Агар Мюллера-Хинтона по ТУ 9385-001-11161893-2014, в вариантах исполнения: Агар Мюллера-Хинтона; Агар Мюллера-Хинтона с бараньей кровью. — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2015/2845 от 15.07.2015 · класс риска 2б

Производитель: ООО "СРЕДОФФ" (Россия)

Вид изделия: Агар Мюллера-Хинтона питательная среда чувствительность к антимикробным препаратам ИВД, с овечьей кровью · Агар Мюллера-Хинтона питательная среда для определения чувствительности к антимикробным препаратам ИВД

Назначение: Медицинское изделие для диагностики in vitro, готовая питательная среда, предназначенная для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам диско-диффузионным методом

В госконтрактах 44-ФЗ: 59 контрактов, медианная цена за единицу 85,98 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ
«СРЕДОФФ»
(ООО «СРЕДОФФ»)
ОКПД2 20.59.52.140
«УТВЕРЖДАЮ»
Исполнительный директор
ООО «СРЕДОФФ»
Акберов Р.Т.
______________________
20 ноября 2025 г.
АГАР МЮЛЛЕРА-ХИНТОНА
ПО ТУ 9385-001-11161893-2014,
В ВАРИАНТАХ ИСПОЛНЕНИЯ
Образец инструкции по применению
медицинского изделия для диагностики in vitro
(введена взамен версии 1 от 17.03.2015)
Дата введения в действие – 2025-11-21
Без ограничения срока действия
Разработчик: ООО «Средофф»
2025
| АгарМюллера-Хинтона |  | АгарМюллера-Хинтонасбараньейкровью |  |
| Стандартнаяформула | Граммналитр | Стандартнаяформула | Граммналитр |
| Обезвоженнаявытяжкаиз говядины | 300,0 | Обезвоженнаявытяжкаиз говядины | 300,0 |
| Гидролизатказеина | 17,5 | Гидролизатказеина | 17,5 |
| Крахмал | 1,5 | Крахмал | 1,5 |
| Агар | 17,0 | Агар | 17,0 |
| Добавки | Налитр | Добавки | Налитр |
| - | - | Дефибринированнаякровь барана | 50,0мл |
1. НАЗНАЧЕНИЕ ИЗДЕЛИЯ
Агар Мюллера-Хинтона, по ТУ 9385-001-11161893-2014 (далее Агар Мюллера-
Хинтона), представляет собой среду для определения чувствительности микроорганизмов к
антибиотикам диско-диффузионным методом. Питательная среда представлена в двух
вариантах исполнения: Агар Мюллера-Хинтона и Агар Мюллера-Хинтона с бараньей кровью.
Оба варианта применяются для выращивания клинически значимых бактерий с целью
последующего определения их чувствительности к антибиотикам; при этом Агар Мюллера-
Хинтона используется для выращивания большинства неприхотливых к питательным
свойствам среды микроорганизмов, а Агар Мюллера-Хинтона с бараньей кровью может
применяться для культивирования как нетребовательных, так и требовательных к составу
питательной среды бактерий.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА
2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Агар Мюллера-Хинтона во всех вариантах исполнения содержит обезвоженную
вытяжку из говядины и гидролизат казеина – высокопитательные компоненты, необходимые
для роста бактерий, а также крахмал, который играет роль абсорбента токсичных продуктов
метаболизма, выделяемых некоторыми микроорганизмами. Содержание компонентов в среде
подобрано таким образом, чтобы оказывать минимальное влияние на результаты тестов на
чувствительность микроорганизмов к антибиотическим препаратам.
Вариант исполнения готовой питательной среды Агар Мюллера-Хинтона используется
для выращивания большинства неприхотливых к питательным свойствам среды клинически
значимых бактерий (энтеробактерии, не обладающие способностью к брожению
грамотрицательные палочки, стафилококки и энтерококки) с целью последующего
определения ихчувствительности к антибиотикам.
Вариант исполнения готовой питательной среды Агар Мюллера-Хинтона с бараньей
кровьюсодержитвкачестведобавкидефибринированнуюкровьбарана,котораястимулирует
рост труднокультивируемых бактерий. По этой причине Агар Мюллера-Хинтона с бараньей
кровью может быть использован для выращивания как неприхотливых к питательным
свойствам среды клинически значимых бактерий, так и для клинически значимых
требовательныхксоставусредымикроорганизмов,вчастностиграмположительныхбактерий,
с целью последующегоопределения ихчувствительности к антибиотикам.
