Набор реагентов для определения активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови "по конечной точке" с п-нитрофенилфосфатом (КлиниТест-ЩФ) по ТУ 9398-272-27511906-2003 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
«УТВЕРЖ ДАЮ » Руководитель Департамента государственного кон троля лекарственндаер^тв, изделий медицинского назначения и м е л й й « 1а д ^х н и кн М 3 РФ I, Акимочкин ИНСТРУКЦИЯ г по применению набора реагентов для определения активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови «по конечной точке» с п-нитрофенилфосфатом (КлиниТест-Щ Ф) Рекомендована к утверждению комиссией по лабораторным реагентам Комитета по новой медицинской технике М 3 РФ (протокол № Ю от 23 декабря 2002 г.) НАЗНАЧЕНИЕ Набор КлиниТест-Щ Ф предназначен для определения активности щелочной фосфатазы (Щ Ф ) в сыворотке крови человека унифицированным методом с п-нитрофенилфосфатом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях, а также в научно- исследовательской практике. Набор рассчитан на проведение 120 определений при расходе 1,0 мл рабочего реагента на один анализ. ПРИНЦИП МЕТОДА Определение активности щелочной фосфатазы основано на гидролизе п- нитрофенилфосфата под воздействием фермента с образованием эквимолярного количества п- нитрофенола, окрашенного в щелочной среде в желтый цве'г. Интенсивность окраски раствора пропорциональна активности щелочной фосфатазы и определяется фотометрически при длине волны 405 (400-420) нм. СОСТАВ НАБОРА: - АМП-буфер, pH 10,5, состоящий из 2-амино-2-метил-1-пропаноЛа^ 0,35 моль/л; соляной кислоты, 0,025 моль/л; магния хлористого, 0,001 моль/л - 1 флакон (100 мл); “ субстрат п-НФ Ф Ка2, состоящий из динатриевой соли п-нитрофенилфосфата, 0,075 моль/л; этиленгликоля, 12,5 мл — 1 флакон (20 мл); - ингибитор: натрия гидроокись, 0,3 ^ моль/л - 4 флакона (по 125 мл); - калибратор: п-питрофенол, 0,02 ммоль/л - 1 флакон (5,0 мл). Инструкция составлена старшим научным сотрудником НПЦ "Эко-Сервис" РОС СПбОЕ С.А.Коньковым и зав. отделением лабораторной диагностики НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова М3 РФ, д.м.н. В.К. Гуркало АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Линейная область определения активности щелочной фосфатазы - в диапазоне от 30 до 400 Е/л, отклонение от «линейности» - не более 7%. Чувствительность определения - не более 25 Е/л, Коэффициент вариации результатов определений - не более 7%. Качество набора может оцениваться по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным данным методом. Активность щелочной фосфатазы в норме в сыворотке крови составляет 36-120 Е/л. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин для обследуемого контингента людей, АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЩЫ Негемолизированная сыворотка крови. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Потенциальный риск применения набора - класс 2а. В состав набора входят соляная кислота и натрия гидроокись. При работе с набором следует не допускать их попадания на кожу и слизистые; при попадании следует промыть пораженное место большим количеством проточной воды. В случае попадания внутрь следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции. Меры предосторожности - соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.). ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ: - Спектрофотометр, длина волны 405 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 400-420 нм, кювета с длиной огггического пути 1 см; - пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкостей от 0,02 до 2,0 мл; - колба вместимостью 200 мл; - секундомер; - пробирки вместимостью 5,0 - 10 мл; - термостат, поддерживающий температуру +37^0,1®С - перчатки резиновые или пластиковые. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА 1. Определения коэффициента миллимолярной экстинкции* В кювету внести калибратор и измерить его оптическую плотность (Екал) относительно ингибитора при длине волны 405 (400-420) нм в кювете с длиной оптического njrra 1 см. Рассчитать коэффициент миллимолярной экстинкции по формуле: Е = ----- 1x0,02 где: е - коэффициент миллимолярной экстинкции, л/(ммоль-см); Екал - величина оптической плотности калибратора, ед.опт.плотн.; 1 - длина оптического пути, см; 0,02 - концентрация п-нитрофенола в калибраторе, ммоль/л. 2. Приготовление рабочего реагента Субстрат п-НФФЫаг смешать с АМП-буфером в колбе вместимостью 200 мл в соотношении 1:5. Полученный реагент можно хранить в посуде из темного стекла при температуре +2-8** С не более 5 сут или при комнатной температуре (+18-25** С) не более 8 ч. ПРОВЕДЕНИЕ АН АЛИ ЗА В пробирки вместимостью 5,0-10 мл добавить компоненты в соответствии с порядком, указанным в таблице. Таблица Реагент, мл Опы'шая проба Контрольная (холостая) проба Рабочий реагент 0.5 0,5 Инкубировать в течение 5 мин при температуре +37®С, затем внести: Сыворотка крови 0,02 ■..... , ' 1. ■ ■ ■■ ■ ■ ■ Инкубировать в течение 10 мин при температуре +37°С, затем внести; Ингибитор 2,0 2,0 Сыворотка крови - 0,02 Содержимое пробирок перемешать и измерить оптическую плотность опытных проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 405 (400-420) нм в кювете с длиной оптического пути 1 см. РАСЧЕТЫ Активность щелочной фосфатазы в исследуемой пробе рассчитать по формуле: ExV^^xlOOO рс А = V™ X е X t X L пр где: А ~ активность щелочной фосфатазы, Е/л; Е - величина оптической плотности исследуемой пробы, ед.опт.пл.; Vpc - объем реакционной смеси, 2,52 мл; 1000 - коэффициент пересчета; Vnp “ объем исследуемой пробы сыворотки крови, 0,02 мл; е - коэффициент миллимолярной экстинкции «-нитрофенола, л/(ммоль-см); t - время инкубации опытной пробы, 10 мин; L - толщина поглощающего свет слоя, 1 см. УС ЛО ВИ Я ХРАНЕНИЯ И Э КС П ЛУАТА Ц И И НАБОРА Набор должен храниться при комнатной температуре в упаковке предприятия изготовителя в течение всего срока годности (12 месяцев). Рабочий реагент можно хранить при комнатной температуре^! 8-25°С) не более 8 ч или при температуре +2-8°С - не более 5 сут. АМП-буфер, субстрат п-НФФКаг, ингибитор после вскрытия флаконов могут храниться при комнатной температуре в темном месте в течение всего срока годности наборов при условии достаточной герметичности флаконов. Калибратор после вскрытия флакона можно хранить при температуре +2-8°С не более 3 мес при условии достаточной герметичности флакона. Если активность щелочной фосфатазы в исследуемой пробе превьппает 400 Е/л, необ ходимо развести образец в 5 раз физраствором. Анализ повторить, результат умножить на 5. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора. По вопросам, касающимся качества набора КлиниТест-Щ Ф, следует обращаться в: - НПЦ «Эко-Сервис» РОО СпбОЕ по адресу: 199034, г. Санкт-Петербург, Университет ская набережная, 7/9, тел.: (812) 3289663,4279779; - Институт государственного контроля качества лекарственных средств Ф ГУ "НЦ ЭСМП' М3 РФ по адресу: 117246, г. Москва, Научный проезд, 14 а, тел.: (095) 120-60-95, 120-60-96. Старший научный сотрудник НПЦ 'Эко-Сервис" РОО СПбОЕ С.А. Коньков Заведующий отделением лабораторной диагностики НИИ онкологии им. проф Н.НЛетрова М 3 РФ, д. м. н. В.К. Гуркало