | Не допускать воздействия солнечного света | | | Код партии (серии) | | Нестерильно | | | Дата изготовления | | Осторожно | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 29 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 9 УКАЗАНИЯ ПО УТИЛИЗАЦИИ 9.1 При использовании комплекта реагентов в клинико-диагностической лаборатории образуются отходы класса В, которые утилизируются в соответствии с требовани- ями СанПиН 2.1.3684-21 и МУ 1.3.2569-09. 9.2 Комплекты реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе в связи с истече- нием срока годности, повреждением упаковки, подлежат утилизации в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21. 10 ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ 10.1 Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие комплекта реагентов требова- ниям технических условий при соблюдении условий транспортирования, хранения и эксплуатации, установленных техническими условиями. 10.2 Срок годности комплекта реагентов – 12 месяцев при соблюдении всех условий транс- портирования, хранения и эксплуатации. 11 РЕМОНТ И ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ Комплект реагентов предназначен для однократного применения и не подлежит тех- ническому обслуживанию и текущему ремонту. 12 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ МАРКИРОВКЕ КОМПЛЕКТА РЕАГЕНТОВ ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 30 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 13 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НОРМАТИВНЫХ ДОКУМЕНТОВ И НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ ТУ 9398-037-46482062-2009 Комплект реагентов для выделения ДНК (ПРОБА-ГС, ПРОБА- ГС-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА) ГОСТ ISO 14971-2021 Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к медицин- ским изделиям ГОСТ Р 2.105-2019 Единая система конструкторской документации. Общие требования к текстовым документам ГОСТ Р 15.013-2016 Система разработки и постановки продукции на производство. Медицинские изделия ГОСТ 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство. Испытания и приемка выпускаемой продукции. Основные положения ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний ГОСТ Р 53022.3-2008 Требования к качеству клинических лабораторных исследований, Ч.3. Правила оценки клинической информативности лабораторных тестов ГОСТ Р ИСО 15190-2023 Лаборатории медицинские. Требования безопасности ГОСТ Р ИСО 15223-1-2023 Изделия медицинские. Символы, применяемые для передачи информации, предоставляемой изготовителем. Часть 1. Основные требования ГОСТ Р ИСО 18113-1-2024 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставленная изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования ГОСТ Р ИСО 18113-2-2024 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставленная изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального использования ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro Примечание – Указанные выше стандарты были действующими на момент утверждения инструк- ции по применению. В дальнейшем, при пользовании документом, целесообразно проверить дей- ствие ссылочных нормативных документов на текущий момент. Если ссылочный документ заменён или изменён, то при применении настоящего документа следует пользоваться заменённым (изменён- ным) документом. ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 31 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА 14 АДРЕС ДЛЯ ОБРАЩЕНИЯ Производство наборов/комплектов реагентов имеет сертифицированную систему менеджмента качества и соответствует требованиям стандарта систем менеджмента качества ISO 9001 в области разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для мо- лекулярно-генетической диагностики, и другого лабораторного применения и ISO 13485 в области разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для медицинской молекулярно-генетической диагностики. Производитель: Общество с ограниченной ответственностью «ДНК-Технология ТС» (ООО «ДНК-Технология ТС»), Россия. Адрес производителя: 117246, Россия, г. Москва, проезд Научный, д. 20, строение 4. Место производства: ООО «ДНК-Технология ТС», 117246, Россия, г. Москва, проезд Науч- ный, д. 20, строение 4. По вопросам, касающимся качества комплекта реагентов, следует обращаться в службу клиентской поддержки. Служба клиентской поддержки: 8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный), +7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный). E-mail: hotline@dna-technology.ru, www.dna-technology.ru . | Биоматериал | Ограничение метода | Особенности взятия | Порядок взятия | | Амниотическая жидкость | - | Взятие амниотической жидкости проводят в ходе процедуры амниоцентеза согласно утвержденному алгоритму проведения. | В сухой стерильный контейнер, снаб- женный герметично завинчивающейся крышкой, помещают амниотическую жидкость в количестве не менее 500 мкл. После взятия материала контейнер плотно закрывают. | | Бронхоальвеолярный лаваж Плевральная жидкость | - | Взятие бронхоальвеолярного лаважа проводят в ходе процедуры бронхоскопии согласно утвержденному алгоритму проведения. Взятие плевральной жидкости проводят в ходе про- цедуры плевроцентеза согласно утвержденному ал- горитму проведения. Взятие материала производится в пустые одноразо- вые плотно завинчивающиеся пробирки объёмом до 50 мл | В стерильные пробирки собирают брон- хоальвеолярный лаваж, плевральную жидкость в количестве не менее 500 мкл. После взятия материала пробирки