2.2.СОДЕРЖАНИЕ ОСНОВНЫХ КОМПОНЕНТОВ
АгарМюллера-Хинтона имеетв своем составе следующие основные компоненты:
Таблица 1
барана
Стр.2из 15
| АгарМюллера-Хинтона |  | АгарМюллера-Хинтонас бараньей кровью |  |
| Наименование показателя | Характеристикаи нормы | Наименование показателя | Характеристика и нормы |
| pH при 25°C | 7,3± 0,2 | pH при 25°C | 7,4± 0,2 |
| Цвет | Соломенно-желтый | Цвет | Красный |
| Прозрачность | Прозрачный | Прозрачность | Матовый |
| Консистенция | Гель | Консистенция | Гель |
| Гомогенность | Гомогенный | Гомогенность | Гомогенный |
| Название культуры микроорганизма,описание ростакультуры на готовой питательной среде | Название антибиотического вещества;концентрация,мкг | Стандартные значения подавления зоны роста культуры,мм |
| Escherichiacoli ATCC® 25922– хороший рост,колонии светло-соломенногоцвета | Амоксициллин/клавулановая кислота; 20/10 | 18-241 |
|  | Цефотаксим; 30 | 29-351 |
|  | Ципрофлоксацин; 5 | 30-401 |
|  | Тобрамицин; 10 | 18-261 |
Количество используемой в качестве добавки дефибринированной крови барана
рассчитываетсястрогоизсоотношения50млдефибринированнойкровибаранана1лготовой
питательной среды АгарМюллера-Хинтонас бараньейкровью.
3.ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Агар Мюллера-Хинтона во всех вариантах исполнения является медицинским изделием
одноразового применения и представляет собой стерильную готовую питательную среду,
асептичноразлитую в чашки Петри.
Одна упаковка содержитне более 10чашек с готовым агаром.
Одна чашка содержитне менее 20мл готовой среды.
ТолщинаслояагаравчашкеПетрисоставляетнеменее4мм(МУК4.2.1890–04«Определение
чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам»).
Таблица2
Гомогенность Гомогенный Гомогенность Гомогенный
Контроль качества
Тестирование стерильности
Макроскопическое исследование не должно выявить никакого микробного роста после
инкубации при 20-24°C и 30-34°C в течение 5дней.
4.АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Таблица 3
Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотическим препаратам на
готовой питательной среде АгарМюллера-Хинтона
Стр.3из 15
| Название культуры микроорганизма,описание ростакультуры на готовой питательной среде | Название антибиотического вещества;концентрация,мкг | Стандартные значения подавления зоны роста культуры,мм |
| Enterococcus faecalis ATCC® 29212– хороший рост,колонии светло-соломенногоцвета | Нитрофурантоин; 100 | 20-272 |
|  | Ампициллин; 10 | 26-352 |
|  | Ципрофлоксацин; 5 | 20-272 |
| Название культуры микроорганизма,описание ростакультуры наготовой питательной среде | Название антибиотического вещества; концентрация,мкг | Стандартные значения подавления зоны ростакультуры,мм (согласно международному стандарту DIN) |
| Enterococcus faecalis ATCC® 29212– хороший рост,колонии светло- соломенногоцвета | Нитрофурантоин; 100 | 20-27 |
|  | Ампициллин; 10 | 26-35 |
|  | Ципрофлоксацин; 5 | 20-27 |
| Staphylococcus aureus ATCC® 25923– хороший рост,колонии кремовогоцвета | Оксациллин; 5 | 26-38 |
|  | Эритромицин; 15 | 26-35 |
|  | Ванкомицин; 30 | 16-23 |
|  | Цефазолин; 30 | 30-41 |
Продолжение таблицы 3
Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотическим препаратам на
готовой питательной среде АгарМюллера-Хинтона
Ципрофлоксацин; 5 20-27
1–согласномеждународному стандарту EUCAST/ CLSA
2–согласномеждународному стандарту DIN
Таблица 4
Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотическим препаратам на
готовой питательной среде АгарМюллера-Хинтонас бараньей кровью
5.МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
АгарМюллера-Хинтона предназначен толькодля invitro диагностики.
Толькодля профессиональногоприменения.
Избегайте вдыхания, попадания в глаза, на кожу, слизистые и на одежду. При
попадании на чувствительные области немедленно промойте водой, кожу промывайте водой
с мылом.
Избегайте микробной контаминации реагента.
Настоятельно рекомендуется считать контрольные штаммы микроорганизмов
потенциально инфицированными и соблюдать все необходимые меры предосторожности при
работе с ними.
Стр.4из 15
Устройствамногоразовогоиспользованиядолжныбытьстерилизованывсоответствии
с принятой процедурой после применения, однако предпочтительным методом является
стерилизациявавтоклавевтечение15минутпритемпературе121°C.Предметыодноразового
использования должны проходить стерилизацию в автоклаве или сжигаться. Рассыпанные
потенциально инфицированные материалы должны немедленно удаляться впитывающей
бумагой, и загрязненные участки должны быть обработаны стандартным антибактериальным
дезинфицирующим средством. НЕ используйте гипохлорит натрия. Материалы,
использованные для очистки разливов, в том числе перчатки, должны утилизироваться как
биологически опасные отходы.
Ненабирайтевеществавпипеткуприпомощирта.Приработеспробамиипроведении
анализаиспользуйтеодноразовыеперчаткиисредствадлязащитыглаз.Поокончанииработы
тщательновымойте руки.
Не используйте контрольные штаммы микроорганизмов с истекшим сроком годности.
6.ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ
Работа в лаборатории должна проводиться с соблюдением СП 1.3.2322-08
«Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и
возбудителями паразитарных инфекций». При работе с реагентом следует соблюдать
требования ГОСТ Р 52905–2007 (ИСО 15190:2003) «Лаборатории медицинские. Требования
безопасности».
