Набор реагентов для определения активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови человека кинетическим методом (АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА ФС) по ТУ 9398-018-48813770-2009 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
"УТВЕРЖДАЮ"
Руководитель Департамента
государственного
контроля качества, эффективности,
безопасности лекарственных средств
и медицинской техники М3 РФ
по применению набора реагентов для определения активности
аланинаминотрансферазы в сыворотке крови человека кинетическим методом
Аланинаминотрансфераза ФС
Рекомендована к утверждению экспертной комиссией по лабораторным реагентам
Комитета по новой медицинской технике Минздрава РФ
ф Протокол от А ^ _____ 1999 г.
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения активности
аланинаминотрансферазы в сыворотке крови человека в клинико-диагностических и
биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Набор выпускается в двух видах фасовки и рассчитан, соответственно, на
проведение 125 или 500 определений при расходе 1,0 мл рабочего реагента на один
анализ.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Аланинаминотрансфераза катализирует в присутствии а - кетоглутарата
переаминирование L - аланина с образованием пирувата. В присутствии
^ лактатдегидрогеназы происходит окисление НАДН. Скорость окисления НАДН прямо
W пропорциональна активности аланинаминотрансферазы и измеряется
фотометрически при длине волны 340 нм.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1: буферно - ферментный раствор, содержащий трис - 100 ммоль/л,
L-аланин - 500 ммоль/л, лактатдегидрогеназу - 1200Е/Л, азид натрия - 0,095% -
5 флаконов ( по 20 мл ) или 5 флаконов { по 80 мл ).
Реагент 2: раствор кофактора и субстрата, содержащий НАДН - 0,18 ммоль/л.
Инструкция составлена: директором по науке и технике ЗАО “Диакон”, к.б.н.
Шарышевым А. А., зам.директора по науке Пущинского медицинского центра МОРАН,
д.м.н. Косяковой Н.И..
а - кетоглутарат - 15 ммоль/л, азид натрия - 0,095% - 1 флакон ( 25 мл ) или
1 флакон ( 100 мл ).
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Набор обеспечивает линейную область определения активности
аланинаминотрансферазы в диапозоне от 20 Е/л до 260 Е/л, отклонение от
линейности не превышает 5%. Чувствительность - не более 15 Е/л, коэффициент
вариации результатов определений - не более 5%.
Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным
контрольным сывороткам, аттестованным данным методом.
Нормальные величины активности аланинаминотрансферазы составляют в
сыворотке крови от 5 до 40 Е/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных ;
величин для обследуемого контингента людей. . |
ОБРАЗЦЫ
I
!
Негемолизированная сыворотка крови. Сыворотку крови следует отделить от
форменных элементов крови не позднее, чем через 1 час после забора крови.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ '
В реагентах 1 и 2 содержится токсичный компонент - азид натрия. При работе с
ними следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые;
при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством
проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать |
рвоту. ;
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или
пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека следует рассматривать как |
потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать
ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ:
-- спектрофотометр, программируемый фотометр или биохимический анализатор,
длина волны 340 нм, термостатируемая кювета с длиной оптического пути 10 мм;
— термостат, обеспечивающий температуру + 37 ° С;
— секундомер;
— цилиндры стеклянные мерные вместимостью 50 и 100 мл;
-- пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 100 и 1000 мкл;
— колба коническая вместимостью 200 мл;
— 0,9% раствор NaCI ( физиологический раствор ).
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Приготовление рабочего реагента: смешать в колбе конической вместимостью
200 мл 4 объема реагента 1 и один объем реагента 2. Тщательно закрыть флаконы с
реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования.
Рабочий реагент можно хранить при температуре +2 - 8° С не более месяца или
при комнатной температуре ( +18 - 25° С ) не более 5 суток.
3 .
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Перед проведением анализа рабочий реагент следует нагреть до температуры
+37 ± 0,5° С в течение 5 мин.
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице.
______________ Таблица.
Отмерить, мкл Опытная проба
Сыворотка крови 100
Рабочий реагент 1000
Примечание. При использовании автоматических или полуавтоматических
биохимических анализаторов количество реагентов и анализируемых образцов. в
зависимости от объема используемой кюветы может быть пропорционально изменено
( соотношение сыворотки крови к рабочему реагенту составляет 1:10 ).
Пробу перемешать и инкубировать в кювете с длиной оптического пути 10 мм
при температуре +37° С в течение 1 мин. Измерить оптическую плотность пробы ( E i)
при температуре +37° С при длине волны 340 нм против воздуха, включить секундомер
и через 1 минуту ( точно ) аналогично измерить оптическую плотность пробы ( Ег ).
Рассчитать ЛЕ/мин: ЛЕ/мин = Ei - Е2.
РАСЧЕТЫ
Активность аланинаминотрансферазы в сыворотке крови определить по
формуле:
А = АЕ/мин 1745,
X
где: А — активность аланинаминотрансферазы, Е/л;
АЕ/мин — изменение оптической плотности пробы за одну минуту, ед. опт. плотн.;
1745 — фактор пересчета для выражения активности аланинаминотрансферазы
в Е/л (указывается в паспорте на набор ).
Примечание. 1 Е/л = 16,67 нмоль/л/( с х л ).
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Хранение наборов должно производиться в темном месте при температуре
+2 - 8° С в упаковке предприятия - изготовителя в течение всего срока годности.
Допускается хранение наборов при температуре до +25° С не более 5 суток.
Замораживание компонентов набора не допускается.
Срок годности наборов — 12 месяцев.
Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов могут храниться при температуре
+2 - 8° С в темном месте в течение всего срока годности наборов при условии
достаточной герметичности флаконов.
Рабочий реагент можно хранить при температуре +2 - 8° С не более месяца или
при комнатной температуре ( +18 - 25° С ) не более 5 суток.
При активности аланинаминотрансферазы выше 260 Е/л пробу следует
развести физиологическим раствором в 5 раз и полученный результат умножить на 5.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение
инструкции по применению набора.
По вопросам, касающимся качества набора аланинаминотрансфераза ФС,
следует обращаться в ЗАО “Диакон” по адресу:
142292, г. Пущине, Московской обл., пр. Науки, 5; тел.факс ( 0967 ) 79-05-54, 79-05-28
и в ГосНИИ по стандартизации и контролю лекарственных средств М3 России по адресу:
117247, г. Москва, Научный проезд, 14, тел. ( 095 ) 120-60-96, 120-60-95.
Директор по науке и технике
ЗАО “Диакон”
кандидат биол. наук А.А. Шарышев.
Зам.директора по науке
Пущинского медицинского центра МОРАН
доктор мед. наук Н.И. Косякова.