Материалы расходные к анализатору бактериологическому полуавтоматическому «МикроТакс» (см. Приложение на 2 листах) — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
«УТВЕРЖДАЮ»
Исполнительн^Жректо^СЙрО «СИ-ЛАБ»
_______ , лТ^^^Шалинин А.Л/
Ш'- i n '
\ч>оч^ 5 ^;>>^ентября 2011 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению Материалов расходных к анализатору микробиологическому
полуавтоматическому «МикроТакс»
Зав. кафедрой клинической лабораторной
диагностики ГБОУ ДПО РМАПО Г^^нздоавсоцразвития России,
Д.М.Н., профессор^
«<^ »
/
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Расходные материалы планшеты 96 луночные и реагенты используются для идентификации
микроорганизмов и определения их чувствительности к антибиотикам.
Данная система может применяться для микробиологических исследований в клинической
диагностике, ветеринарии, биотехнологии, для санитарных исследований, при анализе
продуктов питания и воды, для контроля качества продукции, в фармацевтической
промышленности, для мониторинга окружающей среды, а также в научных исследованиях.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
Принцип использования планшет и реагентов основан на фотометрический регистрации
результатов биохимических реакций, которые происходят на данных планшетах вследствие
взаимодействия вносимой бактериальной суспензии с уже имеющимися сухими реагентами
или антибиотиками на планшетах и последующей компьютерной обработкой данных.
2.2. Состав набора
1. Планшеты, 96 луночные с уже нанесенными на них сухими реагентами или антибиотиками.
2. Реагенты для планшет, 96 луночных.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Анализ проводится с использованием микропланшетного фотометра Ридера МТ-1:
-спектральный диапазон-от 400 до 750нм,
- 7 фильтров - 405, 414, 450, 492, 540, 620 и 690 нм,
-режимы измерений - монохроматический, бихроматический, мультихроматический;
-диапазон измерений оптической плотности - от О до 3,5;
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1 При работе с планшетами и реагентами следует надевать одноразовые резиновые или
пластиковые перчатки, так как образцы патогенных микроорганизмов следует рассматривать
как потенциально опасные возбудители инфекций.
4.2 Отработанные материалы утилизировать в соответствии с установленными правилами и
требованиями лаборатории.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Для проведения необходимо наличие:
- МТ-1 Ридер- 8-канальный фотометр для считывания планшет;
- МТ-5 Инкубатор;
- Компьютерный блок, включая: компьютер, принтер, LCD монитор;
- 8-канальная автоматическая электронная пипетка МТ-10, включая зарядное устройство;
- Штативы (10 шт/уп ) с наконечниками (960 шт/уп);
- Кюветы, 2/4-камерные, 50 шт/уп;
- Планшеты для идентификации и определения чувствительности бактерий к антибиотикам;
- Реактивы для вышеперечисленных планшет;
- Руководство пользователя.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Для анализа используются суточные культуры микроорганизмов.
6.1 Приготовьте бактериальную суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов,
выращенной строго на кровяном агаре без добавок.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ РЕАКЦИИ
7.1. МикроТакс-IDS
Планшет МикроТакс-IDS используется для быстрой (в течение 3-5 часов) идентификации
113 наиболее клинически значимых аэробных Грам-отрицательных, Оксидазо-отрицательных
бактерий.
4 определения на планшете
23 биохимических реакций + 1 контроль
Список определяемых микроорганизмов на планшете МикроТакс-Ш8
1. Acinetobacter Iwoffii 31. Enterobacter gergoviae
2. Acinetobacter species I 32. Enterobacter sakazakii
3. Acinetobacter species II 33. Enterococcus avium
4. Acinetobacter species III 34. Enterococcus casseliflavus
5. Acinetobacter species V 35. Enterococcus durans
6. Aeromonas caviae 36. Enterococcus faecalis
7. Aeromonas hydrophila 37. Enterococcus faecium 1
8. Aeromonas sobria 38. Enterococcus faecium 2
9. Aeromonas veronii 39. Enterococcus flavescens
10. Achromobacter denitrificans 40. Enterococcus gallinarum
11. Alcaligenes faecalis sub. faecalis 41. Enterococcus hirae
12. Bordeteila bronchiseptica 42. Enterococcus malodoratus
13. Brevundimonas diminuta 43. Enterococcus mundtii
14. Brevundimonas vesicularis 44. Escherichia coli
15. Burkholderia cepacia 45. Escherichia coli LDC-/ODC-
16. Cedecea davisae 46. Escherichia coli PYR+
17. Cedecea lapagei 47. Escherichia vulneris
18. Chryseobacterium indologenes 48. Ewingella americana
19. Chryseobacterium meningosepticum 49. Hafnia alvei
20. Citrobacter amalonaticus 50. Klebsiella oxitoca
51. Klebsiella pneumoniae sub.
21. Citrobacter freundii
pneumoniae
22. Citrobacter koseri 52. Kluyvera ascorbata
23. Citrobacter species 1 53. Kluyvera cryocrescens
24. Citrobacter species 2 54. Leclercia adecarboxylata
25. Comamonas testosteroni 55. Moellera wisconsensis
J?
Схема работы с планшетами МикроТакс-IDS
Только для in vitro диагностики 4 теста/планшет
В программе MCN введите тип теста «I»
Приготовление
проб
Грам-отрицательные, Грам-
положительные бактерии на
кровяном агаре без добавок
5 мл физраствора с культурой
Приготовление
культуры для засева плотностью 2 по
засева МакФарланду
Перенесите суспензию в
Засев
4-камерную кювету
Раскапайте по 100 мкл
суспензии
в каждую лунку планшета
Добавьте по 2 капли
парафинового масла (серые
лунки на Схеме справа)
О
Парафиновое масло
Накрытие
Накройте планшеты
пленкой
специальной
и инкубация
перфорированной пленкой
Инкубируйте 5-6 часов при 35-
37°С
Считывание Добавьте по 2 капли пептидазного
и индольного реагента
(соответственно, розовые и синие
лунки на Схеме справа)
Пептидазный реагент
Проведите считывание планшет Индольный реагент
спустя 5 минут инкубации
J -
МикроТ акс-IDS
Подготовка инокулята;
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «I» .
Приготовление бактериальной суспензии:
Приготовьте бактериальную суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов,
выращенной строго на кровяном агаре без добавок.*
Приготовить суспензию в 5 мл физраствора согласно стандарту мутности McFarland
2.0.
Перенесите полученную суспензию в 4-камерную кювету.
Инокулирование планшета:
Внесите по 100 мкл бактериальной суспензии в следующие лунки планщета:
Ф
А1 : В12 определение 1
С1 : D12 определение 2
Е1 : F12 определение 3
G1 : Н12 определение 4
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 i: Добавьте по две капли
о
парафинового масла в
следующие лунки:
А 4+5+6, В 4+5,
С 4+5+6, D 4+5,
Е 4+5+6, F 4+5,
Ф
G 4+5+6, И 4+5
7.2 МикроТакс-IDS
Накройте планщет IDS специальной перфорированной пленкой, которая прилагается к
набору. Использование перфорированной пленки гарантирует проникновение кислорода,
необходимого для реакций. В то же время газовый обмен между ячейками планшета,
нарушающий протекание реакций, становится невозможным.
Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик
исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам
Инкубация:
Инкубируйте 5-6 часов при 37°С. Снимите покрывающую планшет пленку и добавить
по две капли реактивов в следующие лунки:
Пептидазный реагент в лунках:
А 1+2+3, В 2, С 1+2+3, D 2, Е 1+2+3, F 2,
G 1+2+3, Н 2
Индольный реагент в лунках: В 1,
D 1,F 1,Н 1
Подождите 5 минут для развития
окраски.
Считывание:
После 5-30 минут инкубирования (не более!) тщательно протрите дно лунок планшета
фильтровальной бумагой и проведите считывание на МикроТакс ридере.
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания. Планшеты должны быть считаны в
тот же день, на следующий день считывание невозможно.
Вычисление результатов:
Войдите в программу MCN в колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Вычисление». Нажмите «Старт» для начала вычисления. Система МикроТакс выдаст
полученные в ходе исследования результаты.
Контроль реакций:
Постановка контроля реакций исключает ошибочную инокуляцию.
Имеется 1 контроль.
Схема планшета
1 2 3 4 5 6 8 9 10 11 12
P- a-
А PROL PYR АРРА URE ODC DECO PNPG PGUR GLUF ADOF
GLU GAL
В IND HPR MAL LDC ADH a-GLU CHIT PNPX DIP L-ALA MANF TREF
P- a-
С PROL PYR АРРА URE ODC DECO PNPG PGUR GLUF ADOF
GLU GAL
D IND HPR MAL LDC ADH a-GLU CHIT PNPX DIP L-ALA MANF TREF
Р- a-
Е PROL PYR АРРА URE ODC DECO PNPG PGUR GLUF ADOF
GLU GAL
F IND HPR MAL LDC ADH a-GLU CHIT PNPX DIP L-ALA MANF TREF
P- a-
G PROL PYR АРРА URE ODC DECO PNPG PGUR GLUF ADOF
GLU GAL
Н IND HPR MAL LDC ADH a-GLU CHIT PNPX DIP L-ALA MANF TREF
Таблица визуального контроля
Реакция Реакция
PROL Пролинамидаза 3-GLU P- Глюкозидаза
IND Индол CHIT Хитиназа
р-Нитрофенил-р-
PYR Пираза PNPG
Г алактозидаза
р-Нитрофенил-р-
HPR Г идроксипролинамидаза PNPX
Ксилозидаза
APPA Трипептидаза a-GAL а-Г алактозидаза
MAL Малонат DIP Фосфодиэстераза
р-Нитрофенил-Р-
URE Уреаза PGUR
Г люкуронидаза
LDC Лизиндекарбоксилаза L-ALA L-Аланинаминопептилаза
ADH Аргининдегидролаза GLUF Г люкоза
ODC Орнитиндекарбоксилаза MANF Манноза
DECO Контроль декарбоксилазы ADOF Адонит
a-GLU а-Г люкозидаза TREF Трегалоза
МикроТ акс-IDS
Ячейка Положительная реакция Отрицательная реакция
PROL A1,C1,E1,G1 красный, фиолетовый розовый, оранжевый, желтый
IND B1,D1,F1,H1 зеленый, синий розовый
PYR А2, С2, Е2, G2 красный, фиолетовый розовый, оранжевый, желтый
Г-отрицательные бактерии -
красный, фиолетовый, розовый, оранжевый, желтый
HPR В2, D2, F2, Н2
Г-положительные бактерии -
оранжевый, розовый желтый, светло-оранжевй
АРРА АЗ, СЗ, ЕЗ, G3 красный, фиолетовый розовый, оранжевый, желтый
желто-зеленый, светло-
MAL B3,D3,F3,H3 темно-зеленый, синий
желтый
URE А4, С4, Е4, G4 фиолетовый, синий желтый, желто-коричневый
LDC В4, D4, F4, Н4 фиолетовый, синий желтый, желто-коричневый
ADH В5, D5, F5, Н5 фиолетовый, синий желтый, желто-коричневый
ODC А5, С5, Е5, G5 фиолетовый, синий желтый, желто-коричневый
Негативный контроль для вы шеперечисленных тестов,
Если цвет - желтый, то кор ичневый принимают за
DECO А6, С6, Е6, G6 положительный результат. Если i 1вет - коричневый или светло-
фиолетовый, то синий и фи олетовый принимают за
положительны!й результат.
a-GLU B6,D6, F6, Н6 желтый бесцветный
P-GLU А7,С7, Е7, G7 желтый бесцветный
CHIT В7, D7, F7, Н7 желтый бесцветный
PNPG A8, C8, E8, G8 желтый бесцветный
PNPX B8,D8, F8, H8 желтый бесцветный
a-GAL A9, C9, E9, G9 желтый бесцветный
DIP 39, D9, F9, H9 желтый бесцветный
PGUR A10,C10,E10,G10 желтый бесцветный
L-ALA B10,D10,F10,H10 темно-желтый бесцветный, светло-желтый
GLUF A ll,C ll,E ll,G il желтый сине-зеленый
MANF B11,D11,F11,H11 желтый сине-зеленый
ADOF A12,C12,E12,G12 желтый сине-зеленый
TREF B12,D12,F12,H12 желтый сине-зеленый
Комментарии
Для получения хороших результатов следует:
• Использовать только рекомендованные настоящей методикой расходные
материалы;
• Использовать для анализа бактериальные культуры не старше 24 часов,
выращенные на кровяном агаре без добавок;
• Плотность бактериальной суспензии должна быть строго 2.0 по МакФарланду;
• Покрывайте планшеты только прилагающейся к ним пленкой;
• Инкубируйте строго 5-6 часов при 37°С;
• Высейте на кровяном агаре без добавок бактериальную суспензию для контроля
чистоты культуры.
