Среды питательные микробиологические (см. Приложение на 5 листах) — инструкция и характеристики

РУ: ФСЗ 2007/00435 от 11.10.2007 · класс риска 1

Производитель: Мерк КГаА (Германия)

Вид изделия: Питательный бульон базовый/простой питательная среда ИВД · Антимикробная добавка к питательным средам ИВД · Агар Мюллера-Хинтона питательная среда чувствительность к антимикробным препаратам ИВД, с овечьей кровью

В госконтрактах 44-ФЗ: 4 контракта.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

«УТВЕРЖДАЮ»
Глава Представительства
фирмы «МЕРК КГаА»
по
ИНСТРУКЦИЯ ПРИМЕНЕНИЮ
Среды питательные микробиологические,
производства
Merck KGaA, Германия
Среда Cult-Dip plus-Merck с флюорогенным субстратом для
ориентировочного бактериологического анализа мочи -
Cult-Dip
plus-Merck dip culture media with fluorogenic substrate for orientative
bacteriological urinanalysis,
Готовая среда на тест-пластинах: Кат.№ 1.00777.0001
Упаковка: 10 шт/уп
Способ применения: Дипслайд Cult-Dip plus-Merck - представляют собой тест-
пластину с нанесенной питательной средой. Дипслайд Cult-Dip plus-Merck
предназначен для проведения бактериологического скрининг-теста при выявлении
возбудителей инфекций мочеиспускательного канала. В качестве питательной
среды используется BROLACIN агар с добавлением флюорогенного субстрата MUG
(метил-умбелиферил-глюкоуронид), а также MacCONKEY агар с флюорогенным
субстратом MUG. Клетки Е. соН флуоресцируют при освещении УФ-светом с длиной
волны 336 нм. Посев осуществляется погружением дипслайда в исследуемый
образец мочи. Колонии бактерий могут быть лересеяны с дипслайда на питательные
среды для определения чувствительности к антибиотикам, микроскопии и
идентификации.
Образцы мочи: Способ сбора мочи влияет на результаты анализа. Для анализа
необходимо использовать средние порции утренней мочи. Не следует держать
отобранные образцы мочи при комнатной температуре свыше 1 часа, поскольку это
способствует размножению бактерий и искажает результаты анализа.
Состав среды: Одна сторона дипслайда содержит BROLACIN-arap (среда зелено­
голубого цвета) с флюоргенным субстратом MUG, другая сторона: MacCONKEY агар
(среда красно-коричневого цвета) с хромогенным субстратом MUG.
Ход исследования. Мочу собирают в стерильный контейнер. Дипслайд погружают в
образец мочи на 3-5 секунд. Дипслайд вынимают, оставшиеся капли удаляют
фильтровальной бумагой. Вставляют дипслайд в пенал, закрывают и маркируют.
Сразу после этого образец инкубируют в термостате при 37 °С в течение 16-24 ч.
Оценка результатов.
А) Подсчет бактерий на BROl_ACIN-arape.
Если численность бактерий превышает 100000 кл/мл, то диагностируют инфекцию
мочеиспускательного канала. Численность колоний ориентировочно определяют,
сравнивая результаты на BROLACIN-arape с рис. 1-5. Если их численность в
пределах 10000-100000 кл/мл, то образец анализирует повторно.
Результаты:
б) Ориентировочная идентификация.
На BROLACIN-arape вырастают как грамположительные, так и грамотрицательные
бактерии.
На MacCONKEY-arape вырастают энтеробактерии и грамотрицательные бактерии.
Рост грамположительных бактерий подавлен.
Если какое-то количество бактерий выросло на обеих сторонах дипслайда, то это
- грам-отрицательные бактерии.
Если обильный рост бактерий отмечен только на BROLACIN агаре, но
незначителен или отсутствует на MacCONKEY агаре, то это свидетельствует о
наличии в анализируемом образце грам-положительных бактерий.
BROLACIN-arap:
Бактерии, разлагающие лактозу (среда меняет цвет с зелено-голубого на желтый,
колонии желтые): Е. соИ, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, Enterococci,
Staphylococci.
Бактерии, не разлагающие лактозу (среда остается зелено-голубой, колонии
бесцветные); Proteus, Providencia, Ps. aeruginoginosa. Candida albicans (дрожжи).
MacCONKEY-агар;
Бактерии, разлагающие лактозу (среда и колонии красные): Е. соИ, Enterobacter,
Klebsiella.
Бактерии не разлагающие лактозу (среда желто-розовая, колонии кажутся
бесцветными): Proteus, Providencia, Ps. Aeruginosa.
с) Предварительная идентификация Е. соИ
MUG, который содержится в средах дипслайда, взаимодействует с ферментом (3.-D-
глюкоуронидазой. В семействе энтеробактерий B-D-глюкоуронидазная активность
характерна для Е. соН. 94% всех штаммов Е. соН обладают этим ферментом. Для
сравнения: только отдельные штаммы Salmonella и Shigella обладают подобным
свойством.
4-метил-умбеллиферон - это продукт реакции с ß-D-глюкоуронидазой, определяется
при облучении дипслайда УФ-светом 366 нм лосле инкубации (16-24 ч) при 37°С.
При низком числе бактерий флуоресценция проявляется как «ореол колонии», но,
как правило, вся культуральная среда полностью флуоресцирует. Флуоресценция
всегда должна оцениваться параллельно с отрицательным контролем (например, на
дипслайде без посева образца).
Считается, что Е. coli присутствуют, когда выявляется примерно одинаковое
количество бактерий, разлагающих лактозу и флуоресцирующих.
Сразу же после окончания инкубирования дипслайдов рекомендуется все
содержащие мочу образцы обработать антимикробным веществом. Это позволит
точнее оценить количество колоний.
Обеззараживание. Дипслайды в течение 6 ч выдерживаются в дезинфицирующем
растворе. Их можно также автоклавировать.
Агар Левина для выделения и дифференциации Е. соМ и
Enterobacter - Levine-EMB-agar for the isolation and differentiation of E.coli
and Enterobacter
Кат.№ 1.01342.0500
Упаковка - 500 г
Для выделения и дифференциации Е. соМ и энтеробактерий и для быстрого
определения Candida albicans, разработана Levine (1918,1921).
Согласовано с рекомендациями АРМА по исследованию воды и сточных вод
(1998) и USP XXIII (1995).
Принцип действия
Красители, содержащиеся в этой среде, подавляют рост многих сопутствующих
грамположительных бактерий. По мнению Weld (1952,1953), Vogel и Moses (1957)
агар Левина может быть использован для определения Candida albicans в
клинических материалах, если добавить в него тетрациклин-гидрохлорида для
подавления сопутствующей микрофлоры. Агар Левина также пригоден для
определения коагулазоположительных стафилококков, которые образуют
характерные точечные колонии. Характер роста коагулазоположительных
стафилококков на агаре коррелирует с результатами анализа колоний на коагулазу.
Состав (г/л)
Пептон 10,0; лактоза 10,0; калий фосфорнокислый двузамещенный 2,0; азур-эозин
0,4; метиленовый синий 0,065; агар-агар 13,5.
Приготовление
Растворить 36 г/л воды, автоклавировать 15 мин при 121°С, разлить в чашки.
pH 7,0±0,2 при 25°С.
Чашки прозрачные, цвет среды красно-коричневый.
При культивировании Candida необходимо добавить 100 мг тетрациклина
гидрохлорида на 1 л среды после автоклавирования и тщательно перемешать.
Питательная среда в этом случае становится синей.
Проведение анализа
Исследуемый материал распределяют тонко по поверхности среды в чашках.
Инкубация 1-2 дня при 35°С аэробно. Для получения первичных колоний Candida
посев необходимо инкубировать на среде с тетрациклин-гидрохлоридом в
атмосфере 10% СОг т.е. в Anaerocult®C или Anaerocult®C мини.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Диаметр 2-3 мм, зеленый металлический блеск в Escherichia coli
отраженном свете, темный или очень темный
центр в проходящем свете
Диаметр 4-6 мм, серо-коричневый центр в Enterobacter
проходящем свете без металлического блеска
Прозрачные, янтарно-окрашенные Salmonella и Shigella
Бесцветные, точечные колонии Коагулазоположительные
стафилококки
Паутинообразные Candida albicans
Дрожжеподобные, круглые, гладкие Другие виды Candida, иногда
Nocardia
Контроль качества
Тест-штаммы Колонии
Рост Синий Металлический
оттенок
Escherichia coli АТСС 25922 хороший / очень + +
хороший
Escherichia coli АТСС 11775 хороший / очень + +
хороший
Escherichia coli 194 хороший / очень + +
хороший
Enterobacter cloacae АТСС хороший / очень бледно-синий
-
13047 хороший
Shigella sonnei ATCC 11060 хороший / очень -
-
хороший
Salmonella typhimurium ATCC хороший / очень
- -
14028 хороший
Proteus mirabilis ATCC 14273 хороший / очень - -
хороший
Staphylococcus aureus ATCC роста нет / слабый
- -
25923
ар EMB для выделения и определения патогенных
iterobacteriaceae -
ЕМВ Agar for the detection and isolation of pathogenic
fterobacteriaceae
Кат.№ 1.01347.0500
Упаковка - 500 г
лективный агар для обнаружения и выделения патогенных энтеробактерий,
едложенная Holt-Harris и Teague (1916).
1ИНЦИП действия
ктоза и сахароза, присутствующие в этой среде, позволяют отличить лактозо- и
карозоотрицательные сальмонеллы и шигеллы от лактозоположительных
пиформных микроорганизмов и лактозоотрицательной сахарозоположительной
путствующей флоры (т.е. Proteus vulgaris, Citrobacter, Aeromonas hydrophila). Рост
желательных сопутствующих микроорганизмов, в частности, грамположительных,
давляется красителями, присутствующими в среде.
)став (г/л)
АПТОНЫ 10,0: калий фосфорнокислый двузамещенный 2,0; лактоза 5,0; эозин Y,
;лтый 0,4; метиленовая синь 0,07; агар-агар. 13,5.
зиготовление
ютворить 36 г/л воды, автоклавировать 15 мин при 121°С, разлить в чашки.
17,1±0,2 при 5°С.
зеда в чашках прозрачная, красновато-коричневая или фиолетово-коричневая .
эоведение анализа
эеду инокулируют тонким слоем, поверхностно. Инкубируют 24 ч при 35°С аэробно.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
розрачные с окрашенным краем Salmonella, Shigella
эленоватый металлический блеск в Escherichia coli
граженном свете, синевато-черный центр
проходящем свете
элонии более крупные, чем Е. coli, Enterobacter, Klebsiella и другие
укоидные, сливающиеся, с серо-
зричневым центром в проходящем свете
Тест-штаммы Рост Цвет колоний Металлич.
блеск
Escherichia coli АТСС 25922 хороший / очень хороший фиолетовый +
Escherichia coli АТСС11775 хороший / очень хороший фиолетовый +
Escherichia coli 194 хороший / очень хороший фиолетовый +
Escherichia coli ATCC 23716 хороший / очень хороший фиолетовый +
Escherichia coli ATCC 8739 хороший / очень хороший фиолетовый +
Enterobacter cloacae ATCC средний / очень хороший розовый, темный + /-
13047 центр
Salmonella typhimurium ATCC хороший / очень хороший бесцветный,
-
14028 прозрачный
Shigella flexneri ATCC 12022 хороший / очень хороший бесцветный,
-
прозрачный
Bacillus cereus ATCC 11778 роста нет / слабый -
BROLACIN агар (CLED-агар) для подсчета, выделения и первичной
идентификации микроорганизмов -
BROLACIN agar (C.L.E.D. agar) for
* the enumeration, isolation and preliminary identification of microorganisms)
j Кат.№ 1.01638.0500
^ Упаковка - 500 г
Для выделения, первичной идентификации и учета микроорганизмов в моче.
Принцип действия
Питательная среда обеспечивает рост микроорганизмов, обнаруживаемых в моче.
CLED-arap является также превосходной универсальной средой благодаря широкому
спектру питательных веществ, отсутствию ингибиторов. CLED-arap позволяет в
определенной степени проводить дифференциацию колоний. Входящая в ее состав
лактоза, распадаясь с образованием кислоты, изменяет цвет бромтимолового синего на
желтый. Подщелачивание среды приводит к образованию темно-синего окрашивания.
Отсутствие электролитов предупреждает роение Proteus.
Состав (г/л)
Пептоны 7,0; дрожжевой экстракт 2,0; мясной экстракт 2,0; а-цистин 0,128; лактоза 10,0;
бромтимоловый синий 0,03; агар-агар 12,0.
Приготовление
Растворить 33 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в
течение 20-30 минут; автоклавировать 15 мин при 121°С, pH 7,3±0,2 при 25°С.
Среда прозрачная, синевато-зеленого цвета.
Проведение анализа
Питательная среда инокулируется поверхностным способом (до 1 мл) исследуемым
материалом или его разведением. Инкубируют 24 ч при 35°С анаэробно.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Крупные, золотисто-желтые, окружающая Escherichia coli, лактоза-положительные
среда желтого цвета Citrobacter и другие
Крупные. Золотисто-желтые, обычно Enterobacter, Klebsiella и другие
слизистые, среда вокруг них желтая
Крупные, бесцветные, среда вокруг них Proteus, Serratia и другие
голубая
Крупные, с коричневатым цветом, среда Pseudomonas
вокруг них голубая
Бледно-желтые, мелкие, непрозрачные Streptococci
Темно-желтые, очень мелкие, непрозрачные Staphylococci
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм, Обнаружение Изменение Роение
КОЕ/МЛ цвета
Escherichia coli АТСС 11775 10^-10" >70 жёлтый
Salmonella typhimurium АТСС 13311 10"-10" > 70 синий
Shiqella flexneri АТСС 29903 10^-10® >70 синий
Proteus mirabilis АТСС 29906 10^-10" > 70 синий нет, слабое
Proteus vulgaris АТСС 8427 > 10" >70 синий нет, слабое
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 > 10® >70 синий
Staphylococcus aureus ATCC 6538-P 10^-10® >70 желтый
Селективная добавка для кампилобактер агара -
Campylobacter
Selective Supplement for preparation of 3,21 Campylobacter Selective Agar
Кат.№ 1.02249.0001
Упаковка -16 флаконов/уп
Принцип действия
Селективная добавка для кампилобактера включает смесь трех различных
лиофилизированных антибиотиков. Подавляет рост сопутствующей фекальной флоры
при культивировании кампилобактера.
Состав одного флакона
Ванкомицин 2,0 мг; полимиксин 50,0 мг; триметоприм 1,0 мг
Проведение анализа
Лиофилизат растворяют в оригинальном флаконе, добавляя стерильную
дистиллированную воду (около 2 мл). При изготовлении селективного агара для
кампилобактера растворенное содержимое одного флакона вносят в 200 мл
стерильного, еще жидкого агара, охлажденного до 45-50°С.
Цитратный агар Симмонса для идентификации микроорганизмов -
SIMMONS Citrate Agar for the identification of microorganisms
Кат.№ 1.02501.0500
Упаковка - 500 г
Синтетическая питательная среда Симмонса (1926) используется для идентификации
микроорганизмов (энтеробактерий и некоторых грибов) по их способности к утилизации
цитрата, как единственного источника углерода. Питательная среда соответствует
рекомендациям АРМА по исследованию воды (1998) и анализу пищевых продуктов
(1992). По данным Van Kregten (1984) питательная среда может быть использована для
выявления Klebsiella после добавления к ней инозита.
Принцип действия
Утилизация цитрата приводит к подщелачиванию среды, в результате чего индикатор
бромтимоловый синий становится темно-синим.
Состав (г/л)
Аммоний фосфорнокислый однозамещенный 1,0; калий фосфорнокислый двузамещенный 1,0;
хлористый натрий 5,0; цитрат натрия 2,0; сульфат магния 0,2; бромтимоловый синий 0,08; агар-
агар 13,0.
Приготовление
Растворить 22,5 г/л воды, автоклавировать 15 мин при 121 °С. pH 6,6±0,2 при 25°С. Среда
прозрачная, зеленого цвета.
Приготовление агара для Klebsiella, перед автоклавированием добавить к питательной среде
10 г/л инозита.
Проведение анализа
Исследуемую чистую культуру наносят на агар штрихом.
Рост Микроорганизмы
Положительный; питательная среда Цитрат-положительные
тёмно-синяя Citrobacter
Enterobacter
S. paratyphi В
S. enteritidis
S. typhimurium
Arizona
Kiebsiella
Serratia
Отрицательный или угнетенный Цитрат-отрицател ьн ые:
Escherichia
Shigella
S. typhi
S.parathyphi А
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Синий цвет
Enterobacter cloacae АТСС 13047 хороший / очень хороший +
Salmonella typhimurium АТСС 14028 хороший / очень хороший +
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 хороший / очень хороший +
Escherichia coli ATCC 25922 роста нет / слабый -
Shigella flexneri ATCC 12022 роста нет / слабый -
Morganella morganii ATCC 25830 роста нет / слабый -
Агар Клиглера для идентификации грам-отрицательных бактерий
KLIGLER agar for the identification of Gram-negative intestinal bacteria
Кат.№1.03913.0500
Упаковка - 500 г
Среда предложена для определения энтеропатогенных бактерий Kligler (1917,
1918) и может быть модифицирована добавлением 0,2 % мочевины для
получения железо-мочевинного двухсахарного агара (Bader и Hotz, 1951).
