Реагенты для иммуноферментной диагностики in vitro опухолевых маркеров, в наборах и отдельных упаковках — инструкция и характеристики

РУ: ФСЗ 2010/06815 от 21.05.2010 · класс риска 1

Производитель: DRG Instruments GmbH (ДРГ Инструментс ГмбХ) (Германия)

Вид изделия: Альфа-фетопротеин (АФП) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА) · Раковый антиген 15-3 (СА15-3) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА) · Раковый антиген 19-9 (СА19-9) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

Назначение: предназначены для применения в ЛПУ, лабораториях для проведения ИФА тестов in vitro

В госконтрактах 44-ФЗ: 59 контрактов, медианная цена за единицу 27 348 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

«УТВЕРЖДАЮ»
Генеральный директор
ЗАО «ДРГ Техсистемс»
Наборы реагентов in vitro для иммунологических исследований
производства компании
DRG Instrument GmbH, Германия
Инструкция по применению.
DRG С A 125 ELISA (EIA-3939)
Вступление
DRG С A 125 ИФА набор для количественного определения связанного с раком антигена СА 125 в
сыворотке и плазме человека.
С А 125 ELISA- анализ определения ОС 125 реактивной детерминанты гетерогенного
высокомолекулярного (200 - 1000 кД) гликопротеина в сыворотке. Этот гликопротеин обычно
обнаруживается моноклональными антителами. Набор использует МП н ОС 125 мышиные
моноклональные антитела как ловушки. ОС 125 реактивные детерминанты могут быть обнаружены с
высокой вероятностью при опухолях яичников в сыворотке и на неслизистом эпителии.
Значения С А 125 повышены у большинства пациентов с эпителиальным раком яичников, включая тех, у
кого 1 стадия заболевания.
У женщин с первичной эпителиальной карциномой яичников, которые перенесли основную тераптпо с
последующей диагностикой, значение СА 125, больше или равное 35 Е/мл, было признано признаком
присутствия остаточной опухоли. Показатеш! ниже этого значения не говорят об отсутствии опухоли.
Принцип анализа
Микротитровальные лунки покрыты моноклональным антителом к антигенному сайту' на молекуле СА
125.
Аликвоту пациента с эндогенной СА 125 икубируют в лунке с конъюгатом фермента (анти-СА 125
антитело - пероксидаза хрена). После инкубации несвязавшийся конъюгат вымывают. Количество
связавшегося конъюгата пропорционально концентрации СА 125 в образце. При добавлении раствора
субстрата, интенсивность образовавшейся окраски пропорцгюнальна концентрации С А 125 в образце
пациента.
Меры предосторожности
• Только для использования в «ин-витро» диагностике.
• Все реагенты протестированы на ВРТЧ и гепатит В и признаны безопасными. Однако весь материал
стоит расценивать как потенциально заразный.
• Избегать контакта со стоп-раствором (0,5 М H2SO4). Можно получить раздражение кожи или ожог.
• Не пипетировать ртом и избегать контакта реагентов и образцов с кожей или слизистыми.
• Не курить, не есть, не пить, не наносить косметику вблизи реагентов.
• Надевать одноразовые латексные перчатки при контакте с реагентами. Микробная контаминация
может дать ложные результаты.
• Не использовать реагенты с истекшим сроком годности.
• Не смешивать реагенты между собой и не использовать реагенты из других наборов.
Состав набора
1. Микротитровальная панель с 96 лут1ками, покрытыми анти-СА 125 моноклональными антителами.
2. Набор референс-стандартов СА125, 6 флаконов, содержащих: О, 15, 30, 80, 200, 500 Ед./мл С А125, 1
мл каждый, готовы к использованию
3. Контроль, 0,5 мл, (лиоф.)
4. Ферментный конъюгат, 10Х концентрат, 0,75 мл.
5. Растворитель конъюгата, 7 мл, готов к использованию.