плотно закрывают. | | Везикулярная жидкость Мазки/соскобы с поражений кожи, эро- зивно-язвенных элементов, раневое отделя- емое Соскобы эпителиальных клеток (отделяе- мое) с конъюнктивы глаза Экссудаты | Местное применение лекарственных препа- ратов (спреи, капли, кремы и мази) - менее, чем за 24 часа до иссле- дования | Взятие материала осуществляют с помощью специ- альных медицинских изделий, имеющих регистраци- онные удостоверения, согласно установленной в за- висимости от источника биологического материала процедуре (например, Зонды медицинские по ТУ 9436-002-98349125-2016, ООО «Медицинские изде- лия», Россия, РУ № РЗН 2018/7058). Взятие материала проводится: в одноразовые пластиковые пробирки объё- мом 1,5 мл, в которые предварительно внесено 300-500 мкл стерильного физиологического раствора; в пробирки с транспортной средой, предназна- ченной производителем для транспортирова- ния и хранения образцов биологического мате- риала для ПЦР-исследований. | После взятия материала перенесите зонд в пробирку с физиологическим раство- ром или транспортной средой, предна- значенной производителем для транс- портирования и хранения образцов био- логического материала для ПЦР-иссле- дований, и тщательно промойте его в жидкости в течение 10–15 с, избегая её разбрызгивания. Извлеките зонд из раствора и, враща- тельным движением прижимая его к внутренней стенке пробирки выше уровня раствора, отожмите избыток жидкости. Полностью удалите зонд из пробирки и утилизируйте. Плотно закройте и промаркируйте про- бирку. | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 32 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА ПРИЛОЖЕНИЕ А Таблица А.1 – Взятие материала для выделения ДНК | Биоматериал | Ограничение метода | Особенности взятия | Порядок взятия | | | | Особенности взятия материала с конъюнктивы глаза При наличии обильного гнойного отделяемого его убирают стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Отделяемое/соскоб бе- рут с внутренней поверхности нижнего века движе- нием к внутреннему углу глазной щели. При взятии соскоба необходимо придерживать веко руками, чтобы при моргании ресницы не касались зонда. | | | Культуры микроорганизмов | - | Взятие культур микроорганизмов с жидких и плот- ных сред проводится в одноразовые пластиковые пробирки объёмом 1,5-2,0 мл, в которые предвари- тельно внесено 500 мкл стерильного физиологиче- ского раствора. | При помощи одноразовой микробиоло- гической петли, шпателя или пастеров- ской пипетки помещают в каждую про- бирку одиночную колонию клеток или 100 мкл жидкой среды. После взятия материала пробирки плотно закрывают и маркируют. | | Ликвор (спинномозговая жидкость) | - | Взятие спинномозговой жидкости (ликвора) прово- дится одноразовыми иглами в одноразовые пробирки объёмом 1,5 мл согласно установленной процедуре. | В одноразовую пробирку собирают лик- вор в количестве не менее 500 мкл. По- сле взятия материала пробирки плотно закрывают и маркируют. | | Мазки/соскобы из дыхательных путей Мазки и смывы с эндотрахеальных трубок | Местное применение лекарственных препа- ратов (спреи, капли, кремы и мази) менее чем за 24 часа до иссле- дования. При использовании аэрозолей и других форм лекарственных препаратов для ингаля- ций при лечении брон- хиальной астмы мате- риал для исследований следует брать не ранее, чем через три часа по- сле ингаляции. | Взятие материала осуществляют с помощью специ- альных медицинских изделий, имеющих регистраци- онные удостоверения, согласно установленной в за- висимости от источника биологического материала процедуре (например, Зонд медицинский одноразо- вый стерильный по ТУ 32.50.13-002-28731857-2020, ООО «ФармМедПолис РТ», Россия, РУ № РЗН 2021/13989). Взятие материала проводится: в одноразовые пластиковые пробирки объёмом 1,5 мл, в которые предварительно внесено 300-500 мкл стерильного физиологического раствора; в пробирки с транспортной средой, предназначенной производителем для транспортирования и хранения образцов | После взятия материала перенесите зонд в пробирку с физиологическим раство- ром или транспортной средой, предна- значенной производителем для транс- портирования и хранения образцов био- логического материала для ПЦР-иссле- дований, и тщательно промойте его в жидкости в течение 10–15 с, избегая её разбрызгивания. Извлеките зонд из раствора и, враща- тельным движением прижимая его к внутренней стенке пробирки выше уровня раствора, отожмите избыток жидкости. Полностью удалите зонд из пробирки и утилизируйте. | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 33 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Ограничение метода | Особенности взятия | Порядок взятия | | | | биологического материала для ПЦР- исследований (рекомендуется СТОР-Ф). Особенности взятия соскобов/мазков из полости носа Зонд вводят лёгким движением по наружной стенки носа на глубину 2–3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носо- вой ход под нижнюю носовую раковину, делают вра- щательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Особенности взятия соскобов/мазков из рото- глотки Соскобы/мазки берут вращательным движением с поверхности миндалин, нёбных дужек и задней стенки глотки. | Плотно закройте и промаркируйте про- бирку | | Мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта | Использование рек- тальных свечей, слаби- тельных препаратов, медикаментов, содер- жащих высокий про- цент железа – менее чем за 48 часов до ис- следования | Взятие материала осуществляют с помощью специ- альных