Принцип действия
Распад сахаров и сопровождающее его кислотообразование регистрируется
индикатором pH феноловым красным, который изменяет цвет от красно-оранжевого до
желтого, в щелочной среде - до темно-красного. Некоторые виды бактерий
восстанавливают тиосульфат до сероводорода, который реагирует с ионами железа,
образуя сульфид железа черного цвета.
Состав (г/л)
Пептон из казеина 15,0; мясной пептон 5,0; мясной экстракт 3,0; дрожжевой экстракт
3,0; хлорид натрия 5,0; лактоза 10,0; глюкоза 1,0; цитрат аммонийного железа 0,5;
тиосульфат натрия 0,5; феноловый красный 0,024; агар-агар 12,0.
Приготовление
Растворить 55 г среды на 1 литр дистиллированной воды, распределить по пробиркам,
автоклавировать 15 мин при 121°С. Приготовить скошенную среду с высоким
столбиком. Среда прозрачная, красного цвета.
pH 7,4±0,2 при 25 °С.
Проведение анализа
Засеять исследуемую чистую культуру штрихом по поверхности скошенной среды и
затем уколом по центру столбика в его толщу в той же пробирке.
Инкубировать до 48 ч при 35°С. Среда Клиглера может быть модифицирована по Bader
и Hotz (1951) добавлением 0,2 % мочевины.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Цвет столбика Цвет
скошенной
поверхности
Escherichia coli АТСС 25922 очень хороший желтый желтый
Citrobacter freundii АТСС 8090 очень хороший желтый и черный желтый
Enterobacter cloacae АТСС 13047 очень хороший желтый желтый
Shigella flexneri АТСС 12022 очень хороший желтый красный
Salmonella typhimurium АТСС 14028 очень хороший желтый и черный красный
Salmonella enteritidis ATCC 13076 очень хороший желтый и черный красный
Proteus mirabilis АТСС 14153 очень хороший желтый красный
Proteus vulgaris АТСС 13315 очень хороший желтый и черный красный
Висмут-сульфитный агар Вильсона Блэра для выделения и
'у
идентификации Salmonella typhi -
Bismuth sulfite agar acc. to WILSON-
BLAIR for the isolation and différentiation of Salmonella typhi
Кат.№ 1.05418.0500
Упаковка - 500 г
Селективный агар для выделения и дифференциации сальмонелл, в частности,
Salmonella typhi из клинического материала. Среда предложена Вильсоном и
Блером (1927, 1931).
Состав среды соответствует рекомендациям Американской Фармакопеи USP XXIII
(1995), ЕР и АРМА (1992) по исследованию продуктов.
Принцип действия
Бриллиантовый зеленый и висмут сульфит значительно ингибируют рост
сопутствующей микрофлоры. Колонии сальмонелл, образующие сероводород, чернеют
вследствие образования сульфида железа. Восстановление ионов висмута до
металлического висмута приводит к образованию металлического блеска вокруг
колоний.
Состав (г/л)
Мясной экстракт 5,0; пептон из мяса 10,0; глюкоза 5,0; гидрофосфат натрия 4,0;
сульфат железа (III) 0,3; бриллиантовый зеленый 0,025; висмут сульфит 8,0; агар-агар
15,0.
Приготовление
Растворить 47,5 г среды в 1 литре дистиллированной воды, образовавшийся осадок
размешать, чтобы получить равномерную суспензию, разлить в чашки толстым слоем
(25 мл).
Среда не подлежит автоклавированию.
pH 7,6±0,2 при 25°С.
Готовая среда мутная, зеленого цвета.
Свежеприготовленная среда обладает сильно ингибирующим эффектом и поэтому
особенно удобна для анализа сильно контаминированных образцов. Металлический
блеск колоний обычно проявляется только после 48 часов инкубации.
После хранения чашек при 4°С в течение 4 дней ингибирующие свойства среды
ослабевают, и она становится пригодной для анализа менее контаминированных
объектов. В этом случае металлический блеск проявляется быстрее.
Проведение анализа
Материал из накопительной среды переносят тонким слоем на поверхность чашек.
Инкубируют до 48 ч при 35°С в аэробных условиях. Обычно колонии сальмонелл
чернеют через 18 ч, металлический блеск появляется несколькими часами позже, в
зависимости от срока хранения среды с момента ее приготовления.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Черный центр, светлый край, окруженный Salmonella (за исключением
преципитатом черного цвета с металлическим S.paratyphi и S.pullorum)
блеском
Мелкие, окрашенные в цвет от зеленого до Колиформные бактерии,
коричневого, иногда мукоидные Serratia, Proteus и др.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Черный Металлический
центр блеск
Salmonella typhimurium АТСС 14028 хороший + +
Salmonella choleraesius АТСС 13312 хороший + +
Salmonella enteritidis NCTC 5188 хороший + +
Salmonella arizonae ATCC 13314 хороший + +
Salmonella aboni NCTC 6017 хороший + +
Escherichia coli ATCC 25922 слабый
- -
Proteus mirabilis ATCC 29906 хороший ± -
Shigella sonnei ATCC 11060 роста нет
Staphylococcus aureus ATCC 25923 роста нет
Bacillus cereus ATCC 11778 роста нет
Агар Мюллер-Хинтон в соответствии со стандартом CLSI ,
определения чувствительности к антибиотикам -
MUELLER-HINJ<
agar асе. to CLSI for the determination of antibiotic susceptibility including
sulfonamides
I
Кат.№ 1.05435.0500
Упаковка - 500 г
Для испытания чувствительности микроорганизмов к антибиотикам и
сульфамидам методом диффузии в агар. Среда соответствует требованиям
Национального комитета по стандартам в клинических лабораториях (National
Committee for Clinical Laboratory Standards - NCCLS).
Принцип действия
Среда содержит в себе в малых концентрациях тимин, тимидин и в необходимых
количествах ионы кальция и магния.
Концентрации тимина и тимидина определяются дисковым методом диффузии с
триметопримом и сульфометоксазолом и Enterococcus faecalis АТСС 29212.
Концентрации кальция и/или магния определяются по зонам с аминогликозидными
антибиотиками и Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853.
Состав (г/л)
Мясной отвар 2,0; гидролизат казеина 17,5; крахмал 1,5; агар-агар 17,0.
Приготовление
Растворить 38 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в
течение 20-30 минут. Автоклавировать 15 мин при 121°С. Если необходимо, охладить
до 45-50 °С и добавить 5-10 % дефибринированной крови.
pH 7,3±0,2 при 25 °С.
Без крови среда прозрачна или опалесцирует, желтовато-коричневая.
f
Проведение анализа
Выполняют тест на чувствительность в соответствии с инструкциями NCCLS.
Инкубация 24 ч при 35 °С в аэробных условиях.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Соответствие диаметра
зон описанию
Escherichia coli АТСС 25922 хороший / очень +
хороший
Staphylococcus aureus АТСС 25923 хороший / очень +
хороший
Pseudomonas aeruginosa АТСС хороший / очень +
27853 хороший
Enterococcus faecalis АТСС 29212 хороший / очень +
хороший
Агар Мюллера-Хинтона для тестирования клинически-значимых
патогенов -
MUELLER-HINTON agar for testing the sensitivity of clinically
important pathogens
Кат.№1.05437.0500
Упаковка - 500 г
Среда предложена Мюллером и Хинтоном (1941) для оценки чувствительности
клинически важных патогенных микроорганизмов к антибиотикам и
сульфамидным препаратам. Среда соответствует требованиям ВОЗ и DIN Norm
58930.
Принцип действия
Состав среды обеспечивает благоприятные условия роста и не включает в себя
вещества, разрушающие сульфамидные препараты.
Улучшение условий роста чувствительных микроорганизмов достигается добавлением
к агару крови. Однако, по мнению Jenkins (1985) это может привести к ошибкам при
оценке чувствительности энтерококков к аминогликозидам.
Состав (г/л)
Мясной отвар 2,0: гидролизат казеина 17,5; крахмал 1,5; агар-агар 13,0.
Приготовление
Растворить 34,0 г среды растворить в 1 литре дистиллированной воды, дать среде
набухнуть в течение 20-30 минут. Автоклавировать в мягких условиях (10 мин при
115°С). При необходимости охладить до 45-50°С и добавить 10% дефибринированной
крови.
pH 7,4 ± 0,2 при 25 °С.
Без крови среда прозрачна или опалесцирующая, желтовато-коричневого цвета.
Проведение анализа
Выполняют тест на чувствительность или резистентность по прописям. Инкубация 24 ч
при 35°С аэробно.
Контроль качества
Тест-диски Диаметр зон отсутствия роста, мм по ВОЗ
Е. coli Staph, aureus Pseud. Enteroc. faecalis
АТСС 25922 АТСС 25923 aeruginosa АТСС АТСС 33186
27853
Ампициллин 10 мг 15-20 24-35
- -
Тетрациклин 30 мг 18-25 19-28
- -
Гентамицин 10 мг 19-26 19-27 16-21
-
Полимиксин В 300 ИЕ 12-16 7-13
- -
Сульфаметоксазол 1,25 мг + 24-32 24-32 16-23
-
Триметоприм 23.75 мг
Анаэробный агар по Бруэру для культивирования на поверхности
клостридий и других микроорганизмов -
Anaérobie Адаг асе. to BREWER
for the surface cultivation of clostridia and other microorganisms
Кат.№ 1.05452.0500
Упаковка - 500 г
Для поверхностного культивирования клостридий и других анаэробных
микроорганизмов по Бруэру (1940, 1942).
Принцип действия
Среда содержит ряд редуцирующих веществ (тиогликолят, формальдегид-
сульфоксилат, цистин), обеспечивающих анаэробиозис. Редокс-инд и катером служит
метиленовая синь, бесцветная в анаэробных условиях.
Состав (г/л)
Казеиновый пептон 10,0; соевый пептон 5,0; дрожжевой экстракт 5,0; L-цистин 0,4;
глюкоза 10,0; хлористый натрий 5,0; тиогликолят натрия 2,0; формальдегид
сульфоксилат натрия 1,0; метиленовая синь 0,002; агар-агар 12,6.
Приготовление
Растворить 51 г/л, автоклавировать 15 мин при 121 °С , разлить в чашки толстым
слоем.
pH 7,2±0,2 при 25 °С .
Среда прозрачная, светло-зеленая.
Проведение анализа
Инокулируют питательную среду. Для идентификации спорообразующих
микроорганизмов исследуемый материал вводят при температуре 80-100°С. Инкубация
до 48 ч при 35°С в анаэробных условиях, т.е. Anaerocult® А, Anaerocult® Р, Anaerocult® А
мини.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост
Clostridium tetani АТСС 19406 средний
Clostridium botulinum хороший / очень хороший
Clostridium perfringens ATCC 10543 хороший / очень хороший
Clostridium putrificum ATCC 25784 хороший / очень хороший
Clostridium septicum ATCC 12464 хороший / очень хороший
Clostridium novyi 1795 хороший / очень хороший
Staphylococcus aureus ATCC 25923 средний / очень хороший
Escherichia coli ATCC 25922 хороший / очень хороший
Агар Мак-Конки для выделения Salmonella, Shigella и колиформных
бактерий -
MacCONKEY agar for the isolation of Salmonella, Shigella and
conform bacteria (acc. harm.EP/USP/JP)
Кат.№1.05465.0500; упаковка - 500 г;
Кат.№1.05465.5000; упаковка - 5000 г
Селективная среда для выделения сальмонелл, шигелл, колиформных бактерий
из фекалий, мочи, пищевых продуктов, сточных вод по МакКонки (1950). Состав
среды полностью соответствует рекомендациям USP XXIII (1995) и Европейской
фармакопеи ЕР II.
Принцип действия
Соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый значительно подавляют рост
грамположительной микрофлоры. Лактоза и индикатор нейтральный красный служат
для обнаружения расщепления лактозы.
Состав (г/л)
Пептон из казеина 17,0; мясной пептон 3,0; хлорид натрия 5,0; лактоза 10,0; смесь
солей желчных кислот 1,5; нейтральный красный 0,003; кристаллический фиолетовый
0,001; агар-агар 13,5.
Приготовление
Растворить 50 г в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение 20-
30 минут; автоклавировать 15 мин при 121 °С. pH 7,4±0,2 при 25°С. Среда в чашках
прозрачная, от красно-коричневого до темно-красного цвета.
Проведение анализа
Материал для исследования распределяют поверхностным методом. Инкубация 18-24ч
при 35°С аэробно. Лактозоотрицательные колонии бесцветные; лактозоположительные
- красные и окружены мутной зоной преципитации желчных солей вследствие снижения
pH.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Бесцветные, прозрачные Salmonella, Shigella и другие
Крупные, красные, окруженные зоной преципитации Escherichia соН
Крупные, розовые, слизистые Enterobacter, Klebsiella
Очень мелкие, непрозрачные, изолированные Enterococci, Staphylococci и dp.
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм, Выход, Цвет Цвет среды Осадок
КОЕ /мл (%) колоний
Escherichia coli ATCC 8739 >30 Красный Красный +
Salmonella typhimurium ATCC 10^-10^ >30 Бесцветный Желтоватый +
14028
Salmonella dublin ATCC 15480 10^-10" >30 Бесцветный Желтоватый -
Shigella sonnei ATCC 11060 юМо" >30 Бесцветный Желтоватый -
Proteus mirabilis ATCC 29906 10"-10" >30 Бесцветный Желтоватый -
Bacillus cereus ATCC 11778 > 10" <0,01
Staphylococcus aureus ATCC 6538 > 10® <0,01
Enterococcus hirae ATCC 8043 > 10" <0,01
Селективный агар для патогенных грибов -
Selective Agar for pathogenic
fungi for the isolation of pathogenic fungi (contains Cycloheximide)
Кат.№ 1.05467.0500
Упаковка - 500 г
Для выделения патогенных грибов, особенно дерматофитов, из сильно
контаминированного материала.
Принцип действия
Для выделения дерматофитов используется цикло-гексимид. Хлорамфеникол в
значительной мере подавляет бактерии. Могут быть подавлены также и некоторые
патогенные грибы, поэтому необходимо использовать питательные среды, лишенные
ингибиторов. Для подавления хлорамфеникол-резистентных бактерий рекомендуется
добавлять 40 мг/л гентамицин-сульфата (т.е.0,5 мл раствора гентамицина на 1 л).
Состав (г/л)
Соевый пептон 10,0; глюкоза 10,0; циклогексимид 0,4; хлорамфеникол 0,05, агар-агар
12,5.
Приготовление
Растворить 33 г/л, разлить в чашки.
pH 6,9±0,2 при 25 °С.
Среда прозрачная, желтовато-коричневая. Среда не подлежит автоклавированию.
Следует избегать перегрева и повторного расплавления.
Проведение анализа
Инокулируют поверхность агара и инкубируют до 3 недель приблизительно при 28 °С
(комнатная температура), а если предполагается эндомикоз, то при 35 °С.
Образовавшиеся колонии идентифицируют или пересевают на среды без ингибиторов
для дальнейшей дифференциации.
Тест-штаммы Рост
Trichophyton mentagrophytes АТСС 18748 хороший / очень хороший
Trichophyton rubrum АТСС 28188 средний / хороший
Microsporum gallinae АТСС 12108 средний / хороший
Trichophyton ajelloi АТСС 28454 средний / хороший
Microsporum canis ATCC 36299 хороший / очень хороший
Geotrichum candidum DSM 1240 хороший / очень хороший
Candida albicans ATCC 10231 хороший / очень хороший
Aspergillus niger ATCC 16404 роста нет / слабый
Penicillium commune ATCC 10428 роста нет / слабый
Bacillus cereus ATCC 11778 роста нет
Агар BPLS для выделения Salmonella по стандарту USP - BPLS agar for
the isolation of Salmonella USP
Кат.№ 1.07232.0500
Упаковка - 500 г
Селективный агар для выделения Salmonella кроме S.typhosa и Shigella из
патологического материала, фекалий, мочи, продуктов питания,
фармацевтического материала и т.п. Эта питательная среда соответствует
рекомендациям USP XXIII (1995) и ЕР II.
Принцип действия
Росту сальмонелл способствует богатая питательная основа. Росту сопутствующих
микроорганизмов препятствует увеличенная концентрация бриллиантовой зелени.
Сальмонеллы не ферментируют ни сахарозу, ни лактозу. Присутствие этих сахаров
позволяет идентифицировать сопутствующие слабо лактозоположительные или
лактозоотрицательные, но сахарозоположительные микроорганизмы.
Состав (г/л)
Мясной пептон 5,0; казеиновый пептон 5,0; дрожжевой экстракт 3,0; хлористый натрий
5,0; лактоза 10,0; сахароза 10; феноловый красный 0,08; бриллиантовый зеленый
0,0125; агар-агар 13,0.
Приготовление
Растворить 51 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в
течение 20-30 минут. Автоклавировать 15 мин при 121°С, разлить по чашкам. Среда
прозрачная, красно-коричневого цвета.
pH 6,9±0,2 при 25°С.
Проведение анализа
Чашки инокулируют непосредственно исследуемым материалом, либо после
накопительного культивирования. Тесты следует выполнять на питательных средах с
минимальным количеством ингибиторов. Инкубируют 24 ч при 35°С аэробно.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Розовые, окруженные красной зоной Лактозо- и сахарозо- отрицательные
Salmonella и др.