6. Раствор субстрата - ТМВ Реагент (готов к использованию), 14 мл.
7. Стоп-раствор (0,5 М H2SO4), 14 мл.
8. Промывочный раствор, 40Х концентрат, 30 мл
Материалы и приборы, необходимые, но не поставляемые с набором
• Прецизионные микропипетки
• Дистиллированная вода.
• Абсорбирующая бумага.
121248 Москва, Набережная Тараса Шевчевко, д. Э, Московское представительство «DRG Intemationai, 1ос.»
тел. (499) 243-5621,243-5228,243^4028, факс (495) 232-0211, (499) 245>9300; е-шаИ: drgtecfa@doLru fattp://www>drgtech>ru
DRG С A 125 ELISA (ETA-3939)
• Планшетный ридер откалиброванный на измерентте при 450 нм
Хранение
Закрытый набор хранится при 2-8”С, микротитровальная панель - в закрытом пакете с
влагопоглотителем. После открытия неиспользованные лунки необходимо запечатать в том же пакетике
из фольги. Вскрытый набор стабилен до даты срока годности, при условии хранения как описано выше.
Подготовка реагентов
Довести реагенты до комнатной температуры непосредственно перед использованием.
• Контроль
Развести лиофилизированный порошок 0,5 мл дистиллированной водой и дать отстояться 10 мин
миним)^. Помешать контроль несколько раз перед использованием.
Разведенный контроль должен храниться при -20Т.
• Конъюгат
Развести Конъюгат с Расжижителем 1:10
Хранить после разведения 1 неделю при 2 - 8°С в запечатанном контейнере.
Табл. соотношеня реагентов при разведении
Количество стрипов !1 Конъюгат конп., мкл Расжижитель, мл
1 !1 50 0.45
2 i1 100 0,90
3 ^ 150 1,35
4 200 1,80
5 !! 250 2.25
6 300 2.70
7 1 350 ЗД5
8 400 3.60
9 450 4,05
10 500 4,50
11 550 4.95
12 600 5,40
Образец
Сыворотка или плазма подходят для анализа.
• Отбор проб: через вену, дать свернуться крови и отцентрифугировать её.
• Для плазмы: кровь должна помешена в контейнеры для центрифугирования вместе с
антикоагулянтами сразу после отбора.
• Хранение: 5 дней при 2 - 8°С или при - 20°С на более долгий срок.
• Разведение; можно развести в 10 раз или в 100 раз со стандартом О
Процедура анализа
1. Закрепить желаемое количество лунок в держателе.
2. Раскапать 50 мкл стандартов, образцов, конролей в соответствующие лунки,
3. Раскапать 50 мкл Ферментного конъюгата в каждую лунку.
4. Аккуратно перемешивать 10 секунд. Важно добиться полного смешивания на этаи этапе,
5. Инкубировать при комнатной температуре 30 мин\т.
6. Удалить инкубационную смесь в контейнер для отходов. Промыть 3 раза разведенным
раствором для промывки (400 мкл на лунку). Постучать панелью по абсорбирующей бу”маге, чтобы
удалить оставшиеся капли.
121248 Москва, Набережная Тараса Шевченко, д. 3, Московское представительство ^RG InteniatioBal, Ino
тел. (499) 243-5621,243-5228,243>402g, факс (495) 232-0211, (499) 243-9300; e>maii: drgtech@doLni fattp://ww.drgtech.ru
DRG С A 125 ELISA (EIA-3939)
7. Раскапать 100 мкл ТМВ реагента в каждую лунку. Аккуратно перемешивать 10 сек>т1Д.
8. Инкубнроать при комнатной температуре, в темноте 30 минут.
9. Остановить реакцию, добавив 100 мкл Стоп-раствора в каждую лунку.
10. Считывать оптическую плотность при 450 нм в течение 10минут.
Подсчет результатов
1. Подсчитать средине значения абсорбции для каждого набора стандартов, контролей и образцов.
