Набор реагентов для количественного иммуноферментного определения антигена СА 125 в сыворотке крови ("ИммуноФА-СА 125") по ТУ 9398-030-11361534-2012 в составе (см. приложение на 1 листе): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
s. ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНА СА 125 В СЫВОРОТКЕ КРОВИ («ИммуноФА-СА 125») 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор «ИммуноФА-СА 125» предназначен для количественного определения содер жания ракового антигена С А 125 в сыворотке крови человека методом твердофазного имму- ноферментного анализа (ИФА). Щ СА 125 - основной маркер рака яичников и его метастазов. Это высокомолекулярный ,V гликопротеид (молекулярная масса от 200 до 1000 кДа) группы муцинов, который секрети- I руется опухолевыми клетками эпителия яичников, а также другими патологическими и нор- 1 мальными клетками, имеющими происхождение из Мюллерова протока. 2 Определение опухолеассоциированного антигена СА 125 рекомендовано Междуна родным противораковым союзом (VICC) для уточняющей диагностики рака яичников и по следующего мониторинга лечения. Наиболее значительные изменения концентрации С А 125 характерны для серозной карциномы яичников, для которой он служит основным диагности чески значимым онкомаркером. Приблизительно у 80% женщин с серозной карциномой яич ников уровень СА125 превышает 35 Ед/мл. Концентрация и частота выявления СА 125 у больных серозной карциномой яичников возрастает по мере прогрессирования заболевания, поэтому определение исходной концентрации СА 125 и дальнейшее наблюдение в динамике может использоваться для прогноза развития заболевания. У практически здоровых женщин уровень антигена в сыворотке крови обычно не пре вышает 35 Ед/мл. Незначительное возрастание его обнаруживается при беременности, лак тации и менструации или после менопаузы. Умеренно повышенный уровень С А 125 может наблюдаться при раке поджелудочной и молочной желез, легкого, желудка, толстой кишки, а также при таких неонкологических заболеваниях, как воспаление серозных оболочек, цирроз и эндометриоз. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 исследуемого образца, 6 ка либровочных проб и 1 пробы контрольной сыворотки, всего 96 определений. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ Принцип метода основан на «сэндвич»-схеме твердофазного иммуноферментного анализа с использованием двух типов специфических моноклональных антител к различным эпитопам СА 125. Исследуемые образцы сыворотки крови инкубируют в планшете с иммо билизованными на твердой фазе антителами к СА 125 и одновременно с конъюгатом других антител к СА 125 с пероксидазой. Имеющийся в образце СА 125 связывается с антителами Составлена: заместителем генерального директора Т.А. Поздняковой. на твердой фазе и конъюгированными антителами. Количество связавшегося конъюгата вы являют с помощью раствора субстрата (тетраметилбензидина с добавлением перекиси водо рода). Интенсивность окраски продукта окисления субстрата прямо пропорциональна кон центрации СА 125, содержащегося в анализируемом образце. 2.2. СОСТАВ НАБОРА В состав набора входят: - планшет 96-луночный полистироловый, сенсибилизированный моноклональными антителами к СА 125, готовый для использования - 1 шт.; - калибровочные пробы на основе сыворотки крови, содержащие известные количест ва СА 125: О Ед/мл (3,0 мл); 10; 50; 100; 250; 500 Ед/мл (по 0,5 мл); концентрация СА 125 в калибровочных пробах может незначительно изменяться от серии к серии, точные значения концентраций указаны на этикетках флаконов, готовые для использования - 6 фл.; - контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержа нием СА 125, готовая для использования - 1 фл. (0,5 мл); - конъюгат моноклональных антител к СА 125 с пероксидазой из корня хрена, гото вый для использования - 1 фл. (14 мл); - фосфатно-солевой буферный раствор, концентрированный - 1 фл. (15 мл); - раствор субстрата на основе тетраметилбензидина (ТМБ) с добавлением перекиси водорода, готовый для использования - 1 фл. (14 мл); - стоп-реагент, готовый для использования - 1 фл. (15 мл); - пленка для заклеивания планшета - 1 шт. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Специфичность. Использование моноклональных антител к различным эпитопным областям (антигенным доменам) СА 125 (А и В) обеспечивает высокую специфичность ана лиза. Чувствительность. Минимальная концентрация СА 125, определяемая с помощью на бора, составляет не более 0,5 Ед/мл. Воспроизводимость результатов. Коэффициент вариации результатов определения содержания СА 125 в одном и том же образце сыворотки крови не превышает 8%. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на "открытие" С А 125 - соответствие измеренной концентрации СА 125 предписанной в пробе, полученной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 50 Ед/мл. Процент "открытия" составляет 90-110 %. Линейность. Зависимость концентрации С А 125 в образцах сыворотки крови при раз ведении их сывороткой крови, не содержащей СА 125, имеет линейный характер в диапазоне концентраций 10-500 Ед/мл и составляет 90-110 %. Клиническая проверка набора. Концентрация СА 125, исследованная с помощью на бора «ИммуноФА-СА 125», в сыворотке крови 150 здоровых лиц составила 0,5 - 35 Ед/мл. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значения концентраций СА 125, соответствующие нормальным. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Потенциальный риск применения набора - класс 1. Все компоненты набора, за исключением стоп-реагента, в используемых концентра циях являются нетоксичными. г Стоп-реагент действует на кожу и слизистые прижигающим образом, вызывая раз дражение и ожоги, поэтому в случае попадания на кожные или слизистые покровы следует его немедленно тщательно смыть большим количеством проточной воды. При работе с набором и утилизации отходов следует соблюдать "Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и лич ной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно- эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР" (Москва, 1981 г.). При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфици рованные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита и дру гие возбудители вирусных инфекций. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ: - Фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плот ность раствора в лунках планшета при длине волны 450 нм; - термостат суховоздушный, поддерживающий температуру +(37+1)°С; - секундомер; - шейкер; - пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным объемом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости 50-200 мкл, 200-1000 мкл; - пипетка полуавтоматическая многоканальная с переменным объемом со сменными наконечниками, позволяющая отбирать объем жидкости 50-300 мкл; - стакан химический или колба мерная вместимостью 300 мл; - бумага фильтровальная; - вода дистиллированная; - перчатки резиновые или пластиковые. 6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Исследуемые образцы крови для получения сыворотки собирают в сухие пробирки. До проведения анализа возможно хранение образцов сыворотки крови не более 2 дней при температуре +(2-8)°С или в замороженном состоянии при температуре минус 20°С не более 3 месяцев. Допускается только однократное замораживание и размораживание образцов сыво ротки крови. После размораживания образцы следует тщательно перемешать. Тепловая инактивация сывороток не допускается. 7. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ Внимание! Все компоненты набора и исследуемые образцы перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (+18-25”С) и тщательно пе ремешаны. 7.1. Приготовление рабочего раствора фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБР). Содержимое флакона с концентратом фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБР) перенести в мерный стакан вместимостью 300 мл, дважды ополоснуть флакон дистиллиро ванной водой, все промывные воды объединить с разведенным ФСБР и довести общий объ ем раствора до 300 мл дистиллированной водой. При дробном использовании набора расчет- ное количество ФСБР развести дистиллированной водой в 20 раз. Например, 5 мл ФСБР + 95 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешать, избегая пенообразования. Полученный рабочий раствор ФСБР можно хранить в закрытой емкости при темпера туре +(2-8)"С не более 7 дней. Примечание. При хранении ФСБР могут образовываться кристаллы, поэтому перед отбором аликвоты ФСБР необходимо слабо подогреть флакон с буферным раствором, по местив его в водяную баню или термостат при температуре +37°С до полного растворения кристаллов. 8 ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Построение калибровочной кривой необходимо проводить для каждой серии анализов. Внесение реагентов следует проводить согласно схеме на рис. 1. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 А КП1 КП1 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС В КП2 КП2 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС С КПЗ КПЗ ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС D КП4 КП4 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС Е КП5 КП5 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС F КП6 КП6 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС G КС КС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС Н ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС Рис. 1. Схема заполнения лунок планшета. 8.1. Вскрыть пакет с планшетом выше "замка" (по насечке) и извлечь планшет. Вставить в свободную рамку необходимое количество лунок для калибровочных проб, ис следуемых образцов и контрольной сыворотки для постановки в дубликатах. Неиспользуе мые стрипы необходимо тщательно заклеить пленкой для заклеивания планшетов, поместить в пакет, удалить из него воздух и плотно закрыть "замок". Планшеты хранить в упаковке при температуре +(2-8)°С в течение всего срока годности набора. 8.2. В два ряда лунок планшета внести в дубликатах по 25 мкл калибровочных проб (КП), начиная с минимальной концентрации. 8.3. В две лунки планшета внести по 25 мкл контрольной сыворотки (КС). 8.4. В оставшиеся лунки внести в дубликатах по 25 мкл исследуемых образцов сыво ротки крови (ИС). 8.5. Во все лунки планшета внести по 100 мкл конъюгата. Процедуру внесения образ цов и конъюгата следует выполнять как можно быстрее. Длительность всей операции не должна превышать 10-15 минут. 8.6. Тщательно перемешать содержимое лунок на шейкере при комнатной температу ре (+18-25"С) в течение 2-3 минут. 8.7. Закрыть планшет крышкой или пленкой для заклеивания планшета и инкубиро вать в течение 1 часа при температуре +37“С, избегая попадания прямого солнечного света.