Схема работы с планшетами МикроТакс-Е
Только для in vitro диагностики
теста/планшет
Приготовление В программе IVICN введите тип теста«Е»
проб
Грам-отрицательные, оксидазо-
отрицательные бактерии на кровяном
агаре или агаре 1\/1акконки
Приготовление 5 мл физраствора с культурой засева
культуры для плотностью 0.5 по МакФарланду
засева
Перенесите суспензию в
Засев 4-камерную кювету
Раскапайте по 100 мкл
суспензии
Добавьте по 2 капли
парафинового масла (серые
лунки на Cxiеме справа)
о
Парафиновое масло
Накройте планшеты
Накрытие
специсальной
пленкой и
инкубация
Инкубируйте 18-24 часов при
35-37°С
Добавьте по 2 капли ТДА и
индольного реагента
(соответственно, желтые и
Считывание
синие лунки на Схеме справа)
^ ТДА реагент
А Индольный реагент
Проведите считывание планшет
спустя 3 минуты инкубации
МикроТакс-Е
Подготовка инокулята:
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «Е» .
Бактериальная суспензия:
Приготовьте бактериальную суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов,
выращенной строго на кровяном агаре без добавок.*
Приготовить суспензию в 5 мл NaCl согласно стандарту мутности McFarland 0.5.
Перенесите полученную суспензию в 4-камерную кювету.
Инокулирование планшета:
Внесите по 100 мкл бактериальной суспензии в следующие лунки планшета:
А1 : В12 определение 1
С1 : D12 определение 2
Е1 : F12 определение 3
G1 : Н12 определение 4
О
Добавьте по две капли парафинового масла в следующие лунки:
В 1+2, D 1+2,
F 1 +2,Н 1+2
МикроТакс-Е
Накройте планшет Е специальной перфорированной пленкой, которая прилагается к
набору. Использование перфорированной пленки гарантирует проникновение кислорода,
необходимого для реакций. В то же время газовый обмен между ячейками планшета,
нарушающий протекание реакций, становится невозможным.
Инкубация:
Инкубируйте 18-24 часов при 37°С. По окончании инкубации снимите покрывающую
' Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик
исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам
планшет пленку и добавьте по две капли реактивов в следующие лунки
(23 ТДА в лунках: А1, С1, Е1, G1
Индольный реагент в лунках:
АЗ, СЗ, ЕЗ, G3
Подождите 5 минут для развития окраски.
Считывание:
Подождите 5-30 минут (не более!) для развития окраски, после чего тщательно
протрите дно лунок планщета фильтровальной бумагой и проведите считывание на
МикроТакс ридере. Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в
раздел «Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания. Планщеты должны быть
считаны в тот же день, на следующий день считывание невозможно.
Вычисление результатов:
Войдите в программу MCN в колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Вычисление». Нажмите «Старт» для начала вычисления. Система МикроТакс выдаст
полученные в ходе исследования результаты.
Схема планшета
Ф
1 2 3 4 5 ■. 6 7 8 9 10 11 12
А, TDA ESC IND LDC ADH CIT VP RHAF ADOF XYLF ONPG PGUR
H2S/ DECO/
В H2S URE ODC MAL FCO SUCF INOF SORF ONPX ONC
ESCO GLUF
С TDA ESC IND LDC ADH CIT VP RHAF ADOF XYLF ONPG PGUR
H2S/ DECO/
D H2S URE ODC MAL FCO SUCF INOF SORF ONPX ONC
ESCO GLUF
: Е TDA ESC IND LDC ADH CIT VP RHAF ADOF XYLF ONPG PGUR
H2S/ DECO/
F H2S URE ODC MAL FCO SUCF INOF SORF ONPX ONC
ESCO GLUF
G TDA ESC IND LDC ADH CIT VP RHAF ADOF XYLF ONPG PGUR
H2S/ DECO/
Н H2S URE ODC MAL FCO SUCF INOF SORF ONPX ONC
ESCO GLUF
МикроТакс-Е
Таблица визуального контроля
Реакция Реакция
TDA Триптофан дезаминаза VP Voges - Proskauer реакция
HzS Формирование H2S FCO Ферментационный контроль
ESC Гидролиз Эскулина RHAF Ферментация рамнозы
H2S/ESCO H2S / Контроль Эскулина SUCF Ферментация сахарозы
IND Формирование Индола ADOF Ферментация адонитола
URE Уреаза INOF Ферментация инозитола
LDC Лизин Декарбоксилаза XYLF Ферментация ксилозы
ODC Орнитин Декарбоксилаза SORF Ферментация сорбитола
ADH Аргинин Дигидролаза ONPG |3-Г алактозидаза
Контроль декарбоксилазы /
DECO/GLUF ONPX Р-Ксилозидаза
Ферментация глюкозы
CIT Цитрат PGUR Р-Г люкуронидаза
Контроль за хромогенными
MAL Малонат ONC
Ячейка Положительная реакция Отрицательная реакция
Ф
TDA A1,C1,E1,G1 красно-коричневый желтый, светло коричневый
H2S B1,D1,F1,H1 черный осадок нет осадка
ESC А2, С2, Е2, G2 темно коричнево-черный бежевый
АРРА АЗ, СЗ, ЕЗ, G3 красный, фиолетовый розовый, оранжевый, желтый
IND B3,D3,F3,H3 темно-зеленый, синий желто-зеленый, светло-желтый
URE А4, С4, Е4, 04
LDC В4, D4, F4, Н4
зеленовато-голубой желто-зеленый
ADH 85, D5, F5, Н5
ODC А5, С5, Е5, 05
DECO/ А6, С6, Е6, 06 негативный контроль
GLUF В5, D5, F5, Н5 желто-зеленый зеленовато-голубой
CIT А6, С6, Е6, 06
MAL B6,D6, F6, Н6 зеленовато-голубой желто-зеленый
VP А7, С7, Е7, 07
FCO В7, D7, F6, Н7 негативный контроль
RHAF А8, С8, Е8, 08
SUCF B8,D8, F8, Н8
ADOF А9, С9, Е9, 09
INOF В9, D9, F9, Н9
желто-зеленый зеленовато-голубой
А10,С10,Е10,
XYLF
010
B10,D10,F10,
SORF
НЮ
А11,С11,Е11,
ONPG
011
B11,D11,F11,
ONPX желтый бесцветный
НИ
А12,С12,Е12,
PGUR
012
B12,D12,F12,
ONC негативный контроль
Н12
/■(г
Контроль реакций:
Постановка контроля реакций исключает неспецифические факторы такие, как
недостаточное время инкубации, неспецифическое защелачивание. Для различных тестов
используются различные контролирующие реакции.
НгЗ/ЕЭС-контроль: контроль должен быть бесцветным или светло-серым.
DEC-контроль: контроль уреазы, LDC, ODC, ADH и VP. При положительной
реакции цвет индикатора синий (щелочная среда). При отрицательной реакции цвет
индикатора желтый (кислая среда). DEC-контроль - это также реакция на глюкозу,
поскольку все энтеробактерии являются глюкозо-позитивными.
S-контроль: контроль утилизации различных Сахаров. Отрицательный контроль
должен быть голубым (щелочная среда).
CS-контроль: контроль хромогенных субстратов (ONPG, ONPX, p-GUR). Содержит
основную среду и должен быть бесцветным. CS-контроль является также контролем роста.
Комментарии
Для получения хороших результатов следует:
• Использовать только рекомендованные настоящей методикой расходные
материалы;
• Использовать для анализа бактериальные культуры не старше 24 часов,
выращенные на кровяном агаре без добавок;
• Плотность бактериальной суспензии должна быть строго 0.5 по МакФарланду;
• Покрывайте планшеты только прилагающейся к ним пленкой;
• Инкубируйте строго 18-24 часов при 37°С;
• Высейте на кровяном агаре без добавок бактериальную суспензию для контроля
ф
чистоты культуры.
МикроТакс -RPO
Подготовка инокулята:
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод
и правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «Р» и введите
код таксона ("COR", "STR" или "STA"). Для этого необходимо:
Предварительное тестирование бактериальных колоний перед идентификацией на RPO-
планшетах системы МикроТакс:
Провести микроскопирование:
• Если Г+-палочки (короткие палочки) иногда образуют длинные цепи, то при
проведении идентификации внесите "COR" (в разделе SUSPICION).
Listeria - каталазо-положительные микроорганизмы, восстанавливают нитрат
(нитратный тест).
• Если Г+- кокки образуют цепочки или диплококки, тогда при проведении
идентификации внесите "STR" (в разделе SUSPICION).
• При образовании бесформенных скоплений кокков или тетрад - выбирайте "STA"
(в разделе SUSPICION).
• Если микроскопирование не дает возможности определить тип кокковых
образований (цепочки или скопления), то необходимо провести каталазный тест. В
случае положительного результата каталазного теста, введите "STA", при
отрицательном результате - "STR" (в разделе SUSPICION).
Примечание:
Проведение предварительных исследований на селективных питательных средах
позволяет предположить семейство (род) микроорганизма.
В клинической диагностике при проведении идентификации необходимо учитывать
источник исследуемого образца и предварительный диагноз.
В пищевой микробиологии идентификация проводится только после предварительного
селективного предобогащения.
Таким образом, еще до начала проведения идентификации у Вас уже будет
достаточно информации об исследуемом объекте, чтобы выбрать тип планшета и группу
COR, STA или STR в RPO-планшете.
Бактериальная суспензия:
• Приготовьте бактериальную суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов.
/4^
выращенной строго на кровяном агаре без добавок.* Медленнорастущие бактерии,
такие как Streptococci, Gardnerella и некоторые Corinebacteria необходимо
выращивать в течение 48 часов в атмосфере 5% СО2.