2. Построить стандартную кривую, поместив средние значения абсорбции, полученные для каисюго
референс-стандарта против его концентрации в IVml, с aocopouneii на вертикальной оси (у) и
конаен грацией т горизои гальиой оси (\).
3. Используя средние значения абсорбции для каждого образца, определить соответствующую
концентрацию С А 125 в Ь мл по стандартной KpiiBoft.
4. Автоматический метод: компьютерные программы, использующие кубическое сглаживание, 4 PL
и;и1 Logit-Log мог у i давагь xopomnii результа!.
5. Концентрация образиов может быть прочитана прямо из этой стандартной кривой. Образцы с
концентра1и1ями выше стандартных должны быть разведены ете. Но при подсчете концентрации
фактор разведения должен быть взят в расчет.
Чувствительность
Для здоровых женщин содержание составляет менее 35 Ед/мл. Минимальная определяемая
концентрация была посчи1ана сред1{ей из 20 результатов и сосгавила 3.327 Ед/мл.
Ограничения процедуры
1. Надежные результаты \тожно получить только при полном понимании инструкшт и следовании
опыту лабораторной практики.
2. Процедура промывки является критической. Недостаточная промывка может влиять на результаты
анатиза.
12I24S Москм, Шбфреашав Шевченко, л. 3^ Московское врс^с1яв11ТЁ.1ьсТ1Ю «0RC iBtematloBaU
тел. (4^) 24J-522S. 243^2Н, флкс (ту т т ги (499) 243-930»: атесШ<к||.гц tittp;//iyww.drgtccit.nt
DRG" Рак Мочевого Пузыря (EIA-2355)
ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ
Набор Рак Мочевого Пузыря (РМП) ИФА - это одностадийный анализ ин-витро для количественного определения цитокератинов
8 и 18 в моче. Аниализ является чувствительным показателем активностн раковых клеток и будет полезен при диагностике
пациентов с раком мочевого пузыря эпителиального происхождения.
Только для инвитро диагностики. В США данный набор предназначен только для исследований.
ПРИНЦИП АНАЛИЗА
DRG РМП ИФА - это твердофазный "сендвич" анализ на основе иммунохимической технологии. Стандарты, контролн и образцы
пациентов реагируют одинаково с ловящими антителами (6D7 и 3F3) на твердой фазе и определяющими антителами, меченными
пероксидазой хрена, в стрипованных лунках. После промывки добавляется субстрат ТМБ. Далее реакция останавливается и
считывается абсорбция. Образовавшееся окрашивание прямо пропорционально концентрации аналита.
СПЕЦИФИЧНОСТЬ АНАЛИЗА
РМП мерит определенные эпитопы на цитокератинах 8 и 18, используя моноклональные антитела 6D7 и 3F3. Не обнаружено
перекрестной реактивности к другим связанным с оп>'холями антигенам, которые могут присутствовать в образце пациента.
ОБРАЗЦЫ
Для проведения анализа рекомендуется забор мочи из периуретральной зоны с предварительной обработкой антисептиком
{остаток мочи в пузыре > 3 ч). Образцы мочи необходимо отцентрифугировать (1000 х g на 10 минут) и отобранные с верхней
кромки образцы развести 1:10 в РМП растворе (!х конц.) Разведенная моча хранится максимум 5 дней в холодильнике при
температуре 2 - 8 ‘'С. Если проведение анализов отложено, разведенн\то мочу необходимо заморозить по аликвотам (< - 18 “С ).
Избегать повторного замораживания.
Не использовать зараженные образцы мочи или образцы с макр о гематурией.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Использовать набор только для диагностики ин-витро.
2. Использовать перчатки и защитные очки.
3. Не использовать набор после окончания срока действия.
4. Не смешивать реагенты из наборов с разными лотами.
5. Со образцами пациентов необходимо обращаться как с потенциально биологически опасными, использовать в соответствии
с правилами.