7.ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Для постановки анализа дополнительно требуются следующие виды оборудования,
средств измерения и материалов:
ламинарный бокс (бокс биологической безопасности) класс II /тип А2/,
инокуляционные петли/иглы для посева, стерильные металлические толстые иглы с
утолщенными концами, газовая горелка для создания асептических условий при посеве,
стерильные пробирки, стерильные пипетки, стерильный шпатель Дригальского, стерильный
микробиологический тампон, стерильный физиологический раствор, стерильный трипсин,
стерильная пептонная вода, стерильные чашки Петри, стерильные неметаллические сосуды,
стерильные одноразовые перчатки, средства для защиты глаз при посеве, стандарт мутности
0,5поMcFarlandдляприготовлениясуспензиимикроорганизмов,инкубатордляподдержания
температуры инкубации, таймер, диагностические диски с антибиотиками (M.I.C.E. полоски,
Е-тесты), штангенциркуль, таблицы с пограничными значениями диаметров зон подавления
роста исследуемых микроорганизмов антибиотическими препаратами, дезинфицирующее
средство, автоклав для стерилизации отработанного материала, автоклав или сухожаровой
шкаф для стерилизации посуды.
Необходимость использования конкретного вида оборудования, средств измерения и
материалов,требуемыхдляработы,атакжеихэксплуатационныехарактеристикиопределяет
посвоемуусмотрению микробиолог,занимающийся постановкой анализа.
8.АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Чистые культуры микроорганизмов, выделенных из клинических образцов
(биоматериала) – образцов из организма человека (кровь; ликвор; пунктаты
различныхорганов и тканей; соскобы с кожных покровов; образцы из дыхательных путей:
отделяемое верхних дыхательных путей (отделяемое слизистых отделов полости носа, зева),
отделяемое нижних дыхательных путей (мокрота, бронхоальвеолярный лаваж); отделяемое
наружногоуха; образцы из мочеполовой системы: моча,отделяемое
Стр.5из 15
влагалища, отделяемое цервикального канала, отделяемое уретры, секрет простаты;
отделяемое свищей).
9.ЗАБОР И ТРАНСПОРТИРОВКА АНАЛИЗИРУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
Забор и транспортировка исследуемых образцов осуществляется в соответствии с
требованиями Приказа Минздрава СССР от 22 апреля 1985 г. №535 «Об унификации
микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-
диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений» и МУ 4.2.2039-05
«Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Техника сбора и
транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории».
9.1Образцы крови
Взятие исследуемогоматериала
1. Забор проб крови для посева осуществляется в любое время суток независимо от
приема пищи. Пробы для определения наличия в крови биологических агентов получают
венопункцией периферических вен (чаще вены локтевого сгиба), артерий или из пятки у
новорожденных, строго соблюдая правила асептики, чтобы избежать попадания в пробу
микроорганизмов из внешней среды.
2. Кровь для посева следует брать до начала антибактериальной терапии, или, по
крайнеймере,через12-24часапослепоследнеговведенияпрепаратабольному(взависимости
от скорости выведения примененного препарата из организма); в противном случае следует
учесть, что антибиотические вещества в составе лекарственных препаратов, назначенных
пациенту, могут отсрочить или предотвратить рост бактерий, что приведет к получению
ложноотрицательного результата исследования. Следует учитывать также стадию
заболевания,чтобывзятькровьдляпосевавтовремя,когдапредполагаетсябактериемия,т.е.
присутствие возбудителя в крови пациента.
3. При заборе пробы у взрослых получают 10-30 мл крови, у детей - 0,5-3,0 мл. Взятие
крови осуществляется с последующим переносом пробы во флакон с жидкой питательной
средойобогащения,котораятакжеможетсодержатьреагенты,нейтрализующиеантибиотики
и разрушающие форменные элементы крови, или двухфазной средой. Предварительно
крышка флакона дезинфицируется 70%-м этиловым спиртом. Кровь вносится во флакон со
средойчерезпроколврезиновойпробкефлакона.Сниматьпробкузапрещаетсявоизбежание
попадания микроорганизмов извне. Кровь, получаемую от взрослых, вносят либо в жидкую
часть двухфазной среды, либо в емкость с питательным бульоном; кровь, полученную от
детей,-в специальную «детскую»бутылочкус питательным бульоном.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Полученные пробы крови немедленно доставляют в микробиологическую
лабораторию.
Есликровькультивируютвбульоне,тогдапослеполученияпробухранятвтермостате
при температуре 35-37°С.
Если пробы собирают в специальные емкости для последующего исследования с
двухфазной средой,ихследуетхранить при комнатной температуре (18-20°С).
9.2.Образцы спинномозговой жидкости (ликвора)
Взятие исследуемогоматериала
1. Для бактериологического анализа обычно используют спинномозговую жидкость,
взятую при люмбальной пункции или при пункции боковыхжелудочков мозга.
2. Взятиеспинномозговойжидкостипроводяткакможнораньше,желательнодоначала
антибактериальноголечения.