Желтовато-зеленые, окруженные Лактозо- и сахарозо- положительные Е.соИ,
желтовато-зеленой зоной Citrobacter, Proteus vulgaris, Klebsiella, и др.
Возможно иногда полное подавление роста.
Контроль качества
Тест-штаммы Выход, (%) Цвет колоний Цвет среды
Salmonella typhimurium АТСС 14028 >40 Красный Красный
Salmonella choleraesius АТСС 13312 >40 Красный Красный
Salmonella enteritidis NCTC 5188 >40 Красный Красный
Escherichia coli ATCC 25922 не ограничен Желтый Желтый
Staphylococcus aureus ATCC 25923 < 0,01
Enterococcus faecalis ATCC 33186 <0,01
Bacillus subtilis ATCC 6633 < 0,01
Агар BPLS для выделения Salmonella - BPLS agar for the isolation of
Salmonella
Кат.№ 1.07237.0500
Упаковка - 500 г
Селективный агар для выделения Salmonella кроме S. typhosa и Shigella из
патологического материала, фекалий, мочи, продуктов питания,
фармацевтического материала и т.п. Эта питательная среда соответствует
рекомендациям USP XXIII (1995) и ЕР II.
Принцип действия
Росту сальмонелл способствует богатая питательная основа. Росту сопутствующих
микроорганизмов препятствует увеличенная концентрация бриллиантовой зелени.
Сальмонеллы не ферментируют ни сахарозу, ни лактозу. Присутствие этих сахаров
позволяет идентифицировать сопутствующие слабо лактозоположительные или
лактозоотрицательные, но сахарозоположительные микроорганизмы.
Состав (г/л)
Мясной пептон 5,0; казеиновый пептон 5,0; дрожжевой экстракт 3,0; хлористый натрий
5,0; лактоза 10,0; сахароза 10; феноловый красный 0,08; бриллиантовый зеленый
0,0125; агар-агар 13,0.
Приготовление
Растворить 57 г/л, автоклавировать 15 мин при 121 °С.
pH 6,9±0,2 при 25 °С. Среда прозрачная, красно-коричневого цвета.
Проведение анализа
Инокулируют чашки непосредственно исследуемым материалом либо после
накопительного культивирования. Тесты следует выполнять на питательных средах с
минимальным количеством ингибиторов. Инкубируют 24 ч. при 35 °С аэробно.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Розовые, окруженные красной зоной Лактозо- и сахарозо- отрицательные Salmonella и
др. энтеробактерии
Желтовато-зеленые, окруженные Лактозо- и сахарозо- положительные E.coli,
желтовато-зелёной зоной Citrobacter, Proteus vulgaris, Klebsiella, и др.
Возможно иногда полное подавление роста.
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм, обнаружение Цвет Цвет
КОЕ/мл (%) колоний среды
Salmonella typhimurium АТСС >70 розовый красный
14028
Salmonella choleraesius АТСС >70 розовый красный
13312
Salmonella enteritidis NCTC 5188 >70 розовый красный
Escherichia coli ATCC 25922 10^-1 О*’ >70 желтый желтый
Proteus vulgaris ATCC 13315 >70 желтый желтый
Staphylococcus aureus ATCC 25923 10^-10*^ <0.01 желтый желтый
Enterococcus faecalis ATCC 33186 10^-10*^ <0.01 желтый желтый
Bacillus subtilis ATCC 6633 <0.01 оранж. / желтый
желтый
rap Сабуро 2% глюкозы для культивирования дерматофитов -
ABOURAUD 2% glucose agar for the cultivation of dermatophytes
Кат.№ 1.07315.0500
Упаковка - 500 г
реда рекомендована Janke (1961) для культивирования дерматофитов. Georg
954) предложил вносить циклогексимид, пенициллин и стрептомицин для
^давления непатогенных сопутствующих бактерий.
остав (г/л)
ептон 10,0; глюкоза или мальтоза 20,0; агар-агар 17,0.
риготовление
астворить 47 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в
учение 20-30 минут; автоклавировать 15 мин при 121 °С. Не перегревать.
Н 5,6±0,2 при 25°С.
реда прозрачная, желтовато-коричневая.
роведение анализа
реду инокулируют в соответствии с инструкцией. Инкубация до 7 дней при 28°С
эробно. При работе по методу Emmons доводят pH до 6,9±0,2 и добавляют
порамфеникол (50 мг/л).
онтроль качества
Тест-штаммы Рост
richophyton mentagrophytes хороший / очень хороший
richophyton rubrum средний / хороший
licrosporum gallinae ATCC 12108 хороший / очень хороший
'richophyton ajelloi средний / хороший
licrosporum canis хороший / очень хороший
'leothchum candidum DCM 1240 хороший / очень хороший
'andida albicans ATCC 10231 хороший / очень хороший
[spergillus niger хороший / очень хороший
^eniciilium commune ATCC 10428 хороший / очень хороший
РАМБАХ-агар для идентификации Salmonella -
RAMBACH® agar for the
identification of Salmonella
Кат.№ 1.07500.0001, упаковка (4 флакона)
для приготовления 250 мл Рамбах агара
Кат.№ 1.07500.0002, упаковка (4 флакона)
для приготовления 1000 мл Рамбах агара
Кат.№ 1.07500.0003, упаковка (1 флакон)
для приготовления 50 л Рамбах агара
Рамбах-агар - хромогенная дифференциально-диагностическая среда для
идентификации сальмонелл в пищевых продуктах, сырье и клиническом
материале.
Принцип
Питательные вещества РАМБАХ-агара обеспечивают быстрый рост энтеробактерий.
Дезоксихолат натрия ингибирует сопутствующую грамположительную микрофлору.
Сальмонеллы продуцируют кислоту из пропиленгликоля, в результате чего происходит
изменение рН-среды, и колонии сальмонелл окрашиваются в красный цвет. Для
дифференциации сальмонелл от колиформных бактерий в состав среды включена
хромогенная смесь, которая выявляет наличие фермента (2.-галактозидазы -
характерного фермента колиформных бактерий. Колиформные бактерии растут в виде
сине-зеленых или сине-фиолетовых колоний. Остальные энтеробактерии и
грамотрицательные бактерии, такие как Proteus, Pseudomonas, Shigella вырастают в
виде бесцветных-желтоватых колоний. РАМБАХ-агар обеспечивает однозначную
дифференциацию сальмонелл от других бактерий.
Состав среды (г/л)
Пептон 8.0; хлорид натрия 5.0; дезоксихолат натрия 1.0; хромогенная смесь 1.5;
пропиленгликоль 10.5; агар-агар 15.0.
Добавить 1 флакон жидкой хромогенной смеси среды к 250 мл дистиллированной воды
и перемешать до полного растворения. Добавить 1 флакон порошка среды
(питательная основа), дать среде набухнуть в течение 20-30 минут; перемешать до
полного растворения. Не должно быть кристалликов агара на стенках колбы. Колбу
со средой нагревать на кипящей водяной бане с периодическим помешиванием. Среда
полностью растворяется. Стандартное время до полного растворения для 250 мл - 20-
25 мин. Среду не перегревать! Не автоклавировать, не перегревать среду!
Охладить среду как можно быстрее на водяной бане 45-50°С. Во время этой процедуры
(максимум 30 минут) следует помешивать среду время от времени. Разлить по чашкам.
Для предотвращения образования осадка следует разместить чашки Петри на
охлажденной поверхности стола (максимум 25°С). Готовые чашки со средой
опалесцируют и слегка розовые. Перед посевом чашки следует подсушить. pH: 7.3±0.2
при 25°С. Срок годности и условия хранения готовых чашек - в холодильнике (ниже 6°С)
закрытые в пластиковых пакетах - 3 месяца.
После этапа селективного обогащения посеять на % поверхности агара петлей. Для
того чтобы лолучить изолированные колонии - той же петлей посеять на оставшуюся
поверхность чашки. Инкубировать в аэробных условиях 24-48 часов при 35-37°С.
Микроорганизмы Цвет колоний
Salmonella spp.* Красный
Колиформы Синие или сине-фиолетовые
Другие энтеробактерии Бесцветные или желтоватые
SS агар для выделения сальмонелл и шигелл S S agar for the isolation
-
of Salmonellae and shigellae
Кат.№1.07667.0500,
Упаковка - 500 г
Для выделения сальмонелл и шигелл из фекалий, пищевых продуктов и др.
образцов. Состав Среда согласована с рекомендациями АРМА по исследованию
продуктов питания (1992).
Принцип действия
Бриллиантовый зеленый, бычья желчь, высокая концентрация тиосульфата и цитрата в
значительной степени подавляют сопутствующую микрофлору. Образование сульфида
обнаруживается по реакциям тиосульфата и ионов железа, в результате которых
колонии окрашиваются в черный цвет. Присутствие колиформных бактерий
обнаруживается по изменению цвета индикатора нейтрального красного, при
ферментации лактозы до кислоты.
Состав (г/л)
Пептон 10,0; лактоза 10,0; бычья желчь 8,5; цитрат натрия 10,0; тиосульфат натрия 8,5;
цитрат аммонийного железа 1,0; бриллиантовый зеленый 0,0003; нейтральный красный
0,025; агар-агар 12,0.
Приготовление
Растворить 60 г среды в 1 л дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение
20-30 мин, довести до кипения и разлить в чашки.
Среда не автоклавируется!
pH 7,0±0,2 при 25°С. Среда прозрачная, красновато-коричневого цвета.
Проведение анализа
Среду инокулируют культурой, выращенной в накопительном бульоне. Инкубация 18-24
ч при 35°С аэробно. Лактозонегативные колонии бесцветны. Лактозоположительные
бактерии образуют колонии розового или красного цвета. Колонии бактерий,
образующих H S, имеют черный центр.
2
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Бесцветные, прозрачные Shigella и некоторые виды
сальмонелл
Прозрачные, с черным центром Протей и большинство видов
сальмонелл
Цветом от розового до красного Escherichia соН
Колонии крупнее, чем у Е.соН, окрашены от Enterobacter aerogenes
Iрозового до белого цвета, либо кремовые,
/непрозрачные слизистые________________
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм, Выход, Цвет Черный Цвет среды
КОЕ/мл % колоний цвет
Klebsiella pneumoniae АТСС 13883 10^-10" >30 розовый - Розово-красный
(преципитат)
Shigella flexneri АТСС 29903 10^-10" >30 бесцветные - Желто-коричн.
Salmonella typhimurium АТСС 14028 10^-10" >30 бесцветные + Желто-коричн.
Salmonella enteritidis NCTC 5188 10^-10" >30 бесцветные + Желтовато-
коричневый
Proteus mirabilis ATCC 14273 10^-10® >30 бесцветные + Желто-коричн.
Escherichia coll ATCC 25922 > 10^ < 0,01 Розово­ - Розово-красный
красные (лреципитат)
Staphylococcus aureus ATCC 25923 > 10® < 0,01
Bacillus cereus ATCC 11778 > 10^ < 0,01
I
Селенит-цистиновый накопительный бульон -
Selenite cystine
enrichment broth for the enrichment of salmonellae
Кат.№1.07709.0500
Упаковка - 500 г
Для накопления сальмонелл из клинического материала (фекалии), пищевых
продуктов и др. материалов. Состав среды соответствует рекомендациям ИСО
Standart 6579 (1993), APHA (1992), USP XXIII (1995), DIN Norm 10181 no контролю
молока и №35 LMBG по контролю продуктов питания.
Принцип действия
Селенит ингибирует рост колиформных бактерий и энтерококков в первые 6-12 часов
культивирования, затем его ингибирующий эффект постепенно снижается. Только на
Salmonella, Proteus и Pseudomonas селенит действует слабо.
Состав (г/л)
Казеиновый пептон 5,0; L-цистин 0,01; лактоза 4,0; фосфатный буфер 10,0; натрий
селеновокислый 4,0.
Приготовление
Сухую питательную среду следует хранить при температуре ниже 15°С!
Растворить 23 г в 1 литре дистиллированной воды при комнатной температуре. Если
среда плохо растворяется, допустимо кратковременное нагревание (максимум до
60°С). Если среда подлежит хранению, ее следует стерилизовать методом холодной
стерилизации, используя мембранные фильтры.
Среда не подлежит автоклавированию.
pH 7,0±0,2 при 25 X.
Готовая среда прозрачная, желтоватого цвета. После длительного хранения сухой
среды цвет приготовленного бульона может измениться на красноватый или красный.
На ход анализа и результаты его это не влияет.
Проведение анализа
Твердый исследуемый образец смешивают со средой нормальной концентрации.
Жидкий образец смешивают с бульоном в соотношении 1:1. Инкубация до 24 ч при 35-
37°С; (лучше 43°С - по данным Вап1Тег с соавт., 1971). Через 6-12 ч, либо, если
необходимо, через 18-24 ч делают пересев на дифференциальные среды.
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм Рост после 24 часов
Escherichia соН АТСС 25922 99 % < 10 %
Salmonella typhimurium АТСС 14028 1 % > 90 %
Селенитовый накопительный бульон Лейфсона для селективного
обогащения сальмонелл -
Selenite enrichment broth асе. to LEIFSON for
the selective enrichment of salmonellae
Кат.№1.07717.0500
Упаковка - 500 г
Среда предложена Лейфсоном (1930) для селективного накопления сальмонелл
из клинического материала (фекалии, моча), а также проб воды и образцов
пищевых продуктов. Среда соответствует рекомендациям АРМА (1992) для
анализа пищевых продуктов.
Принцип действия
Селенит подавляет рост кишечных колиформных бактерий и энтерококков
преимущественно в течение первых 6-12 часов инкубации. Рост Salmonella, Proteus и
Pseudomonas не тормозится.
Состав (г/л)
Пептон мясной 5,0; лактоза 4,0; селенит натрия 4,0; калий фосфорнокислый
двузамещенный 3,5; калий фосфорнокислый однозамещенный 6,5.
Приготовление
Сухую питательную среду следует хранить при температуре ниже 15°С.
Растворить 23 г среды в 1 литре дистиллированной воды при комнатной температуре,
если среда не растворяется сразу, осторожно подогреть ее до 60°С (не выше). Если
предполагается хранить среду продолжительное время, ее необходимо стерилизовать
фильтрацией и разлить в подходящую посуду.
Среда не подлежит автоклавированию.
pH 7,0 ±0,2 при 25 °С.
Готовая среда прозрачная, желтоватого цвета. После длительного хранения сухой
среды цвет готовой среды может измениться на красноватый или красный, но на
результатах анализа это не отражается.
Проведение анализа
Твердый исследуемый материал добавляют к питательной среде нормальной
концентрации. Жидкие образцы - вносят в питательную среду двойной концентрации в
соотношении 1:1. Посев инкубируют до 24 ч при 37“С или 43°С. Через 6-12 ч, если
необходимо, то и через 18-24 ч делают пересев на селективные агаризованные среды.
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм Рост после 24 часов
Escherichia соН АТСС 25922 99 % < 10 %
Salmonella typhimurium АТСС 14028 1 % > 90 %
Стандартный питательный агар 1 для культивирования
требовательных бактерий -
Standard I Nutrient Agar for the cultivation of
fastidious bacteria
Кат.№ 1.07881.0500; Упаковка - 500 г
Кат.№ 1.07881.5000; Упаковка - 5000 г
Эта питательная среда подходит для культивирования требовательных
бактерий; после добавления крови, асцитической жидкости или сыворотки их
можно использовать для культивирования стрептококков, пневмококков,
возбудителей рожистого воспаления и др. Может использоваться для учета,
выделения и накопления бактерий и как высококачественная основа для
приготовления специальных питательных сред.
Состав (г/л)
Пептоны 15,0; дрожжевой экстракт 3,0; хлористый натрий 6,0; глюкоза 1,0; агар-агар
12 0
, .
Приготовление
Растворить 37 г агара в 1 л воды; стерилизовать 15 мин при 121 С.
pH 7,5±0,2 при 25 °С.
Готовая среда прозрачна, желтовато-коричневого цвета.
Инкубация 24 ч при 35°С аэробно.
Контроль качества агара
Тест-штаммы Инокулюм КОЕ/мл Обнаружение, %
Staphylococcus aureus АТСС 25923 10^-1 O'’ >70
Streptococcus pyogenes АТСС 12344 > 70
Streptococcus pneumoniae АТСС 6301 lO^-IO*’ >70
Listeria monocytogenes АТСС 19118 lO'^-IO'’ > 70
Erysipelothrix rhusiopathiae ATCC 19414 lO'-IO'’ > 70
Escherichia coll ATCC 25922 io^To^ > 70
Shigella flexneri ATCC 12022 lO'-IO'’ > 70
Стандартный питательный бульон 1 для культивирования
ребовательных бактерий -
Standard I Nutrient Broth for the cultivation of
astidious bacteria
Кат.№ 1.07882.0500; Упаковка - 500 г
Кат.№ 1.07882.5000; Упаковка - 5000 г
1итательная среда подходит для культивирования требовательных бактерий;
юсле добавления крови, асцитической жидкости или сыворотки ее можно
юпользовать для культивирования стрептококков, пневмококков, возбудителей
эожистого воспаления и др. Среда используется для накопления бактерий и как
высококачественная основа для приготовления специальных питательных сред
Состав (г/л)
Пептоны 15,0; дрожжевой экстракт 3,0; хлористый натрий 6,0; глюкоза 1,0.
