Набор реагентов для иммуноферментного определения свободного тироксина в сыворотке крови (ИФА-СвТ4-1) по ТУ 9398-341-11361534-01 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
"УТВЕРЖДАЮ”
Зам. руководителя Департамента госу
дарственного контроля качества, эф-
шости, безопасности лекарствен-
ютв и медицинской техники
Топорков
2001 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ СВОБОДНОГО ТИРОКСИНА В СЬШОРОТКЕ КРОВИ
(ИФА.СвТ,-1)
Рекомендована Комиссией по наборам реагентов для иммуноферментного (неинфекцион
ные), радиоиммунологического и других видов иммунохимического анализа Комитета по новой
медицинской технике Минздрава РФ (протокол № 6 от 18 июня 2001 г.).
Взамен инструкции, утвержденной Минздравом РФ 10 августа 1998 г.
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор ИФА-СвТ^ предназначен для количественного определения концентрации сво
бодного тироксина (CbTJ в сыворотке крови человека методом иммуноферментного анализа.
Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 неизвестного образца, 6 кагшб-
ровочных проб и одной пробы контрольной сыворотки, всего 96 определений.
Количественное определение содержания свободного тироксина в сыворотке крови че
ловека может быть использовано для диагностики изменений функции щитовидной железы.
Составлена; заместителем генерального директора, к.б.н. Е.М. Гавриловой и научным со
трудником М.А. Рябининой - сотрудниками ЗАО “ИБО Иммунотех”; доцентом, к.м.н, Г.В. Иб
рагимовой, врачом-лаборантом А.В. Рябых - сотрудниками РМАПО.
2. ПРИНЦИП РАБОТЫ НАБОРА
Принцип метода определения основан на конкуренции свободного тироксина Hi изме
ряемой пробы и конъюгата тироксина с нероксидазой за центры связывания специфичных к ти
роксину антител, иммобилизованных на поверхности лунок полистиролового нла}1шега. Коли
чество связавшегося конъюгата выявляют с 1юмощью субстрата ТМБ. Интенсивность окраски
продуктов ферментативной реакции окисления субсграта обратно пропорциона.чьна концентра
ции свободного 1’ироксина, содержагцегося в апашзирусмом образце.
3. СОСТАВ НАБОРА
В состав набора входя т:
- планшет 96-луночный полистироловый, покры тый полиююна*пьными антителами к ти
роксину - 1 шт.:
- кaJJибpoвoчныe пробы на основе сыворотки крови человека, содержащие известные ко
личества свободного тироксина: 0; 3,0: 12; 25; 50; 100 пмоль/л; корнгентрации свободного ти
роксина в калибровочных пробах могут незначительно изменяться от серии к серии, гочные
значения концентраций указаны на этикетках флаконов, лиофилизованные или жидкие - 6 фл.
(но 0,5 мл). Kajm6p0B04Hbie пробы при1’отовлены добавлением в сыворотку крови человека, [ге
содержащую эндогенный гироксин, рассчита^нюго ко.'шчества химически чистого тироксина
произволе гва фирмы S1GMA (США).
- контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с извесшым содержанием
свободного тироксина, лиофилизованная или жидкая - 1 фл. (0,5 мл);
- конъюгат тироксина с пероксидазой из корня хрена, готовый для ис1[Ользования - 1
фл. (22 мл);
' фосфатно-солевой буферный раствор с добавлением твин-20, pH 7,0+0,5, концентриро
ванный - 1 фл. (15 мл);
- раствор субстрата на основе 3.3'.5,5'-тетраметилбензидина ( ГМБ) с добавлением пере
киси водорода, готовый для использования - 1 фл. (12,5 мл);
- стоп-реагент, готовый для использования - 1 ф.т (15 мл);
- пленка для заклеивания ]1ланшета - 1 нтг.
4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Специфичность. Использование высокоаффинных антител к тироксину (Т4} обсспсчива-
ег высокую специфичность анали'ш. Про цен г перекрестных реакций с трийодтнро1Н1ном (Т;)
сосчавляст 0,9 %, с тирозином - 0,001 %.
Чувствительность. Минимальная концентрация свобо/щою тироксина, определяемая с
помощью набора, составляет не более 1.8 пмоль/л.
Воспроизводимость рс'^ультатов. Коэффициент вариации результатов определения со
держания СВ060ДН010 тироксина в одном и том же образце сыворотки крови не превышает 8 %
в диапазоне концентраций 10-100 пмоль/л. 10 % - в диапазоне концентраций 3 -10 пмоль/л.
Линейность. Линейность определения - в диапазоне определяемых концетраций
3 - 100 пмоль/л.
Клиническая проверка набора. Диапазон концентраций свободною (ироксина, опреде
ляемый с помощью набора ИФЛ-СВТ4. в сыворогке крови, взятой с 9 до 11 часов у здоровых
лиц в возрасте от 20 до 50 лет {п=216). составил 10 - 25 пмоль/л.