Стр.6из 15
3. Взятие спинномозговой жидкости производит врач. Проба отбирается со строгим
соблюдением правил асептики. Свежевзятый ликвор из шприца без иглы над спиртовкой
вносятв стерильную,желательноцентрифужную пробиркув количестве 1-2мл.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Ликвордляисследованияпослезаборанемедленнодоставляютвлабораторию,гдеего
сразу же подвергают анализу. При отсутствии такой возможности материал собирают в
емкость с транспортировочной средой и оставляют в холодильнике (при температуре 4-8°С)
до утра, а затем доставляют в лабораторию. Для пересылки материала используют
изотермальные ящики, грелки, термос или любую другую упаковку, где поддерживается
температура около37°С.
9.3.Образцы пунктатов
Взятие исследуемогоматериала
Забор пунктатов из различных органов и тканей производит врач во время
оперативного вмешательства или при проведении диагностической пункции, используя
методику аспирации. Пробы необходимо сразу же поместить в пробирки с транспортной
средой или в стерильную пробиркус тиогликолевой средой.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Материал следует немедленно доставить в лабораторию. Пробы биоматериала в
транспортныхсредаххранятпри комнатной температуре (18-20°С).
9.5.Образцы соскобов с кожныхпокровов
Взятие исследуемогоматериала
Место локализации пораженного участка должно быть чистым и не обработанным
посторонними веществами, в особенности растворами, обладающими микостатическими
свойствами. Забор пробы осуществляет врач. Используя специальные инструменты, врач
производит глубокий соскоб с кожи пациента, после чего незамедлительно помещает пробу в
стерильную пробиркуили пробиркус транспортной средой.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Материал следует немедленно доставить в лабораторию. Пробы биоматериала в
транспортныхсредаххранятпри комнатной температуре (18-20°С).
9.5.Образцы отделяемогодыхательныхпутей
9.5.1.Отделяемое верхнихдыхательныхпутей
Взятие исследуемогоматериала
I. Мазок со слизистых передних отделов полости носа. Пробу со слизистых передних
отделов полости носа собирают одним стерильным зондом-тампоном, вмонтированным в
стерильную одноразовую пробирку(тубсер).
Приналичиивполостиносаочаговвоспаленийилиизъязвленийотдельнымтампоном
собираютматериал из очага (очагов)в отдельную пробирку.
II.Мазок сослизистойглотки(зева).
Мазок из зева (глотки) собирают натощак или через 3-4 ч после приема пищи. Перед
взятием пробы больной должен прополоскать роттеплой кипяченой водой.
Для получения пробы используют стерильный шпатель и тампон, вмонтированный в
стерильную одноразовую пробирку (тубсер). Использование зонда-тампона с вискозной
головкой предпочтительнее, т.к. вискоза адсорбирует меньше жидкости и больше клеточного
материала.
Стр.7из 15
При наличии очагов воспалений или изъязвлений на слизистой относятся к сбору
пробы особенно внимательно и собирают отдельным тампоном дополнительно материал из
очага (очагов)в отдельную пробирку.
Помещаюттампон в стерильную одноразовую пробиркуи доставляютв лабораторию.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Полученныепробынезамедлительнодоставляютвмикробиологическуюлабораторию.
При невозможности произвести немедленный посев рекомендуется хранить полученные
образцы в холодильнике при температуре 2-8°С,ноне более 3-4часов.
9.5.2.Отделяемое нижнихдыхательныхпутей
Взятие исследуемогоматериала
I.Сбормокроты.
Предпочтителен утренний сборсвободноотделяемой (отхаркиваемой)мокроты.
Перед сбором пробы пациенту необходимо почистить зубы и сполоснуть рот и горло
теплой кипяченой водой.
Пробу мокроты, полученную в результате глубокого кашля, собирают в специальный
стерильныйодноразовыйконтейнерсзавинчивающейсякрышкойиливспециальнымобразом
подготовленную стерильную стеклянную банку. Нельзя собирать для анализа слюну или
носоглоточное отделяемое.
II.Сборбронхоальвеолярнойжидкости(лаважа).
Бронхоальвеолярный лаваж получают с помощью специального прибора для
обследования внутренних поверхностей трахеи и бронхов – бронхоскопа. Для этого вводят
шприцем через биопсийный канал бронхоскопа отдельными порциями стерильный
небактериостатический физиологический раствор (общий объем от 5-20 до 100 мл). Перед
введением следующейпорциифизиологическогораствора осторожноотсасываютвведенную
часть стерильным одноразовым шприцем в стерильный одноразовый контейнер с
завинчивающейся крышкой или в стерильную одноразовую или стеклянную пробирку с
пробкой, или оставляют в закрытом шприце, предварительно удалив из него воздух. Каждую
отсасываемую порцию собирают в отдельную посуду и по окончании процедуры соединяют
пробы,полученные из одногои тогоже участка.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Полученныепробынезамедлительнодоставляютвмикробиологическуюлабораторию.
При невозможности произвести немедленный посев рекомендуется хранить полученные
образцы в холодильнике при температуре 2-8°С,ноне более 3-4часов.
