Комплект реагентов для экстракции ДНК из клинического материала "АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ" по ТУ 9398-002-09286667-2012 в составе (см. приложение на 1 листе): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
/ / O f(/ ^ « У Т В Е Р Ж Д А Ю » Генерал ь ны й д и р екто р О бщ еот^^гт^т^ран имен НОИ о т в е ^ ш й ё й ^ ^ ^ )© «Н екстБ ио» . А гаф онова ^ 2012 г. ¥ > ИНСТРУКЦИЯ по применению комплекта реагентов для экстракции ДНК из клинического материала «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ» IVD | НАЗНАЧЕНИЕ........................................................................................................................ | \ | | ПРИНЦИП МЕТОДА............................................. | 3 | | ФОРМЫ ВЫПУСКА КОМПЛЕКТА РЕАГЕНТОВ................................................................ | 3 | | МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.......................................................................................... | 4 | | ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ.............................................. | 5 | | ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА... | 6 | | СОСТАВ................................................................................................................................. | I | | ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ...................................................... | 6 | | СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ........................ | 9 | | СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ........................................ | Ю | ОГЛАВЛЕНИЕ ^:ПИСОК СОКРАЩЕНИЙ......................................................................................................3 (сок СОКРАЩЕНИЙ /настоящей инструкц1 1и поименяются следующие сокращении и ------- - Внутренний контрольный образец для проведения ПЦР с Т ВкО комплексный электоосЬоретической детекцией ------------ ------ - Внутренний контрольный образец для наборов с BKO-FL гибрилизационно-флуоресцентной детекцией — отрицательный контрольный образец ------------- ОКО — положительный контрольный о б р а з е ц -----------------— ПКО - полимеразная цепная реакция_________________________ ПЦР дезоксирибонуклеиновая кислота ДМН' *К*' ------- - Федеральное государственное учреждение науки «Центральный научно-исследовательский институт ФГУН цнииэ эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере Роспотребнадзора защиты прав потребителей и благополучия человека НАЗНАЧЕНИЕ Комплект реагентов предназначен для экстракции (выделения) ДНК из соскобного материала и отделяемого слизистых оболочек урогенитального тракта, ротоглотки, прямой кишки, конъюнктивы глаз, эрозивно-язвенных элементов слизистых и кожи, а также из образцов мочи человека для последующего исследования на возбудители ИППП и других инфекций органов репродукции методом ПЦР с использованием соответствующих комплектов реагентов, рекомендованных производителем. ПРИНЦИП МЕТОДА Клинический образец, обрабатывается лизирующим раствором в присутствие частиц силики - сорбента. В результате происходит деструкция клеточных мембран, вирусных оболочек и других биополимерных комплексов и высвобождение ДНК. Растворенная ДНК в присутствии лизирующего раствора связывается с частицами сорбента, в то время как другие компоненты лизированного клинического материала ^остаются в растворе и удаляются при осаждении сорбента центрифугированием и ;^^едующей отмывке. При добавлении раствора для элюции ДНК к сорбенту происходит переход ДНК с поверхности силики в раствор, который отделяется от частичек сорбента центрифугированием. В результате указанной процедуры получается высокоочищенный препарат ДНК, свободный от ингибиторов реакции ^ амплификации, что обеспечивает высокую аналитическую чувствительность ПЦР- исследования. ФОРМЫ ВЫПУСКА КОМПЛЕКТА РЕАГЕНТОВ Комплект реагентов выпускается в 4 формах комплектации: Форма 1 включает вариант 50С - комплект реагентов для экстракции ДНК из 50 проб, включая контроли; 2 включает вариант ЮОС - комплект реагентов для экстракции ДНК из проб, включая контроли; ^Форма 3 включает вариант 50 - комплект реагентов для экстракции ДНК из 50 проб, не включая контроли; Форма 4 включает вариант 100 - комплект реагентов для экстракции ДНК из 100 проб, не включая контроли. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно биологические (ПЦР) исследования клинического материала на наличие возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно-эпидемических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней», СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». При работе всегда следует выполнять следующие требования: - Следует рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III—IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, используя дезинфицирующие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится в отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне Выделения, продолжать в Зоне Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы, оборудование и реактивы в зону, в которой была проведена предыдущая стадия процесса. - Неиспользованные реактивы, реактивы с истекшим сроком годности, а также использованные реактивы следует удалять в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». - Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для 4 ультрафиолетовому облучению в течение 30 мин. Применять комплект строго по назначению, согласно данной инструкции. Допускать к работе с комплектом только специально обученный персонал. Не использовать комплект по истечении срока годности. Использовать одноразовые перчатки, лабораторные халаты, защищать глаза во время работы с образцами и реактивами. Тщательно вымыть руки по окончании работы. Избегать контакта с кожей, глазами и слизистой оболочкой. При контакте немедленно промыть пораженное место водой и обратиться за медицинской помощью. Листы безопасности материалов (MSDS — material safety data sheet) доступны по запросу. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ 1. Стерильный ламинарный бокс (например, «БАВп-01-«Ламинар-С»-1,2», «Ламинарные системы», Россия). 2. Термостат для пробирок типа «Эппендорф» от 25 до 100 °С (например, «ТЕРМО 24-15», «Биоком», Россия). 3. Вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой для удаления ?^^^надосадочной жидкости (например, «ОМ-1», г. Ульяновск, Россия). 4. Микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» до 16 тыс об/мин (например, MiniSpin, Eppendorf, Германия). 5. Вортекс (например, «ТЭТА-2», «Биоком», Россия). 6. Отдельный набор автоматических дозаторов переменного объема (например, «Ленпипет», Россия). 7. Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающиеся пробирки на 1,5 мл (например, Ахудеп, США). 8. Штативы для пробирок на 1,5 мл (например, «ИнтерЛабСервис», Россия) и наконечников (например, Ахудеп, США). 9. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема с фильтром до 200 5 I ДО 1000 мкл (например, Axygen, США). ^Одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема до 200 мкл и до 1000 мкл (например, Axygen, США). 11.Холодильник от 2 до 8 °С с морозильной камерой не выше минус 16 °С. 12.Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки по МУ 1.3.2569-09. 13. Емкость для сброса наконечников. 14. Одноразовые пластиковые контейнеры для сброса и инактивации материалов. ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА Перед началом работы следует ознакомиться с методическими рекомендациями «Взятие, транспортировка, хранение клинического материала для ПЦР-диагностики», разработанными ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Москва, 2008 г. СОСТАВ Комплект реагентов «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ» вариант 50 или вариант 50С или вариант 100 или вариант ЮОС - комплект реагентов для экстракции ДНК из Вариант 50 и Вариант 100 и ваоиант 50С вариант ЮОС Реактив Описание Объем, Объем, Кол-во Кол-во мл мл Лизирующий Прозрачная 15 1 флакон 30 1 флакон раствор бесцветная жидкость Отмывочный Прозрачная 50 1 флакон 100 1 флакон раствор бесцветная жидкость Сорбент Суспензия белого 1.0 1 пробирка 1.0 2 пробирки универсальный цвета ТЕ-буфер для Прозрачная 5,0 1 пробирка 5.0 2 пробирки эпюиии ПНК бесцветная жидкость CO(<jaBe форм комплектации 1 и 2 к комплекту реагентов прилагаются следующие ^реагенты: Вариант 50С Вариант ЮОС Реактив Описание Объем, Кол-во Объем, Кол-во мл мл ВКО комплексный Прозрачная 1.0 1 пробирка 1.0 1 пробирка ь бесцветная жидкость BKO-FL Прозрачная 1.0 1 пробирка 1.0 1 пробирка бесцветная жидкость Прозрачная 1.2 1 пробирка 1.2 1 пробирка ОКО бесцветная жидкость ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ Забор клинического материала должен производиться в пробирки с транспортной средой, рекомендованной производителем. ?