медицинских изделий, имеющих регистраци- онные удостоверения, согласно установленной в за- висимости от источника биологического материала процедуре (например, Зонды медицинские по ТУ 9436-002-98349125-2016, ООО «Медицинские изде- лия», Россия, РУ № РЗН 2018/7058). Взятие материала проводится: в одноразовые пластиковые пробирки объёмом 1,5 мл, в которые предварительно внесено 300-500 мкл стерильного физиологического раствора; в пробирки с транспортной средой, предназначенной производителем для транспортирования и хранения образцов биологического материала для ПЦР- исследований (рекомендуется СТОР-Ф). | После взятия материала перенесите зонд в пробирку с физиологическим раство- ром или транспортной средой, предна- значенной производителем для транс- портирования и хранения образцов био- логического материала для ПЦР-иссле- дований, и тщательно промойте его в жидкости в течение 10–15 с, избегая её разбрызгивания. Извлеките зонд из раствора и, враща- тельным движением прижимая его к внутренней стенке пробирки выше уровня раствора, отожмите избыток жидкости. Полностью удалите зонд из пробирки и утилизируйте. Плотно закройте и промаркируйте про- бирку. | | Мазки/соскобы (отделяемое) из урогени- тального тракта | Местное применение лекарственных препа- ратов, использование | Взятие материала осуществляют с помощью специальных медицинских изделий, имеющих регистрационные удостоверения, согласно установленной в зависимости от источника | После взятия материала перенесите зонд в пробирку с физиологическим раство- ром или транспортной средой, предна- | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 34 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 35 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Биоматериал Ограничение метода Особенности взятия Порядок взятия лубрикантов, УЗИ ва- биологического материала процедуре (например, значенной производителем для транс- гинальным датчиком, Зонды урогенитальные одноразовые стерильные, портирования и хранения образцов био- кольпоскопия – менее «Цзянсу Яда Технолоджи Групп Ко., Лтд.», Китай, логического материала для ПЦР-иссле- чем за 24 часа до ис- РУ № ФСЗ 2011/10587; Зонды медицинские по ТУ дований, и тщательно промойте его в следования 9436-002-98349125-2016, ООО «Медицинские жидкости в течение 10–15 с, избегая её изделия», Россия, РУ № РЗН 2018/7058; Устройство разбрызгивания. для самостоятельного взятия пробы для Извлеките зонд из раствора и, враща- лабораторной диагностики в гинекологии Qvintip тельным движением прижимая его к (Квинтип), «Aprovix AB», Швеция, РУ №РЗН внутренней стенке пробирки выше 2019/8249; Устройство медицинское - Сваб-система уровня раствора, отожмите избыток Сораn, "Копан Италия С.п.А.",Италия, РУ № ФСЗ жидкости. Полностью удалите зонд из 2010/07660). пробирки и утилизируйте. Взятие материала проводится: Плотно закройте и промаркируйте про- в одноразовые пластиковые пробирки бирку. объёмом 1,5 мл, в которые предварительно внесено 300-500 мкл стерильного физиологического раствора; в пробирки с транспортной средой, предназначенной производителем для транспортирования и хранения образцов биологического материала для ПЦР- исследований (рекомендуется СТОР-Ф). Допускается использование сред для жидкостной цитологии. Взятие материала проводится в соответствии с инструкциями по применению используемых сред. В случае использования устройств для самозабора материала взятие материала проводится в соответствии с инструкциями по применению используемых устройств. Особенности взятия урогенитальных соскобов Женщины накануне обследования не должны проводить туалет половых органов и спринцевание. Для получения объективного результата необходимо, чтобы исследуемый материал содержал возможно большее количество эпителиальных ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 36 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Биоматериал Ограничение метода Особенности взятия Порядок взятия клеток и минимальное количество слизи и примеси крови. Неправильное взятие биоматериала может привести к недостоверному результату и, вследствие этого, необходимости повторного взятия биоматериала. ВНИМАНИЕ! Перед получением соскоба эпителиальных клеток из уретры, с заднебокового свода влагалища и цервикального канала, свободно стекающее отделяемое необходимо удалить стерильным ватным тампоном. Особенности взятия материала из влагалища Материал должен быть взят до проведения мануального исследования. Зеркало перед манипуляцией можно смочить горячей водой, применение антисептиков для обработки зеркала противопоказано. Соскоб берут с заднебокового свода влагалища. У девочек взятие материала производят со слизистой оболочки преддверия влагалища, а в отдельных случаях – из заднего свода влагалища через гименальные кольца. Особенности взятия материала из уретры Перед взятием биоматериала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5–2 часов. Непосредственно перед взятием биоматериала необходимо обработать наружное отверстие уретры тампоном, который можно смочить стерильным физиологическим раствором. При наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15–20 минут после мочеиспускания, при отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия биоматериала. В уретру у женщин зонд вводится на глубину 1,0–1,5 см, у детей материал для исследования берут только с наружного отверстия уретры. | Биоматериал | Ограничение метода | Особенности взятия | Порядок взятия | | | | Особенности взятия материала из цервикального канала Перед