9.6.Образцы отделяемогонаружногоуха
Взятие исследуемогоматериала
При поражении наружного уха проводят обработку кожи 70%-м спиртом с
последующим промыванием стерильным физиологическим раствором. Отделяемое из очага
собирают на стерильный одноразовый зонд-тампон тубсера или пробирки с
транспортировочной средой.Тампон помещаютв пробиркуи доставляютв лабораторию.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Полученные образцы незамедлительно доставляют в лабораторию, где их сразу же
подвергают анализу. При невозможности произвести немедленный посев рекомендуется
хранить полученные образцы в холодильнике при температуре 2-8°С, но не более 3-4 часов.
При использовании пробирки с транспортировочной средой исследуемые пробы хранят при
комнатной температуре (18-20°С).
Стр.8из 15
9.7.Образцы из мочеполовой системы
9.7.1Моча
Взятие исследуемогоматериала
Для микробиологического анализа используется утренняя моча, сбор суточной мочи
для этихцелей недопустим.
Сбормочинеобходимопроводитьдоначаламедикаментозноголечения.Еслиставится
цель оценить эффект проведенной терапии, то посев мочи производится по окончании курса
лечения(на5-7деньпослеотменыантибиотиковилиуросептиков),собязательнымуказанием
препарата,которым проводилось лечение.
Сбор утренней мочи проводится после тщательного туалета наружных половых
органов и области заднегопрохода.
В одноразовый стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой собирают
среднюю порцию свободновыпущенной мочи в количестве 3-7мл.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Доставка материала в лабораторию осуществляется в течение 1,5-2 часов после сбора.
Допускаетсяхранениемочивхолодильнике(при2-4ºС)неболее3-4часов.Вслучаедоставки
мочи в лабораторию позже указанных сроков результаты посева мочи могут быть
недостоверны.
9.7.2.Образцы отделяемогомочеполовой системы
Взятие исследуемогоматериала
I.Сборпроб из влагалища.
Не допускается исследовать материал,собранный из переднегосвода влагалища.
Материал для анализа получаютдопроведения мануальногоисследования.
Длясборапробыиспользуют2стерильныхзонда-тампонаилитубсера.Послевведения
зеркала пробу собирают одним стерильным зондом-тампоном или тубсером, допускается
также использование зондов-тампонов, вмонтированных в стерильные стеклянную или
завинчивающуюся одноразовые пробирки; материал собирают со слизистой заднего свода
илисеепатологическиизмененныхучастков.Зонд-тампонпомещаютвстерильнуюпробирку
(тубсер) для доставки в лабораторию. Вторым стерильным зондом-тампоном (тубсером)
собираютпробуи готовятмазки.
Для большей информативности анализа пробы вагинального секрета получают с
помощью стерильных одноразовых калиброванных петли или пипетки, материал из которых
переносятвстерильныеодноразовуюилистекляннуюпробиркидлядоставкивлабораторию.
Мазки высушивают на воздухе и, поместив в стерильные чашки Петри, также доставляют в
лабораторию.
II.Сборпроб из цервикальногоканала
Следует иметь в виду, что из проб цервикального канала, как правило, выделяется
существенно меньший спектр микроорганизмов, чем из влагалища, что является следствием
различий в составе эпителия и рН этихотделов мочеполовоготракта.
После обнажения шейки матки в зеркалах тщательно очищают шейку от секретов
вагины и слизи с помощью ватного тампона, смоченного стерильным физиологическим
раствором или стерильной водой. После этого щеточку (стерильный зонд-тампон, зонд-
тампон тубсера или зонд-тампон пробирки с транспортной средой) осторожно вводят в
цервикальный канал на глубину 1,0-1,5 см, не касаясь стенок влагалища. Вращая любой из
перечисленныхвышеинструментовнесколькоразвокругоси,захватываютматериал–клетки,
экссудат – по периметру цервикального канала. Переносят материал в стерильные
одноразовую или стеклянную пробирки и доставляютв лабораторию.
III.Сборпроб из уретры у женщин
Собираютматериал через 1-2часа после мочеиспускания.
Стр.9из 15
Собирают отделяемое уретры стерильным зондом-тампоном. Помещают зонд-тампон
в тубсер или стерильную одноразовую пробирку с завинчивающейся пробкой, или в
стеклянную стерильную пробирку с газопроницаемой пробкой и передают материал в
лабораторию.
Если описанным выше способом не удалось получить отделяемое, промывают
наружную уретру бактерицидным мылом, споласкивают теплой кипяченой водой, вводят
стерильный зонд-тампон на 2-4 см в эндоуретру, осторожно поворачивают его несколько раз
вокругосииоставляютвуретрена1-2с,извлекаюттампон,помещаютвстерильнуюемкость
и доставляютматериал в лабораторию.
IV.Сборпроб из уретры у мужчин
Сбор пробы осуществляют после тщательного туалета наружных половых органов и
области заднегопрохода для предотвращения дополнительной контаминации.
Собираютпробуне ранее чем через 2ч после мочеиспускания.