• Приготовить суспензию в 6 мл NaCl согласно стандарту мутности McFarland 2.0.
• Перенесите полученную суспензию в 2-камерную кювету.
Инокулирование планшета:
Внесите по 100 мкл бактериальной суспензии в следующие лунки планшета:
А1 - D12 определение 1
Е1-Н12 определение 2
Добавьте по две капли парафинового
масла в следующие лунки:
A12-D12 определение 1
Е12-Н12 определение 2
Накройте планшет RPO специальной перфорированной пленкой, которая прилагается к
набору. Использование перфорированной пленки гарантирует проникновение кислорода,
необходимого для реакций. В то же время газовый обмен между ячейками планшета,
нарушающий протекание реакций, становится невозможным.
Инкубация:
Инкубируйте 18-24 часов при 37°С. По окончании инкубации снимите покрывающую
планшет пленку и добавьте по две капли
пептидазного реагента в следующие
лунки:
Пептидазный реагент-
A1:D4 определение 1
Е1 :Н4 определение 2
Если проводить культивирование на иной среде, то
это приведет к изменению биохимических характеристик исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к
ложным результатам
Считывание:
Подождите 5 минут для полного развития окраски (не более 30 мин.), после чего
тщательно протрите дно лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание на
МикроТакс ридере. Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в
раздел «Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания.
Вычисление результатов:
Войдите в программу MCN в колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Вычисление». Нажмите «Старт» для начала вычисления. Система МикроТакс выдаст
полученные в ходе исследования результаты.
Схема планшета
1 2 ^ 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
L- a- a- P-
А BZAR D-ALA HPR ONC TREF MALF RIBF URE
ALA GLU CHIT FUC
P-
В АРРА РЕР GLYP GLYT CHIT DIP FCO MATF SUCF XYL ODC
GLU
a-
С LEU GLY LYS ARG PGUR PNPX GLUF SORF INUF TAGF ADH
GAL
a-
D PYR PROL TYR PECO. PNPG LIPC MANF RAFF LACF TURF DECO
MAN
L- a- a- P-
Е BZAR D-ALA HPR ONC TREF MALF RIBF URE
ALA GLU CHIT FUC
P-
F АРРА ASP GLYP GLYT CHIT DIP FCO MATF SUCF XYLF ODC
GLU
a-
G LEU GLY LYS ARG PGUR PNPX GLUF SORF INUF TAGF ADH
GAL
a-
Н PYR PROL TYR PECO PNPG LIPC MANF RAFF LACF TURF DECO
MAN
Таблица визуального контроля
Реакция Реакция
BZAR Трипсиноподобный фермент P-FUC Р-Фукозидаза
APPA Трипептидаза DIP Дифосфоэстераза
LEU Лейцинамидаза PNPX р-Нитрофенил- Р-Ксилозидаза
PYR Пираза LIPC Фосфолипаза
D-ALA D-Аланинаминопептидаза ONC Контроль хромогенных субстратов
ASP Аспартиламинопептидаза FCO Контроль ферментации
GLY Г лицинаминопептидаза GLUF Г люкоза
PRO Пролинаминопептидаза MANF Манноза
L-ALA L-Аланинаминопептидаза TREF Трегалоза
GLYP Г лицилпролинаминопептидаза MATF Манит
LYS Лизинаминопептидаза SORF Сорбит
TYR Т ирозинаминопептидаза RAFF Раффиноза
HPR Г идроксипролинаминопептидаза MALF Мальтоза
GLYT Г лицилтриптофанаминопептидаза SUCF Сахароза
ARG Аргининаминопептидаза INUF Инулин
PECO Контроль пептидазы LACF Лактоза
a-GLU а-Г люкозидаза RIBF Рибоза
P-GAL р-Г люкозидаза XYLF Ксилоза
a-GAL а-Г алактозидаза TAGF Тагатоза
PNPG р-Нитрофенил- Р-Г алактозидаза TURF Тураноза
a-CHIT a-N -Ацетил глюкозоамидаза URE Уреаза
CHIT Хитиназа ODC Орнитиндекарбоксилаза
PGUR р-Нитрофенил- Р-Глюкуронидаза ADH Аргининдегидролаза
a-MAN а-Маннозидаза DECO Контоль декарбоксилазы
МикроТ акс -RPO
Ячейка Положительная реакция Ячейки Отрицательная реакция
А1-А4 С1-С4
В1-В4 красный, фиолетовый D1-D4
желтый, светло-розовый
Е1-Е4 (лиловый) G1-G4
F1-F4 Н1-Н4
А5-А7
Е5-Е7 С5-С7
А9-А11 D5-D7 Бесцветный или бледно-
желтый
В9-В11 G5-G7 желтый
Е9-Е11 Н5-Н7
F9-F11
С8-С11
D8-D11 Красный или светло-
G8-G11 оранжевый
H8-G11
Контроль для URE, ODC, ADH если DEC-contr.:
1 )если цвет DEC-contr и URE, ODC, ADH реакций одинаковый, то (-)
DEC-contr
2)если цвет DEC-contr желтый, то (+)реакция для URE, ODC, ADH-
коричневый;__________________________
3) 2)если цвет DEC-contr коричн..светло-желтый. то (+)реакция для
URE, ODC, ADH-фиoлeтoвый,cиний
Вычисление результатов:
URE- DEC-contr>0,25, ODC-contr>0,20, ADH-DEC-contr>0,20
Контроль реакций:
Постановка контрольных реакций исключает ошибки при инокулировании,
неспецифическое защелачивание. Имеется 4 контроля.
Peptidase-контроль: после добавления пептидазного реагента контроль должен быть
светло-желтым.
CS-контроль: контроль хромогенных субстратов. Должен быть бесцветным.
S-контроль: контроль ферментации Сахаров. При положительной реакции цвет
индикатора желтый. При отрицательной реакции цвет индикатора красный (среда щелочная).
DEC-контроль: контроль Urease, ODC и ADH. При положительной реакции цвет
индикатора фиолетовый (среда щелочная). При отрицательной реакции цвет индикатора
JJ
желтый (среда кислая).
Комментарии
Для получения хороших результатов следует:
• Использовать только рекомендованные настоящей методикой расходные
материалы;
• Использовать для анализа бактериальные культуры не старше 24 часов,
выращенные на кровяном агаре без добавок;
• Плотность бактериальной суспензии должна быть строго 2.0 по МакФарланду;
• Покрывайте планшеты только прилагающейся к ним пленкой;
• Инкубируйте строго 18-24 часов при 37°С;
• Высейте на кровяном агаре без добавок бактериальную суспензию для контроля
чистоты культуры.
Схема работы с планшетами МикроТакс-NF
Только для in vitro диагностики 3 теста/планшет
В программе IVICN введите тип
Приготовление
теста «N»
проб
Грам-отрицательные, оксидазо-
положительные бактерии на
кровяном агаре
5 мл физраствора с культурой засева
Приготовление
плотностью 0.5 по МакФарланду, пос
культуры для
ле чего перемешать 1 мл полученной
засева суспензии с 6 мл МикроТакс-NF
Susmed
Перенесите суспензию в
2-камерную кювету
Засев Раскапайте по 100 мкл
суспензии
в каждую лунку планшета
Добавьте по 2 капли
парафинового масла (серые
Накройте планшеты
Накрытие Q Парафиновое масло
специальной
пленкой и
перфорированной пленкой
инкубация
Инкубируйте 24 часа при 28-
30°'
Добавьте по 2 капли
индольного реагента (синие
лунки на Схеме справа)
Индольный реагент
Проведите считывание планшет
Считывание
спустя 3 минуты инкубации
Подготовка инокулята:
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «N» .
Бактериальная суспензия:
• Приготовьте бактериальную суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов,
выращенной строго на кровяном агаре без добавок.*
• Приготовить суспензию в 5 мл NaCl согласно стандарту мутности McFarland 0.5.
• Перемешать 1 мл полученной суспензии с 6 мл МикроТакс-NF.
• Перенесите полученную суспензию в 4-камерную кювету.
Инокулироваиие планшета:
Внесите по 100 мкл бактериальной суспензии в следующие лунки планщета:
А1 : Н4 - определение 1
А5 : Н8 - определение 2
А9 : Н12 - определение 3
Добавьте по две капли парафинового
масла в следующие лунк^^
В1-Н1,А2, В2,
В5-Н5, А6, В6,
В9-Н9, А10, В10.
МикроТакс -NF
Накройте планшет NF специальной перфорированной пленкой, которая прилагается к
набору. Использование перфорированной пленки гарантирует проникновение кислорода,
необходимого для реакций. В то же время газовый обмен между ячейками планшета,
нарушающий протекание реакций, становится невозможным.
Инкубация:
Инкубируйте 18-24 часов при 30°С. По окончании инкубации снимите покрывающую
планшет пленку и добавьте по две капли индольного реагента
в следующие лунки: А1, А5, А9.
Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик
исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам
Считывание:
Подождите 5 минут для полного развития окраски (не более 30 мин.), после чего
тщательно протрите дно лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание на
МикроТакс ридере. Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в
раздел «Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания.
Вычисление результатов:
Войдите в программу MCN в колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Вычисление». Нажмите «Старт» для начала вычисления. Система МикроТакс выдаст
полученные в ходе исследования результаты.
Схема планшета
1 2 3 4 -„5 8 9 10 11 12
Ф А IND SUCF HBA ONPG IND SUCF HBA ONPG IND SUCF HBA ONPG
В ESC FCO LAT LIPC ESC FCO LAT LIPC ESC FCO LAT LIPC
С ESCO GLU ADI DIP ESCO GLU ADI DIP ESCO GLU ADI DIP
D URE MAN SUB PRO URE MAN SUB PRO URE MAN SUB PRO
Е ODC MALA MAA AMA ODC MALA MAA AMA ODC MALA MAA AMA
F ADH NAG PAA CHIT ADH NAG PAA CHIT ADH NAG PAA CHIT
G DECO MAT HIS APH DECO MAT HIS APH DECO MAT HIS APH
Н GLUF GCA ACO ONC GLUF GCA ACO ONC GLUF GCA ACO ONC
Таблица визуального контроля
Положительная
Ячейка Отрицательная реакция
рецкция
IND Al, A5, A9 пурпурный красный
ESC B1,B5, B9, темно-коричневый бежевый
ESCO C1,C5, C9 негативный контроль
URE Dl, D5,D9
ODC E1,E5,E9 зеленовато-голубой желто-зеленый
ADH F1,F5,F9,
DECO G1,G5,G9 негативный контроль
GLUF H1,H5,H9
желтый зеленовато-голубой
SUCF A2, A6, AlO
FCO 82, 36, BIO негативный контроль
GLU C2, C6, CIO
MAN D2, D6,D10
MALA E2, E6, ElO
NAG F2, F6,F10
MAT G2, G6,G10
GCA H2, H6,H10
нет роста
HBA A3, A7, All есть рост (мутность)
(прозрачная жидкость)
LAT B3,B7,B11
ADI C3,C7,C11
SUB D3,D7,D11
MAA E3,E7,E11
PAA F3,F7,F11
HIS G3, G7, G 11
AGO H3,H7, HU негативный контроль
IND Индол НВА Гидроксимасляная кислота
ESC Эскулин LAT Лактат
ESCO Контроль эскулина ADI Адипат
URE Уреаза SUB Суберат
ODC Орнитиндекарбоксилаза МАА Малат
ADH Аргининдегидролаза РАА Фенилуксусная кислота
DECO Контроль декарбоксилазы HIS Г истидин
GLUF Г люкоза АСО Контроль ассимиляции
SUCF Сахароза ONPG Ортонитрофенил-|3-галактозидаза
FCO Контроль ферментации LIPC Фосфолипаза
GLU Г люкоза DIP Фосфодиэстераза
MAN Манноза PRO Пролинамидаза
MALA Мальтоза AMA Мальтозидаза
NAG N -Ацетил глюкозамин CHIT Хитиназа
MAT Маннитол APH Кислая фосфатаза
GCA Г люконат ONC Контроль хромогенных субстратов
ONPG А4, А8, А12 бесцветный
LIPC В4, В8,В12
DIP С4,С8,С12
PRO D4, D8,D12 желтый Бесцветный / светло-
AMA Е4, Е8,Е12 желтый
CHIT F4, F8,F12
APH G4, G8,G12
ONC Н4,Н8,Н12 негативный контроль
Комментарии
Для получения хороших результатов следует:
Использовать только рекомендованные настоящей методикой расходные материалы;
Использовать для анализа бактериальные культуры не старше 24 часов, выращенные
на кровяном агаре без добавок;
Плотность бактериальной суспензии должна быть строго 0.5 по МакФарланду;
Покрывайте планшеты только прилагающейся к ним пленкой;
Инкубируйте строго 18-24 часов при 30°С;
Высейте на кровяном агаре без добавок бактериальную суспензию для контроля
чистоты культуры.