Приготовление
Растворить 25 г среды в 1 л воды; стерилизовать 15 мин при 121°С.
pH 7,5±0,2 при 25 °С.
Готовая среда прозрачная, желтовато-коричневого цвета.
Инкубировать 24 ч при 35 °С аэробно.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост
Staphylococcus aureus АТСС 25923 хороший / очень хороший
Streptococcus pyogenes АТСС 12344 хороший / очень хороший
Streptococcus pneumoniae АТСС 6301 хороший / очень хороший
Listeria monocytogenes АТСС 19118 хороший / очень хороший
Erysipelothrix rhusiopathiae АТСС 19414 средний / хороший
Escherichia coli ATCC 25922 хороший / очень хороший
Shigella flexneri ATCC 12022 хороший / очень хороший
Бульон с мочевиной для определения микроорганизмов, которые
метаболизируют мочевину -
Urea Broth for detecting microorganisms which
metabolize urea
Кат.№ 1.08483.0500
Упаковка - 500 г
Дифференциальная среда, предложенная Rustigian и Stuart для обнаружения
микроорганизмов, метаболизирующих мочевину.
Принцип действия
Эта питательная среда поддерживает рост микроорганизмов, таких, как Proteus,
которые утилизируют мочевину в качестве единственного источника углерода (Stuart,
1945; Cook 1948). Ferguson и Hook рекомендуют эту среду для дифференциации
Proteus от Salmonella; она также может быть использована для дифференциации
бацилл и сарцин. Микроорганизмы, метаболизирующие мочевину, вызывают
покраснение индикатора, а бульон становится мутным вследствие микробного роста.
Состав (г/л)
Дрожжевой экстракт 0,1; калий фосфорнокислый однозамещенный 9,1; натрий
фосфорнокислый двузамещенный 9,5; мочевина 20,0; феноловый красный 0,01.
Приготовление
Растворить 38,5 г/л, если необходимо, подогревая до 60°С. Стерилизовать
фильтрацией либо разлить в пробирки примерно по 3 мл и стерилизовать 5 мин
текучим паром в мягких условиях. Среда не подлежит автоклавированию.
pH 6,8±0,2 при 25°С. Среда прозрачная, оранжево-красная. Если стерилизация
фильтрацией или текучим паром невозможна, среду следует инокулировать как можно
скорее после изготовления.
Проведение анализа
Бульон засевают обильно чистой культурой исследуемого микроорганизма. Инкубация
до 48 ч при 35 °С.
Питательная среда Микроорганизмы
Красная Мочевино-положительные: Proteus (Р. vulgaris, Р.
mirabilis), Morganella, Rettgerella и др.
Желтая Мочевино-отрицательные или слабо положительные:
Shigella, Escherichia, Salmonella, Citrobacter, Enterobacter,
Klebsiella, Serratia, Providencia и др.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Покраснение
Escherichia coli АТСС 25922 хороший / очень хороший -
Salmonella typhimurium АТСС 14028 хороший / очень хороший
-
Klebsiella pneumoniae АТСС 13883 хороший / очень хороший
-
Proteus vulgaris ATCC 13315 хороший / очень хороший +
Proteus mirabilis ATCC 14153 хороший / очень хороший +
Proteus rettgeri ATCC 29944 хороший / очень хороший +
Основа SMAC агара для прямого выделения и дифференциации
энтерогеморрагических (ЕНЕС) штаммов Е.соМ 0157:Н7 - SMAC agar base for direct
isolation and differentiation of enterohemorrhagic (EHEC) E.coli 0157:H7-strains
KaT.N1.09207.0500
Упаковка - 500 г
Селективный агар для выделения и дифференциации энтерогеморрагического
штамма (ЕНЕС) E.coli 0157:Н7 из продуктов питания и клинического материала.
I Среда соответствует рекомендациям DIN Norm 10167 по определению серотипа
0157:Н7 E.coli в продуктах питания и FDA/BAM по выделению
энтерогеморрагической Е. coli.
Принцип действия
Соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый подавляют рост
грамположительной флоры. Внесение СТ-добавки (цефиксим + теллурит калия)
увеличивает селективность среды для E.coli 0157:Н7 и угнетает сопутствующую
микрофлору. Для обнаружения E.coli 0157:Н7 агар МакКонки с сорбитом и селективной
СТ-добавкой (CT-SMAC-arap) эффективнее, чем НС-агар (Szabo) по мнению Weagant
(1995). Сорбит и индикатор нейтральный красный используются для обнаружения
сорбит-положительных колоний по покраснению. Сорбит-негативные колонии остаются
бесцветными.
Состав (г/л)
Пептон 20,0; хлористый натрий 5,0; соли желчных кислот №3 1,5; сорбит 10,0;
кристаллический фиолетовый 0,001; нейтральный красный 0,03; агар-агар 15,0.
Приготовление
Растворить 51,5 г/л дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение 20-30
мин, автоклавировать 15 мин при 121°С.
рН7,1±0,2при25°С. Среда прозрачная, красного цвета.
СТ-8МАС-агар
Растворить 25,8 г в 500 мл дистиллированной воды, автоклавировать 15 мин при 121°С.
Добавить 1 мл стерильной дистиллированной воды во флакон с лиофилизированной
СТ-добавкой (Кат.№1.09202.0001). Тщательно перемешать и внести в стерильный
СМАК-агар, охлажденный до 50°С. Среда прозрачная, красного цвета. рН7,1±0,2 при
25°С.
Проведение анализа
Инокулируют бульон тЕС или тТЗВ, используя 25 г исследуемого материала и 225 мл
бульона и инкубируют 18-24°С при 35-37°С в аэробных условиях. Около 1 мл бульонной
культуры наносят штрихом на поверхность ЗМАС-агара так, чтобы получить
изолированные единичные колонии. Инкубация 16-24 ч при 35-37 °С. Фекалии наносят
непосредственно петлей и инкубируют 16-24 ч при 37°С. Сорбит-негативные колонии
отсевают и исследуют со специальной сывороткой.
Контроль качества SMAC-arap
Тест-штаммы Обнаружение, % Цвет колоний Сорбит
Е. соН 0157:Н7 АТСС 35150 >70 бесцветный
-
Е. соН АТСС 11775 >70 красный +
Serratia marcescens АТСС 14756 >70 красный +
Bacillus cereus АТСС 11778 >0,01
I
На SMAC агаре E.coli 0157:Н7 растут в виде бесцветных колоний, E.coli и Serratia
marcescens в виде красных колоний.
Контроль качества CT-SMAC-araр
I
Тест -штаммы Инокулюм, Выход, % Цвет Сорбит
КОЕ/мл колоний
Е. соН 0157:Н7 АТСС 35150 10^-10^ >60 бесцветный
-
Е. соН АТСС 11775 10^-10^ <0,01
Е. соН АТСС 87639 <0,01 +
Serratia marcescens АТСС 14756 >iö^ <0,01 +
Bacillus cereus АТСС 11778 >iö^ <0,01
На CT-SMAC агаре E.coli 0157:Н7 растут в виде бесцветных колоний, тогда как E.coli и
Serratia marcescens не растут не растут на данной среде.
Среда обогащения по Раппапорту для селективного обогащения
Salmonella -
Salmonella enrichment broth асе. to RAPPAPORT for the
selective enrichment of Salmonella
Кат.№1.10236.0500
Упаковка - 500 г
Среда предложена Раппапортом (1956) для селективного накопления сальмонелл
за исключением S.typhosa из фекалий, лродуктов питания и другого материала.
Питательная среда превосходит другие накопительные среды для сальмонелл,
т.к. способствует почти десятикратному увеличению урожая клеток. Накопление
сальмонелл усиливается при добавлении тетратионата и заменой желтого
метахрома на малахитовый зеленый (Hofer 1969). Goosens (1984) сообщил о
высокой степени выделения сальмонелл на полужидкой среде, основанной на
бульоне Раппапорта.
Принцип действия
Малахитовый зеленый и хлористый магний существенно подавляют рост
микроорганизмов, обычно обитающих в кишечнике, но не влияют на пролиферацию
большинства сальмонелл. Только S.typhosa и Shigella обычно угнетаются малахитовым
зеленым, поэтому для указанных патогенных микроорганизмов данная среда не
пригодна.
Состав (г/л)
Казеиновый пептон 5,0; хлористый натрий 8,0; калий фосфорнокислый двузамещенный
0,8; магний хлористый шестиводный 40,0; малахитовый зеленый 0,12.
Приготовление
Растворить 54 г среды в 1 литре дистиллированной воды, автоклавировать в мягких
условиях (20 мин при 115 °С ). pH 6,0±0,2 при 25 °С.
Готовая среда прозрачна, темно-голубого цвета. При длительном (2-3 недели)
хранении в восстановленной среде может образоваться осадок, не влияющий на
ее качество.
Проведение анализа
Растворяют пробу фекалий в стерильном физиологическом растворе в соотношении до
1:1000 и 3-4 капли вносят в пробирку с бульоном. Если предполагается малое
содержание сальмонелл в образце, то большую аликвоту вносят в 100 мл бульона.
Инкубация 18-24 ч при 35°С. Производят пересев штрихом с бульона на селективные
питательные среды.
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм, КОЕ/мл Рост после 24ч
Escherichia coli АТСС 25922 99 % < 10 %
Salmonella typhimurium АТСС 14028 1 % > 90 %
Агар TCBS для селективного выделения Vibrio choiera -
TCBS agar for
the isolation and selective cultivation of Vibrio cholera
Кат.№1.10263.0500,
Упаковка - 500 г
Тиосульфат-цитратный агар с сахарозой и желчью представлен Nakaníshi (1962),
модифицирован Kobayashi с сотр.(1963) и используется для выделения и
селективного культивирования Vibrio choierae и других энтеропатогенных
вибрионов (NAG вибрионы, V.parahaemoiyticus). Среда соответствует
рекомендациям ВОЗ (1965,1967) и АРНА(1992).
Принцип действия
Высокие концентрации тиосульфата и цитрата, а также высокая щелочность среды в
значительной степени подавляют рост энтеробактерий. Бычья желчь и холаты
подавляют главным образом энтерококков. Колиформные бактерии, которые смогут
вырасти, не метаболизируют сахарозу. Лишь несколько сахарозоположительных
штаммов протея могут расти на этой среде с образованием желтых колоний, похожих
на колонии вибрионов. Смешанный индикатор тимоловый синий-бромтимоловый синий
желтеет при образовании кислоты даже в сильно щелочной среде.
Состав (г/л)
Пептон из казеина 5,0; пептон из мяса 5,0; дрожжевой экстракт 5,0; цитрат натрия 10,0;
тиосульфат натрия 10,0; бычья желчь 5,0; холеиновокислый натрий 3,0; сахароза 20,0;
хлористый натрий 10,0; цитрат железа(111)1,0; тимоловый синий 0,04; бромтимоловый
синий 0,04; агар-агар 14,0.
Приготовление
Растворить 88 г среды в 1 литре дистиллированной воды и разлить в чашки.
Среда не подлежит автоклавированию! pH 8,6±0,2 при 25°С. Среда прозрачная,
сине-зеленого цвета.
Проведение анализа
Среду инокулируют материалом с накопительных сред поверхностным способом.
Инкубируют 18-24 ч при 35°С в аэробных условиях. Рекомендуется (Burkhardt, 1969) в
“Дополнение к жидкой накопительной среде еще использовать две разные плотные -
высокоселективную (например, ТСВЗ-агар) и менее селективную (например,
Питательный агар).
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Плоские, 2-3 мм в диаметре, желтые Vibrio cholerae, Vibrio cholerae type El Tor
Мелкие с сине-зеленым центром Vibrio parahaemolyticus
Крупные желтые Vibrio alqinolyticus
Голубые Pseudomonas, Aeromonas и dp.
Очень мелкие, прозрачные Enterobacteriaceae и dp.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Желтый цвет среды
Vibrio alqinolyticus хороший / очень хороший +
Vibrio cholerae Inaba NIH 35 хороший / очень хороший +
Vibrio cholerae El Tor Inaba CH 38 хороший / очень хороший +
Vibrio cholerae Oqawa NIH 41 хороший / очень хороший +
\ Vibrio cholerae El Tor Oqawa CH 60 хороший / очень хороший +
\ Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 хороший / очень хороший -
\ Escherichia coli ATCC 25922 роста нет / слабый -
Enterobacter cloacae ATCC 13047 роста нет / слабый -
Proteus mirabilis ATCC 14273 роста нет / слабый -
Pseudomonas aeruqinosa ATCC 27853 роста нет / слабый -
OF базовая среда для дифференциации и классификации
грам-отрицательных бактерий OF Basal Medium for the differentiation and
-
classification of gram-negative intestinal bacteria
Кат.№ 1.10282.0500
Упаковки - 500 г
Питательная среда Hugh и Leifson (1953) для выявления окислительной или
ферментативной способности расщеплять различные углеводы. Она
í
используется для первичной дифференциации и классификации
грамотрицательных энтеробактерий. На основе этой среды Welch и другие (1987)
создали селективный и дифференциальный агар для Pseudomonas путем
добавления агар-агара, лактозы, полимиксина В и бацитрацина.
Принцип действия
Распад до кислоты вносимых в среду углеводов обнаруживается по изменению цвета
бромтимолового синего до желтого. Расщепление углеводов может происходить в
присутствии кислорода воздуха (окислительный или ферментативный) или в
анаэробных условиях (только ферментативный).
Состав (г/л)
Казеиновый пептон 2,0; дрожжевой экстракт 1,0; хлористый натрий 5,0; калий
фосфорнокислый двузамещенный 0,2; бромтимоловый синий 0,08; агар-агар 2,5. Также
следует внести: углеводы в количестве 10,0 г/л.
Приготовление
Растворить 11 г/л, автоклавировать 15 мин при 121°С. Охладить примерно до 50 °С,
добавить 100 мл/л 10 % раствора глюкозы (стерилизация фильтрацией) (либо лактозы,
сахарозы или других углеводов), перемешать. Разлить в пробирки высотой слоя около
5 см. Сразу после охлаждения в половину пробирок наслоить стерильный жидкий
•парафин или парафиновое масло высотой слоя 1 см.
Готовая среда прозрачная, цвет от темно-зеленого до сине-зеленого.
pH 7,1±0,2 при 25°С.
Проведение анализа
Для каждого углевода инокулируют одну пробирку с парафиновым слоем и одну - без
парафина чистой культурой исследуемого микроорганизма уколом до самого дна
пробирки. При этом исследуемый микроорганизм должен находиться в
логарифмической (активной) фазе роста.
Инкубация не менее 48 ч при оптимальной температуре. Этот тест может быть
выполнен и в одной пробирке (Моззе! и Ма111п, 1961), если для чувствительных
микроорганизмов добавить дрожжевой экстракт, содержание агара увеличить до 1,5%,
а высоту столбика среды - до 8 см.
Пожелтение как открытых, так и парафинированных пробирок означает
ферментативное расщепление; а только в открытых - окислительную. Окислительный
распад происходит ближе к поверхности среды, в то время, как ферментативный
наблюдается по всему столбу агара. Следует установить, происходит рост
микроорганизма только по уколу (неподвижный штамм) или распространился по всей
среде (подвижный штамм).
Метаболизация углеводов некоторыми видами микроорганизмов (Hugh,
Leifson, 1953)
Микроорганизмы Глюкоза Лактоза Сахароза Группа
Аэроб Анаэроб Аэроб Анаэроб Аэроб Анаэроб
Alcalig. faecalis - - - - - - 1
не окисл.
виды
не ферм.
виды
Ps. aeruginosa К - - - - - II
Bact. anitratum К - К - - - окисл. виды
Agrobacterium tumefaciens К - - - К - не ферментир.
Malleomyces pseudomallei к - К - К - виды
Shig. dysenteriae к К - - - - Illa
Shig. sonnei к к к К - - ферм, виды
Vibrio comma к к - - к К (анаэроген.)
S. enteritidis кг кг - КГ - - Illb
E. coli кг кг кг - - - ферм, виды
Aerom. liquefaciens кг кг - кг кг КГ (аэроген)
Ent. aerogenes кг кг кг кг кг
--------------------------------------------
111с
Non-classified species к к к -? варьир. варьир. окисл. виды
Some Paracolon-bacteria кг кг к -? варьир. варьир. ферм, виды
Условные обозначения; (-) нейтральная или щелочная реакция, (К) образование кислоты, (КГ)
образование кислоты и газа.
Использование среды для идентификации облигатных и факультативно
анаэробных грамотрицательных палочек, представляющий интерес для
медицины (в модификации СовЬп, 1967)
Распад глюкозы Оксидаза Тип реакции Микроорганизмы
Отрицательный 1 1. Enterobacteriaceae
2. Yersinia pestis
3. Yersinia malassezii (pseudotuberculosis)
4. Yersinia enterocolitica
Ферментативный Положительный II 1. Aeromonas spp.
2. Vibrio cholerae
3. Vibrio spp. (NAG or NVC)
4. Vibrio parahaemolyticus
5. Pasteurella haemolytica
6. Pasteurella multocida
7. Pasteurella pneumotropica
8. Actinobacillus lignieresii
9. Chromobacterium violaceum
Отрицательный III 1. Acinetobacter calcoaceticus (produces acid)
2. Pseudomonas maltophilia
Окислительный Положительный IV 1. Pseudomonas aeruginosa
2. Pseudomonas stützen
3. Pseudomonas fluorescens (putida)
4. Pseudomonas mallei
5. Pseudomonas pseudomallei
6. Flavobacterium meningosepticum
Отрицательный V 1. Acinetobacter calcoaceticus (does not
produce acid)
2. Bordetella parapertussis
негативный Положительный VI 1. Alcaligenes faecalis (denitrificans)
2. Pseudomonas alcaligenes
3. Bordetella bronchiseptica
4. Pseudomonas spp.
5. Campylobacter (Vibrio fetus)
6. Moraxella spp.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Изменение цвета на желтый
Аэробные уел. Анаэробные
уел.