говка к проведению процедуры экстракции ДНК ^ 5/слючить термостат и установить температуру 65 °С. ^2. Лизирующий раствор (если он хранился при температуре от 2 до 8 °С) следует прогреть, перемешивая при температуре 65 °С до полного растворения кристаллов. 3. Подготовить и расставить в штативе необходимое количество одноразовых стерильных полипропиленовых пробирок объемом 1,5 мл и промаркировать их. 4. Подготовить и расставить в штативе пробирки с клиническими образцами. Перед проведением процедуры экстракции нуклеиновых кислот осадить капли материала со стенок пробирки и внутренней части крышки центрифугированием (1500-3000 об/мин в течение 5 с), после чего аккуратно перемешать содержимое пробирки на вортексе, избегая разбрызгивания и попадания материала на внутреннюю часть крышки. Процедура экстракции ДНК 1. В подготовленные одноразовые стерильные полипропиленовые пробирки внести по 10 мкл ВКО-комплексного или BKO-FL в зависимости от метода детекции продуктов ПЦР (см. СОСТАВ). При использовании наборов реагентов с разными методами детекции допускается внесение двух препаратов внутреннего контрольного образца по 10 мкл каждого. 2. Ресуспендировать сорбент и внести в каждую пробирку по 20 мкл сорбента универсального, после чего внести по 300 мкл лизирующего раствора, используя наконечники с фильтром. Примечание - Если количество обрабатываемых клинических образцов составляет более 50 за рабочую смену, рекомендуется добавить весь объем *еор^нта и ВКО во флакон с лизирующим раствором (2 мл сорбента универсального и 1 мл ВКО на 30 мл лизирующего раствора). Полученную суспензию тщательно перемешать и внести по 330 мкл в подготовленные пробирки. Допускается хранение смеси не более 2 сут при комнатной температуре. Перед применением суспензию тщательно перемешать. 3. Внести по 100 мкл клинического образца, используя для каждой пробы отдельный наконечник с фильтром. В пробирку отрицательного контроля экстракции внести 100 мкл ОКО. 4. Пробирки плотно закрыть, содержимое тщательно перемешать на вортексе и инкубировать 5 мин при температуре 65 °С в термостате. После окончания инкубации содержимое повторно перемешать на вортексе и оставить при 1!!^гной температуре на 2 мин. /Щадить сорбент в пробирках центрифугированием при 10 тыс об/мин в течение 30 сек. Не захватывая сорбент, удалить надосадочную жидкость в колбу-ловушку с помощью вакуумного отсасывателя, используя для каждой пробы отдельный наконечник без фильтра. 6. Добавить в пробы по 1 мл отмывочного раствора, перемешать на вортексе до полного ресуспендирования сорбента. 7. Повторить п. 5. 8. Поместить пробирки в термостат с температурой 65 °С на 5-10 мин для подсушивания сорбента, при этом крышки пробирок должны быть открыты. 9. В пробирки добавить по 100 мкл ТЕ-буфера для элюции ДНК, используя наконечник с фильтром. Перемешать на вортексе до полного ресуспендирования сорбента. Поместить в термостат с температурой 65 “С на 5 мин. Допускается при необходимости увеличение объема элюции до 150 мкл. 10. Центрифугировать пробирки при 12 тыс об/мин в течение 1 мин на микроцентрифуге. Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК. Пробы готовы к постановке ПЦР. Полученные пробы можно хранить в течение 1 нед при температуре от 2 до 8 °С или в течение года при температуре не выше минус 16 °С. При повторном исследовании проб, содержимое пробирок необходимо перемешать на вортексе и повторить п.10. # Ti годности. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и ХРАНЕНИЯ /фСк годности. 12 мео. Комплект реагентов с истекшим сроком годности примененик. не подлежит. Срок годности вскрытых реагентов соответствует сроку годности, указанному на этикетках для невскрытых реагентов, если в инструкции не указано иное. Транспортирование. Комплект реагентов транспортировать при температуре от 2 до 8 "С не более 5 сут. При получении разукомплектовать в соответствии с указанными температурами хранения. Хранение. Комплект реагентов хранить при температуре от 2 до 25 ”С, кроме ВКО комплексного. BKO-FL и ОКО. ВКО комплексный, BKO-FL и ОКО хранить при температуре от 2 до 8 °С. Рекламации на качество комплекта реагентов «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ» направлять на адрес предприятия-изготовителя ООО «НекстБио» (111141 г. Москва, 3-й проезд Перова поля, 8 стр.1) в отдел по работе о рекламациями (тел. (495) 768- 71-81, e-mail; info@nextbio.ru).