взятием материала необходимо удалить ватным тампоном слизь и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором. Зонд вводят в цервикальный канал на глубину 0,5–1,5 см. При извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание стенок влагалища. Особенности взятия материала с крайней плоти головки полового члена, препуциального мешка Перед взятием биоматериала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5–2 часов. | | | Молоко | - | Взятие грудного молока проводится в стерильный контейнер, снабженный герметично закрывающейся крышкой. Срок сбора молока не более 24 часов. Хранение в те- чение всего срока сбора при температуре от 2 °С до 8 °С. | После окончания сбора молоко переме- шивают и переносят в одноразовую пла- стиковую пробирку объёмом 1,5 мл 1,0 мл материала. | | Мокрота | - | - | В одноразовый градуированный сте- рильный флакон с широким горлом и за- винчивающейся крышкой объёмом не менее 50 мл собирают мокроту в коли- честве не менее 1,0 мл. | | Моча | - | Взятие мочи проводится в сухой стерильный контей- нер объёмом до 60 мл, снабжённый герметично за- винчивающейся крышкой. Особенности взятия остаточной мочи после мас- сажа предстательной железы ВНИМАНИЕ! При подозрении на острый проста- тит выполнять массаж предстательной железы кате- горически запрещено! Перед взятием остаточной мочи после массажа пред- стательной железы рекомендуется половое воздержа- ние в течение трёх суток до исследования. | Для анализа отбирают первую порцию утренней мочи в количестве не менее 20 – 30 мл. После сбора мочи контейнер плотно закрывают и маркируют. Остаточная моча после массажа пред- стательной железы Сбор остаточной мочи осуществляется пациентом после окончания массажа. Взятие первой порции мочи проводится в сухой стерильный контейнер объёмом | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 37 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Ограничение метода | Особенности взятия | Порядок взятия | | | | Пациент мочится в туалете, оставляя часть мочи в мо- чевом пузыре. Перед сбором мочи головку полового члена обраба- тывают стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Пациенту проводят массаж предстательной железы в течение 1-3 минут. Интенсивность массажа зависит от консистенции предстательной железы: при мягкой предстательной железе осуществляют несильные надавливания, при плотной консистенции предста- тельной железы силу давления увеличивают. | до 60 мл, снабженный герметично за- винчивающейся крышкой. в количестве 10–15 мл. После сбора материала контейнер плотно закрывают и маркируют. | | Образцы тканей (биопсийный (в т.ч. ауто- псийный), хирургический материал, пунк- таты) | - | Взятие материала проводится в пробирки с транс- портной средой, предназначенной производителем для транспортирования и хранения образцов биоло- гического материала для ПЦР-исследований. | В пробирки с транспортной средой по- мещают образцы диаметром не более 5,0 мм. После взятия материала пробирки плотно закрывают и маркируют. | | Периферическая/пуповинная кровь | Внутривенные инъек- ции гепарина, инфузии препаратов для парен- терального питания – менее чем за 6 часов до исследования | - | Взятие крови проводится в вакуумные пластиковые пробирки типа Vacuette с добавленной в качестве антикоагулянта солью ЭДТА. В качестве антикоагу- лянта допускается также использование цитрата натрия (если это не противоре- чит требованиям к ПЦР-набору реаген- тов, применяемому совместно с ком- плектом реагентов во всех вариантах ис- полнения). ВНИМАНИЕ! Не допускается ис- пользование гепарина в качестве анти- коагулянта. Для перемешивания крови с антикоагу- лянтом после взятия материала необхо- димо плавно перевернуть пробирку не менее 3-5 раз. | | Секрет предстательной железы | - | Перед взятием секрета предстательной железы реко- мендуется половое воздержание в течение трех суток до исследования. | Взятие выделившегося простатического секрета проводится после окончания массажа в одноразовую пробирку объё- мом 2,0 мл или контейнер объёмом до 60 | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 38 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Ограничение метода | Особенности взятия | Порядок взятия | | | | Перед сбором материала головку полового члена об- рабатывают стерильным ватным тампоном, смочен- ным физиологическим раствором. Секрет предстательной железы собирают после пред- варительного массажа предстательной железы через прямую кишку. Массаж проводит врач посредством энергичного надавливающего движения от основа- ния к верхушке железы. ВНИМАНИЕ! При подозрении на острый про- статит выполнять массаж предстательной железы ка- тегорически запрещено! | мл в виде свободно стекающей капли (0,15–1,0 мл). После сбора материала ёмкость с секре- том предстательной железы плотно за- крывают и маркируют. | | Синовиальная жидкость Слюна | - | - | В стерильный контейнер собирают ма- териал в количестве не менее 500 мкл. После сбора материала контейнер плотно закрывают и маркируют. | | Смывы из ротоглотки и полости носа | - | Особенности взятия смывов из ротоглотки Перед взятием смывов из ротоглотки проводят пред- варительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10–15 с) 8,0–10 мл стерильного физиологи- ческого раствора. Жидкость собирают через воронку в стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного авто- клавирования. Особенности взятия смывов из полости носа Взятие материала производят в положении больного сидя с отклонённой назад головой. Для