Escherichia coli ATCC 25922 хороший / очень + +
хороший
Staphylococcus aureus ATCC 25923 хороший / очень + +
хороший
Mirococcus luteus ATCC 9341 хороший / очень + (-)
хороший
Pseudomonas aeruginosa ATCC хороший / очень + -
27853 хороший
Alcaligenes faecalis ATCC 19209 хороший / очень
- -
хороший
Pseudomonas alcaligenes ATCC хороший / очень -
-
14909 хороший
Бульон Мюллер-Хинтона для определения чувствительности
клинически-значимых патогенов -
MUELLER-HINTON broth fortesting
the sensitivity of clinically important pathogens
Кат.№ 1.10293.0500
Упаковка - 500 г
Среда предложена Мюллером и Хинтоном (1941) для оценки чувствительности
клинически важных патогенных микроорганизмов к антибиотикам и
сульфамидным препаратам. Среда соответствуют требованиям ВОЗ и DIN
Norm 58930.
Бульон Мюллера-Хинтона используется для определения МИК (минимальной
ингибирующей концентрации).
Принцип действия
Состав сред обеспечивает благоприятные условия роста и не включает в себя
веществ, разрушающих сульфамидные препараты.
Состав (г/л)
Мясной отвар 2,0; гидролизат казеина 17,5; крахмал 1,5.
Приготовление
Растворить 21 г среды в 1 литре дистиллированной воды, разлить в пробирки,
автоклавировать 15 мин при 121°С.
pH 7,4±0,2 при 25Х.
Готовый бульон прозрачен, слегка желтоват и устойчив в течение 2 недель при
температуре 2-8°С.
Проведение анализа
Выполняют тест на чувствительность или резистентность по соответствующим
инструкциям. Инкубация 24 ч при 35°С в аэробных условиях.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост
Escherichia coli АТСС 25922 хороший / очень хороший
Staphylococcus aureus АТСС 25923 хороший / очень хороший
Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853 хороший / очень хороший
Enterococcus faecalis АТСС 33186 хороший / очень хороший
Bacillus subtilis АТСС 6633 хороший / очень хороший
Streptococcus pyogenes АТСС 12344 хороший
Streptococcus pneumoniae ATCC 6301 средний / хороший
Listeria monocytogenes ATCC 19118 средний
Основа кровяного агара N2 для культиврования -
Blood agar (base)
по. 2 for the cultivation of fastidious microorganisms
Кат.№1.10328.0500, улаковка - 500 г;
Кат.№1.10328.5000, упаковка - 5000 г
Улучшенный кровяной агар для культивирования требовательных патогенных
и других микроорганизмов, для определения формы гемолиза.
Состав (г/л)
Питательный субстрат (дрожжевой экстракт, пептон, гидролизат печени) 23,0;
хлористый натрий 5,0; агар-агар 12,0.
Приготовление
Растворить 40 г среды на 1 литр дистиллированной воды; дать среде набухнуть в
течение 20-30 минут; автоклавировать 15 мин при 121°С. Охладить до 40-50°С,
добавить 5-8% стерильной дефибринированной крови без пузырьков. Осторожно
перемешать и разлить в чашки.
pH 7,4 ±0,2 при 25°С.
Перед добавлением крови среда прозрачная, желтовато-коричневого цвета, затем
— окрашенная в цвет крови.
Проведение анализа
Посевы инкубируют при оптимальных условиях, 24ч при 35°С аэробно (для
Cl.perfringens - анаэробно). Исследуют реакцию гемолиза.
Контроль качества
Тест штаммы Инокулюм, Обнаружение Гемолиз Бацитрацин
КОЕ/мл (%) тест
Staphylococcus aureus АТСС 25923 10"-10" >70 P
-
Streptococcus pyogenes АТСС 19615 10"-10^ >70 P +
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 10^-10" >70 a
-
Streptococcus agalactiae ATCC 13813 10^-10" >70 -
-
Listeria monocytogens ATCC 19118 10"-10" >70
-
Bacillus cereus АТСС 11778 10^-10^ >70 ß
Clostridium perfringens АТСС 13124 юМо" >70 ___ ß___
Элективный агар Никерсона для выделения и предварительной
дифференциации Candida и других дрожжей -
Candida Elective Agar
асе. to NICKERSON for the isolation and preliminary differentiation of
Candida and other yeasts Merckopiate®
Готовая среда в чашках: Кат.№ 1.10412.0001
Упаковка - 20 чашек/уп
Для выделения и предварительной дифференциации Candida и других
дрожжей по Никерсону (1953).
Принцип действия
Эта питательная среда содержит, кроме питательной основы, состоящей из
дрожжевого экстракта, глицерина и глюкозы, «висмут-сульфитный индикатор»,
который существенно подавляет рост сопутствующих микроорганизмов. Candida и
другие дрожжи развиваются нормально. Они восстанавливают сульфит висмута и
окрашиваются в цвета от коричневого до черного. Добавление 2 мг/л неомицина
усиливает угнетение сопутствующей бактериальной флоры.
Состав (г/л)
Дрожжевой экстракт 1,0; соевый пептон 1,0; глицин 10,0; глюкоза 10,0; висмут-
сульфитный индикатор 2,0; агар-агар 15,0.
Проведение анализа
Поверхность питательной среды засевают культурой, взятой из колонии, либо
фарингеальным или вагинальным отделяемым, взятым стерильным ватным
тампоном. Инкубация 4 дня при 28С аэробно или, если необходимо, при 35С.
Гладкие тестообразные колонии цветом от коричневого до черного, обычно
образованы дрожжами. Окрашенные подобным образом колонии бактерий или
дрожжеподобных грибов обычно не растут на этой среде и могут быть
дифференцированы микроскопированием. Дерматофиты и плесневые грибы на этой
среде появляются редко и легко отличаются по воздушному мицелию. Для
идентификации Candida и дифференциации дрожжей следует выполнить
дальнейшие тесты (напр., на Агаре с рисовым экстрактом). Биохимические методы
идентификации видов Candida описаны Martin и Schneidau (1970).
Контроль качества
Тест-штаммы Рост, выход, % Цвет колоний
Candida albicans АТСС 10231 хороший/очень хор. >70% коричневый / чёрный
Candida albicans 1021 хороший / очень хороший коричневый / чёрный
Candida glabrata DSM 70614 средний / очень хороший коричневый
Saccharomyces cerevisiae ATCC роста нет / слабый
7752
, Proteus mirabilis АТСС 29906 роста нет / слабый
Enterobacter cloacae АТСС роста нет / слабый
13047
Pseudomonas aeruginosa АТСС роста нет / слабый
27853
Escherichia coli АТСС 25922 роста нет
Агар Сабуро 2% глюкозы для культивирования дерматофитов -
SABOURAUD 2% glucose agar for the cultivation of dermatophytes
Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№1.10413.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Среда рекомендована Janke (1961) для культивирования дерматофитов. Georg
(1954) предложил вносить циклогексимид, пенициллин и стрептомицин для
подавления непатогенных сопутствующих бактерий.
Состав (г/л)
Пептон 10,0; глюкоза или мальтоза 20,0; агар-агар 17,0.
Проведение анализа
Среду инокулируют в соответствии с инструкцией. Инкубация до 7 дней при 28°С
аэробно. При работе по методу Ennmons доводят pH до 6,9±0,2 и добавляют
хлорамфеникол (50 мг/л).
Контроль качества
Тест-штаммы Рост
Trichophyton mentagrophytes хороший / очень хороший
Trichophyton rubrum средний / хороший
Microsporum gallinae ATCC 12108 хороший / очень хороший
Trichophyton ajelloi средний / хороший
Microsporum canis хороший / очень хороший
Geotrichum candidum DCM 1240 хороший / очень хороший
Candida albicans ATCC 10231 хороший / очень хороший
Aspergillus niger хороший / очень хороший
Pénicillium commune ATCC 10428 хороший / очень хороший
Агар Мюллер-Хинтон для определения чувствительности
клинически-значимых патогенов -
MUELLER-HINTON agar for testing
the sensitivity of clinicaiiy important pathogens Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№1.10414.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Среда предложена Мюллером и Хинтоном (1941) для оценки чувствительности
клинически важных патогенных микроорганизмов к антибиотикам и
сульфамидным препаратам. Среда соответствует требованиям ВОЗ и DIN
Norm 58930.
Принцип действия
Состав среды обеспечивает благоприятные условия роста и не включает в себя
вещества, разрушающие сульфамидные препараты.
Улучшение условий роста чувствительных микроорганизмов достигается
добавлением к агару крови. Однако, по мнению Jenkins (1985) это может привести к
ошибкам при оценке чувствительности энтерококков к аминогликозидам.
Состав (г/л)
Мясной отвар 2,0; гидролизат казеина 17,5; крахмал 1,5; агар-агар 13,0.
Проведение анализа
Выполняют тест на чувствительность или резистентность по прописям. Инкубация
24 ч при 35°С аэробно.
Контроль качества
Тест-диски Диаметр зон отсутствия роста, мм по ВОЗ
Е. со// Staph, aureus Pseud, Enteroc.
АТСС 25922 АТСС 25923 aeruginosa faecalis АТСС
АТСС 27853 33186
Ампициллин 10 мг 15-20 24-35
- -
Тетрациклин 30 мг 18-25 19-28
- -
Гентамицин 10 мг 19-26 19-27 16-21
-
Полимиксин В 300 ИЕ 12-16 7-13 -
-
Сульфаметоксазол 1,25 мг + 24-32 24-32 16-23
-
Триметоприм 23.75 мг
Селективный агар для выделения патогенных грибов -
Selective
agar for pathogenic fungi for the isolation of pathogenic fungi Merckopiate®
Готовая среда в чашках; Кат.№ 1.10415.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Для выделения патогенных грибов, особенно дерматофитов, из сильно
контаминированного материала.
Принцип действия
Для выделения дерматофитов используется цикло-гексимид. Хлорамфеникол в
значительной мере подавляет бактерии. Могут быть подавлены также и некоторые
патогенные грибы, поэтому необходимо использовать питательные среды,
лишенные ингибиторов. Для подавления хлорамфеникол-резистентных бактерий
рекомендуется добавлять 40 мг/л гентамицин-сульфата (т.е.0,5 мл раствора
гентамицина на 1 л).
Состав (г/л)
Соевый пептон 10,0; глюкоза 10,0; циклогексимид 0,4; хлорамфеникол 0,05, агар-
агар 12,5.
Проведение анализа
Инокулируют поверхность агара и инкубируют до 3 недель приблизительно при 28
°С (комнатная температура), а если предполагается эндомикоз, то при 35 °С.
Образовавшиеся колонии идентифицируют или пересевают на среды без
ингибиторов для дальнейшей дифференциации.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост
Trichophyton mentagrophytes АТСС 18748 хороший / очень хороший
Trichophyton rubrum АТСС 28188 средний / хороший
Microsporum gallinae АТСС 12108 средний / хороший
Trichophyton ajelloi АТСС 28454 средний / хороший
Microsporum canis ATCC 36299 хороший / очень хороший
Geotrichum candidum DSM 1240 хороший / очень хороший
Candida albicans ATCC 10231 хороший / очень хороший
Aspergillus nigerATCC 16404 роста нет / слабый
Pénicillium commune ATCC 10428 роста нет / слабый
Bacillus cereus ATCC 11778 роста нет
Стандартный питательный агар 1 для культивирования
требовательных бактерий -
Standard I nutrient agar for the cultivation of
fastidious bacteria Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№
1.10416.0001; Упаковка - 20 шт/уп
Эта питательная среда подходит для культивирования требовательных
бактерий; после добавления крови, асцитической жидкости или сыворотки их
можно использовать для культивирования стрептококков, пневмококков,
возбудителей рожистого воспаления и др. Может использоваться для учета,
выделения и накопления бактерий и как высококачественная основа для
приготовления специальных питательных сред.
Состав (г/л)
Пептоны 15,0; дрожжевой экстракт 3,0; хлористый натрий 6,0; глюкоза 1,0; агар-агар
12,0.
Ход исследования:
Инкубация 24 ч при 35 °С аэробно.
Контроль качества агара
Тест-штаммы Инокулюм КОЕ/мл Обнаружение, %
Staphylococcus aureus АТСС 25923 10^-10^ >70
Streptococcus pyogenes АТСС 12344 >70
Streptococcus pneumoniae АТСС 6301 lO^-IO'^ >70
Listeria monocytogenes АТСС 19118 10^-10" >70
Erysipelothrix rhusiopathiae ATCC 19414 10^-1 O'’ >70
Escherichia coli ATCC 25922 >70
Shigella flexneri ATCC 12022 lO'^-IO'’ >70
Агар по Киммигу модифицированный для культивирования,
выделения, идентификации и хранения грибов -
Agar for fungi асе. to
Kl ММ IG modified for cultivation, isolation, identification and strain preservation of
fungi Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№ 1.10421.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Среда предложена Kimmig и Rieth (1953) для культивирования, выделения,
идентификации и хранения штаммов грибов. Эта питательная среда
представляет собой улучшенный вариант "Grutz II Agar", полученного путем
его смешивания со Стандратным II питательным бульоном. Она способствует
развитию образований, служащих важным критерием при определении вида.
Агар Киммига может служить также основой для приготовления селективного
агара.
Состав (г/л)
Пептон 15,0; хлористый натрий 1,0; глюкоза 19,0; агар-агар 15,0.
Дополнительно: глицерин 5,0.
Приготовление
Растворить 50 г/л вместе с глицерином, автоклавировать 15 мин при 121 °С.
pH 6,5±0,2 при 25 °С.
Среда прозрачная, желтовато-коричневого цвета.
Приготовление селективного агара: охладить среду до 50 °С, добавить 0,4 г/л
циклогексимида, 40000 ИЕ/л пенициллина и 40 мкг/л стрептомицина или 80 мг/л
колистина и 100мг/л новобиоцина и перемешать. Эти вещества следует вносить в
виде водных растворов (стерилизация фильтрацией).
Проведение анализа
Среду инокулируют материалом, полученным соответствующим способом. Если
материал сильно контаминирован, используют описанный выше селективный агар
или другой, например, Селективный агар для патогенных грибов.
Посевы инкубируют до 3 недель при 25-28 °С.
Идентифицируют колонии.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост
Microsporum gallinae хороший / очень хороший
Trichophyton ajelloi хороший / очень хороший
Trichophyton mentagrophytes хороший / очень хороший
Microsporum canis хороший / очень хороший
Pénicillium spp. хороший / очень хороший
Aspergillus niger хороший / очень хороший
Candida albicans ATCC 10231 хороший / очень хороший
Geotrichum candid urn DSM 1240 хороший / очень хороший
Селективный агар по Тэплину для выделения и быстрой
дифференциации дерматофитов -
Dermatophytes selective agar (DTM)
асе. to TAPLIN for the isolation and rapid differentiation of dermatophytes
Merckopiate®
Готовая среда в чашках: Кат.№ 1.10422.0001
упаковка - 20 шт/уп
Среда предложена Таллином с соавт. (1969) для выделения и ускоренной
дифференциации дерматофитов из разных образцов, в том числе
инфицированных другими микроорганизмами. Сравнительные исследования
Mertz с соавт. (1970) показали, что селективные свойства DTM агара выше, чем
у других сред, используемых для культивирования грибов, и дерматофиты на
нем растут быстрее, вызывая характерное изменение цвета.
Принцип действия
Эта питательная среда содержит рН-индикатор феноловый красный и селективный
t ингибитор циклогексимид, гентамицин и хлортетрациклин, которые частично
подавляют рост бактерий, дрожжей и микромицетов. На этой среде дерматофиты
образуют метаболиты, подщелачивающие кислотный субстрат и изменяющие цвет
индикатора с желтого на красный. Однако, в некоторых случаях изменение цвета
может быть вызвано и другими микроорганизмами. Многие микромицеты образуют
кислые метаболиты, которые не изменяют цвета индикатора. Поэтому на этой среде
возможна быстрая дифференциация дерматофитов от других грибов с высокой
степенью точности (около 97 %).
Состав (г/л)
Соевый пептон 10,0; циклогексимид 0,5; гентамицина-сульфат 0,1; хлортетрациклин
0,1; феноловый красный 0,2; агар-агар 17,0.