Ф
Ф
7.5. МикроТакс-RC Candida
Идентификация клинически значимых видов грибов / дрожжей за 24 часа.
4 определения на планшете
21 биохимические реакции + 3 контроля
Список определяемых микроорганизмов па планшете
МикроТакс- RC Candida
1. Candida africana 21.
2. Candida albicans 22.
3. Candida catenulate 23.
Ф
4. Candida dubliniensis 24.
5. Candida famata 1 25.
6. Candida famata 11 26.
7. Candida famata 111 27.
8. Candida famata IV 28.
9. Candida glabrata 29.
10. Candida guilliermondii 30.
11. Candida inconspicua 31.
12. Candida intermedia 32.
13. Candida kefyr 33.
14. Candida krusei 34.
15. Candida lambica 35.
16. Candida lipolytica 36.
17. Candida lusitaniae 37.
18. Candida magnoliae 38.
19. Candida membranefaciens 39.
20. Candida norvegensis
Схема работы с планшетами МикроТакс-RC Candida
Только для in vitro диагностики 4 теста/планшет
Приготовление В программе MCN введите тип теста «V»
проб
Дрожжи на агаре Сабуро с 2% глюкозой
без добавок
или
Ф
МикроТакс-RC Candida
Подготовка инокулята:
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «V».
Бактериальная суспензия:
• Приготовьте бактериальную суспензию из 24-48 часовой культуры
микроорганизмов, выращенной строго на кровяном агаре Сабуро с 2% глюкозой.*
• Приготовить суспензию в 6 мл реактива RC Candida-Susmed согласно стандарту
мутности McFarland 0.5.
• Перенесите полученную суспензию в 4-камерную кювету.
Инокулирование планшета:
Внесите по 100 мкл бактериальной суспензии в следующие лунки планщета:
А1 : 312 определение 1
С1 : D12 определение 2
Е1 : F12 определение 3
G1 : Н12 определение 4
МикроТакс-RC Candida
Накройте планшет RC специальной перфорированной пленкой, которая прилагается к
набору. Использование перфорированной пленки гарантирует проникновение кислорода,
необходимого для реакций. В то же время газовый обмен между ячейками планшета,
нарушающий протекание реакций, становится невозможным.
Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик
исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам
Инкубация:
Инкубируйте 24 часа при 25-30°С.
Считывание:
По окончании инкубации снимите покрывную пленку, после чего тщательно протрите
дно лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание на МикроТакс ридере.
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Считывание».
Нажмите «Старт» для начала считывания. Планшеты должны быть считаны в тот же день, на
следующий день считывание невозможно.
Вычисление результатов:
Войдите в программу MCN в колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Вычисление». Нажмите «Старт» для начала вычисления. Система МикроТакс выдаст
полученные в ходе исследования результаты.
Схема планшета МикроТакс-RC Candida
1 •.. : 2 ■ 3 4 :':"5 6 8 9 10 11 12
А NGA PRO PHE P-GLU URE ACO XYL GENA INO GAL LAC
s u e
В a-GAL PGUR a-GLU ONC UCO MEL RHA GLU CEL TRE MALA RAF
С NGA RPO PHE p-GLU URE ACO XYL GENA INO GAL LAC
s u e
D a-GAL PGUR a-GLU ONC UCO MEL RHA GLU CEL TRE MALA RAF
Е NGA RPO PHE p-GLU URE ACO XYL GENA INO GAL LAC
s u e
F a-GAL PGUR a-GLU ONC UCO MEL RHA GLU CEL TRE MALA RAF
G NGA PRO PHE p-GLU URE ACO XYL GENA INO s u e GAL LAC
Н a-GAL PGUR a-GLU ONC UCO MEL RHA GLU CEL TRE MALA RAF
Таблица визуального контроля
Положитель Отрицатель
Реакции Ячейки
ная реакция ная реакция
Хромогенные субстраты
NGA N-Aцeтил-P-D-гaлaктoзaминидaзa A1,C1,E1,G1
a-GAL a-F алактозидаза B1,D1,F1,H1
PRO L-Пролинаминопептидаза А2, С2, Е2, G2
PGUR р-Нитрофенил-Р-глюкуронидаза В2, D2, F2, Н2 Желтый Бесцветный
PHE L-Фенилаланинаминопептидаза АЗ, СЗ, ЕЗ, G3
a-GLU а-Глюкозидаза ВЗ, D3, F3, НЗ
P-GLU Р-Глюкозидаза А4, С4, Е4, G4
Контроль хромогенных
ONC В4, D4, F4, Н4 Негативный контроль
субстратов
| URE | Уреаза | | А5, | С5, | Е5, | G5 Красный | Желтый |
| исо | Контроль уреазы | | В5, | D5, | F5, | Н5 Контро | ль уреазы |
| | Ассим | ил | яци | я | | | |
| АСО | Контроль ассимиляции | | А6, | С6, | Е6, | G6 Контроль | ассимиляции |
| MEL | Мелибиоза | | В6, | D6, | F6, | Н6 | |
| XYL | D-Ксилоза | | А7, | С7, | Е7, | G7 | |
| RHA | L-Рамноза | | В7, | D7, | F7, | Н7 | |
| GENA | Г антибиоза | | А8, | С8, | Е8, | 08 | |
| GLU | D-Глюкоза | | В8, | D8, | F8, | Н8 | |
| INO | Инозитол | | А9, | С9, | Е9, | G9 | |
| CEL | Целобиоза | | В9, | D9, | F9, | Н9 Рост | Нет рост |
| sue | Сахароза | A | 10,C | 10, | E10 | ,G10 | |
| TRE | Трегалоза | B | 10,D | 10, | F10 | , НЮ | |
| GAL | Г алактоза | A | 11,C | 11, | E11 | ,G11 | |
| MALA | Мальтоза | B | 11,D | 11, | F11 | ,H11 | |
| LAC | Лактоза | A | 12,C | 12, | E12 | ,G12 | |
| RAF | Рафиноза | B | 12,D | 12, | F12 | ,H12 | |
ДекарСЗоксилазы
й
а
| | | | NAL | Налидиксовая кислота | | | | |
| | | | STR | Стрептомицин | | | | |
| | | | TEL | Телитромицин | | | | |
| | | | ТЕТ | Тетрациклин | | | | |
| | | | T/S | Триметоприм/Сульфаметоксазол | | | | |
| | | | GC | Контроль роста | | | | |
| 6) | | | МикроТак | с-S Cystic Fibrosis (1 тес/планше | т, 1 кон | троль) | - для и | сслед |
| множестве | | нно | й лекарственно | й устойчивости неферментирующ | их бак | терий, | вызываю | щих |
| развитие ц | | ист | ического фиброз | а за 18-24 часа. | | | | |
| | | | | Схема планшета* | | | | |
| | | | 3 4 | 5 6 7 8 | 9 | 10 | 11 | 12 |
| СРС | C | SC | CZT TBC | CZF FOC CZA MRA | MRF | MRT | TOM | FOM |
| А | | | | | | | | |
| 4/2 | 8 | /1 | 32/4 16/8 | 32/32 128/8 32/16 16/16 | 16/32 | 16/4 | 16/4 | 128/4 |
| СРС | C | SC | CZT TBC | CZF FOC CZA MRA | MRF | MRT | TOM | FOM |
| В | | | | | | | | |
| 2/2 | 4 | /1 | 16/4 8/8 | 16/32 64/8 16/16 8/16 | 8/32 | 8/4 | 8/4 | 64/4 |
| СРС | C | SC | CZT TBC | CZF FOC CZA MRA | MRF | MRT | TOM | FOM |
| С | | | | | | | | |
| 1/2 | 2 | /1 | 8/4 4/8 | 8/32 32/8 8/16 4/16 | 4/32 | 4/4 | 4/4 | 32/4 |
| СРС | C | SC | CZT TBC | CZF FOC CZA MRA | MRF | MRT | TOM | FOM |
| D | | | | | | | | |
| 0.5/2 | 1 | /1 | 4/4 2/8 | 4/32 16/8 4/16 2/16 | 2/32 | 2/4 | 2/4 | 16/4 |
| CIP | C | OL | CAZ TOB | FOS LEV AMK MER | AZT | PIP | PIT | T/S |
| Е | | | | | | | | |
| 4 | | 8 | 32 16 | 128 8 64 16 | 32 | 128 | 128/4 | 4/76 |
| CIP | C | OL | CAZ TOB | FOS LEV AMK MER | AZT | PIP | PIT | T/S |
| 2 | | 4 | 16 8 | 64 4 32 8 | 16 | 64 | 64/4 | 2/38 |
| CIP C | | OL | CAZ TOB | FOS LEV AMK MER | AZT | PIP | PIT | T/S |
| G | | | | | | | | |
| 1 | | 2 | 8 4 | 32 2 16 4 | 8 | 32 | 32/4 | 1/19 |
| CIP C | | OL | CAZ TOB | FOS LEV AMK MER | AZT | PIP | PIT | |
| Н | | | | | | | | GC |
| 0.5 | | 1 | 4 2 | 16 1 8 2 | 4 | 16 | 16/4 | |
| ''Кон | ц | ен | трация антибиоти | ков указана в мкг/мл | | | | |
| | | | | Обозначения | | | | |
| | | | Аббревиатура | Полное название антимикробног | о агент | а | | |
| | | | AMK | Амикацин | | | | |
| | | | AZT | Азтреонам | | | | |
| | | | CAZ | Цефтазидим | | | | |
| | | | CZA | Цефтазидим/Амикацин | | | | |
| | | | CZF | Цефтазидим/Фосфомицин | | | | |
| | | | CZT | Цефтазидим/Т обрамицин | | | | |
| | | | CIP | Ципрофлоксацин | | | | |
| | | | CPC | Ципрофлоксацин/Колистин | | | | |
| | | | COL | Колистин | | | | |
| | | | CSC | Колистин/Ципрофлоксацин | | | | |
| | | | FOS | Фосфомицин | | | | |
| | | | FOC | Фосфомицин/Цефтазидим | | | | |
| | | | FOM | Фосфомицин/Меропенем | | | | |
ования
А
В
С
D
Е
F
G
Н
LEV Левофлоксацин
MER Меропенем
MRA Меропенем/Амикацин
MRF Меропенем/Фосфомицин
MRT Меропенем/Тобрамицин
PIP Пиперацилин
PIT Пиперацилин/Т азобактам
TOB Тобрамицин
TBC Т обрамицин/Цефтазидим
TOM Т обрамицин/Меропенем
T/S Т риметоприм/Сульфаметоксазол
GC Контроль роста
7) МикроТакс-S-Vet (1, 2 и 4 теста/планшет, 1 контроль) - для определения
бактериальной чувствительности к антибиотикам в ветеринарии за 18-24 часа.