6. Избегать микробиологической контаминации реагентов.
7. Проводить анализ в соответствии с GLP.
8. Точность результатов анализа зависит от проведения процедуры в соответствии с инструкцией.
9. Стоп -раствор содержит 0.5 М серной кислоты. Избегать контакта с кожей и слизистой оболочкой глаз.
10. При попадании ТМБ-раствора на кожу тщательно промыть водой и обратиться к врачу.
И. РгоСИп 300 (60 миллионных долей) может вызвать аллергическ>то реакцию. При попадании на кожу тщательно про.мыть
водой и обратиться к врачу.
12. Material Safety Data Sheets предоставляются по просьбе.
МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
Микропланшетный ридер (длинна волны 450 нм)
Микропланшетный шейкер (вибрация - 450 об/мин)
Микропланшетный промывочный аппарат.
Стандартное лабораторное оборудование (прецизионные пипетки и вращательная мешалка)
РАЗВЕДЕНИЕ РМП СТАНДАРТОВ НАБОРА ИФА.
Восстановить РМП стандарт набора ИФА 1.0 мл свежей деионизированной воды.
Оставить на 15 минут при комнатной температуре.
Внести 3.0 мл РМП раствора (стандарт О мкг/л). Общий объем должен составить 4.0 мл.
Смешать вращением в мешалке 15 мкг/л 1 стандарт.
Стандарт (мкг/л) Стандарт 15 мкг/л (мкл) Раствор (ст. 0 мкг/л) (мкл)
0 1 0 1 1000
1 100 1 1400
2.5 100 1 500 1
5 600 i 1200
10 600 1 300
15 1000 10
121248 Москаа, Набережная Тараса Шевченко^ д. 3, Московское аредставктельство «DRG IntcrnatloBai, 1ас.»
тел. (49») 243-5621,243-S22S, 243^28, факс (495) 232^211, (499) 243-93СЮ; e>maii: drgteeh@dQl.ni ^tti>:i/www.drgtech.m
DRG" Рак Мочевого Пузыря (EIA-2355)
СОСТАВ НАБОРА
Материалы для 96 определений.
1. Микрострипы покрытые антителами к РМП: 1 плашка, 96 сухих лунок (12x8), покрытых моноклональными антителами 8/18
к цитокератину (6D7 и 3F3).
Пластиковая, влагопоглощающая упаковка. Готовы к использованию.
2. РМП конъюгат: 2 флакона по 0.5 мл,
коньюгированные антитела в буфере, стабилизированном протеином pH 7,5 (Их кони.)
Развести с раствором РМП (стандарт мкг/л). Синего цвета. Добавлены консерванты.
3. Раствор РМП для мочи: 1 флакон, 20 мл,
раствор образца, стабилизированный белком буфер, pH 7.5 (2.5 х конц)
Разбавить 30 мл деионизированной воды. Добавлены консерванты.
4. Раствор РМП (Стандарт О мкг'л ): 2 флакона по 15 мл,
Рствор стандарта и стандарт О мкг/л, стабилизированный белком буфер, pH 7.5.
Добавлены консерванты. Готов к использованию.
5. Стандарт РМП: 1 флакон (4 мл), лиофилизированное вещество цитокератина в стабилизированный белком буфер, pH 7,5.
Добавлены консерванты.
6. РМП контроль (низкий, высокий): 2 флакона с контролями по I мл,
лиофилизированное вещество цитокератина в стабилизированный белком буфер, pH 7.5. Желтого цвета. Добавлены
консерванты.
7. Промывочная таблетка: 1 упаковка, 1 таблетка в упаковке.
Таблетку растворить в 500 мл свежей деионизированной воды.
8. Раствор субстрата ТМБ: 1 флакон, 22 мл.
Избегать прямого попадания света, плотно закрывать флакон. Не использовать больше, чем необходимо для анализа. Готов к
использованию.