получения смыва из полости носа в оба носовых хода пооче- редно с помощью зонда или одноразового шприца вводят по 3,0–5,0 мл тёплого стерильного физиологи- ческого раствора. Промывную жидкость из обоих но- совых ходов собирают через воронку в одну стериль- ную пробирку. Не допускается повторное использо- вание воронки без предварительного автоклавирова- ния. | Перенесите 300 мкл собранной жидко- сти в одноразовую пластиковую про- бирку объёмом 1,5 мл. При взятии мате- риала из нескольких биотопов необхо- димо переносить его в отдельные про- бирки. Плотно закройте и промаркируйте про- бирку. | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 39 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Ограничение метода | Особенности взятия | Порядок взятия | | | | При необходимости взятия биоматериала из несколь- ких биотопов повторите процедуру, каждый раз заби- рая материал в новую пробирку. | | | Эндотрахеальный и назофарингеальный ас- пираты | - | - | Взятие материала производится в пу- стые одноразовые плотно завинчиваю- щиеся пробирки объёмом 50 мл. После сбора материала пробирки плотно закрывают и маркируют. Для пе- ремешивания материала необходимо пе- ревернуть пробирку 3-5 раз. | | Фекалии (меконий) | Приём энтеросорбен- тов менее чем за 2 дня до исследования. | Для анализа используют образцы фекалий или мекония массой (объёмом) примерно 1–3 г (1–3 мл). Взятие материала проводится отдельным наконечником с фильтром или одноразовыми лопатками в сухой стерильный флакон. | В сухой стерильный флакон помещают фекалии (меконий) в количестве не ме- нее 1,0 г. После взятия материала флакон плотно закрывают и маркируют. | | Эякулят (сперма) | - | Перед взятием эякулята рекомендуется половое воздержание в течение трёх суток до исследования. Перед сбором эякулята пациент мочится в туалете, полностью опорожняя мочевой пузырь. После мочеиспускания пациент должен тщательно вымыть руки с мылом и провести туалет наружных половых органов с мылом и водой. Головку полового члена и крайнюю плоть необходимо высушить стерильной салфеткой. Эякулят получают путем мастурбации. | Взятие эякулята проводится в стериль- ный контейнер объёмом до 60 мл, снаб- жённый герметично завинчивающейся крышкой. После взятия материала контейнер плотно закрывают и маркируют. | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 40 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Порядок подготовки | | Амниотическая жидкость | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл 500 мкл материала. 2. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 3. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). 4. Добавьте к осадку по 500 мкл стерильного физиологического раствора. 5. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 6. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | Бронхоальвеолярный лаваж | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл 500 мкл материала. 2. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 3. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). 4. Добавьте к осадку по 500 мкл стерильного физиологического раствора. 5. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 6. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | Везикулярная жидкость | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | Ликвор (спинномозговая жидкость) | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл 500 мкл материала. 2. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 3. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). 4. Добавьте к осадку по 500 мкл стерильного физиологического раствора. 5. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 6. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | Мазки/соскобы из дыхательных путей | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | Мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 41 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Таблица А.2 – Подготовка образцов биологического материала к выделению ДНК | Биоматериал | Порядок подготовки | | | Мазки/соскобы с поражённых участков кожи и эрозивно- язвенных элементов, раневое отделяемое | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Мазки/соскобы (отделяемое) из урогенитального тракта | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Мазки с эндотрахеальных трубок | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл (осадок+жидкая фрак- ция). Образец готов для выделения НК. | | | Материал из влагалища, полученный с использованием устройства для самостоя- тельного забора проб | 1. Добавьте в пробирку (или другую ёмкость, указанную в инструкции по применению устройства для самостоятельного забора проб, далее по тексту - пробирка), в которой находится наконечник устройства, 500 мкл стерильного физиологического раствора, закройте пробирку. 2. Встряхните пробирку на микроцентрифуге-вортексе в течение 15 с. 3. Инкубируйте пробирку при комнатной температуре (от 18 °С до 25 °С) в течение 3-5 минут. 4. Центрифугируйте пробирку на микроцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с. 5. Извлеките наконечник устройства из пробирки и утилизируйте. 6. Перенесите содержимое пробирки в новую одноразовую пробирку объемом 1,5 мл. 7. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 8. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Мокрота | Способ 1 1. Перенесите в стерильную ёмкость примерно 500 мкл образца мокроты. 2. Добавьте к образцу равный объём 10 % трехзамещённого фосфорнокислого натрия х 12Н О, плотно закройте и интенсивно 2 встряхните. 