Вводят специальный стерильный уретрогенитальный зонд-тампон на оси из тонкой
алюминиевой проволоки (предпочтительно с алгинатом кальция, но допускается
использование тампона из хлопка, вискозы или дакрона) или тампон из транспортировочной
емкости со средами с активированным углем или без него на 3-4 см в дистальный отдел
уретры. Осторожно вращая тампон вокруг оси, оставляют его в уретре на 2-3 с. Извлекают
тампон и помещаютегов пробирку,доставляютпробув лабораторию.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Доставка материала в лабораторию осуществляется в течение 1,5-2 часов после сбора.
Допускается хранение проб в холодильнике (при 2-4 ºС) не более 3-4 часов. При
использовании пробирки с транспортировочной средой исследуемые пробы хранят при
комнатной температуре (18-20°С).
9.7.3.Образцы секретапростаты
Взятие исследуемогоматериала(неинвазивный метод)
Сбор пробы осуществляют после тщательного туалета наружных половых органов и
области заднегопрохода (необходимодля предотвращения дополнительной контаминации).
Собираютэякулятвстерильныйодноразовыйконтейнерсзавинчивающейсякрышкой
или в стерильную одноразовую пробирку с завинчивающейся пробкой, закрывают емкость.
Еслиматериаламало,собираютпробуназонд-тампонилипредпочтительно–наспециальный
тампон с алгинатом кальция, тампон помещают в стерильную емкость с завинчивающейся
крышкой.
Транспортировкаисследуемогоматериала
Материал следует немедленно доставить в лабораторию для проведения анализа. При
невозможности произвести немедленный посев рекомендуется хранить полученные образцы
в холодильнике при температуре 2-8°С,ноне более 3-4часов.
9.8.Образцы отделяемогосвищей
Взятие исследуемогоматериала
Забор проб отделяемого свищей производит врач во время оперативного
вмешательства или при проведении диагностической пункции, используя методику
аспирации. Пробы необходимо сразу же поместить в пробирки с транспортной средой или в
стерильную пробиркус тиогликолевой средой.
Стр.10из 15
Транспортировкаисследуемогоматериала
Материал следует немедленно доставить в лабораторию для проведения анализа.
Пробы биоматериала в транспортныхсредаххранятпри комнатной температуре (18-20°С).
10.ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
1. Выделяют чистые культуры микроорганизмов из анализируемых образцов. Для
этого вначале выполняют прямой посев исследуемого биоматериала на поверхность чашки
Петри с агаром, подходящим для выращивания микроорганизмов, предположительно
содержащихся в пробе.
Кровь. При использовании для посева крови бульона для обогащения пробы
инкубируют в термостате при температуре 35-37°С в течение 8 суток. Пробы просматривают
каждый день. Наличие роста микроорганизмов оценивают визуально по помутнению среды
вофлаконе.Вслучаепомутнениясреды,атакжеприотсутствиивидимыхпризнаковростана
3, 5 и 8 сутки производят высев на питательную среду, для чего стерильной пипеткой
переносят0.1млкровиизфлаконанаповерхностьчашекПетрисготовойпитательнойсредой
и тщательнораспределяютпоповерхности агара стерильным шпателем Дригальского.
При использовании для посева крови двухфазной среды пробы инкубируют в
термостате при температуре 35-37°С в течение 8 суток. Пробы просматривают каждый день,
при этом наклоняя флакон таким образом, чтобы жидкая часть среды смачивала поверхность
скошенного агара. Наличие роста микроорганизмов оценивают визуально по помутнению
среды во флаконе. В случае помутнения среды, а также при отсутствии видимых признаков
ростана3,5и8суткипроизводятвысевнапитательнуюсреду,длячегостерильнойпипеткой
переносят 0.1 мл крови из жидкой части среды во флаконе на поверхность чашек Петри с
готовой питательной средой и тщательно распределяют по поверхности агара стерильным
шпателем Дригальского.
Спинномозговая жидкость (ликвор). Проводят посев 2-4 капель гнойного ликвора
на чашку с питательной средой. Капли материала слегка растирают подогретым в пламени
спиртовки стерильным шпателем Дригальскогопоповерхности агара.
Пунктаты. С помощью стерильной пипетки производят посев взятого материала в
объеме 0,1 мл на чашку Петри с питательной средой, после чего тщательно распределяют
образец поповерхности среды стерильным шпателем Дригальского.
Отделяемое верхних дыхательных путей (мазок со слизистых передних отделов
полости носа, мазок со слизистой глотки (зева)); отделяемое наружного уха. Материал с
тампона, полученный при осмотре ЛОР-врачом, высевают на чашку Петри с питательной
средой штрихом по диагонали чашки, после чего расштриховывают петлей для получения
изолированныхколоний.
Отделяемое нижних дыхательных путей (мокрота, бронхоальвеолярный лаваж).
Мокроту выливают в стерильную чашку Петри. С помощью стерильных металлических
толстых игл с утолщенными концами выбирают 2-3 гнойных комочка мокроты. С целью
очистки образцов от сопутствующих обитателей верхних дыхательных путей и ротовой
полости комочки мокроты трехкратно отмывают в стерильном физиологическом растворе.