9. Стоп раствор: 1 флакон, 12 мл,
0.5 М серная кислота. Готов к использованию.
10. Упаковочная лента: 1 полоска.
Упаковочная лента для микрострипов.
11. Сертификат набора РМП ИФА.
Сертификат на состав набора.
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
Анализ проводится при комнатной температуре {22 ±6 ®С).
1. Довести все реагенты и образщ>1 до комнатной температуры. Встряхн>ть все реагенты перед использованием.
2. Разбавить РМП раствор мочи с 30 мл свежей деионизированной воды к 1х конц.
3. Разбавить образцы 1:10с 1х конц. РМП раствора мочи.
4. Приготовить стандарты (см. выше).
5. Развести РМП контроль (низкий, высокий) с 1.0 мл свежей деионизированной волы. Оставить на 10 минут. Тщательно
перемешать. Готов к использованию через 15 минут после воссоздания.
6. В зависимости от количества стрипов, разбавить ПХ конъюгат (Их конц.) в наборе РМП ELISA с раствором РМП (Стандарт
О мкг/л) (флакон по 5.0 мл).Тшательно перемешать.
7. Внести 100 мкл стандартов, контролен и образцов в каждую лунку (2 раза). Начать с двух пустых лунок для измерения
фоновой абсорбции.
8. Добавить 100 мкл разведенного ПХ коньюгата в каждую лунку, кроме 2-х пустых лунок. Накрыть стрипы упаковочной
лентой.
ПРИМЕЧАНИЕ: Шаг 7 и 8 должны исполняться последовательно без перерывов.
9. Инкубировать 2 ч ±2 мин на шейкере (-450 об., мин).
10. Подготовить промывочный раствор. Растворить Промывочную таблетку^ в 500 мл свежей дeиoнизиpoвa^^нoй воды.
11. Осушить и промыть лунки 3 X 0,3 мл промывочным раствором.
12. Добавить 200 мкл ТМБ Субстрата в каждую лунку, включая 2 пустых лунки. Инкубировать в темноте 15 ± 1 мин.
13. Добавить 100 мкл Стоп-раствора в каждую лунку. Оставить на шейкере на 1 митту ('-450 об./мин).
14. Считать абсорбцию при 450 нм. в течение 30 мин после добавления Стоп-раствора.
15. Подсчитать цитокератин 8 и 18 концентрашш (мкг/л) образцов.
ПРИМЕЧАНИЕ: Умножение с фактором разведения. Образцы (в пропорции разведения 1:10), показывающие концентрации
выше 15 мкг/л, должны быть соответственно разведены Разбавителем РМП мочи перед повторным анализом.
__________________________Краткое описание методики________________________________
Приготовить стандарты и ПХ конъюгат
Пипетировать 100 мкл стандартов/контрол ей/образцов в лу'нки (в дублях)
Добавить 100 мкл ПХ конъюгата в кажд>то лунку
2 ч инкубировать в шейкере при комнатной температуре
Осушить и промыть
Добавить 200 мкл ТМБ. Инкубировать в темноте при 15 мин.
Добавить 100 мкл Стоп-Раствора, всболтать 1 мин. Считать абсорбцию при 450 нм.
12124S Москва, Набережная Тараса Шевченко, д. Э, Московское представительство «DRG Internatiooai, ino
тел. (499) 243-5621,243>522S, 243^28, факс (495) 232^211, (499) 243-9300; e-mail: drgtech@dol.ro http;//www.drgtech.nt
DRG" Рак Мочевого Пузыря (EIA-2355)
ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
Ручной подсчет или с использованием программного обеспечения для использования данных по ИФЛ (построение кривой -
сглаженный сплайн). Для достижения правильных результатов убедитесь, что контроли показывают значения в допустимых
пределах.
Ручной подсчет результатов:
Откорректируйте каждую абсорбцию вычитанием из неё значения бланка. Получите среднее значение для каждого дубля.