3. Инкубируйте смесь при температуре 37 °С в течение 18–24 часов, затем нейтрализуйте 1 М НСl до рН 6,8-7,4. 4. Центрифугируйте при RCF(g) 900 в течение | Способ 2 1. Добавьте во флакон с образцом мокроты муколизин в соотношении 5:1 (пять частей муко- лизина к одной части мокроты), ориентируясь по градуировке флакона. 2. Закройте флакон, встряхните содержимое и инкубируйте при комнатной температуре (от 18 °С до 25 °С) в течение 20–30 мин, каждые 2–3 мин встряхивая флакон. Образец готов для выделения ДНК. | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 42 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Порядок подготовки | | | | 20 мин. 5. Слейте надосадочную жидкость в ёмкость с 5,0 % раствором хлорамина для обеззаражи- вания. 6. Добавьте к осадку 500 мкл дистиллирован- ной воды, перемешайте пипетированием и перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл. 7. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 8. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке 50 мкл (осадок + жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Молоко | Подготовка не требуется. Образец готов для выделения ДНК. | | | Моча | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл 1,0 мл мочи. 2. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 3. Наиболее полно удалите надосадочную жидкость. 4. Добавьте к осадку 1,0 мл стерильного физиологического раствора. 5. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 6. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Образцы тканей (биопсийный (в т.ч. аутопсийный), хирур- гический материал, пунктаты) | 1. Встряхните пробирку с биоматериалом на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифу- гируйте на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с. 2. Удалите надосадочную жидкость. Образец готов для выделения ДНК. | | | Периферическая/пуповинная кровь (плазма крови) | 1. Центрифугируйте пробирки с кровью при RCF(g) 800-1600 при комнатной температуре (от 18 °С до 25 °С) в течение 20 мин. 2. После центрифугирования отберите с помощью дозатора верхнюю фракцию (плазма) и перене- сите в отдельную одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5–2,0 мл. Образец готов для выделения НК. ВНИМАНИЕ! 1. Время от момента взятия периферической крови до получения плазмы не должно превышать 6 часов. При необходимости плазму допускается хранить при температуре минус 20 °С не более 3 месяцев. 2. Перед выделением НК плазму необходимо перемешать! | | | Периферическая/пуповинная кровь (лейкоциты крови) | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 2,0 мл 1,5 мл цельной крови. | | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 43 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Порядок подготовки | | | 2. Центрифугируйте пробирку с кровью при RCF(g) 50 в течение 10 мин. 3. После центрифугирования отберите с помощью дозатора 500-600 мкл верхней фракции (плазма с лейкоцитами) и перенесите в отдельную одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5–2,0 мл. 4. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 10000 в течение 10 мин. 5. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фрак- ция). Образец готов для выделения ДНК. | | Плевральная жидкость | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл 500 мкл материала. 2. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 3. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фрак- ция). 4. Добавьте к осадку по 500 мкл стерильного физиологического раствора. 5. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 6. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл (осадок+жидкая фрак- ция). Образец готов для выделения ДНК. | | Секрет предстательной железы | 1. Промаркируйте необходимое количество одноразовых пластиковых пробирок объёмом 1,5 мл. 2. Внесите в каждую пробирку по 500 мкл стерильного физиологического раствора или транспорт- ной среды, предназначенной производителем для транспортирования и хранения образцов биоло- гического материала для ПЦР-исследований. 3. Перенесите в соответствующие пробирки по 100 мкл жидкого материала. 4. Центрифугируйте пробирки при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 5. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | Синовиальная жидкость | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл 500 мкл материала. 2. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 3. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). 4. Добавьте к осадку по 500 мкл стерильного физиологического раствора. 5. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 6. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | Слюна | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл 500 мкл материала. 2. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 3. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). 4. Добавьте к осадку по 500 мкл стерильного физиологического раствора. | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 44 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Порядок подготовки | | | | 5. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 6. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Смывы из ротоглотки и полости носа | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом смыва при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фрак- ция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Смывы с эндотрахеальных трубок | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Соскобы эпителиальных клеток (отделяемое) с конъюнктивы глаза | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Фекалии (или меконий) | Приготовление суспензии 1. Промаркируйте необходимое количество одноразовых пластиковых пробирок объёмом 1,5 мл. 2. Внесите в каждую пробирку по 1,0 мл стерильного физиологического раствора. 