Затем производят посев биоматериала на чашку Петри с питательной средой, тщательно
распределяя материал поповерхности агара стерильным шпателем Дригальского.
При отсутствии в мокроте комочков гноя и слизи для посева производят
гомогенизацию мокроты: в неметаллический сосуд вносят равные объемы патологического
материала и муколитика (трипсина),тщательноперемешиваюти
Стр.11из 15
оставляют на 20-30 минут в термостате при температуре 37°С. Готовят десятикратные
разведения в 0,1% пептонной воде до степени разведения образца 10 (из расчета 1 мл
7
гомогенизированной мокроты и 9 мл 0,1% пептонной воды). Посевы осуществляют
стерильной пипеткой по 0,1 мл из нескольких разведений образца для получения
изолированных колоний микроорганизмов и подсчета количества колоний
полуколичественным методом. Образец, перенесенный на поверхность питательной среды
пипеткой,тщательнораспределяютпоповерхностипитательнойсредыстерильнымшпателем
Дригальского.
Бронхоальвеолярныйлаважзасеваюткакмокроту,нобезпредварительногоотмывания
гнойных комочков физиологическим раствором. При отсутствии комочков гноя и слизи
производят посев биоматериала на питательную среду стерильной пипеткой в количестве 0,1
мл, после чего тщательно распределяют материал по поверхности питательной среды
стерильным шпателем Дригальского.
Образцы из мочеполовой системы: моча, отделяемое влагалища, отделяемое
цервикального канала, отделяемое уретры, секрет простаты; отделяемое свищей.
Исследуемый материал, взятый тампоном, засевают этим тампоном на чашку Петри с
питательной средой штрихом по диагонали чашки, после чего расштриховывают петлей для
получения изолированныхколоний.
Жидкие пробы (гной, экссудат, мочу и т.д.) переносят стерильной пипеткой в
количестве 0,1 мл на чашку Петри с питательной средой. Материал тщательно растирают по
поверхности стерильным шпателем Дригальского.
2.Инкубируют чашки Петри в условиях, подходящих для предположительно
содержащихся в пробе микроорганизмов.
3.Просматриваютчашки на наличие типичныхколоний микроорганизмов.
4.Описывают морфологию каждой отдельной колонии, выполняют пересев
подозрительныхколоний для получения чистыхкультурмикроорганизмов.
5.Проводятподтверждающие реакции.
6.После получения чистых культур микроорганизмов и подтверждения их видовой
и/или родовой принадлежности ставяттестна определение антибиотикочувствительности.
Постановкатестанаопределение антибиотикочувствительности.
Готовятсуспензииисследуемыхштаммовмикроорганизмов,длячегочистыесуточные
культуры при помощи инокуляционной петли/иглы вносят в пробирки со стерильным
физиологическим раствором. Плотность полученных суспензий должна быть эквивалентна
стандартумутности 0,5поMcFarland,чтопримерносоставляет1,5х108 КОЕ/мл.
Спомощьюпипеткиишпателяпереносятсуспензииисследуемыхмикроорганизмовна
поверхность чашек Петри с агаром Мюллера-Хинтона.
Параллельно проводят посев контрольных штаммов микроорганизмов по аналогичной
схеме (готовят суспензии, пересевают их на поверхность чашек Петри с агаром Мюллера-
Хинтона).
Накладываютдиагностическиедискисантибиотиками(неболее6дисковначашку)на
поверхность чашек Петри с исследуемыми и контрольными штаммами.
Инкубируют чашки Петри при 35-39°C в течение 18-24 часов. Атмосфера инкубации
(аэробная или микроаэрофильная)зависитотвида исследуемогомикроорганизма.
*Не рекомендована инкубация в атмосфере с повышенным содержанием CO2 из-
за оказываемого влияния на pH среды. При необходимости культивирования
микроорганизмов в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа для оценки
оказываемого эффекта в контроль должны быть включены известные контрольные
анаэробные микроорганизмы.
Отмечают наличие/отсутствие зон задержки роста микроорганизмов и измеряют
диаметры зон, по которым делают выводы о чувствительности исследуемой культуры к
каждому виду антибиотика. При определении чувствительности контрольных штаммов к
антибиотическим препаратам диаметры зон подавления роста должны попадать в
определенные диапазоны,которые указаны в таблицахиспользуемыхстандартов.