Проведение анализа
Среду инокулируют и инкубируют до 7 дней, возможно до 3 недель примерно при 28
°С аэробно.
t
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Покраснение среды
Trichophyton mentagrophytes АТСС слабый / хороший +
18748
Trichophyton rubrum АТСС 28188 слабый / хороший +
Microsporum gallinae АТСС 12108 слабый / хороший +
Microsporum canis АТСС 36299 слабый / хороший +
Geotrichum candidum DSM 1240 средний / хороший ±
Candida albicans ATCC 10231 хороший / очень +
хороший
Aspergillus nigerATCC 16404 роста нет / слабый
Pénicillium commune ATCC 10428 роста нет / слабый
Saccharomyces cerevisiae ATCC роста нет
9763
Bacillus cereus ATCC 11778 роста нет
Escherichia coli ATCC 25922 роста нет
Staphylococcus aureus ATCC 25923 роста нет
Агар с рисовым экстрактом для дифференциации дрожжей -
Rice
®
Extract Agar for the differentiation of yeasts Merckoplate
Готовая среда в чашках; Кат.№1.10424.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Тест-среда по TASCHDJIAN, (1953; 1957) для дифференциации дрожжей,
особенно Candida albicans и Candida stellatoidea от других видов Candida по
образованию типичных хламидоспор. Другие дрожжи, выращиваемые на
агаре с рисовым экстрактом, также могут быть дифференцированы по
микроморфологическим критериям.
Rieth с соавт. (1959) неоднократно подтверждали исключительную важность данной
среды для целей микодиагностики.
Принцип действия
Культуральная среда содержит рисовый экстракт в качестве единственного
источника питательных веществ. Культивирование проходит при недостатке
питательных веществ в сочетании с дефицитом кислорода (культивирование под
покровным стеклом!), что приводит у некоторых видов дрожжей к образованию
специфических морфологических структур (хламидоспоры и псевдомицелий).
Состав (г/л)
Концентрат рисового экстракта 0.7; агар-агар 14.3.
Проведение анализа
С помощью петли берут небольшое количество материала из колоний, которые
являются предположительно Candida. Инокулюм наносят редкими штрихами на
поверхность агара 3-4 широкими зигзагообразными линиями. Место посева на
поверхности агара закрывают стерильными покровными стеклами. Если материал
сильно загрязнен Candida, то можно непосредственно сеять на агар с рисовым
экстрактом.
Вагинальные мазки, взятые ватными тампонами, непосредственно распределяют по
поверхности культурной среды (Taubert а. Smith, 1960).
Инкубируют: до 4 суток при 22°С. Более высоких температур следует избегать,
поскольку выше 37°С хламидоспоры не формируются.
Выросшие на агаре колонии (под покровными стеклами) микроскопируют прямо на
чашке через покровные стекла. Дополнительные исследования проводят согласно
(Ajello et al.,1966).
Структуры гриба Виды грибов и дрожжей
Хламидоспоры (диаметр 6-12 мкм, с Candida albicans, очень редко
толстыми, термоустойчивыми стенками Candida stellatoidea
с двойным контуром)
Псевдомицелий, иногда истинный Прочие виды Candida
мицелий, обычно бластоспоры.
Хламидоспоры отсутствуют
Артроспоры, бластоспоры, истинный Виды Trichospore
мицелий, иногда встречается
псевдомицелий
Бластоспоры, нет ни хламидоспор, ни Другие виды дрожжей
псевдомицелия
Аскоспоры в сумках Совершенные дрожжи
Артроспоры, истинный мицелий, Виды Geotrichum
бластоспоры отсутствуют
Контроль качества
Виды, штаммы дрожжей Рост Псевдомицелий Хламидоспоры
Candida albicans АТСС хороший + +
10231
Candida albicans 6313 хороший + +
Candida stellatoidea NCDC хороший +
-
385
Основа Колумбийского агара для культивирования требовательных
микроорганизмов (в соответствии со стандартами
ep/ usp/ jp и исо) -
Columbia agarbase for the cultivation of fastidious microorganisms
(A ccording harm. EP/USP/JP and ISO)
Кат.№1.10455.0500; упаковка-500 г;
Кат.№1.10455.5000, упаковка - 5000 г
Колумбийский агар - полноценная питательная среда, предложена ЕМпег (1966),
может быть использована для культивирования требовательных микроорга­
низмов, а также как основа для приготовления различных специальных сред.
Колумбийский агар может быть использован для приготовления кровяного или
шоколадного агара, в нее можно добавлять различные ингибиторы для придания
селективных свойств. Колумбийский агар может служить основой для приготовления
молочного агара с лактозой и желточной эмульсией для выделения клостридий,
требовательных к условиям роста. AL-Jumaili и Bint (1981) рекомендовали к
Колумбийскому агару добавлять кровь, циклосерин и цефокситин для выделения
Clostridium difficile. Колумбийский агар может быть использован также в тесте на
токсичность (вирулентность) Corynebacterium diphteriae методом диффузии в агар по
Hermann (1958). Greenwood (1977) на основе этого агара приготовили агар для
культивирования Gardnerella vaginalis, а Bannermann и Bille на основе колумбийского
агара приготовили агар с акрифлавином и цефтацидимом для культивирования
листерий из продуктов питания.
Состав (г/л) Специальный питательный субстрат 23,0; крахмал 1,0; хлористый натрий
5,0; агар-агар 13,0
Приготовление
Растворить 42 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в
течение 20-30 минут; автоклавировать 15 мин при 121°С. Охладить до 45-50°С перед
смешиванием с термолабильными добавками. pH 7,3±0,2 при 25°С. Среда прозрачная,
желтовато-коричневого цвета. После добавления крови среда ярко-красная.
Приготовление кровяного агара. Равномерно смешать 5 мл крови с 95 мл стерильной
питательной среды.
Приготовление кровяного агара с гентамицином. 100 мл дефибринированной
овечьей крови и 0,11 мл раствора гентамицина равномерно смешать с 900 мл
стерильной питательной среды.
Приготовление "шоколадного" агара. 10 мл крови смешать с 90 мл основы
питательной среды. Нагревать смесь на водяной бане при 80°С в течение 10 мин при
постоянном перемешивании до тех пор, пока она не станет коричневой.
Приготовление молочного агара с лактозой и яичной эмульсией. Растворить 42 г
Колумбийского агара, 12 г лактозы, 1 г агар-агара в 1 л дистиллированной воды.
Добавить 33 мл/л 0,1% водного раствора нейтрального красного, установить pH 7,0 и
автоклавировать 15 мин при 121°С. Охладить до 45-50°С, добавить примерно 35 мл
яично-желточной эмульсии, 10 г сухого молока на 1 л среды и тщательно перемешать.
)оль качества
Тест-штаммы Инокулюм, Рост, % Гемолиз Бацитраци-
КОЕ/МЛ Без крови С кровью новый тест
irichia соН АТСС 25922 10^-10^ >70 >70
tylococcus aureus АТСС 25923 10^-10^ >70 >70 Р
-
tococcus pyogenes АТСС 10^-10^ >70 >70 Р +
4
'tococcus pyogenes АТСС 10^-10' >70 >70 Р +
9
itococcus pneumoniae АТСС 10"-10" >70 >70 а -
rococcus faecalis АТСС 19433 10"-10" >70 >70
- -
'lus cereus ATCC 11778 10^-10" >70 >70 ___ Р___
¡ктивный агар Никерсона для выделения и предварительной
рференциации Candida и других дрожжей -
Candida Elective Agar асе.
lICKERSON for the isolation and preliminary differentiation of Candida and other
ts
Кат.№ 1.10456.0500,
Упаковка - 500 г
I выделения и предварительной дифференциации Candida и других дрожжей
-(икерсону (1953).
1НЦИП действия
I питательная среда содержит, кроме питательной основы, состоящей из
•жжевого экстракта, глицерина и глюкозы, «висмут-сульфитный индикатор», который
дественно подавляет рост сопутствующих микроорганизмов. Candida и другие
)жжи развиваются нормально. Они восстанавливают сульфит висмута и
-ашиваются в цвета от коричневого до черного. Добавление 2 мг/л неомицина
ливает угнетение сопутствующей бактериальной флоры.
1
став (г/л)
ожжевой экстракт 1,0; соевый пептон 1,0; ГЛИЦИН 10,0; глюкоза 10,0; висмут-
пьфитный индикатор 2,0; агар-агар 15,0.
1иготовление
Створить 40 г/л, хорошо перемешать, чтобы образующийся осадок распределился
1
вномерно, разлить в чашки. Среда не подлежит автоклавированию.
1 6,5±0,2 при 25С.
)товая среда опалесцирует, желтовато-белого цвета.
роведение анализа
оверхность питательной среды засевают культурой, взятой из колонии, либо
арингеальным или вагинальным отделяемым, взятым стерильным ватным тампоном,
нкубация 4 дня при 28С аэробно или, если необходимо, при 35С .
падкие тестообразные колонии цветом от коричневого до черного, обычно образованы
рожжами. Окрашенные подобным образом колонии бактерий или дрожжеподобных
эибов обычно не растут на этой среде и могут быть дифференцированы
мкроскопированием. Дерматофиты и плесневые грибы на этой среде появляются
редко и легко отличаются по воздушному мицелию. Для идентификации Candida и
дифференциации дрожжей следует выполнить дальнейшие тесты (напр., на Агаре с
рисовым экстрактом). Биохимические методы идентификации видов Candida описаны
Martin и Schneidau (1970).
Контроль качества
Тест-штаммы Рост, выход, % Цвет колоний
Candida albicans АТСС 10231 хороший/очень хор. >70% коричневый / чёрный
Candida albicans 1021 хороший / очень хороший коричневый / чёрный
Candida glabrata DSM 70614 средний / очень хороший коричневый
Saccharomyces cerevisiae АТСС роста нет / слабый
7752
Proteus mirabilis АТСС 29906 роста нет / слабый
Enterobacter cloacae АТСС роста нет / слабый
13047
Pseudomonas aeruginosa АТСС роста нет / слабый
27853
Escherichia coli АТСС 25922 роста нет
Триптозный бульон для обогащения и культивирования
требовательных латогенных микроорганизмов - Tryptose Broth for the
enrichment and cultivation of fastidious pathogenic microorganisms
Кат. №1.10676.0500
Упаковка - 500 г
Триптозный бульон для накопления, выделения, культивирования и
дифференциации преимущественно бруцелл, но также и стрептококков,
пневмококков, менингококков, листерий пастерелл и других патогенных
микроорганизмов. Питательная среда предложена Hausler и Koontz (1970) для
диагностических целей.
Принцип действия
Триптозный бульон используется для культивирования требовательных
микроорганизмов. Возможно также использование среды для изготовления антигенов
(Silverman и Elberg, 1950), выделения Listeria monocytogenes из мозга (Gray с соавт.,
1948), приготовления селективного агара для листерий добавлением теллурита калия
(Gray с соавт., 1950).
Состав (г/л)
Триптоза 20,0; глюкоза 1,0; хлористый натрий 5,0; тиамин-хлорид 0,005.
Приготовление
Растворить 26 г триптозного бульона в 1 л, дистиллированной воды, автоклавировать
15 мин при 121°С. pH 7,3±0,2 при 25°С. Готовая среда прозрачная, желтовато-
коричневого цвета.
Проведение анализа
Для культивирования требовательных микроорганизмов используют триптозный
бульон.
контроль качества
Тест-штаммы Рост
Streptococcus pyogenes АТС 12344 хороший / очень хороший
Streptococcus pneumoniae АТСС 6301 хороший / очень хороший
Pasteurella multocida АТСС 43137 средний / хороший
Listeria monocytogenes АТСС 19188 хороший / очень хороший
Shigella flexneh АТСС 12022 хороший / очень хороший
Escherichia coli aTCC 25922 хороший / очень хороший
Staphylococcus aureus ATCC 25923 хороший / очень хороший
Агар МакКонки для выделения сальмонелл, шигелл и колиформных
бактерий -
MacCONKEY agar for the isolation of Salmonella, Shigella and
conform bacteria Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№ 1.10748.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Селективная среда для выделения сальмонелл, шигелл, колиформных бактерий
из фекалий, мочи, пищевых продуктов, сточных вод по МакКонки (1950). Состав
среды полностью соответствует рекомендациям USP ХХШ (1995) и Европейской
фармакопеи ЕР II.
Принцип действия
Соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый значительно подавляют рост
грамположительной микрофлоры. Лактоза и индикатор нейтральный красный служат
для обнаружения расщепления лактозы.
Состав (г/л)
Пептон из казеина 17,0; мясной пептон 3,0; хлорид натрия 5,0; лактоза 10,0; смесь
солей желчных кислот 1,5; нейтральный красный 0,003; кристаллический фиолетовый
0,001; агар-агар 13,5.
Проведение анализа
Материал для исследования распределяют поверхностным методом. Инкубация 18-24ч
при 35°С аэробно. Лактозоотрицательные колонии бесцветные; лактозоположительные
- красные и окружены мутной зоной преципитации желчных солей вследствие снижения
pH.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Бесцветные, прозрачные Salmonella, Shigella и другие
Крупные, красные, окруженные зоной преципитации Escherichia coli
Крупные, розовые, слизистые Enterobacter, Klebsiella
Очень мелкие, непрозрачные, изолированные Enterococci, Staphylococci и dp.
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм, Выход, Цвет Цвет среды Осадок
КОЕ /мл (%) колоний
Escherichia coli ATCC 8739 10"-10" >30 Красный Красный +
Salmonella typhimurium ATCC 10"-10" > 30 Бесцветный Желтоватый +
14028
Salmonella dublin ATCC 15480 10^-10" >30 Бесцветный Желтоватый
-
Shigella sonnei ATCC 11060 10^-10" >30 Бесцветный Желтоватый
-
Proteus mirabilis ATCC 29906 10^-10^ >30 Бесцветный Желтоватый
-
Накопительный бульон по Хайну для селективного обогащения
грам-отрицательных бактерий - GN enrichment broth асе. to HAJNA for the
sélective cultivation of Gram-negative intestinal bacteria
KaT.N1.10756.0500
Упаковка - 500 г
Питательная среда предложена Hajna (1955) для селективного культивирования
грамотрицательных кишечных бактерий (в частности, Shigella) из различных
материалов.
При предварительном обогащении материала на накопительном бульоне достигается
больший выход шигелл, чем при непосредственном высеве на селективные или
элективные плотные среды (Croît и Miller, 1956). Выход сальмонелл и шигелл
значительно увеличивается при комбинировании с ксилозолизиновым агаром с
дезоксихолатом натрия (Кат. № 1.05287)
Принцип действия
Питательной основой служит триптоза. Цитрат и дезоксихолат действуют как
селективные агенты и подавляют рост грамположительных микроорганизмов (в
частности, фекальных стрептококков), всех типов бацилл и некоторых колиформных
бактерий. Маннит способствует росту метаболизирующих манит сальмонелл и шигелл.
Фосфатный буфер предотвращает преждевременное закисление среды кислыми
продуктами метаболизма. Если в материале присутствуют Proteus и Pseudomonas
aeruginosa, в течение первых 6-8 ч они развиваются медленнее, чем сальмонеллы и
шигеллы.
Состав, г/л
Триптоза 20,0; глюкоза 1,0; Д(-) маннит 2,0; калий фосфорнокислый однозамещенный
1,5; хлористый натрий 5,0; натрий лимоннокислый 5,0; дезоксихолат натрия 0,5.
Приготовление
Растворить 39 г/л воды, распределить в необходимую посуду, автоклавировать 15 мин
при 121 X. pH 7,0±0,2 при 25 X.
Готовый бульон прозрачный, желтоватого цвета.
Проведение анализа
Инокулируют бульон исследуемым материалом. Инкубируют около 6 ч при комнатной
температуре аэробно. Пересевают на элективные плотные среды.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост
Shigella flexneri АТСС 12022 хороший
Shigella sonnei АТСС 11060 хороший
Salmonella typhimiihum АТСС 14028 хороший
Salmonella enteritidis NCTC 5188 хороший
Escherichia coli ATCC 25922 хороший
Staphylococcus aureus АТСС 25923 роста нет
Enterococcus faecalis АТСС 11700 роста нет
Bacillus cereus АТСС 11778 роста нет
Основа кровяного агара для выделения и культивирования
различных требовательных микроорганизмов- Blood Agar (base) for the
isolation and cultivation of various fastidious microorganisms
Кат.№ 1.10886.0500
Упаковка - 500 г
Среда для приготовления кровяного или шоколадного агара для выделения и
культивирования различных микроорганизмов, особенно патогенных видов, а
также для определения характера гемолиза. Эта культуральная среда без
добавления крови может также использоваться как основа для приготовления
других сред.
Принцип действия
Культуральная среда представляет богатую питательную основу, которая обеспечивает
оптимальные условия для роста микроорганизмов. pH среды 6,8 стабилизирует
эритроциты и создает благоприятные условия для образования ясных зон гемолиза.
Лучше всего для определения гемолиза подходит свежая дефибринированная кровь
барана. Шоколадный агар является чрезвычайно богатой средой и получается при
нагревании кровяного агара после добавления крови. Если используется основа
кровяного агара без добавления крови, то pH среды должен быть доведен до 7,2-7,4,
поскольку большинство бактериальных колоний вырастают быстрее и растут лучше на
слегка щелочной среде. Tarshis и Frish (1951) рекомендовали добавлять 1% глицерол и
25% человеческой крови при выделении возбудителя туберкулеза из мокроты. Hosty
(1953) сообщил, что достаточно 0,1% глицерола и 2,5% человеческой крови и 100
ед/моль пенициллина в качестве селективного агента. Согласно Sondag (1977) и Black
van Buskirk (1973) добавление 5мг/л гентамицина к кровяному агару позволяет
селективно культивировать Streptococcus pneumoniae и других стрептококков, а также
бактериоды, клостридии и дрожжи. Для селективного культивирования Aeromonas
рекомендуется использовать кровяной агар с ампицилином.