Для всех типов планшет МикроТакс-S применяется одна Схема работы:
Подготовка инокулята:
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «Rx» » («Нх»-
для медленнорастущих бактерий).
Бактериальная суспензия:
• Приготовьте бактериальную суспензию плотностью 0.5 по Макфарланду из 24-
часовой культуры микроорганизмов, выращенной строго на кровяном агаре без добавок.*
• Для определения грам-отрицательных бактерий перемешайте 50 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл бульона Миллера-Хинтона II.
Для определения грам-положительных бактерий перемешайте 100 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл бульона Миллера-Хинтона II.
Для определения медленнорастущих бактерий (streptococci, согше-бактерии,
Haemophilus, Neisseria) перемешайте 200 мкл приготовленной суспензии в 11 мл Н-бульона
(H-broth).
Для определения медленнорастущих бактерий (CF-штаммы) перемещайте 50 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл Н-бульона (H-broth).
• Перенесите полученную суспензию в 1,2 или 4-камерную кювету.
Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик
исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам
Инокулирование планшета:
Внесите по 100 мкл бактериальной суспензии в следующие лунки планшета:
А1 : В12 определение 1
С1 : D12 определение 2
Е1 : F12 определение 3
G1 : Н12 определение 4
Накройте планшет S специальной неперфорированной пленкой, которая прилагается к
набору.
Инкубация:
Инкубируйте 18-24 часов при 37°С. Медленнорастущие бактерии (при необходимости)
инкубируются в обогащенной СОг-атмосфере 22-24 часа.
Считывание:
По окончании инкубации снимите покрывающую пленку, тщательно протрите дно
лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание на МикроТакс ридере.
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Считывание».
Нажмите «Старт» для начала считывания. Планшеты должны быть считаны в тот же день, на
следующий день считывание невозможно.
Вычисление результатов:
Войдите в программу MCN в колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Вычисление». Нажмите «Старт» для начала вычисления. Система МикроТакс выдаст
полученные в ходе исследования результаты.
Примечание:
Контрольная лунка должна быть мутной (т.е. должен быть бактериальный рост). В
противном случае тест должен быть повторен.
Схема работы с планшетами МикроТакс-S
Только для in vitro диагностики 1, 2 или 4 теста/планшет
Приготовление
В программе MCN введите тип теста «Rx», «Нх»для
проб
медленнорастущих бактерий
Бактерии
Приготовление г
5 мл физраствора с культурой засева плотностью 0.5 по
культуры для
МакФ'арланду
засева
i i 4
Грам- Грам- Медленнорастущие бактерии
отрицательные положительные (Streptococci, coryneform bac
teria, Haemophilus,
Neisseria)
Смешайте 50 мкл Смешайте 100 мкл
баксуспензии с 11 мл баксуспензии с 11 мл Смешайте 200 мкп баксус
Изосенситест-бульона* Изосенситест-бульона* пензии с 11 мл Н-бульона
Перенесите суспензию в 1, 2 или 4-камерные кюветы
Засев
Раскапайте по 100 мкл суспензии в каждую лунку
f
Накройте планшеты специальн< эй неперфорированной пленкой или
Накрытие
поставьте их друг на друга (но не более 5 планшетов в высоту) и
пленкой и
закройте пленкой только верхний из них
инкубация
Инкубируйте 18-24 часа при 35-37°С (при необходимости
медленнорастущие бактерии можно инкубировать в
обогащенной СОг-атмосфере 22-24 часа)
Проведите считывание планшет*
Считывание
‘Или на бульоне Мюллера-Хинтона для детекции МИК
**Пожалуйста, проверьте визуально оксациллин
7. 7 МикроТакс-SB
1) МикроТакс-SB быстрый тест
Определение бактериальной чувствительности к антибиотикам за 6 часов.
1, 2 или 4 определения на планшете в зависимости от количества внесенных
антибиотиков.
Подготовка инокулята:
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «8х».
Бактериальная суспензия:
• Приготовьте бактериальную суспензию в 5 мл физраствора со значением
мутности 0.5 по МакФарланду из 24-часовой культуры микроорганизмов, выращенной строго
на кровяном агаре без добавок.*
• Для определения грам-отрицательных бактерий перемешайте 200 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл среды МикроТакс SB.
Для определения грам-положительных бактерий перемешайте 400 мкл приготовленной
суспензии в 11 мл среды SB-Susmed.
• Перенесите полученную суспензию в 1,2 или 4-камерную кювету.
Инокулирование планшета:
Внесите по 100 мкл бактериальной суспензии в следующие лунки планшета:
А1 : В12 определение 1
С1 : D12 определение 2
^ Е1 : F12 определение 3
G1 : Н12 определение 4
Накройте планшет S специальной неперфорированной пленкой, которая прилагается к
набору.
Инкубация:
Инкубируйте 6 часов при 37°С. По окончании инкубации снимите покрывную пленку,
тщательно протрите дно лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание
на МикроТакс ридере.
Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик
исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам
Считывание:
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания. Планшеты должны быть считаны в
тот же день, на следующий день считывание невозможно.
Вычисление результатов:
Войдите в программу MCN в колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Вычисление». Нажмите «Старт» для начала вычисления. Система МикроТакс выдаст
полученные в ходе исследования результаты.
Схема работы с планшетами МикроТакс-SB / быстрый тест
Только для in vitro диагностики 1, 2 или 4 теста/планшет
2) МикроТакс-SB ночная инкубация
Планшет МикроТакс-SB/ ночная инкубация (1,2 или 4 теста/планшет) используется
для определения бактериальной чувствительности к антибиотикам за 18-24 часа.
Подготовка инокулята:
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «8х» («Нх» - для
медленнорастущих бактерий).
Бактериальная суспензия:
Приготовьте бактериальную суспензию со значением мутности 0.5 по МакФарланду в 5
мл физраствора из 24-часовой культуры микроорганизмов, выращенной строго на кровяном
агаре без добавок. Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к
изменению биохимических характеристик исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к
ложным результатам.
Для определения Грам-отрицательных бактерий необходимо перемешать 50 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл среды МикроТакс-SB.
Для определения Грам-положительных бактерий необходимо перемешать 100 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл среды МикроТакс-SB.
Для определения медленнорастущих бактерий (streptococci, соппе-бактерии,
Haemophilus, Neisseria) необходимо перемешать 200 мкл приготовленной суспензии в 11 мл Н-
бульона.
Перенесите полученную суспензию перенесите в 1, 2 или 4-камерную кювету.
Инокулирование планшета:
Внесите по 100 мкл суспензии в следующие лунки планшета:
А1 ; В12 определение 1
С1 : D12 определение 2
Е1 : F12 определение 3
G1 : Н12 определение 4
Накройте планшет SB/ночная инкубация специальной неперфорированной пленкой,
которая прилагается к набору.
Инкубация:
Инкубируйте 18-24 часа при 37°С. Медленнорастущие бактерии (при необходимости)
инкубируются в обогащенной СОг-атмосфере 22-24 часа.
Считывание:
По окончании инкубирования снимите с планшета покровную пленку, тщательно
протрите дно лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание на
МикроТакс ридере. Для этого войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными»
перейдите в раздел «Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания. Планшеты
должны быть считаны в тот же день, на следующий день считывание невозможно.
Вычисление результатов:
После считывания проведите вычисление результатов. Для этого в программе MCN в
колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Вычисление». Нажмите «Старт» для начала
вычисления. Система МикроТакс выдаст полученные в ходе исследования результаты.
j>
Схема работы с планшетами МикроТакс-8В/ночная инкубация
Только для in vitro диагностики 1, 2 или 4 теста/планшет
В программе MCN введите тип теста «Rx», «Нх» для
Приготовление проб
медленнорастущих бактерий
Бактерии
5 мл физраствора с культурой засева плотностью 0.5 по
Приготовление
МакФарланду
культуры для засева
Медленнорастущие бактерии
G
Г рам-отрицательные Г рам-положительные (Streptococci, coryneform bac
бактерии бактерии teria, Haemophilus, Neisseria)
Смешай1 те 50 мкл Смешайте К DO мкл Смешайте 200 мкл
баксуспе знзии с 11 баксуспензии с 11 мл баксус-пензии с 11
мл б\ /льона бульона Микр) оТакс- мл Н-бульона
МикроТакс-SB SB
Засев
Перенесите суспензию в 1, 2 или 4-камерные кюветы
О
7.8. МикроТакс-STAPH
Используется для идентификации клинически значимых стафилококков за 6 и 18-24
часов.
(4 определения на планшете)
21 биохимическая реакция + 2 контроля
Список определяемых микроорганизмов на планшете
МикроТакс-STAPH
17. Staphylococcus
9. Staphylococcus
1. Micrococcus luteus saprophyticus sub.
gallinarum
saprophyticus
10. Staphylococcus
2. Staphylococcus aureus 18. Staphylococcus schleiferi
haemolyticus
3. Staphylococcus capitis 11. Staphylococcus
19. Staphylococcus sciuri
sub. capitis hominis
4. Staphylococcus sub. 12. Staphylococcus
20. Staphylococcus simulans
ureolyticus huicus
5. Staphylococcus 13. Staphylococcus
21. Staphylococcus warneri
chromogenes intermedius
6. Staphylococcus cohnii 14. Staphylococcus
22. Staphylococcus xylosus
sub. cohnii kloosii
7. Staphylococcus cohnii
15. Staphylococcus lentus
sub. urealyticum
8. Staphylococcus 16. Staphylococcus
epidermidis lugdunensis
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста («СЗ» - для 6-
часовой инкубации и «D1» - для 18-24-часовой инкубации). В поле «Код таксона» укажите Р-
Гемолиз ±.
С Приготовьте бактериальную суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов,
выращенной строго на кровяном агаре без добавок.*
Для 6-часовой инкубации необходимо приготовить суспензию со значением мутности
2.0 по МакФарланду в 5 мл физраствора. Для 18-24-часовой инкубации необходимо
приготовить суспензию со значением мутности 0.5 по МакФарланду в 5 мл физраствора.
Полученную суспензию перенесите в 4-камерную кювету.
