Набор реагентов для иммуноферментного определения антител к тиреоидной пероксидазе в сыворотке крови (ИммуноФА-АТ-ТПО) в составе (см. приложение): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
“УТВЕРЖДАЮ” Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития ________________ Р.У. Хабриев “ ” 2007 г. ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ТИРЕОИДНОЙ ПЕРОКСИДАЗЕ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ (Имму ноФ А-АТ-ТПО) Рекомендована к утверждению Научно-экспертным Советом по медицинским изделиям. 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор ИммуноФА-АТ-ТПО предназначен для количественного определения аутоан тител к тиреоидной пероксидазе (АТ к ТПО) в сыворотке крови человека методом твердо фазного иммуноферментного анализа (ИФА). АТ к ТПО - антитела к пероксидазе клеток щитовидной железы, участвующей в син тезе тиреоидных гормонов. Тиреоидная пероксидаза обеспечивает образование активной формы йода, которая способна включаться в процесс модификации тиреоглобулина. Антите ла к этому ферменту блокируют его активность, вследствие чего снижается секреция тирео идных гормонов (Тз, Т4). Количественное определение уровня антител к тиреоидной пероксидазе в крови чело века необходимо для диагностики аутоиммунных заболеваний щитовидной железы (аутоим мунный тиреоидит Хашимото, болезнь Грейвса, диффузный токсический зоб, идиопатиче- ская микседема и др.), а также для контроля за течением заболевания и ходом его лечения. При использовании достаточно чувствительных методов АТ к ТПО обнаруживаются у 95% людей с тиреоидитом Хашимото и примерно у 50-70% пациентов с болезнью Грейвса. Выявление АТ к ТПО во время беременности свидетельствует о риске развития у ма тери послеродового тиреоидита и возможном его влиянии на развитие ребенка. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 исследуемого образца, 6 ка либровочных проб, 1 пробы контрольной сыворотки, всего 96 определений. Составлена: заместителем генерального директора, к.б.н. Е.М. Гавриловой, заместителем генерального директора Т.А. Поздняковой - сотрудниками ЗАО “ПВО Иммунотех”, доцен том, к.м.н. Г.В. Ибрагимовой, врачом-лаборантом А.В. Рябых - сотрудниками РМАПО. “УТВЕРЖДАЮ” Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития 2007 г. ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ТИРЕОИДНОЙ ПЕРОКСИДАЗЕ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ (ИммуноФА-АТ-ТПО) Рекомендована к утверждению Научно-экспертным Советом по медицинским изделиям. 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор ИммуноФА-АТ-ТПО предназначен для количественного определения аутоан тител к тиреоидной пероксидазе (АТ к ТОО) в сыворотке крови человека методом твердо фазного иммуноферментного анализа (ИФА). АТ к ТОО - антитела к пероксидазе клеток щитовидной железы, участвующей в син тезе тиреоидных гормонов. Тиреоидная пероксидаза обеспечивает образование активной формы йода, которая способна включаться в процесс модификации тиреоглобулина. Антите ла к этому ферменту блокируют его активность, вследствие чего снижается секреция тирео идных гормонов (Тз, Т4). Количественное определение уровня антител к тиреоидной пероксидазе в крови чело века необходимо для диагностики аутоиммунных заболеваний щитовидной железы (аутоим мунный тиреоидит Хашимото, болезнь Грейвса, диффузный токсический зоб, идиопатиче- ская микседема и др.), а также для контроля за течением заболевания и ходом его лечения. При использовании достаточно чувствительных методов АТ к ТПО обнаруживаются у 95% людей с тиреоидитом Хащимото и примерно у 50-70% пациентов с болезнью Грейвса. Выявление АТ к ТПО во время беременности свидетельствует о риске развития у ма тери послеродового тиреоидита и возможном его влиянии на развитие ребенка. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 исследуемого образца, 6 ка либровочных проб, 1 пробы контрольной сыворотки, всего 96 определений. Составлена: заместителем генерального директора, к.б.н. Е.М. Гавриловой, заместителем генерального директора Т.А. Поздняковой - сотрудниками ЗАО “НВО Иммунотех”, доцен том, к.м.н. Г.В. Ибрагимовой, врачом-лаборантом А.В. Рябых - сотрудниками РМАПО. 