Набор реагентов для определения активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови (АлАТ-ИМПАКТ) по ТУ 9398-212-04545110-2004 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
"УТВЕРЖДАЮ"
Зам.кач^(^ника Управления
н а ) « й Е 1 х М Д - я ' М П РФ
^.Е.Ввльгов
"^ 3 1994 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения активности
аланинаминотрансфвразы в сыворотке крови { АлАТ — ИМПАКТ].
Рекомендована к утвврждекшо комиссией по лабораторным реактивам Комитвгга по
новой медицинской технике М3 и МП Рф. Протокол N 5 от 23 мая 1994г.
Набор реагентов ‘*АлАГГ — ИМПАКТ" предназначен для определения активности
аланинаминотрансфвразы в сыворотке крови по конечной точке методом Райтмана — Френкеля
в реакции с 2,4 — динитрофенклгидразином.
Набор рассчитан на 1В0 определений при суммарном расходе рабочих реагентов 3,0 мл
на t анализ.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Аланинаминотрансфераза каталго8фует реакцию:
L—аланин + а —квгоглугарат L—глугамат + Пируват
Пируват + 2,4 —Динитрофвнилгидразин-----> Динитрофенилгидразон
Метод определения АлАТ основан на фотометрическом определении окрашенного в
щелочной среде гидразона пироаиноградной кислоты;. Измерения проводят при длине волны 490
— 540 нм.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Коэффициент вариации не превышает ? %.
Чувствительность — не более 100 нмоль/с-л.
/\инейность определения активности АлАТ — в диапазоне от 117 до 1170 нмоль/с*л.
Отклонение от лине]^ности — не более 7%.
Нормальные величиньс 28 — 190 ешоль/с-л при 37® С (0,1 0,68 мкмоль/ч*мл,
1 мкмоль/ч*мл соответствует 278 нмоль/с*л).
Составлена: к_х.н.Журавлевой Н.И.— ст.н.сотр. МП "ИМПАКТ”;
проф.Титовым В.Н. —руководителем'лаборатории КНЦ РАМН.
В ВЕРНА N
Генерлльнун «ЙРЕНГОР
000"Имплнг^'йол1(Ов Д , и
- 2 -
СОСТАВ НАБОРА,
1. Реагент 1 — АлАТ, субстрат 50 мл
(L—аланин ОД моль/л, а—кетоглутарат 2 ммоль/л, фосфатный буфер 0,1 моль/л].
2.Реагент 2 — АлАТ/АсАТ, индикатор 50 мл
(2,4—динитрофвнилгидразин 1 ммоль/л в HCL 1 моль/л). Допускается на\ичие ме.\кодисперсных
примесей.
3.Рвагент 3 ~ Пируват натрия 2,5 мл
(Натрий Егировинограднокислый 2 ммоль/л).
4.Реагент 4 — NaOH 8,0 г
(Едкий натр для приготовления 500 мл 0,4м оль/л раствора).
ПОДГОТОВКА К Р.АБОТЕ
Реагенты 1, 2, 3 готовы к употреблению. Доггускается хранение их после вскрытия в
речение 2 недель при 2 — 8° С.
Содержимое флакона с Реагввггом 4 растворить в 500 мл дистиллированной воды.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Компоненты набора нетоксичны. При работе с Реагентом 2 и Реагентом 4 следует
соблюдать правила техники безопасности при работе с кислотами и щелочами-
При работе с набором необходимо надевать резиновые или пластиковые перчатки, так
как образцы сыворотки крови чвлoвeJca являются потенциально инфицированными (ВИЧ, вирус
гепатита В или другие инфекционные заболевания).
НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Фотометрическое оборудование, обеспечивающее кзмереЕШе оптической плотности при
490 — 540 нм в диапазоне О — i,0 ед. опт. плотности, кювета с длиной оптического пути 10
мм (для фотометров типа КФК, ФЭК), микропипвтки для отбора проб и рабочих реагентов
0,05—0^5 мл, пипетка для отбора щелочи — 5 мл, водяной термостат (допускается
использование сухо воздушно го термостата с принудительной циркут^яцией воздуха], секундомер.
ПРОВЕДЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Определение проводят та отечественных или зарубежных фотометрах или
автоматических или полуавтоматических биохимических анализаторах.
а) Выполнение определения на фотометрах.
Для постровЕШя калибровочного графика в пять пробирок внести последовательно
дистиллированную воду, Реагент 3 и Реагент I в соответствии с таблицей 1. После добавления
Реагента 2 содержимое пробирок перемешать и спустя 20 мин. добав^ггь раствор NaOH,
перемешать. Через 10 мин. измерить оптическую плотность растворов 2 — 5 против раствора
N»! при длине волны — 505 км. Построить калибровочный график.
Таблица 1
№ Диет, а о да Реагент 3 Реагент 1 Реагент 2 NaOH Активность
п/п мл мл мл мл мл нмоль/ с*л
iL ОД — 0,50 0.5 5.0 ~
2 0,1 0,05 0,45 0,5 5,0 278
3 ОД одо 0,40 0,5 5,0 556
4 од од 5 0,35 0,5 5,0 834
5 од 0^0 0,30 0,5 5,0 1112
- 3 -
ВЬГПОЛНЕНИЕ АНАЛИЗА;
Использовать сыворотку крови, свободную от гемолиза.
Схеиа проввАвния определения:
КоБггрольная проба Опъггная проба
Реагент 1 (мл) 0,25 0,25
Дист.вода (мл) 0,05
Сыворотка (мл] — 0,05
Перемешать и инкубировать 30 мин. при 37° С на водяной бане
Реагент 2 (мл) 0,25 0,25
Перемешать и оставить при комнатной температуре на 20 мин.
NaOH 0,4 моль/л (мл) 2,5 2,5
Перемешать и через 10 мин. измерить оптическую плотность пробы против контрольной пробы
при длине волны 505 нм.
Иэмерения проводить в течение 30—40 мин.
РАСЧЕТЫ
По оптической плотности опытной пробы на калибровочном графике найти активность
АлАТ в сыворотке крови*
б] Вьпюлнвнив определения на анализаторах.
ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ФП - 901
Определение — стандарт ( КТ ) Единица — 1 ( мкмоль/л ]
фильтр — 5 ( 540 нм ) Стандарт — 1
КоЕщенграхщя стандарта — 2 ммоль/л
СХЕМА ОПРЕДЕ7\ЕНИЯ
Раствор Контр.проба Станд. Проба
мкл мкл мкл
Сыворотка — - 15
Дист.вода 15 -- —
Реагент 1 (3?° С) 75 75 75
Перемешать 15 сек. и инкубировать 30 мин. при 37“ С
Реагент 2 75 75 75
Перемешать 15 сек. и инкубировать 20 мин. при комнатной температуре.
NaOH 0,4 моль/л 750 750 750
Перемешать 15 сек., инкубировать 10 мин. при комнатной температуре и измерить оптическую
плотность.
УСЛОВИЯ ЭКСПЛУАТАЦИИ
Набор хранить в тёмном холодном месте при 2 — 8^ С в течение 12 месяцев.
-4 -
Для больных диабетом необходимо поставить холостую пробу, в которую сыворотку
вЕтести после добавления Реагегтта 2, так как повышенная концеггтрация веществ, содержащих
кетогруппу, вызывает ложное завьииение активности фермеьгта.
По вопросам, связанным с качеством и поставками набора, обращаться tio адресу;
127018, г.Москва, ул.Двинцев, 6, МП "ИМПАКТ
Телефон для справок: 289“ 79‘"59