Внесите по 100 мкл суспензии в следующие лунки планшета:
А1 : В12 определение 1
С1 : D12 определение 2
Е1 : F12 определение 3
* Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик
исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам
G1 : Н12 определение 4
Добавьте по 2 капли парафинового масла в следующие лунки: А-Н 12.
Парафиновое масло
Накройте планшет STAPH специальной перфорированной пленкой, которая
прилагается к набору. Использование перфорированной пленки гарантирует проникновение
кислорода, необходимого для реакций. В то же время газовый обмен между ячейками
планшета, нарушающий протекание реакций, становится невозможным.
В зависимости от выбранного метода инкубируйте 6 или 18-24 часа при 37°С. По
окончании инкубирования снимите с планшета покровную пленку, тщательно протрите дно
лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание на МикроТакс ридере. Для
этого войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел
«Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания. Планшеты должны быть считаны в
тот же день, на следующий день считывание невозможно.
После считывания проведите вычисление результатов. Для этого в программе MCN в
колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Вычисление». Нажмите «Старт» для начала
вычисления. Система МикроТакс выдаст полученные в ходе исследования результаты.
Схема работы с планшетами МикроТакс-STAPH
Только для in vitro диагностики 4 теста/планшет
В программе MCN введ ите тип теста «STAPH»:
Приготовление
Для 6-часовой инкубаь1 ИИ введите тест «СЗ»;
проб Для 18-24-часовой инкуб ации введите тест «D1»;
Введите (3-Haemolyse ± в поле Код Таксона
Стафилококки на кровяном агаре без добавок
5 мл физраствора с культурой засева:
Для 6-часовой инкубации - плотностью 2 по
с Приготовление МакФарланду;
Культуры Для 18-24-часовой инкубации - плотностью 0.5 по
для засева МакФарланду
Уг
Перенесите суспензию в 4-камерную кювету
г
Засев
Раскапайте по 100 мкл суспензии
в каждую лунку планшета
’ 1_______________
Добавьте пс ) 2 капли
парафинового ^ 1асла (серые
лунки на Схерле справа)
Накройте ш паншеты
специал
Накрытие 1ЬН0Й
пленкой перфорирован!ной пленкой
и инкубация
В зависимости от выбранного
метода инкубируйте 6 или 18-
24 часов при 35-37°С
Парафиновое масло
о
Считывание
Проведите считывание планшет
/ГУ .
МикроТ акс-ST АРН
Схема планшета
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
А SEMAF SEMTF SENGF SLAF STUF SABF STRF SCIT SPGR SHPR SPYR SURE
В SESCF SETRF SMNF SMAF SAMF SNGF SpGL SPNP SCSC SLAL SNCO SODC
С SEMAF SEMTF SENGF SLAF STUF SABF STRF SCIT SPGR SHPR SPYR SURE
D SESCF SETRF SMNF SMAF SAMF SNGF SpGL SPNP SCSC SLAL SNCO SODC
Е SEMAF SEMTF SENGF SLAF STUF SABF STRF SCIT SPGR SHPR SPYR SURE
F SESCF SETRF SMNF SMAF SAMF SNGF SpGL SPNP SCSC SLAL SNCO SODC
G SEMAF SEMTF SENGF SLAF STUF SABF STRF SCIT SPGR SHPR SPYR SURE
Н SESCF SETRF SMNF SMAF SAMF SNGF SpGL SPNP SCSC SLAL SNCO SODC
Таблица визуального контроля
Положительная Отрицательн
Реакции Ячейки
реакция ая реакция
Ферментация
SEMAF Манноза A1,C1,E1,G1
SESCF Сахароза B1,D1,F1,H1
SEMTF Мальтоза А2, С2, Е2, G2
SETRF Трегалоза В2, D2, F2, Н2
SENGF N-Ацетилглюкозамин АЗ, СЗ, ЕЗ, G3
SMNF Манит ВЗ, D3, F3, НЗ
SLAF Лактоза А4, С4, Е4, G4 Желтый Сине-зеленый
SMAF Манноза В4, D4, F4, Н4
STUF Тураноза А5, С5, Е5, G5
SAMF Амигдалин В5, D5, F5, Н5
SABF Арбутин А6, С6, Е6, G6
SNGF N-Ацетилглюкозамин В6, D6, F6, Н6
STRF Трегалоза А7, С7, Е7, G7
Хромогенные субстраты на основе N-нитрофенола
SpGL р-Нитрофенил-Р-О-Г люкопиранозид В7, D7, F7, Н7
р-Нитрофенилацетил-P-D-
SCIT А8, С8, Е8, G8
Г глюкозамид
Желтый Бесцветный
р-Нитрофенил-P-D-
SPNP В8, D8, F8, Н8
Г галактоопиранозид
SPGR р-Нитрофенил-P-D-F глюкуронид А9, С9, Е9, G9
Контроль хромогенных р- Негативный контроль и контроль
SCSC В9, D9, F9, Н9
нитрофенольных субстратов роста
Хромогенные субстраты на основе р-нитроанилида
4-Г идрокси-Е-Пролин-р- А10,С10,Е10,
SHPR
Нитроанилид G10
B10,D10,F10,
SLAL L-Аланин-р-Нитроанилид Желтый Бесцветный
НЮ
А11,С11,Е11,
SPYR L-Пироглутамин-р-Нитроанилид
G11
SNCO Контроль хромогенных р- B11,D11,F11, Негативный контроль и контроль
нитроанилидных субстратов НИ роста
Декарбоксилазы
А12,С12,Е12, Темно-
SURE Уреаза Желтый
G12 фиолетовый
B12,D12,F12, Темно-
SODC Орнитиндекарбоксилаза Желтый
Н12 фиолетовый
7.9. МикроТакс-STREP 2
Планшет МикроТакс-STREP 2 (4 тестаУпланшет; 24 биохимические реакции)
используется для идентификации клинически значимых стрептококков и энтерококков за 20-
24 часа.
Список определяемых микроорганизмов па планшете
МикроТакс-STREP 2
I. Enterococcus avium 12. Streptococcus bovis Biotyp 1 23. Streptococcus mutans
PYR+
2. Enterococcus 13. Streptococcus bovis Biotyp 2 24. Streptococcus oralis
casseliflavus
3. Enterococcus durans 14. Streptococcus constellatus 25. Streptococcus
pneumoniae
4. Enterococcus 15. Streptococcus dysgalactiae 26. Streptococcus
faecalis sub, equisimilis_________ pyogenes
5. Enterococcus 16. Streptococcus equi sub. equi 27. Streptococcus
faecium salivarius
6. Enterococcus 17. Streptococcus equi sub. 28. Streptococcus
gallinarum zooepidemicus_______ sanguinis
7. Enterococcus hirae 18. Streptococcus equinus 29. Streptococcus
sorbrinus
8. Streptococcus 19. Streptococcus gordonii 30. Streptococcus suis
agalactiae
9. Streptococcus 20. Streptococcus intermedius 31. Streptococcus uberis
agalactiae PYR+
10. Streptococcus 21. Streptococcus mitis 32. Streptococcus
alactolyticus vestibularis
11. Streptococcus 22. Streptococcus mutans
anginosus
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «К». В поле
«Код таксона» укажите (3-Гемолиз ± и пигментацию ±.
Приготовьте бактериальную суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов,
выращенной строго на кровяном агаре без добавок. Если проводить культивирование на иной
среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик исследуемых
микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам.
Бактериальную суспензию со значением мутности 1.0 по МакФарланду необходимо
приготовить в 5 мл физраствора. Полученную суспензию перенесите в 4-камерную кювету.
Внесите по 100 мкл суспензии в следующие лунки планшета:
А1 : В12 определение 1
С1 : D12 определение 2
Е1 : F12 определение 3
G1:H12 определение 4
Добавьте по 2 капли парафинового масла в следующие лунки;
А-Н 12.
О
Парафиновое масло
Накройте планшет STREP 2 специальной перфорированной пленкой, которая
прилагается к набору. Использование перфорированной пленки гарантирует проникновение
кислорода, необходимого для реакций. В то же время газовый обмен между ячейками
планшета, нарушающий протекание реакций, становится невозможным.
Инкубируйте 20-24 часа при 37°С.
По окончании инкубирования снимите с планшета покровную пленку, тщательно
протрите дно лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание на
МикроТакс ридере. Для этого войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными»
перейдите в раздел «Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания. Планшеты
должны быть считаны в тот же день, на следующий день считывание невозможно.
После считывания проведите вычисление результатов. Для этого в программе MCN в
колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Вычисление». Нажмите «Старт» для начала
вычисления. Система МикроТакс выдаст полученные в ходе исследования результаты.
МикроТакс-STREP
Схема планшета
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
А TEL SUCFE CELF LACF ARBF MATF SORF TREF AMYF NAGF RAFF URE
PYRn/ PGUR/ P-
В GLPn NASP a-GAL PNPG P-FUC CHIT ESC SPMS ADH
HIP** NEUR* GLU
С TEL SUCFE CELF LACF ARBF MATF SORF TREF AMYF NAGF RAFF URE
PYRn/ PGUR/ (3-
D GLPn NASP a-GAL PNPG P-FUC CHIT ESC SPMS ADH
HIP** NEUR* GLU
Е TEL SUCFE CELF LACF ARBF MATF SORF TREF AMYF NAGF RAFF URE
PYRn/ PGUR/ P-
F GLPn NASP a-GAL PNPG P-FUC CHIT ESC SPMS ADH
HIP NEUR GLU
G TEL SUCFE CELF LACF ARBF MATF SORF TREF AMYF NAGF RAFF URE
PYRn/ PGUR/ P-
н GLPn NASP a-GAL PNPG P-FUC CHIT ESC SPMS ADH
HIP NEUR GLU
PGUR / NEUR* - комбинация хромогенных тестов, которая автоматически считывается и
и нтерпретируется.
HIP* - дополнительный тест, который должен ставиться только по подсказке прибора (при получении
результатов).