Рекомендуегся в каждой лаборатории при использовании набора ИФА-СвГ.1 уточнить
значения концентраций свободного тироксина, соответствующие нормальным для обследуемо
го контингента.
5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Все компоненты набора, за исключением сгон-реагента, в используемых концентрациях
нетоксичны.
Стоп-реагент действует па кожу и слизистые прижигающим образом, выбывая раздраже
ние и ожоги, поэтому в случае попадания на кожные или слизистые покровы его следует не
медленно тщательно смыть большим количесч вом проточной воды.
При рабоге с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые пер
чатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицирован
ные. способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита и другие возбу-
дигeJш инфекций.
6. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ:
- Фотометр вертикального сканирования одно- или многоканальный, позволяющий изме
рять оптическую плотность раствора в лунках планшета при длине волны 450 нм:
- пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным объемом со сменяемыми на
конечниками, позволяющие отбирать объемы жидкое ги 2-20 мкл, 200-1000 мкл:
- пипетка полуавтоматическая м11огоканальная с переменным объемом со сменяемыми на
конечниками, по;шоляющая отбирать объемы жидкости 50-250 мкл;
- секундомер;
- шейкер;
- стаканы химические мерные вместимостью 50 и 300 мл;
- фильтровальная бумага или салфетки марлевые;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые.
7. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ
7.1. Приг отовление рабочего раствора фосфатно-солевого буфер1Юго раствора (ФСБР),
Содержимое флакона с концентратом фосфагно-солевого буферного раствора (ФСЬР)
перенести в мерный стакан вместимостью 300 мл. дважды ополоснуть флакон дистиллирован
ной водой, все промывные воды объединить с разведенным ФСЬР и довести обнщй объем рас
твора до 300 мл дистиллирован!юй водой.
Получе1П1ЫЙ рабочий раствор ФСЬР можно хранить в закрытой емкосги не более 7 дней
при температуре +(2-8/’С.
Примечание. При хранении ФСБР могут образовываться криста_тлы, позтому перед от
бором аликвоты ФСБР необходимо слабо подогреть флакон с буферным раствором, поместив
его в водяную баню или термос гаг (температура +37"С), до полного растворения крис галлов.
7.2. Приготовление калибровочных проб.
Жидкие калибровочные пробы юювы к использованию. При комплектации набора лио-
филизоваппыми ка.иибровочными пробами в каждый флакон, содержащий калибровочную про
бу, внести по 0,25 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать, избегая образования
пены, до полного растворения вещества. В результате получаЕСт растворы со следующими кои-
центрациями свободного тироксина: 0; 3,0: 12; 25; 50: 100 нмоль/л.
Жидкие калибровочнЕле пробы после вскрытия флаконов можно хранить при температу
ре +(2-8У'С не более 1 месяца. Лиофили'юваппые калибровочные пробы, подготовленные к ра-
t)OTe, можно храни гь при температуре +(2-8)‘’С не более 7 дней; при необходимости более дли
тельного хранения следует рахти гь калибровочные пробы на аликвоты по 125 мкл и хранить
ири температуре минус 20Ч" не более 1 месяца.
7.3. Приготовление контрольной сыворотки.
Жидкая контрольная сыворотка готова к использованию. При комплектации набора
лиофилизованной контрольной сыворогкой во флакон, содержшций контрольную сыворотку,
внести 0,5 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать, избегая образования пены, до
полного растворения вещества.
Жидкую контрольную сыворотку после вскрьггия флакона можно хранить при темпера
туре +(2-8У'С не более 1 месяца. Лиофилизованную контрольную сыворо] ку, нодго'ювленную к
работе, можно хранить при температуре +(2-8У'С не более 3 суток, либо при темперачуре минус
20"С не более 1 месяца.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Внесение реагентов следует проводить согласно схеме на рис. I.
8.1. В два ряда лунок планшета внести в дубликатах но 0,02 мл калибровочных проб
(КГ1), приготовленных согласно н. 7.2, начиная с минимальной концентрации.
8.2. В две лунки планшета внести но 0.02 мл контрольной сыворотки (КС), приготовлен
ной согласно и. 7.3.
8.3. В оставшиеся лунки внести в дубликатах по 0,02 мл исследуемых образцов сыворо
ток крови (ИС).
8.4. Во все лунки планшета внести по 0,2 мл рабочего конъюгата. Конъюгат в}юсить в
лунки планшета в той же последовательности, что и калибровочные пробы, контрольную сыво
ротку и исследуемые образцы. Процедуру внесения следует выполнять как мож1ю быстрее.
Продолжительность операции по внесению Kajm6p0B04Hbix проб. KOHTpojH^HOft сыворотки, ис
следуемых образцов сывороток крови и конъюгата не должна превышать 15 минут.