Состав среды, (г/л):
Питательный субстрат (сердечная вытяжка и пептоны) 20.0; хлорид натрия 5.0; агар-
агар 15.0.
Следует добавить: кровь 50-80 мл
Приготовление среды:
Растворить 40 г в 1л дистиллированной воды, автоклавировать 15 мин. при 121 С.
Охладить до 45-50С. Необходимо добавить: 5-8% дефибринированной крови,
перемешать.
pH: 6.8±0,2 при 25°С
Перед добавлением крови приготовленная среда прозрачная и желтовато-коричневого
цвета. После добавления крови - красная, без гемолиза. Готовые чашки со средой
можно хранить в холодильнике 3 месяца. Приготовление шоколадного агара: после
добавления крови следует нагревать культуральную среду 10 минут при 80С с частым
перемешиванием до образования коричневого (шоколадного) цвета.
Ход исследования:
Распределить образец по поверхности чашки со средой. Инкубировать при 37С в
течение 24 часов. (Clostridium perfringens инкубировать в анаэробных условиях)
Учет результатов:
Тест-штаммы Инокулюм Выход, % Гемолиз Бацитрацин
(КОЕ/мл) тест
Staphylococcus aureus АТСС 25923 10^-1 O' 70 а
Staphylococcus pyogenes ATCC 10'-10' 70 0> +
12344
Streptococcus agalactiae ATCC 13813 10'-10' 70
- -
Streptococcus pneumoniae ATCC 10'-10' 70 а -
6301
Listeria monocytogenes ATCC 19118 ЙО^ 70 (i
Bacillus cereus ATCC 11778 ИО^ 70 (i
Clostridium perfringens ATCC 13124 ЮМО' 70 В
Селективный агар (DTM) по Тэплину для выделения и быстрой идентификации
дерматофитов - Dermatophyte selective agar (DTM) асе. to TAPLIN for the isolation and rapid
differentiation of dermatophytes
Кат.№
1.10896.0500
Упаковка - 500 г
4
Среда предложена Таллином с соавт. (1969) для выделения и ускоренной
дифференциации дерматофитов из разных образцов, в том числе
инфицированных другими микроорганизмами. Сравнительные исследования
Мег1г с соавт. (1970) показали, что селективные свойства ОТМ агара выше, чем у
других сред, используемых для культивирования грибов, и дерматофиты на нем
растут быстрее, вызывая характерное изменение цвета.
Принцип действия
Эта питательная среда содержит рН-индикатор феноловый красный и селективный
ингибитор циклогексимид, гентамицин и хлортетрациклин, которые частично
подавляют рост бактерий, дрожжей и микромицетов. На этой среде дерматофиты
образуют метаболиты, подщелачивающие кислотный субстрат и изменяющие цвет
индикатора с желтого на красный. Однако, в некоторых случаях изменение цвета
может быть вызвано и другими микроорганизмами. Многие микромицеты образуют
кислые метаболиты, которые не изменяют цвета индикатора. Поэтому на этой среде
возможна быстрая дифференциация дерматофитов от других грибов с высокой
степенью точности (около 97 %).
Состав (г/л)
Соевый пептон 10,0; циклогексимид 0,5; гентамицина-сульфат 0,1; хлортетрациклин
0,1; феноловый красный 0,2; агар-агар 17,0.
Приготовление
Растворить 38 г/л, автоклавировать в мягких условиях (10 мин при 121 °С ), разлить в
чашки или приготовить скошенный агар.
pH 5,5±0,2 при 25°С. Среда прозрачная, желтовато-оранжевая.
Проведение анализа
Среду инокулируют и инкубируют до 7 дней, возможно до 3 недель примерно при 28 °С
аэробно.
Тест-штаммы Рост Покраснение среды
Trichophyton mentagrophytes АТСС слабый / хороший + 1
18748
Trichophyton rubrum АТСС 28188 слабый / хороший + 1
Microsporum qallinae АТСС 12108 слабый / хороший + 1
i Microsporum canis ATCC 36299 слабый / хороший + 1
Geotrichum candidum DSM 1240 средний / хороший ±
Candida albicans ATCC 10231 хороший / очень хороший +
Aspergillus nigerATCC 16404 роста нет / слабый
\ Pénicillium commune ATCC 10428 роста нет / слабый 1
Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 роста нет
Bacillus cereus ATCC 11778 роста нет
Escherichia coli ATCC 25922 роста нет
Staphylococcus aureus ATCC 25923 роста нет
53
Агар DHL по Саказаки для определения и выделения
патогенных энтеробактерий DHL адагасс. to SAKAZAKIfor the
-
detection and isolation of pathogenic Enterobacteriaceae
KaT.N1.11435.0500
Упаковка - 500 г
Дезоксихолат-сероводород-лактозный агар используется для
обнаружения и выделения патогенных энтеробактерий из материалов
всех видов. Среда представляет собой модификацию дезоксихолатного
агара Саказаки (1960,1971).
Принцип действия
Образование H S обнаруживается по почернению колоний в результате
2
образования сульфида железа. Хотя Proteos является сероводород-
положительным, его колонии не чернеют. Колонии Proteos, Morganella,
Rettgerella и Providencia, окружены темно-коричневой зоной вследствие
взаимодействия этих микроорганизмов с фенилаланином пептона и
образования фенилпирувата, который образует комплекс с ионами железа (III).
Присутствие сахарозы делает возможной дифференциацию слабо
лактозоположительных или лактозоотрицательных сахарозо-положительных
видов от сахарозо- и лактозоотрицательных энтеробактерий.
Дезоксихолат существенно подавляет рост грамположительных бактерий и
предупреждает роение видов протея. Среда обеспечивает богатую
питательную основу и содержит относительно малое количество ингибитора
дезоксихолата. Эти ее свойства делают возможным рост даже очень
требовательных штаммов Salmonella и Shigella. Они образуют колонии
значительно более крупные, чем на других селективных средах. Proteos,
Morganella, Rettgerella и Providencia могут быть дифференцированы от
Salmonella.
Состав (г/л)
Казеиновый пептон 10,0; мясной пептон 10,0; мясной экстракт 3,0; лактоза 10,0;
сахароза 10,0; L-цистеин солянокислый 0,2; цитрат натрия 1,0; дезоксихолат
натрия 1,5; тиосульфат натрия 2,0; железо(111)-аммиачный цитрат 1,0;
нейтральный красный 0,03; агар-агар 15,0.
Приготовление
Растворить 63,5 г/л, разлить в чашки толстым слоем (около 20 мл на чашку).
Среда не подлежит автоклавированию.
pH 7,2±0,2 при 25С. Среда прозрачная, красного цвета.
Проведение анализа
Материал из накопительной культуры распределяют тонким слоем по
поверхности агара. Инкубируют 24-48 ч при 35С аэробно.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Красные, окруженные зоной Escherichia coli
преципитации, плоские, средних размеров
Розовые с красным центром, часто Enterobacter, Klebsiella и другие
слизистые
Бесцветные, иногда с черным центром Citrobacter
54
Бесцветные, окруженные темно- Proteus mirabilis, Morganella,
коричневой зоной Rettgerella, Providencia
Красные, окруженные темно-коричневой Proteus vulgaris
зоной
Бесцветные , с черным центром Salmonella Arizona)
(eKfi..
Бесцветные, крупные, плоские Shigella
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Цвет Черный Пит. среда
колоний центр
Escherichia coli ATCC 25922 хороший / очень красный - преципитат
хороший
Klebsiella pneumoniae ATCC хороший / очень розовый преципитат
-
10031 хороший
Salmonella typhimurium ATCC хороший / очень бесцветные +
-
14028 хороший
Salmonella enteritidis ATCC хороший / очень бесцветные +
-
13076 хороший
Proteus vulgaris ATCC 13315 средний / хороший розовый коричн.
-
зона
Proteus mirabilis ATCC 14153 хороший / очень бесцветные ± коричн.
хороший зона
Shigella flexneri ATCC 12022 средний / хороший бесцветные
- -
Enterococcus faecalis ATCC роста нет / слабый
11700
Staphylococcus aureus ATCC роста нет
25923
Bacillus cereus ATCC 11778 роста нет
Гектоеновый агар для определения и выделения патогенных
кишечных бактерий -
Hektoen enteric agar for the detection and
isolation of pathogenic intestinal bacteria
Кат.№1.11681.0500
Упаковка - 500 г
Селективный агар, предложенный King и Metzger (1968) для обнаружения
и выделения патогенных энтеробактерий включая Salmonella и Shigella из
различных объектов.
При сравнении с другими селективными средами (SS-arap, BPLS-arap -
(лактозный агар с бриллиантовым зеленым и феноловым красным), висмут-
сульфитный агар) гектоеновый агар слабее угнетает Salmonella и Shigella,
обеспечивая их хороший рост, и в то же время достаточно подавляет развитие
сопутствующих микроорганизмов.
Принцип действия
Колонии лактозо-позитивных бактерий четко отличаются по цвету от лактозо­
негативных благодаря присутствию двух индикаторов: бромтимолового синего
и кислого фуксина. Такое различие в цвете наблюдается даже у колоний, слабо
ферментирующих лактозу, благодаря присутствию сахарозы и салицина. Эти
соединения легче ферментируются, поэтому ложноположительного результата
можно избежать. Сочетание тиосульфата как реактивного компонента и солей
55
железа как индикатора приводит к почернению Н23-положительных
колоний. Смесь солей желчных кислот подавляет рост большинства
сопутствующих микроорганизмов. Hoben (1973) рекомендует внесение 10-20
мг/л новобиоцина для усиления селективных свойств среды, т.е. подавления
Citrobacter и Proteus, которые образуют колонии, похожие на колонии
Salmonella (черный центр).
Состав (г/л)
Пептоны 15,0; хлористый натрий 5,0; дрожжевой экстракт 3,0; сахароза 14,0;
лактоза 14,0; салицин 2,0; тиосульфат натрия 5,0; цитрат аммонийного железа
1,5; смесь солей желчных кислот 2,0; бромтимоловый синий 0,05; фуксин
кислый 0,08; агар-агар 13,5.
Приготовление
Растворить 75 г среды в 1 л дистиллированной воды и дать среде набухнуть в
течение 20-30 минут. Осторожно подогревать до кипения и полного
растворения среды.
Среду не автоклавировать! При необходимости добавить 15 мг/л
новобиоцина в охлажденную до 50°С среду в виде простерилизованного
фильтрованием раствора. Готовую среду разлить в чашки. pH 7,7±0,2 при 25
°С.
Проведение анализа
Питательную среду инокулируют материалом из накопительной культуры
тонким слоем. Инкубация 18-24 ч при 35°С аэробно. Внешний вид колоний
бактерий приведен в таблице. Предполагаемые колонии патогенных видов
должны быть подвергнуты дальнейшим исследованиям для подтверждения
идентификации.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Зеленые, влажные, плоские, прозрачные Shiqella, Providencia
Сине-зеленые с черным центром или без Salmonella, Paracolobactum, Proteus
него
Цвет от зеленого до синеватого, колонии Pseudomonas
плоские с неровными краями
Оранжево-красные, окруженные зоной Колиформные бактерии
преципитации
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм, Выход Цвет колоний Черны Преципита
КОЕ/МЛ . (%) й цвет т
Escherichia coli АТСС 25922 < 10" >30 Оранжево­ - ±
красный
Enterobacter cloacae АТСС 10"-10" >30 Оранжево­ ±
-
13047 красный
Klebsiella pneumoniae АТСС 10"-10" >30 Оранжево­ - +
13883 красный
Salmonella typhimurium ATCC 10^-10® >20 Сине- +
14028 зеленый
Salmonella enteritidis ATCC 10"-10^ > 20 Сине- +
-
13076 зеленый
Shigella flexneri ATCC 12022 10"-10^ >5 Зеленый -
сине-
зеленый
56
: Shigella sonnei ATCC 11060 10^-10" >20 Зеленый -
сине-
зеленый
Proteus mirabilis ATCC 14273 10^-10" > 30 Зеленый - ±
сине-
зеленый
Enterococcus faecalis ATCC > 10^ < 0,01
11700
Staphylococcus aureus ATCC > 10" < 0,01
25923
Агар Мюллер-Хинтон для определения чувствительности
клинически-значимых патогенов -
MUELLER-HINTON agar for
testing the sensitivity of clinically important pathogens Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№1.13405.0001
Упаковка - 480 шт/уп
Среда предложена Мюллером и Хинтоном (1941) для оценки
чувствительности клинически важных патогенных микроорганизмов к
антибиотикам и сульфамидным препаратам. Среда соответствует
требованиям ВОЗ и DIN Norm 58930.
Принцип действия
Состав среды обеспечивает благоприятные условия роста и не включает в себя
вещества, разрушающие сульфамидные препараты.
Улучшение условий роста чувствительных микроорганизмов достигается
добавлением к агару крови. Однако, ло мнению Jenkins (1985) это может
привести к ошибкам при оценке чувствительности энтерококков к
аминогликозидам.
Состав (г/л)
Мясной отвар 2,0; гидролизат казеина 17,5; крахмал 1,5; агар-агар 13,0.
i
Проведение анализа
Выполняют тест на чувствительность или резистентность по прописям.
Инкубация 24 ч при 35°С аэробно.
Контроль качества
Т ест-диски Диаметр зон отсутствия роста, мм по ВОЗ
Е. соН Staph, Pseud, Enteroc.
АТСС 25922 aureus aeruginosa faecalis ATCC
ATCC 25923 ATCC 27853 33186
Ампициллин 10 мг 15-20 24-35
- -
Тетрациклин 30 мг 18-25 19-28
- I
Гентамицин 10 мг 19-26 19-27 16-21
-
Полимиксин В 300 ИЕ 12-16 7-13
- -
Сульфаметоксазол 1,25 мг 24-32 24-32 16-23
+
Триметоприм 23.75 мг
57
Кровяной агар для выделения и культивирования различных
требовательных микроорганизмов - Blood agar for the isolation and
cultivation of various fastidious microorganisms Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№1.13414.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Улучшенный кровяной агар для культивирования требовательных
патогенных и других микроорганизмов, для определения формы
гемолиза.
Состав (г/л)
Питательный субстрат (дрожжевой экстракт, пептон, гидролизат печени) 23,0;
хлористый натрий 5,0; агар-агар 12,0.
Проведение анализа
Посевы инкубируют при оптимальных условиях, 24ч при 35°С аэробно (для
Cl.perfringens - анаэробно). Исследуют реакцию гемолиза.
Контроль качества
Тест штаммы Инокулюм Обнаружение, Гемолиз Бацитрацин
i , КОЕ/мл (%) тест
Staphylococcus aureus АТСС 25923 10^-10^ >70 P
-
Streptococcus pyogenes АТСС 19615 10^-10® >70 3 +
Streptococcus pneumoniae АТСС 10"-10" >70 a
-
'6305
Streptococcus agalactiae АТСС 10^-10^ >70
“ -
13813
Listeria monocytogens ATCC 19118 10"-10" >70
-
Bacillus cereus ATCC 11778 10"-10^ >70 P
Clostridium perfringens ATCC 13124 10^-10® >70 __ P__
58
Кровяной агар для выделения и культивирования различных
требовательных микроорганизмов - Blood agar for the isolation and
cultivation of various fastidious microorganisms Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№1.13421.0001
Упаковка - 480 шт/уп
Улучшенный кровяной агар для культивирования требовательных
патогенных и других микроорганизмов, для определения формы
гемолиза.
Состав (г/л)
Питательный субстрат (дрожжевой экстракт, пептон, гидролизат печени) 23,0;
хлористый натрий 5,0; агар-агар 12,0.
Проведение анализа
Посевы инкубируют при оптимальных условиях, 24ч при 35°С аэробно (для
С1.ре1^ппдеп5 - анаэробно). Исследуют реакцию гемолиза.
Контроль качества
Тест штаммы Инокулюм Обнаружение, Гемолиз Бацитрацин
, КОЕ/МЛ (%) тест
Staphylococcus aureus АТСС 25923 10^-10" >70 (3 -
Streptococcus pyogenes АТСС 19615 lOMO^ >70 3 +
Streptococcus pneumoniae АТСС 10"-10" >70 a
-
6305
Streptococcus agalactiae АТСС loMo" >70
- -
13813
Listeria monocytogens ATCC 19118 10^-10" >70
-
Bacillus cereus ATCC 11778 10^-10" >70 3
Clostridium perfringens ATCC 13124 lO'-IO® >70 ___ 3___
59
Агар Мюллер-Хинтон с кровью для определения
чувствительности клинически-значимых патогенов -
MUELLER-
HINTON agar with blood for testing the sensitivity of clinically important
pathogens Merckoplate®
Готовая среда в чашках; Кат.№1.13571.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Среда предложена Мюллером и Хинтоном (1941) для оценки
чувствительности клинически важных патогенных микроорганизмов к
антибиотикам и сульфамидным препаратам. Среда соответствует
требованиям ВОЗ и DIN Norm 58930.
Принцип действия
Состав среды обеспечивает благоприятные условия роста и не включает в себя
вещества, разрушающие сульфамидные препараты.
Улучшение условий роста чувствительных микроорганизмов достигается
добавлением к агару крови. Однако, по мнению Jenkins (1985) это может
привести к ошибкам при оценке чувствительности энтерококков к
аминогликозидам.
Состав (г/л)
Мясной отвар 2,0; гидролизат казеина 17,5; крахмал 1,5; агар-агар 13,0. В
состав среды входит кровь.