Постройте стандартную кривую, нанеся на графике по оси ординат поглощение, а по оси абсцисс - соответствующую
концентрацию.
ХРАНЕНИЕ
Хранить набор при 2 - 8 '’С. НЕ МОРОЗИТЬ!
Хранить реагенты в оригинальной упаковке, если они ранее не использовались.
Запечатать вместе с осушителем пакет с микрострипами, которые не используются для постановки.
Промывочный раствор стабилен 4 недели, если хранить при 2 - 8 ®С.
Разведенный РМП ИФЛ ПХ Конъюгат стабилен 4 недели, если хранить при 2 - 8 ""С.
Восстановленный и разведенный стандарт стабилен 4 недели, если хранить при 2 - 8 °С.
Восстановленный контроль стабилен 4 недели, если хранить при 2-8 X.
Разведенный Разбавитель РМП мочи (1х конц.) стабилен 4 недели, если хранить при 2 - 8 ^С.
ОГРАНИЧЕНИЕ ПРОЦЕДУРЫ
Данный тест не должен использоваться как раковый ск*рининг. Результаты анализа должны интерпретироваться вместе с
клиническими данными. Повышенные значения мог>т быть обнаружены при сл\чаях, например, гиперплазии простаты,
карциномы верхних мочевых путей, инфекции мочевых путей. Если есть подозрение на временную инфекцию, важно повторить
тест двумя неделями позже. РМП ИФЛ не должен применяться в связи при терапии, особенно внутрипузырной. Поправка на
Креатинин не нужна в данном тесте.
ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЯ
Диапазон измерения от О до 15 мкг л. Анализ не дает "эффекта крюка" до 500 мкг/л.
ВОСПРОИЗВОДИМОСТЬ
Внутрипостановочная воспроизводимость стандартной кривой имеет типичный КВ < 5% (в дублях). Межпостановочная
неточность характерна < 5% КВ.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ
Минимально определяемая концентрация РМП ИФЛ 0,1 мкг/л, определена как концентрация цитокератина 8 и 18, которая
связана с абсорбцией, и составляет три стандартных отклонения от абсорбции стандарта О мкг/л.
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
95%-ный процентиль для здоровых людей (Шведская популяция) определилась как 12 мкг/л. Ввиду различий, которые могуг
быть между лабораториями и местностями, относящимися к популяциям, лабораторным оснащением и отбором испытуемой
группы, настоятельно рекомендуется каждой лаборатории разработать собственные нормы.
ВОССТАНОВЛЕНИЕ
Специальные количества цитокератина 8 и 18 были добавлены к человеческой моче. Восстановление было 91 - 98%.
ГАРАНТИЯ
Постановочные данные, представленные здесь, получены по вышеуказанной процедуре. Любое изменение или модификация
теста, не рекомендованные DRG®, могут навредить результативности. В таких случаях DRG® снимает с себя все обязательства по
гарантии, заявленные на данный набор.
ЛИТЕРАТУРА
1. Stigbrand, Т. et al. Epitope specificity of 30 monoclonal antibodies against cytokeratin antigens: The ISOBM TD5-1 Workshop.
Tumor Biol 1998; 19:132-152.
2. Sanchez-Carbayo, M. et al. Comparative predictive values of urinary cytology, urinary bladder cancer antigen, Cyfra 21-1 and NMP22
for evaluating symptomatic patients at risk for bladder cancer. J Urol 2001; 165:1462-1467.
3. Giannopoulos, A. et al. Comparative evaluation of the diagnostic performance of the BTA stat test. NMP22 and urinary bladder cancer
antigen for primary and recurrent bladder tumors. J Urol 2001; 166:470-475.
121248 Москва, Набережная Тараса Шевченко, д. 3, Московское яредставительство «DRG iRtemational, Ino
тел. (499) 243-5621,243>-5228,243-4028, факс (495) 232^0211, (499) 243-9300; e-mail: drgtech^dotru bttp://www.drgtech.ru