Стр.12из 15
| Название культуры микроорганизма, описание роста культуры на готовой питательной среде | Название антибиотиче ского вещества; концентраци я,мкг | Зона подавле ния роста культур ы,мм | Стандартн ые значения подавления зоны роста культуры, мм | Фотографическое изображение |
| Результаты после аэробной инкубации при 35-37°C в течение 18-24часов Инокулят 10-100КОЕ |  |  |  |  |
| Escherichiacoli ATCC® 25922– хороший рост, колонии светло- соломенногоцвета | Амоксицилин / клавулановая кислота; 20/10 (1) | 18 | 18-241 |  |
|  | Цефотаксим; 30(2) | 34 | 29-351 |  |
|  | Ципрофлокса цин; 5(3) | 33 | 30-401 |  |
|  | Тобрамицин; 10(4) | 19 | 18-261 |  |
| Enterococcus faecalis ATCC® 29212–хороший рост,колонии светло- соломенногоцвета | Нитрофуранто ин; 100(1) | 25 | 20-272 |  |
|  | Ампициллин; 10(2) | 28 | 26-352 |  |
|  | Ципрофлокса цин; 5(3) | 24 | 20-272 |  |
11.РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Учет результатов проводится визуально по наличию/отсутствию роста колоний
микроорганизмовиихсвойствам(размер,цвет,формаколонии)всравнениисконтрольными
культурами (Приложение Б ГОСТ Р 53133.3-2008 «Технологии лабораторные клинические.
Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 3. Описание материалов
для контроля качества клинических лабораторных исследований»). В качестве контрольных
используют штаммы американской коллекции типовых культур (American Type Culture
Collection – ATCC), отличающиеся генетической стабильностью и хорошо изученными
фенотипическими характеристиками.
Контроль качества АгараМюллера-Хинтона Таблица 5
цин; 5(3)
1–согласномеждународному стандарту EUCAST/ CLSA
2–согласномеждународному стандарту DIN
Стр.13из 15
| Название культуры микроорганизма, описание роста культуры на готовой питательной среде | Название антибиотиче ского вещества; концентраци я,мкг | Зона подавлен ия роста культуры ,мм | Стандарт ные значения подавлени я зоны роста культуры, мм | Фотографическое изображение |
| Результаты после аэробной инкубации при 35-37°C в течение 18-24часов Инокулят 10-100КОЕ |  |  |  |  |
| Staphylococcus aureus ATCC® 25923– хороший рост, колонии кремового цвета | Оксациллин; 5(1) | 30 | 26-381 |  |
|  | Эритромици н; 15(2) | 29 | 26-351 |  |
|  | Ванкомицин ; 30(3) | 18 | 16-231 |  |
|  | Цефазолин; 30(4) | 33 | 30-411 |  |
| Enterococcus faecalis ATCC® 29212– хороший рост, колонии светло- соломенного цвета а | Нитрофуран тоин; 100(1) | 25 | 20-271 |  |
|  | Ампицилли н; 10(2) | 28 | 26-351 |  |
|  | Ципрофлокс ацин; 5(3) | 24 | 20-271 |  |
Контроль качества АгараМюллера-Хинтонас бараньей кровью Таблица 6
1–согласномеждународному стандарту DIN
Учет результатов реакции
В соответствии с полученными результатами,заполните отчетные формы и протоколы.
12.УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
Хранить вдали от источника света при температуре 2-8°C до даты, указанной на
упаковке,в перевернутом виде (крышкой вниз).
Стр.14из 15
Транспортировка всеми видами закрытого транспорта при температуре хранения. Не
допускать замораживания.Не использовать поистечении срока годности (60дней).
При появлении свойств, отличных от указанных в сопроводительной документации
(например,изменение цвета среды),реагентследуетзабраковать.
13.КОМПЛЕКТ ПОСТАВКИ
Комплектность медицинского изделия определяется условиями заказа и требованиями
ГОСТ Р 51088-97 «Наборы реагентов для клинической лабораторной диагностики. Общие
технические условия».
В комплект поставки входят: 1 коробка, включающая от 1 до 20 упаковок агара
Мюллера-Хинтона; инструкция поприменению; паспорт.
14.ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ
При соблюдении рекомендованного способа транспортировки и хранения агар
Мюллера-Хинтона обеспечивает требуемые показатели качества и эксплуатационные
характеристики в течение установленногосрока годности (60дней).
После вскрытия упаковок рекомендуется использовать чашки Петри с агаром
Мюллера-Хинтона в течение 1недели.
15.ПРАВИЛА УТИЛИЗАЦИИ
Утилизировать неиспользованные и использованные реагенты необходимо в
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические
требования к обращению с медицинскими отходами» и МУ 287-113 от 30 декабря 1998 г. по
дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского
назначения.
Обезвреживание реагентов следует проводить методом паровой стерилизации при
температуре 132°С в течение 20 минут или сжигания. Для проведения паровой стерилизации
медицинские изделия должны быть упакованы в стерилизационные упаковочные материалы
или в соответствующий контейнер.
Все контаминированные рабочие поверхности необходимо обработать подходящим
дезинфицирующим раствором немедленнопосле загрязнения.
Повопросам качества продукции
АгарМюллера-Хинтона и АгарМюллера-Хинтонас бараньейкровью
обращаться:
ООО «Средофф»
188510,Российская Федерация,Ленинградская область,муниципальный район
Ломоносовский,Виллозское городское поселение,территория Северная часть промзоны
Горелово,3-я улица,дом 4,помещение 3Н.
Телефон/ Факс: (812)305-06-06
Электронная почта: info@sredoff.ru
ООО «Средофф»
Исполнительный директор ______________________Акберов Р.Т.
Информация обизмененияхв инструкции поприменению Изделия
Обновлен адрес обращения повопросам качества Изделия
Стр.15из 15