2. ПРИНЦИП МЕТОДА В основе анализа лежит связывание антигена ТПО, иммобилизованного на поверхно сти лунок полистиролового планшета, с антителами к ТПО, содержащимися в анализируе мом образце. Образующийся комплекс антиген-антитело выявляют с помощью конъюгата моноклональных антител к IgG человека с пероксидазой из корня хрена. Количество связав шегося конъюгата выявляют с помощью раствора субстрата (тетраметилбензидина с добав лением перекиси водорода). Интенсивность окраски продукта окисления субстрата прямо пропорциональна концентрации антител к ТПО, содержащихся в анализируемом образце. 3. СОСТАВ НАБОРА В состав набора входят следующие компоненты: - планшет 96-луночный полистироловый, сенсибилизированный тиреоидной пероксидазой - 1 шт.; - калибровочные пробы на основе сыворотки крови человека, содержащие известные количества антител к тиреоидной пероксидазе: 0; 25; 100; 250; 500; ЮООМЕ/мл; концентра ции АТ к ТПО в калибровочных пробах могут незначительно изменяться от серии к серии, точные значения концентраций указаны на этикетках флаконов, готовые для использования - 6 фл. (по 0,6 мл). Калибровочные пробы аттестованы по Международному стандарту для антител к ти реоидной пероксидазе NIBSC 66/387; - контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержа нием АТ к ТПО, готовая для использования - 1 фл. (0,6 мл); - конъюгат моноклональных антител к IgG человека с пероксидазой хрена, готовый для использования - 1 фл. (12,5 мл); - раствор для разведения сывороток, готовый для использования - 1 фл. (55 мл); - фосфатно-солевой буферный раствор, pH 7,0+0,5, концентрированный - 1 фл. (15 мл); - раствор субстрата на основе тетраметилбензидина (ТМБ) с добавлением перекиси водорода, готовый для использования - 1 фл. (12,5 мл); - стоп-реагент (серная кислота, 0,2 М), готовый для использования - 1 фл. (15 мл); - пленка для заклеивания планшета - 1 шт. 4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Специфичность. Использование высокоочищенного препарата тиреоидной перокси- дазы обеспечивает высокую специфичность анализа. Чувствительность. Минимальная концентрация антител к тиреоидной пероксидазе, определяемая с помощью набора, составляет не более 10 МЕ/мл. Воспроизводимость результатов. Коэффициент вариации результатов определения содержания АТ к ТПО в одном и том же образце сыворотки крови не превышает 8 %. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на "открытие" АТ к ТПО - соответствие измеренной концентрации АТ к ТПО предписанной в пробе, получен ной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 100 МЕ/мл. Процент "открытия" составляет 90-110 . Линейность. Зависимость концентрации АТ к ТПО в образцах сыворотки крови при разведении их сывороткой крови, не содержащей АТ к ТПО, имеет линейный характер в диапазоне концентраций 25-1000 МЕ/мл и составляет 90-110 %. Клиническая проверка набора. Концентрация АТ к ТПО, определенная с помощью набора ИммуноФА-АТ-ТПО в сыворотке крови, взятой с 9 до 11 часов у здоровых лиц (п=250), не превышала 30 МЕ/мл. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора ИммуноФА-АТ-ТПО уточнить значения концентраций АТ к ТПО, соответствующие нормальным для обследуемо го контингента. 5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Потенциальный риск применения набора - класс 26. Все компоненты набора, за исключением серной кислоты, в используемых концен трациях являются нетоксичными. Серная кислота действует на кожу и слизистые прижигающим образом, вызывая раз дражение и ожоги, поэтому в случае попадания на кожные или слизистые покровы ее следует немедленно тщательно смыть большим количеством проточной воды. При работе с набором и утилизации отходов следует соблюдать "Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и лич ной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно- эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР (Москва, 1981 г.). При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые пер чатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфициро ванные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита и другие возбудители вирусных инфекций. 6. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ: - Фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плот ность раствора в лунках планшета при длине волны 450 нм; - термостат суховоздушный, поддерживающий температуру +(37+1)°С; - пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным объемом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости 2-20 мкл, 50-200 мкл, 200-1000 мкл; - пипетка полуавтоматическая многоканальная с переменным объемом со сменными наконечниками, позволяющая отбирать объем жидкости 50-250 мкл; - шейкер; - стакан химический мерный или колба мерная вместимостью 300 мл; - флаконы или пробирки вместимостью 5,0 мл; - вода дистиллированная; - бумага фильтровальная или салфетки марлевые; - перчатки резиновые или пластиковые. 7. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ 7.1. Приготовление рабочего раствора фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБ?). Содержимое флакона с концентратом фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБ?) перенести в мерный стакан или колбу вместимостью 300 мл, дважды ополоснуть флакон дистиллированной водой, все промывные воды объединить с разведенным ФСБ? и довести общий объем раствора до 300 мл дистиллированной водой. Полученный рабочий раствор ФСБР можно хранить в закрытой емкости не более 7 дней при температуре +(2-8)°С. Примечание. При хранении концентрата ФСБР могут образовываться кристаллы, по этому перед отбором аликвоты ФСБР необходимо слабо подогреть флакон с буферным рас твором, поместив его в водяную баню или термостат при температуре +(37+1) °С до полного растворения кристаллов. 7.2. Перед проведением анализа исследуемые образцы сыворотки крови развести в 101 раз: к 0,01 мл сыворотки добавить 1,0 мл раствора для разведения сывороток. Тщатель но перемешать. Разведенные образцы следует использовать в течение дня, хранению они не подлежат. 8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Компоненты набора и исследуемые образцы сыворотки крови перед использованием необходимо вьщержать при комнатной температуре (+18-25”С) в течение времени не менее 30 мин. Внесение реагентов следует проводить согласно схеме на рис. 1. 8.1. Вставить в рамку необходимое количество лунок для калибровочных проб, кон трольной сыворотки и разведенных исследуемых образцов для постановки в дубликатах. Не используемые стрипы необходимо тщательно заклеить пленкой для заклеивания планшетов и хранить в упаковке при температуре +(2-8)°С в течение всего срока годности набора. 8.2. В два ряда лунок планшета внести в дубликатах по 0,05 мл калибровочных проб (КП), начиная с минимальной концентрации. 8.3. В две лунки планшета внести по 0,05 мл контрольной сыворотки (КС). 8.4. В оставшиеся лунки внести в дубликатах по 0,05 мл разведенных исследуемых образцов сыворотки крови (ИС). 1 10 И 12 А КП1 КП1 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС В КП2 КП2 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС С КПЗ КПЗ ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС D КП4 КП4 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС Е КП5 КП5 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС F КП6 КП6 ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС G КС КС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС Н ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС ИС Рис. 1. Схема заполнения лунок планшета. 8.5. Во все лунки планшета внести по 0,1 мл раствора для разведения сывороток. Дли тельность процедуры внесения калибровочных проб, контрольной сыворотки, разведенных исследуемых образцов и раствора для разведения сывороток не должна превышать 15 минут. Перемешать содержимое лунок на шейкере при комнатной температуре в течение 1 -2 минут или пятью-шестью круговыми движениями планшета по поверхности стола. 8.6. Закрыть планшет крышкой или пленкой для заклеивания планшетов и инкубиро вать в течение 45 минут при температуре +(37+1) °С. 8.7. Извлечь планшет из термостата и отмыть его. Промывку планшета можно прово дить вручную или с использованием любого автоматического промываюшего устройства. При ручной промывке удалить содержимое лунок декантированием, в каждую лунку план шета внести по 250 мкл рабочего раствора ФСБР (см п. 7.1), оставить планшет на 2 минуты