Проведение анализа
Выполняют тест на чувствительность или резистентность по прописям.
Инкубация 24 ч при 35°С аэробно.
Контроль качества
Тест-диски Диаметр зон отсутствия роста, мм по ВОЗ
Е. соН Staph, Pseud, Enteroc.
АТСС 25922 aureus aeruginosa faecalis АТСС
АТСС 25923 АТСС 27853 33186
Ампициллин 10 мг 15-20 24-35 -
-
Тетрациклин 30 мг 18-25 19-28 -
-
Гентамицин 10 мг 19-26 19-27 16-21
-
Полимиксин В 300 ИЕ 12-16 7-13 -
-
Сульфаметоксазол 1,25 мг 24-32 24-32 16-23
+
Триметоприм 23.75 мг
60
Агар с сердечно-мозговой вытяжкой для
культивирования требовательных микроорганизмов -
Brain
heart agar for the c u lt i v a t io n o f f a s t i d i o u s
m icroorganism s
Кат.№ 1.13825.0500
Упаковка - 500 г
Для культивирования различных патогенных микроорганизмов,
требовательных к условиям роста. Среда полностью соответствует
требованиям Standard Methods of Water and Wastewater (1992), DIN Norm
10163 no исследованию мяса и LMBG по контролю продуктов питания.
Принцип действия
Среда составлена на основе среды Rosenow (1979), содержащей кусочки
мозговой ткани, и может быть использована для культивирования многих
требовательных к условиям роста бактерий таких, как стрептококки,
пневмококки, менингококки и др. Добавление сыворотки крови позволяет
культивировать гонококки. Бульон с сердечно-мозговой вытяжкой удобно
использовать для культивирования стафилококков перед постановкой теста на
плазмокоагулазу. Рост анаэробов и микроаэрофильных бактерий значительно
улучшается при добавлении небольшого количества агар-агара (0,05-0,2%) к
бульону. На основе агара с сердечно-мозговой вытяжкой Queiroz (1987)
разработал селективный агар для культивирования Campylobacter pylori - Belo
Horisont Medium (BMH). Агар c сердечно-мозговой вытяжкой подходит для
культивирования не только бактерий, но и патогенных грибов. Рост
сопутствующей бактериальной микрофлоры может быть подавлен
добавлением 20 IU пенициллина и 40 мкг стрептомицина на 1 мл среды. Если
данную среду планируется использовать для селективного выделения
требовательных к условиям роста грибов (особенно Histoplasma capsulatum и
Blastomyces) из образцов со смешанной инфекцией, то следует добавить 0,05
мкг/мл циклогексимида и 0,5 мкг/мл хлорамфеникола. Эта среда менее
пригодна (из-за содержания в ней глюкозы) для идентификации гемолитических
форм, для которых следует добавлять кровь.
Состав (г/л)
Питательный субстрат (экстракты из мозговой и сердечной тканей и пептоны)
27,5; глюкоза 2,0; хлористый натрий 5,0; натрий фосфорнокислый
двузамещенный 2,5; агар-агар 15,0.
Приготовление
Растворить 52 г среды в 1 л дистиллированной воды, дать среде набухнуть в
течение 20-30 минут; автоклавировать 15 мин при 121°С. pH 7,4±0,2 при 25°С.
Среда прозрачная, иногда слабо опалесцирует, коричневого цвета.
Ход исследования
Зависит от целей исследования.
Контроль качества
Тест-штаммы АТСС Рост
Streptococcus pyogenes АТСС 12344 хороший / очень хороший
Streptococcus pneumoniae АТСС 6301 хороший / очень хороший
Staphylococcus aureus АТСС 25923 хороший / очень хороший
Erysipelothrix rhusiopathiae АТСС хороший / очень хороший
61
19414
Lactobacillus acidophilus АТСС 4356 средний / хороший
Clostridium perfringens АТСС 10543 хороший / очень хороший (анаэробно)
Clostridium sporogenes АТСС 11437 хороший / очень хороший (анаэробно) 1
Агар Рамбаха для идентификации сальмонелл -
RAMBAChf® agar
for the identification of Salmonella Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№ 1.13999.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Рамбах-агар - хромогенная дифференциально-диагностическая среда для
идентификации сальмонелл в пищевых продуктах, сырье и клиническом
материале.
Принцип
Питательные вещества РАМБАХ-агара обеспечивают быстрый рост
энтеробактерий. Дезоксихолат натрия ингибирует сопутствующую
грамположительную микрофлору. Сальмонеллы продуцируют кислоту из
пропиленгликоля, в результате чего происходит изменение рН-среды, и
колонии сальмонелл окрашиваются в красный цвет. Для дифференциации
сальмонелл от колиформных бактерий в состав среды включена хромогенная
смесь, которая выявляет наличие фермента В-галактозидазы - характерного
фермента колиформных бактерий. Колиформные бактерии растут в виде сине-
зеленых или сине-фиолетовых колоний. Остальные энтеробактерии и
грамотрицательные бактерии, такие как Proteus, Pseudomonas, Shigella
вырастают в виде бесцветных-желтоватых колоний. РАМБАХ-агар
обеспечивает однозначную дифференциацию сальмонелл от других бактерий.
Состав среды (г/л)
Пептон 8.0; хлорид натрия 5.0; дезоксихолат натрия 1.0; хромогенная смесь 1.5;
пропиленгликоль 10.5; агар-агар 15.0.
После этапа селективного обогащения посеять на % поверхности агара петлей.
Для того чтобы получить изолированные колонии - той же петлей посеять на
оставшуюся поверхность чашки. Инкубировать в аэробных условиях 24-48
часов при 35-37°С.
Микроорганизмы Цвет колоний
Salmonella spp.* Красный
Колиформы Синие или сине-фиолетовые
Другие энтеробактерии Бесцветные или желтоватые
62
Агар BPLS для выделения сальмонелл BPLS agarf or the
-
isolation of Salmonella Merckoplate^
Готовая среда в чашках: Кат.№ 1.15164.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Селективный агар для выделения Salmonella кроме S. typhosa и Shigella
из патологического материала, фекалий, мочи, продуктов питания,
фармацевтического материала и т.п. Эта питательная среда соответствует
рекомендациям USP XXIII (1995) и ЕР II.
Принцип действия
Росту сальмонелл способствует богатая питательная основа. Росту
сопутствующих микроорганизмов препятствует увеличенная концентрация
бриллиантовой зелени. Сальмонеллы не ферментируют ни сахарозу, ни
лактозу. Присутствие этих сахаров позволяет идентифицировать
сопутствующие слабо лактозоположительные или лактозоотрицательные, но
сахарозоположительные микроорганизмы.
Состав (г/л)
Мясной пептон 5,0; казеиновый пептон 5,0; дрожжевой экстракт 3,0; хлористый
натрий 5,0; лактоза 10,0; сахароза 10; феноловый красный 0,08; бриллиантовый
зеленый 0,0125; агар-агар 13,0.
Проведение анализа
Инокулируют чашки непосредственно исследуемым материалом либо после
накопительного культивирования. Тесты следует выполнять на питательных
средах с минимальным количеством ингибиторов. Инкубируют 24 ч. при 35 °С
аэробно.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Розовые, окружённые красной Лактозо- и сахарозо- отрицательные
зоной Salmonella и др. энтеробактерии
Желтовато-зелёные, окружённые Лактозо- и сахарозо- положительные Е.соП,
желтовато-зелёной зоной Citrobacter, Proteus vulgaris, Klebsiella, и др.
Возможно иногда полное подавление роста.
Тест-штаммы Инокулюм, обнаружение Цвет Цвет
КОЕ/мл (%) колоний среды
Salmonella typhimurium АТСС >70 розовый красный
14028
Salmonella choleraesius АТСС 10^-10'’ >70 розовый красный
13312
Salmonella enterítidis NCTC 10^-10^ >70 розовый красный
5188
i Escherichia coli АТСС 25922 >70 желтый желтый
Proteus vulgaris АТСС 13315 >70 желтый желтый
Staphylococcus aureus АТСС 10^-10=^ <0.01 желтый желтый
25923
Enterococcus feecalis АТСС 10"-10" <0.01 желтый желтый
33186
63
Bacillus subtilis АТСС 6633 10^-10^ <0.01 оранж. / желтый
желтый
Шоколадный агар для культивирования и выделения
требовательных патогенных бактерий -
Boiled blood agar
(chocolate agar) for the cultivation and isolation of fastidious pathogenic
bacteria Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№1.15177.0001
Упаковка - 20 шт/уп
Шоколадный агар используется для выделения и культивирования
различных требовательных микроорганизмов, в особенности патогенных
видов таких, как (стрептококки. Neisseria spp., Haemophilus).
Принцип действия
Шоколадный агар содержит богатую питательными веществами основу,
которая ускоряет рост микроорганизмов. Шоколадный агар получают при
нагревании кровяного агара после добавления крови.
Состав (г/л)
Питательный субстрат (дрожжевой экстракт, пептон, гидролизат печени) 23,0;
хлористый натрий 5,0; кровь 65 мл; агар-агар 15,0.
Проведение анализа
Инокулируют образцы - посев на поверхность чашки с агаром.
Посевы инкубируют при оптимальных условиях, 24ч при 35°С аэробно.
Neisseria и Haemophilus инкубируют 48 часов при 35С в микроаэрофильных
условиях, используя Anaerocult С или Anaerocult С mini.
Контроль качества
Тест штаммы Рост
Neisseria meningitides АТСС 13090 хороший
Neisseria gonorrhoeae 6545 хороший
Streptococcus pyogenes АТСС 21059 хороший
Haemophilus influenzae ATCC 19418 хороший
64
Агар МакКонки для выделения сальмонелл, шигелл и
колиформных бактерий -
MacCONKEY agar for the isolation of
Salmonella, Shigella and coliform bacteria Merckoplate®
Готовая среда в чашках: Кат.№ 1.15276.0001
Упаковка - 480 шт/уп
Селективная среда для выделения сальмонелл, шигелл, колиформных
бактерий из фекалий, мочи, пищевых продуктов, сточных вод по
МакКонки (1950). Состав среды полностью соответствует рекомендациям
USP XXIII (1995) и Европейской фармакопеи ЕР II.
Принцип действия
Соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый значительно подавляют
рост грамположительной микрофлоры. Лактоза и индикатор нейтральный
красный служат для обнаружения расщепления лактозы.
1 Состав (г/л)
Пептон из казеина 17,0; мясной пептон 3,0; хлорид натрия 5,0; лактоза 10,0;
смесь солей желчных кислот 1,5; нейтральный красный 0,003; кристаллический
фиолетовый 0,001; агар-агар 13,5.
Проведение анализа
Материал для исследования распределяют поверхностным методом.
Инкубация 18-24ч при 35°С аэробно. Лактозоотрицательные колонии
бесцветные; лактозоположительные - красные и окружены мутной зоной
преципитации желчных солей вследствие снижения pH.
Внешний вид колоний Микроорганизмы
Бесцветные, прозрачные Salmonella, Shigella и другие
Крупные, красные, окруженные зоной преципитации Escherichia coli
Крупные, розовые, слизистые Enterobacter, Klebsiella
Очень мелкие, непрозрачные, изолированные Enterococci, Staphylococci и dp.
Контроль качества
Тест-штаммы Инокулюм, Выход Цвет Цвет среды Осадо
КОЕ /мл . (%) колоний к
Escherichia coli ATCC 8739 10"-10® >30 Красный Красный +
Salmonella typhimurium ATCC >30 Бесцветны Желтоватый +
14028 й
Salmonella dublin ATCC 15480 10^-10" >30 Бесцветны Желтоватый -
й
Shigella sonnei ATCC 11060 10"-10" > 30 Бесцветны Желтоватый
-
й
Proteus mirabilis ATCC 29906 10^-10^ > 30 Бесцветны Желтоватый
-
й
Bacillus cereus ATCC 11778 > 10" <0,01
Staphylococcus aureus ATCC > 10^ <0,01
6538
Enterococcus hirae ATCC 8043 > 10" <0,01
65
Агар Рамбаха для идентификации сальмонелл -
RAMBAChF agar for the identification of Salmonella Merckopiate®
Готовая среда в чашках: Кат.№ 1.15999.0001
Упаковка - 480 шт/уп
Рамбах-агар - хромогенная дифференциально-диагностическая среда для
идентификации сальмонелл в пищевых продуктах, сырье и клиническом
материале.
Принцип
Питательные вещества РАМБАХ-агара обеспечивают быстрый рост
энтеробактерий. Дезоксихолат натрия ингибирует сопутствующую
грамположительную микрофлору. Сальмонеллы продуцируют кислоту из
пропиленгликоля, в результате чего происходит изменение рН-среды, и
колонии сальмонелл окрашиваются в красный цвет. Для дифференциации
сальмонелл от колиформных бактерий в состав среды включена хромогенная
смесь, которая выявляет наличие фермента В-галактозидазы - характерного
фермента колиформных бактерий. Колиформные бактерии растут в виде сине-
зеленых или сине-фиолетовых колоний. Остальные энтеробактерии и
грамотрицательные бактерии, такие как Proteus, Pseudomonas, Shigella
вырастают в виде бесцветных-желтоватых колоний. РАМБАХ-агар
обеспечивает однозначную дифференциацию сальмонелл от других бактерий.
Состав среды (г/л)
Пептон 8.0; хлорид натрия 5.0; дезоксихолат натрия 1.0; хромогенная смесь 1.5;
пропиленгликоль 10.5; агар-агар 15.0.
Ход исследования
После этапа селективного обогащения посеять на % поверхности агара петлей.
Для того чтобы получить изолированные колонии - той же петлей посеять на
оставшуюся поверхность чашки. Инкубировать в аэробных условиях 24-48
часов лри 35-37°С.
Микроорганизмы Цвет колоний
Salmonella spp.* Красный
Колиформы Синие или сине-фиолетовые
Другие энтеробактерии Бесцветные или желтоватые
66
Селективный агар по Шайманну (основа) для
селективного культивирования иерсиний -
Yersinia seiective agar
(base) асе. to SCHIEMANN (CIN-Agar) for the selective cultivation of
Yersinia
Кат.№ 1.16434.0500
Упаковка - 500 г
Среда предложена Schiemann (1979) для селективного культивирования
иерсиний, в частности, Y.enterocolitica и Y.pseudotuberculosis из
клинического материала, продуктов питания, воды и т.п. Среда
соответствует требованиям АРМА (1992) по исследованию продуктов
питания.
Принцип действия
Сопутствующая микрофлора подавляется смесью антибиотиков (селективная
CIN-добавка), кристаллического фиолетового и солей желчных кислот. Пируват
натрия и богатая питательная основа среды способствуют росту иерсиний.
Иерсинии разлагают маннит с образованием кислоты, поэтому колонии
окрашиваются в красный цвет вследствие изменения цвета индикатора
нейтрального красного.
Состав (г/л)
Казеиновый пептон 10,0; мясной пептон 10,0; дрожжевой экстракт 2,0; маннит
20,0; пируват натрия 2,0; хлористый натрий 1,0; сульфат магния 0,01; соли
желчных кислот 1,0; нейтральный красный 0,03; кристаллический фиолетовый
0,001; агар-агар 12,5.
Приготовление
Растворить 58,5 г среды в 1 литре дистиллированной воды; дать среде
набухнуть в течение 20-30 минут. Автоклавировать 15 мин при 121 °С, охладить
до 45-50°С. Добавить содержимое селективной CIN-добавки (1 флакон) для
иерсиний к 500 мл питательной среды в стерильных условиях и смешать.
Разлить в чашки.
pH 7,4±0,2 при 25°С. Чашки прозрачные, красного цвета.
Проведение анализа
Чашки инокулируют материалом с накопительной среды штрихом. Инкубация
24-48 ч при 28°С. Иерсинии образуют колонии с темно-красным центром и
прозрачной периферией. Размеры колоний, ширина краев и структура
поверхности зависят от серотипа. Некоторые сопутствующие микроорганизмы
(некоторые виды Enterobacteriaceae и Pseudomonas) на этой среде иногда
могут давать слабый рост.
Контроль качества
Тест-штаммы Рост Красный центр
Yersinia enterocolitica АТСС 9610 Хороший +
Yersinia enterocolitica АТСС 35669 Хороший +
Escherichia coli АТСС 25922 роста нет
Salmonella typhimurium АТСС роста нет
67
14028
Enterobacter cloacae АТСС 13047 роста нет / очень
слабый
Staphylococcus aureus АТСС 25923 роста нет
Селективная добавка для иерсиний (CIN) для приготовления 8 л
селективного агара на иерсинии по Шайману -
Yersinia Selective
Supplement (CIN), for preparation of 8 I Yersinia selective agar acc. to
SCHIEMANN
Кат.№ 1.16466.0001
Упаковка -16 флаконов
Селективная добавка состоит из лиофилизированной смеси трех разных
ингибиторов, подавляющих рост сопутствующей флоры, встречающейся
при культивировании иерсиний, в частности, Y.enterocolitica.
Состав (г/л)
Цефсулодин 7,5 мг; иргасан 2,0 мг; новобиоцин 1,2 мг.
Проведение анализа
К содержимому флакона добавить 1 мл стерильной дистиллированной воды и 1
мл этанола. Равномерно смешать содержимое одного флакона с 500 мл
стерильного селективного агара для иерсиний Schiemann (CIN-Agar),
охлажденного до 45-50°С.
,C£./>cr¡^