Таблица визуального контроля
Положительна Отрицательная
Реакции Ячейки
я реакция реакция
. Ферментация
Бесцветный/желт
TEL Телурит A1,C1,EI,G1 Черно-серый
оватый
SUCFE Сахароза А2, С2, Е2, G2
CELF Целобиоза АЗ, СЗ, ЕЗ, G3
Ф
LACF Лактоза А4, С4, Е4, G4
ARBF Арбутин А5, С5, Е5, G5
MATF Манит А6, С6, Е6, G6
SORF Сорбитол А7, С7, Е7, G7 Оранжево
Красный
TREF Трегалоза А8, С8, Е8, G8 желтый
AMYF Амигдалин А9, С9, Е9, G9
А10,С10,ЕЮ,
NAGF N - Ацетилглюкозамин
G10
А11,С11,Е11,
RAFF Рафиноза
GII
Хромогенные субстраты на основе р-нитрофенола
р-Нитрофенил-a-D-
tt-GAL В4, D4, F4, Н4 Желтый Бесцветный
Г алактопиранозид
PGUR р-Нитрофенил-P-D-r люкуронид В5, D5, F5, Н5
р-Нитрофенил-p-D-
PNPG Галактопиранозид + В6, D6, F6, Н6
изопропилтиогалактопиранозид
P-FUC р-Нитрофенил-Р-О-Фукопиранозид В7, D7, F7, Н7
р-Нитрофенил-P-D-
P-GLU В8, D8, F8, Н8
Глюкопиранозид
р-Нитрофенилацетил-P-D-
CHIT В9, D9, F9, Н9
Глюкозамид
Хромогенные субстраты на основе р-нитроаннлнда
PYRn L-Пироглутамин-р-Нитроанилид 82, D2, F2, Н2
Желтый Бесцветный
GLPn L-ГЛИ-ПРО-р-Нитроанилид B1,D1,F1,H1
Декарбоксилазы
А12,С12,Е12,
URE Уреаза
G12
Фиолетовый Желтый
B12,D12,F12,
ADH Аргининдегидролаза
Н12
Прочие дополнительные тесты
NEUR Нейроаминидаза В5, D5, F5, Н5 Бирюзовый Бесцветный
B10,D10, F10,
ESC Эскулин Черно-серый Желтый
НЮ
NASP ВЗ, D3, F3, НЗ
Нет роста
B11,D11,F11, Рост (мутный)
(прозрачный)
SPMS
НИ
Бесцветный/желт
HIP* Г иппурат В2, D2, F2, Н2 Синий
оватый
HIP* - дополнительный тест, который должен ставиться только по подсказке прибора (при
получении результатов)
Ф
7.10. МикроТакс-UR
Планшет МикроТакс-UR (2 теста/планшет, 23 биохимические реакции, 2 контроля)
используется для идентификации и определения чувствительности быстрорастущих аэробных
бактерий к антибиотикам за 18-24 часа.
Список определяемых микроорганизмов па планшете МикроТакс-UR
1 ■ Acinetobacter species 17. Klebsiella oxytoca 33. Raoulltella ornithinolytica
18. Klebsiella pneumoniae
2. Aeromonas species 34. Salmonella species
sup, pneumoniae____
3. Achromobacter species 19. Kluyvera cryocrescens 35. Serratia liquefaciens
20. Leclercia
4. Burkholderia cepacia 36. Serratia marcescens
adecarboxylata
5. Citrobacter
21. Morganella morganii 37. Serratia rubidaea
amalonaticus
6. Citrobacter freundii 22. Pantoea agglomerans 38. Staphylococcus aureus
23. Plesiomonas 39. Staphylococcus
7. Citrobacter koseri
shigelloides epidermidis
40. Staphylococcus
8. Cronobacter sakazakii 24. Proteus vulgaris
haemolyticus
41. Staphylococcus
9. Enterobacter aerogenes 25. Proteus mirabilis
lugdunensis
42. Staphylococcus
10. Enterobacter cloacae 26. Providencia rettgeri saprophyticus sub.
saprophyticus
11. Enterobacter 27. Providencia 43. Stenotrophomonas
gergoviae alcalifaciens maltophilia_____
12. Enterococcus durans 28. Providencia stuartii 44. Streptococcus agalactiae
29. Pseudomonas
13. Enterococcus faecalis 45. Streptococcus bovis
aeruginosa
46. Streptococcus
14. Enterococcus faecium 30. Pseudomonas putida
pneumoniae
15. Escherichia coli 31. Pseudomonas species 47. Streptococcus pyogenes
32. Pseudomonas
16. Hafnia alvei
oryzihabitans
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «UR1».
Приготовьте 5 мл бактериальной суспензии в физрастворе со значением мутности 0.5
по МакФарланду из 24-часовой культуры микроорганизмов, выращенной на:
- Для Грам-отрицательных бактерий - агаре МакКонки.
- Для Грам-положительных и неферментирующих бактерий - кровяном агаре без
добавок.
Если проводить культивирование на иной среде, то это приведет к изменению
биохимических характеристик исследуемых микроорганизмов и, как следствие, к ложным
результатам.
4-£р
Ряды лунок А-В и E-F предназначены для идентификации, а ряды C-D и G-H - для
определения бактериальной чувствительности к антибиотикам. Таким образом, на одном
планшете МикроТакс-UR мы можем проводить одновременно идентификацию и
определение бактериальной чувствительности к антибиотикам у двух проб бактериальной
суспензии.
Для идентификации:
- Перенесите полученную суспензию в резервуары 1 и 3 (4-камерной кюветы). Внесите
по 100 мкл суспензии в следующие лунки планшета:
А1 : В12 идентификация 1
E1:F12 идентификация 2
Для определения бактериальной чувствительности к антибиотикам:
^ Для определения Грам-отрицательных бактерий необходимо перемешать 25 мкл
приготовленной суспензии в 5 мл среды МикроТакс-SB.
Для определения Грам-положительных бактерий необходимо перемешать 50 мкл
приготовленной суспензии в 5 мл среды МикроТакс-SB.
Для определения медленнорастущих бактерий (streptococci) необходимо перемешать
100 мкл приготовленной суспензии в 5 мл среды МикроТакс-SB.
- Перенесите полученную суспензию перенесите в резервуары 2 и 4 (4-камерной
кюветы). Внесите по 100 мкл суспензии в следующие лунки планшета:
С1 : D12 определение бактериальной чувствительности к антибиотикам 1
G1 : Н12 определение бактериальной чувствительности к антибиотикам 2
^ Добавьте по 2 капли парафинового масла в следующие лунки:
А 10+11+12,В 10+11,Е 10+11+12,F 10+11
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1Q 11 iJ’
О
Парафиновое масло
Накройте планшет UR специальной перфорированной пленкой, которая прилагается к
набору. Использование перфорированной пленки гарантирует проникновение кислорода,
необходимого для реакций. В то же время газовый обмен между ячейками планшета,
нарушающий протекание реакций, становится невозможным.
Инкубируйте 18-24 часа при 37°С.
По окончании инкубации снимите покрывающую планшет пленку и добавьте по 2
капли реактивов в следующие лунки:
Пептидазный реагент - в лунки А 1+2, В 1+2, Е 1+2, F 1+2.
Индольный реагент - в лунки А 3, Е 3.
1 2 3 4 5 8 7 8 g 10 11 12
Пептидазный реагент
Индольный реагент
Подождите 5-30 минут (не более!) для развития окраски, после чего тщательно
протрите дно лунок планшета фильтровальной бумагой и проведите считывание на
МикроТакс ридере. Для этого войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными»
перейдите в раздел «Считывание». Нажмите «Старт» для начала считывания. Планшеты
Ф
должны быть считаны в тот же день, на следующий день считывание невозможно.
После считывания проведите вычисление результатов. Для этого в программе MCN в
колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Вычисление». Нажмите «Старт» для начала
вычисления. Система МикроТакс выдаст полученные в ходе исследования результаты.
Объяснение результатов
- - отрицательная реакция;
“+” - положительная реакция;
“v” - сомнительны результат.
Схема планшета
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
P- a-
А PROL PYR IND PNPG PGUR GLUF ADOF URE LDC DECO
GLU GAL
a-
В HPR АРРА CHIT PNPX DIP L-ALA MANF TREF ODC ADH MAL
GLU
С PEN АМХ АМС CEC CTX CAZ NOV DOX NOR TRP SXT NIT
D ОХА PIP PIT CFA CPP RPC FOS GEN CIP LEV NFT GC
P- a-
Е PROL PYR IND PNPG PGUR GLUF ADOF URE LDC DECO
GLU GAL
a-
F HPR АРРА CHIT PNPX DIP L-ALA MANF TREF ODC ADH MAL
GLU
G PEN АМХ АМС CEC CTX CAZ NOV DOX NOR TRP SXT NIT
Н ОХА PIP PIT CFA CPP RPC FOS GEN CIP LEV NFT GC
Таблица визуального контроля
Положительная Отрицательная
Реакции Ячейки
реакция реакция
PROL Пролинамидаза А1,Е1
PYR Пираза А2, Е2 Пурпурно Желтый-оранжевый-
HPR Г идроксипролинамидаза B1,F1 красный розовый
APPA Трипептидаза В2, F2
L-ALA L-Аланинаминопептидаза В7, F7 Желтый Бесцветный
IND Индол АЗ,ЕЗ Синевато-серый Розово-красный
MAL Малонат B12,FI2 Сине-зеленый Желто-зеленый
URE Уреаза А10,Е10
LDC Лизиндекарбоксилаза B10,F10
Сине-пурпурный Желто-коричневый
ODC Орнитиндекарбоксилаза АП,Ell
ADH Аргининдегиролаза B1I,F11
DECO Контроль декарбоксилазы А12,Е12 Негативный контроль
a-GLU а-Глюкозидаза В4, F4 Желтый Бесцветный
P-GLU Р-Глюкозидаза А4, Е4
CHIT Хитиназа B3,F3
PNPG р-Нитрофенил-Р-Г алактозидаза А5,Е5
PNPX р-Нитрофенил-Р-Ксилозидаза B5,F5
a-GAL а-Г алактозидаза А6, Е6
DIP Фосфодиэстераза В6, F6
р-Нитрофенил-Р-
PGUR А7, Е7
Г люкуронидаза
GLUF Глюкоза А8,С8
MANF Маноза В8, D8
Желтый Сине-зеленый
ADOF Адонит А9, С9
TREF Трегалоза В9, D9
NOV Новобиоцин С7, G7
АМХ Амоксицилин С2, G2
Рост Нет роста
RPC Квинупристин-Дальфопристин D6, Н6
GC Контроль роста D12, Н12
7.11. МикроТакс-АМ
Планшеты МикроТакс-АМ (1, 2 или 4 теста/планшет, 2 контроля) используется для
определения антимикотической чувствительности дрожжей и криптококков за 24-48 часов.
Всего насчитывается два типа планшет МикроТакс-АМ:
1) МикроТакс-АМ КН2 - для определения чувствительности дрожжей и криптококков
к антимикотическим агентам (6 антимикотических агентов в различных концентрациях) за
22-24 часа.