3. Поместите в соответствующие промаркированные пробирки примерно по 0,1-0,2 г (мл) фекалий. 4. Тщательно ресуспендируйте содержимое пробирки на микроцентрифуге-вортексе в течение 5-10 с. 5. Промаркируйте по одной одноразовой пробирке объёмом 1,5 мл для каждого образца суспензии. | | | | При выделении ДНК бактерий (получе- ние бактериальной фракции): 6. Центрифугируйте пробирки с образцами суспензий фекалий при RCF(g) 13000 при комнатной температуре (от 18 °С до 25 °С) в течение 30 с для осаждения дебриса на дно пробирки. 7. Внесите в соответствующие промаркиро- ванные пробирки среднюю фракцию из про- бирок с суспензиями фекалий. Для этого от- берите из каждой пробирки отдельным наконечником с фильтром бактериальную фракцию (верхняя бело-жёлтая часть обра- зовавшегося осадка) в объёме 50 мкл. При | При выделении ДНК вирусов (получение фе- кального экстракта): 6. Центрифугируйте пробирки с образцами сус- пензий фекалий при RCF(g) 10000 при комнат- ной температуре (от 18 °С до 25 °С) в течение 5 мин. 7. Внесите в соответствующие промаркированные пробирки по 50 мкл надосадочной жидкости из пробирок с суспензиями фекалий. | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 45 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА | Биоматериал | Порядок подготовки | | | | отсутствии бело-жёлтого пограничного слоя между осадком и супернатантом отбе- рите 50 мкл с границы осадка и суперна- танта, допускается частичный захват осадка. Примечание – При необходимости возможна дополнительная предподготовка с использованием Набора реагентов для предобработки биоматериала лизоцимом при выделении ДНК (ПРОБА-Л), ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ № РЗН 2022/16776. Предподготовка проводится согласно инструкции по применению набора реагентов ПРОБА-Л. | | | | Образец готов для выделения ДНК. | | | Экссудаты | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Эндотрахеальный и назофарингеальный аспираты | 1. Перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл 1,0 мл материала. 2. Центрифугируйте пробирку при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 3. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок + жидкая фрак- ция). Образец готов для выделения ДНК. | | | Эякулят (сперма) | 1. Промаркируйте необходимое количество одноразовых пластиковых пробирок объёмом 1,5 мл. 2. Внесите в каждую пробирку по 400 - 500 мкл стерильного физиологического раствора или транс- портной среды, предназначенной производителем для транспортирования и хранения образцов биологического материала для ПЦР-исследований. 3. Перенесите в соответствующие промаркированные пробирки по 100 мкл жидкого материала. 4. Встряхните пробирки на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 с и центрифугируйте на мик- роцентрифуге-вортексе в течение 1-3 с. Образец готов для выделения ДНК. | | | Культуры микроорганизмов, выделенных из биоматериала | 1. Центрифугируйте пробирку с образцом в физиологическом растворе/транспортной среде при RCF(g) 16000 в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция). Образец готов для выделения ДНК. | | ^\ Инструкция по применению № ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Лист 46 ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, Листов 46 ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА “` Макеты паспортов качества и АНКСТЕХНОЛОГИЯ ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА УТВЕРЖДАЮ МАКЕТЫ ПАСПОРТОВ КАЧЕСТВА НА МЕДИЦИНСКОЕ ИЗДЕЛИЕ ДЛЯДИАГНОСТИКИ 1\ ИТКО Комплект реагентов для выделения ДНК (ПРОБА-ГС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА) 2025 =`\ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ ООО «ДНК-Технология ТС» Паспорт качества № ХХХХХХ Комплект реагентов для выделения ДНК (ПРОБА-ГС,ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА) ПРОБА-ГС Серия: ХХХХХХ-ХХ Дата изготовления: ХХХХ-ХХ-ХХ Срок годности: до ХХХХ-ХХ-ХХ Результат контроля 1.Проверка комплектности,упаковки и маркировки соответствует — требованиям ТУ 9398-037-46482062-2009 2.Проверка составанабораи внешнеговида компонентов Условия Компонент Серия Количество Характеристикаинорма Результат хранения Лизирующий Прозрачнаябесцветнаяпенящаяся рующ ххх 1флакон 15мл Розр ы в от2 °Сдо25 °С Соответствует аствор жидкость Жидкостьсосадком,образующим 2пробирки В в Сорбент ХХХ по 1.0мл взвеськоричневогоцветапри от2 °Сдо25 °С Соответствует и встряхивании Промывочный Р ххх 1флакон20мл |Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2 °Сдо25 °С Соответствует раствор№ 1 Промывочный Р Ф.Ф 1флакон20мл |Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2 °Сдо25 °С Соответствует раствор№2 Промывочный Р ‚Ф.Ф. 1флакон20мл Прозрачная бесцветнаяжидкость от2°Сдо25°С Соответствует раствор№3 Элюирующий раствор Ф.Ф. 1флакон 10мл Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2°Сдо25°С Соответствует 3.