Набор реагентов для иммуноферментного определения кортизола в сыворотке крови (ИФА-КОРТИЗОЛ) по ТУ 9398-382-11361534-00 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
“УТВЕРЖДАЮ” Руководитель Департамента государственного контроля качества, эффективности, безопасности средств техники М3 РФ Р.У. Хабриев ИНСТРУКЦР1Я по ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОРТИЗОЛА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ (ИФА-КОРТИЗОЛ) Рекомендована Комиссией по наборам реагентов для иммуноферментного (неинфекционные), радиоиммунологического и других видов иммунохимического анализа Комитета по новой медицинской технике Минздрава РФ (протокол № 5 от 22 мая 2000 г.). 1. НАЗНАЧЕНИЕ > л Набор ИФА-Кортизол предназначен для количественного определения концентрации кортизола в сыворотке крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа на полистироловых планшетах. Кортизол - стероидный гормон с молекулярной массой 362 Да. Количественное определение уровня кортизола в крови человека может быть использовано для оценки функционального состояния системы гипотгшамус - гипофиз - кора надпочечников. Особую важность имеет определение кортизола при таких эндокринных заболеваниях, как болезнь Аддисона и болезнь Иценко-Кушинга. Составлена: зам. ген. директора, к.б.н. Е.М. Гавриловой, научным сотрудником И.П. Андреевой - сотрудниками ЗАО “НВО Иммунотех”; научным консультантом отделения перинатальной диагностики МОНИИАГ, д.м.н., профессором И.П. Ларичевой. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА И ПРИНЦИП РАБОТЫ НАБОРА 2.1. Состав набора: - планшет 96-луночный полистироловый, покрытый поликлональными антителами к кортизолу - 1 шт.; - калибровочные пробы на основе сыворотки крови человека, содержащие известные количества кортизола: 0; 20; 50; 150; 400; 700; 1200 нмоль/л; концентрация кортизола в калибровочных пробах может незначительно изменяться от серии к серии, точные значения концентраций указаны на этикетках флаконов, лиофилизованные или жидкие - 7 фл. (по 0,5 мл); Калибровочные пробы приготовлены добавлением в сыворотку крови человека, не содержащую эндогенный кортизол, рассчитанного количества химически чистого кортизола производства фирмы “SIGMA” (США). - контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержанием кортизола, лиофилизованная или жидкая - 1 фл. (0,5 мл); - конъюгат кортизола с пероксидазой из корня хрена, готовый для использования 1 фл. (12,5 мл); - фосфатно-солевой буферный раствор с добавлением твин-20, pH 7,0+0,5, концентрированный - 1 фл. (15 мл); - раствор субстрата на основе 3,3’,5,5’-тетраметибензидина (ТМБ) с добавлением перекиси водорода, готовый для использования - 1 фл. (12,5 мл); - стоп-реагент (серная кислота, 0,2 М), готовый для использования - 1 фл. (15 мл); - пленка для заклеивания планшета - 1 шт. 2.2. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 40 исследуемых образцов, 7 калибровочных проб, одной пробы контрольной сыворотки, всего 96 определений. 2.3. Принцип метода определения основан на конкуренции кортизола из измеряемой пробы и кортизола, меченного пероксидазой, за центры связывания специфичных к кортизолу антител, иммобилизованных на поверхности лунок полистиролового планшета. Количество связавшегося конъюгата выявляют с помощью субстрат-хромогенной смеси. Интенсивность окраски продуктов ферментативной реакции обратно пропорциональна концентрации кортизола, содержащегося в анализируемом образце. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Специфичность. Перекрестная реакция антител к кортизолу с другими стероидами приведена в таблице. Таблица Стероид Перекрестная реакция, % 11-дезоксикортизол 0,9 Кортикостерон 0,6 Дезоксикортикостерон 0,06 Преднизолон 6,0 Прогестерон 0,07 Тестостерон 0,08 Эстрадиол 0,07 Эстриол 0,07 Чувствительность. Минимальная концентрация кортизола, определяемая с помощью набора, составляет не более 5 нмоль/л. Воспроизводимость результатов. Коэффициент вариации результатов определения содержания кортизола в одном и том же образце сыворотки крови не превышает 8 %. Тест на открытие. Процент открытия составляет 90 - 110 %. Линейность. Линейность составляет 90 - 110 %. Диапазон определяемых концентраций - 20- 1200 нмоль/л. Клиническая проверка набора. При определении концентрации кортизола с помощью набора ИФА-Кортизол в сыворотке крови, взятой с 9 до 11 часов у 65 здоровых лиц в возрасте от 20 до 50 лет, концентрация гормона составила 200 - 650 нмоль/л. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора ИФА-Кортизол уточнить значения концентраций кортизола, соответствующие нормальным значениям. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ 4.1. Все компоненты набора, за исключением стоп-реагента, в используемых концентрациях не токсичны. 4.2. Стоп-реагент действует на кожу и слизистые прижигающим образом, вызывая раздражение и ожоги, поэтому в случае попадания на кожные или слизистые покровы следует его немедленно тщательно смыть большим количеством воды. 4.3. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита и другие возбудители вирусных инфекций. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА: Фотометр вертикального сканирования одно- или многоканальный, позволяющий измерять оптическую плотность содержимого лунок планшета при длине волны 450 нм; термостат суховоздушный на температуру +(37+1 )°С; пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным объемом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости 2-20 мкл, 200-1 ООО мкл; пипетка полуавтоматическая многоканальная с переменным объемом со сменными наконечниками, позволяющая отбирать объем жидкости 50-250 мкл; секундомер; шейкер; - стаканы химические или колбы мерные вместимостью 300 мл; вода дистиллированная; - бумага фильтровальная или салфетки марлевые; перчатки резиновые или пластиковые. 6. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 6.1. Приготовление реагентов. 6.1.1. Приготовление рабочего раствора фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБ?). Содержимое флакона с концентратом фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБ?) перенести в мерный стакан вместимостью 300 мл, дважды ополоснуть флакон дистиллированной водой, все промывные воды объединить с разведенным ФСБ? и довести общий объем раствора до 300 мл дистиллированной водой. Полученный рабочий раствор ФСБР можно хранить не более 7 дней при температуре +2-8°С в закрытой емкости. Примечание. При хранении ФСБР могут образовываться кристаллы, поэтому перед отбором аликвоты ФСБР необходимо слабо подогреть флакон с буферным раствором, поместив его в водяную баню или термостат на температуру +37°С до полного растворения кристаллов. 6.1.2. Приготовление калибровочных проб. Жидкие калибровочные пробы готовы к использованию. При комплектации набора лиофилизованными калибровочными пробами в каждый флакон, содержащий калибровочную пробу, внести по 0,25 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать, избегая образования пены, до полного растворения вещества. В результате получают растворы со следующими концентрациями кортизола: 0; 20; 50; 150; 400; 700; 1200 нмоль/л. Жидкие калибровочные пробы после вскрытия флаконов можно хранить при температуре +(2-8)®С не более 2 месяцев. Лиофилизованные калибровочные пробы, подготовленные к работе, можно хранить при температуре +2-8°С не более 7 дней; при необходимости более длительного хранения следует разлить калибровочные пробы по 100 мкл и хранить при температуре минус 20°С не более 2 месяцев. 6.1.3. Приготовление контрольной сыворотки. Жидкая контрольная сыворотка готова к использованию. При комплектации набора лиофилизованной контрольной сывороткой во флакон, содержащий контрольную сыворотку, внести 0,5 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать, избегая образования пены, до полного растворения вещества. Жидкую контрольную сыворотку после вскрытия флакона можно хранить при температуре +(2-8)°С не более 2 месяцев. Лиофилизованную контрольную сыворотку, подготовленную к работе, можно хранить при температуре +2-8®С не более 3 суток, либо при температуре минус 20°С не более 2 месяцев. 6.2. Проведение анализа. Внесение реагентов следует проводить согласно схеме на рис. 1. 6.2.1. В два ряда лунок планшета внести в дубликатах по 0,02 мл калибровочных проб (КП), приготовленных по п. 6.1.2, начиная с минимальной концентрации. 6.2.2. Внести в две лунки планшета по 0,02 мл контрольной сыворотки (КС), приготовленной по п. 6.1.3.