Схема планшета*
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
FCA FCA POS POS VOR VOR CAS CAS FCY FCY АРН АРН
А
4 64 0.5 8 0.5 8 0.5 8 4 64 0.5 8
FCA FCA POS POS VOR VOR CAS CAS FCY FCY АРН АРН
В
2 32 0.25 4 0.25 4 0.25 4 2 32 0.25 4
FCA POS POS VOR VOR CAS CAS FCY FCY АРН АРН
С NGC
16 0.125 2 0.125 2 0.125 2 1 16 0.125 2
FCA POS POS VOR VOR CAS CAS FCY FCY АРН АРН
D GC
8 0.0625 1 0.0625 1 0.0625 1 0.5 8 0.0625 1
FCA FCA POS POS VOR VOR CAS CAS FCY FCY АРН АРН
Е
4 64 0.5 8 0.5 8 0.5 8 4 64 0.5 8
FCA FCA POS POS VOR VOR CAS CAS FCY FCY АРН АРН
F
2 32 0.25 4 0.25 4 0.25 4 2 32 0.25 4
FCA POS POS VOR VOR CAS CAS FCY FCY АРН АРН
G NGC
16 0.125 2 0.125 2 0.125 2 1 16 0.125 2
FCA POS POS VOR VOR CAS CAS FCY FCY АРН АРН
Н GC
8 0.0625 1 0.0625 1 0.0625 1 0.5 8 0.0625 1
| | | Аббреви | атура | Полное название | антимикробного аг | ента | | | |
| | | FCY | | 5-Флуороцитозин | | | | | |
| | | АРН | | Амфотерицин В | | | | | |
| | | CAS | | Каспофунгин | | | | | |
| | | FCA | | Флуконазол | | | | | |
| | | NGC | | Негативный контр | оль | | | | |
| | | POS | | Позаконазол | | | | | |
| | | VOR | | Вориконазол | | | | | |
| | | GC | | Контроль роста | | | | | |
| | 2) | МикроТ | акс-АМ | MIC - для о | пределения чувств | ительн | ости д | рожже | й и |
| к | риптококко | в к анти | микотич | еским агентам (9 | антимикотических | агент | ов в | различ | ных |
| к | онцентраци | ях) за 22-2 | 4 часа. | | | | | | |
| | | | | Схема п | ланшета* | | | | |
| ■ | 1 | 2 | 3 | 4 .л-5-' | 6 7 8 | 9 | 10 i | 11 | 12 |
| А | GC | АРН | АРН | АРН АРН А | РН APH APH | APH | APH | APH | ITR |
| | | 0.03125 | 0.0625 | 0.125 0.25 | 0.5 1 2 | 4 | 8 | 16 | 4 |
| | | FCY | FCY | FCY FCY F | CY | | | | |
| В | NGC | | | | FCY FCY | FCY | FCY | FCY | ITR |
| | | 0.0625 | 0.125 | 0.25 0.5 | 1 2 4 | 8 | 16 | 32 | 2 |
| | КЕТ | КЕТ | КЕТ | КЕТ КЕТ К | ЕТ KET KET | KET | KET | KET | ITR |
| С | | | | | | | | | |
| | 0.007813 | 0.015625 | 0.03125 | 0.0625 0.125 0 | .25 0.5 1 | 2 | 4 | 8 | 1 |
| | FCA | FCA | FCA | FCA FCA F | CA FCA FCA | FCA | FCA | FCA | ITR |
| D | | | | | | | | | |
| | 0.125 | 0.25 | 0.5 | 1 2 | 4 8 16 | 32 | 64 | 128 | 0.5 |
| | VOR | VOR | VOR | VOR VOR V | OR VOR VOR | VOR | VOR | VOR | ITR |
| Е | | | | | | | | | |
| | 0.015625 | 0.03125 | 0.0625 | 0.125 0.25 | 0.5 1 2 | 4 | 8 | 16 | 0.25 |
| | POS | POS | POS | POS PCS P | OS POS POS | POS | POS | POS | ITR |
| F | | | | | | | | | |
| | 0.015625 | 0.03125 | 0.0625 | 0.125 0.25 | 0.5 1 2 | 4 | 8 | 16 | 0.125 |
| | ANF | ANF | ANF | ANF ANF A | NF ANF ANF | ANF | ANF | ANF | ITR |
| G | | | | | | | | | |
| | 0.015625 | 0.03125 | 0.0625 | 0.125 0.25 | 0.5 1 2 | 4 | 8 | 16 | 0.0625 |
| | CAS | CAS | CAS | CAS CAS C | AS CAS CAS | CAS | CAS | CAS | ITR |
| Н | | | | | | | | | |
| | 0.015625 | 0.03125 | 0.0625 | 0.125 0.25 | 0.5 1 2 | 4 | 8 | 16 | 0.03125 |
| | ^Конце | нтрация ан | тибиоти | ков указана в мкг/ | мл | | | | |
| | | | | Обозн | ачения | | | | |
| | | Аббреви | атура | Полное название | антимикробного аг | ента | | | |
| | | ANF | | Анидулафунгин | | | | | |
| | | APH | | Амфотерицин В | | | | | |
| | | CAS | | Каспофунгин | | | | | |
| | | FCA | | Флуконазол | | | | | |
| | | FCY | | 5 -Флуороцитозин | | | | | |
| | | ITR | | Итраконазол | | | | | |
| | | KET | | Кетоконазол | | | | | |
| | | POS | | Позаконазол | | | | | |
| | | VOR | | Вориконазол | | | | | |
| | | NGC | | Негативный контр | оль | | | | |
| | | GC | | Контроль роста | | | | | |
Обозначения
9
Для всех типов планшет МикроТакс-АМ применяется одна схема работы.
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «R6».
Приготовьте суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов, выращенной строго
на агаре Сабуро с 2% глюкозой. Если проводить культивирование на иной среде, то это
приведет к изменению биохимических характеристик исследуемых микроорганизмов и, как
следствие, к ложным результатам.
Суспензию со значением мутности 0.5 по Макфарланду необходимо приготовить в 4 мл
физраствора. Перемешать 200 мкл полученной суспензии с 4 мл физраствора. Приготовление
суспензии для засева:
1) Суспензия Дрожжей: перемешать 200 мкл полученной предварительно
суспензии с 11 мл среды RPMI (с добавлением 50 мкл индикатора AST и 50 мкл метиленового
синего).
2) Суспензия Криптококков: перемешать 2000 мкл полученной предварительно
суспензии с 11 мл среды RPMI (с добавлением 50 мкл индикатора AST и 50 мкл метиленового
синего).
Полученную суспензию перенесите в 1, 2 или 4-камерную кювету.
Внесите по 100 мкл суспензии в следующие лунки планшета:
А1 : В12 определение 1
С1 : D12 определение 2
Е1 : F12 определение 3
G1 : Н12 определение 4
Накройте планшет МикроТакс-АМ специальной неперфорированной пленкой, которая
прилагается к набору (не ставьте покрытые пленкой планшеты друг на друга).
Инкубируйте 24-48 часов при 37°С. По окончании инкубирования снимите с планшета
покровную пленку, тщательно протрите дно лунок планшета фильтровальной бумагой и
проведите считывание на МикроТакс ридере. Для этого войдите в программу MCN. В колонке
«Работа с данными» перейдите в раздел «Считывание». Нажмите «Старт» для начала
считывания. Планшеты должны быть считаны в тот же день, на следующий день считывание
невозможно. После считывания проведите вычисление результатов. Для этого в программе
MCN в колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Вычисление». Нажмите «Старт» для
начала вычисления. Система МикроТакс вьщаст полученные в ходе исследования результаты.
7,12, MIC-стрипы.
MIC-стрипы используются для определения минимальной ингибирующей концентрации
за 18-48 часов в зависимости от типа бактерий.
Всего насчитывается четыре основных типа М1С-стрипов:
1) М1С-стрип ESBL II (1 контроль) - фенотипический подтверждающий тест для
детекции ESBL (расширенного спектра Р-лактамазы), которая продуцируется
энтеробактериями.
2)
1 2 3 4 5' ■/: Т.::7 8 9 10 11 12
СЕРО/ СЕРО/ СЕРО/ СЕРО/ СЕРО/
СЕРО СЕРО СЕРО СЕРО СЕРО СЕРО
GC CLAV CLAV CLAV CLAV CLAV
2 4 8 16 32 64
0.25/4 0.5/4 1/4 2/4 4/4
Аббревиатура Полное название антимикробного агента
СЕРО Цефпоксидим
CLAV Клавулановая кислота
GC Контроль роста
3) МТС-стрип MRSA (1 контроль) - фенотипический подтверждающий тест для
детекции метициллин-резистентных стафилококков.
1 2 3 4 5 6 ' 7 8 9 10 11 12
CEXI CEXI CEXI ОХА ОХА ОХА ОХА ОХА ОХА ОХА ОХА
GC
2 4 8 0.25 0.5 1 2 4 8 16 32
Аббревиатура Полное название антимикробного агента
CEXI Цефокситин
ОХА Оксациллин
GC Контроль роста
4) М1С-стрип PEN (1 контроль) - фенотипический подтверждающий тест для детекции
резистентности к пенициллину у пенициллин-устойчивых изолятов стрептококков и
пневмококков.
. ЛЖ:: 2 . . .■■■■ з.-- 4 5. ■■ 6 ' ■ 7:"--: 8 9 10 11 12
PEN PEN PEN PEN PEN PEN PEN PEN PEN PEN PEN
GC
0.03125 0.0625 0.125 0.25 0.5 1 2 4 8 16 32
Аббревиатура Полное название антимикробного агента
PEN Пенициллин
GC Контроль роста
4) М1С-стрип VAN (1 контроль) - фенотипический подтверждающий тест для
детекции ванкомицин-резистентных Грам-положительных бактерий.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
VAN VAN VAN VAN VAN VAN VAN VAN VAN VAN VAN
GC
0.0625 0.125 0.25 0.5 1 2 4 8 16 32 64
Аббревиатура Полное название антимикробного агента
VAN Ванкомицин
GC Контроль роста
Помимо указанных типов по требованию Заказчика могут быть изготовлены MIC-
стрипы для определения минимальной ингибирующей концентрации других антибиотиков к
соответствующим микроорганизмам.
Для всех типов М1С-стрипов применяется одна схема работы.
Войдите в программу MCN. В колонке «Работа с данными» перейдите в раздел «Ввод и
правка образцов», в котором введите номер образца. Внизу укажите тип теста «Rx» («Нх»- для
медленнорастущих бактерий).
Достаньте М1С-стрип из упаковки и поместите его в специальную рамку.
Приготовьте бактериальную суспензию из 24-часовой культуры микроорганизмов,
выращенной строго на кровяном агаре без добавок. Если проводить культивирование на иной
среде, то это приведет к изменению биохимических характеристик исследуемых
микроорганизмов и, как следствие, к ложным результатам.
Необходимо приготовить суспензию со значением мутности 0.5 по Макфарланду в 5 мл
физраствора.
Для определения анаэробных бактерий необходимо перемешать 200 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл реактива Wilkins-Chalgren (с добавкой НАД).
Для определения Грам-отрицательных бактерий необходимо перемешать 50 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл бульона Мюллера-Хинтона II.
Для определения Грам-положительных бактерий необходимо перемешать 100 мкл
приготовленной суспензии в 11 мл бульона Мюллера-Хинтона II.
Для определения медленнорастущих бактерий (streptococci, соппе-бактерии,
Haemophilus, Neisseria) необходимо перемешать 200 мкл приготовленной суспензии в 11 мл Н-
бульона (H-broth).
Для определения медленнорастущих неферментирующих бактерий (CF-штаммы)
необходимо перемешать 50 мкл приготовленной суспензии в 11 мл Н-бульона (H-broth).
Внесите по 100 мкл суспензии во все лунки стрипа;
Накройте М1С-стрип крышкой, которая прилагается к набору.
Инкубируйте при 37°С:
- 18-24 часа - при определении аэробных бактерий;
- 22-24 часа - при определении медленнорастущих бактерий (при необходимости они
инкубируются в обогащенной СОг-атмосфере).
- 24-48 часов - при определении анаэробных бактерий (в анаэробных условиях).
По окончании инкубирования снимите с планшета покровную пленку, тщательно
протрите дно лунок стрипа фильтровальной бумагой и проведите визуальную оценку опыта.
Мутность в лунке = наличие бактериального роста = положительный результат.
Отсутствие мутности в лунке = отсутствие бактериального роста = отрицательный
результат.
Контрольная лунка должна изменить цвет с синего на розовый (т.е. должен быть
бактериальный рост). В противном случае тест должен быть повторен.
Задокументируйте результаты теста.
О
Ф