Проверка показателей качества Наименованиепоказателя Характеристикаинорма Результат Положительный результат амплификации (Ср указан) по каналу детекцииЕатдлялабораторногоконтрольногообразцапослеэтапа Соответствует выделенияДНК Отрицательныйрезультат амплификации (Ср неуказан) по каналу детекции Еат и положительный результат амплификации (Сруказан) по каналу детекции Нех для отрицательного Соответствует ЭффективностьвыделенияДНК контрольногообразцапослеэтапавыделенияДНК Значение 1в не указано или 18<2,5 для исследования «КВМ»; значение 12<3,5 для исследования «Общая бактериальная масса»; значение 1$неуказаноили18<3,0дляисследования «Сап@4дарр.» Соответствует для отрицательного контрольного образца после этапа выделения ДНК Условиятранспортирования: и ч ай Транспортирование комплекта реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами”‘всеми видами`крытого транспорта при температуре внутри термоконтейнера, соответствующей условиям хранения компонентов, входящих в Костав комплекта реагентов. ОТК) 9 Заключение ОТК: соответствуеттребованиямТУ9398-037-46482062-2009 „ Датавыдачипаспорта:ХХХХ-ХХ-ХХ ООО «ДНК-Технология ТС» м"\ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Паспорт качества № ХХХХХХ Комплект реагентов для выделенияДНК (ПРОБА-ГС,ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА) ПРОБА-ГС-ПЛЮС Серия: ХХХХХХ-ХХ Дата изготовления: ХХХХ-ХХ-ХХ Срок годности: до ХХХХ-ХХ-ХХ Результат контроля 1.Проверка комплектности,упаковки и маркировки соответствует — требованиям ТУ 9398-037-46482062-2009 2.Проверка составанабора и внешнеговида компонентов Условия Компонент Серия Количество Характеристикаинорма Результат хранения Лизирующий Прозрачнаябесцветная рующ ххх 1флакон7,5мл розр В от2 °Сдо25°С Соответствует раствор пенящаясяжидкость Жидкость сосадком, Сорбент ХХХ 1пробирка 1,0мл образующимвзвеськоричневого от2°Сдо25 °С Соответствует цветапривстряхивании Промывочный Р ХХХ 1флакон 10мл Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2 °Сдо25°С Соответствует раствор№ 1 Промывочный Р ›,Ф.Ф 1флакон 10мл Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2°Сдо25 °С Соответствует раствор№2 Промывочный Р ›Ф.Ф 1флакон 10мл Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2°Сдо25°С Соответствует раствор№3 Элюирующий раствор ХХХ 1флакон 15мл Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2°Сдо25°С Соответствует 3.Проверкапоказателей качества Наименованиепоказателя Характеристикаинорма Результат Положительный результат амплификации (Ср указан) по каналу детекцииЕатдлялабораторногоконтрольногообразцапослеэтапа Соответствует выделенияДНК Отрицательныйрезультат амплификации (Ср не указан) по каналу детекции Еатм и положительный результат амплификации (Ср указан) по каналу детекции Нех для отрицательного Соствететвует ЭффективностьвыделенияДНК рус у ы я триц контрольногообразцапослеэтапавыделенияДНК Значение 1в не указано или 18<2,5 для исследования «КВМ»; значение 1в<3,5 для исследования «Общая бактериальная масса»; значение 1фнеуказаноили1 <3,0для исследования «Сап@4дарр.» Соответствует ДЛЯ отрицательног [0]контрольного образца после этапа выделения ДНК Условиятранспортирования: „” х сы Ре Транспортирование комплекта реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами” всеми видам и‚крытого транспортапритемпературевнутритермоконтейнера,соответствующейусловиямхранениякомпо"ненОтов,вТходяКщих !ввчостав комплекта реагентов. Заключение ОТК: соответствуеттребованиямТУ9398-037-46482062-2009 Датавыдачипаспорта:ХХХХ-ХХ-ХХ „\диктЕХНОЛОГИЯ ООО «ДНК-ТехнологияТС» Паспорт качества № ХХХХХХ Комплект реагентов длявыделенияДНК (ПРОБА-ГС,ПРОБА-ГС-ПЛЮС,ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА) ПРОБА-ГС-ГЕНЕТИКА Серия: ХХХХХХ-ХХ Дата изготовления: ХХХХ-ХХ-ХХ Срок годности: доХХХХ-ХХ-ХХ Результат контроля 1.Проверка комплектности,упаковки и маркировки — соответствует требованиям ТУ 9398-037-46482062-2009 2.Проверка состава набора и внешнеговида компонентов Условия Компонент Серия Количество Характеристикаинорма хранения Результат Лизи, рующ ий ххх 1флакон7,2мл П р р о о з з р рачнаябесц Ц ветная от2°Сдо25°С Соответствует раствор пенящаясяжидкость Жидкость с осадком, 1пробирка Я о Сорбент ххх 900МКИ образующимвзвеськоричневого от2 °Сдо25 °С Соответствует цветапривстряхивании Пр Р омывочный ХХХ 1флакон 19,2мл Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2°Сдо25°С Соответствует раствор № 1 П Р ромывочный ххх 1флакон9,6мл Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2 °Сдо25°С Соответствует раствор№2 П Р ромывочный ‚Ф.Ф 1флакон9,6мл |Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2 °Сдо25°С Соответствует раствор№3 Элюирующий раствор ХХХ 1флакон 14,4мл Прозрачнаябесцветнаяжидкость от2°Сдо25°С Соответствует 3.Проверка показателей качества Наименованиепоказателя Характеристикаинорма Результат Положительный результат амплификации (Ср указан) по каналу детекцииЕатдлялабораторногоконтрольногообразцапослеэтапа Соответствует выделения ДНК Отрицательныйрезультат амплификации (Ср не указан) по каналу детекции Раш и положительный результат амплификации (Ср указан) по каналу детекции Нех для отрицательного Соответствует ЭффективностьвыделенияДНК ко р н у тр к ольногообразцапо у слеэтапавыделенияДНК ТР Значение 1 не указано или 18<2,5 для исследования «КВМ»; значение 1ф<3,5 для исследования «Общая бактериальная масса»; значение 1внеуказаноили1 <3,0для исследования «Сап@4да5рр.» Соответствует для отрицательного контрольного образца после этапа выделения ДНК „жен но Условиятранспортирования: Транспортирование комплекта реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хлодоэлементаму/ сом видамикрытого транспортапритемпературевнутритермоконтейнера,соответствующейусловиямхранениякомпоОнентоТв,ВХКОДЯЩИ)Х В став комплекта реагентов. Заключение ОТК: соответствуеттребованиямТУ9398-037-46482062-2009 “^^ сны#, `, У „и Датавыдачипаспорта:ХХХХ-ХХ-ХХ