Набор реагентов для иммуноферментного определения антигена CYFRA 21-1 в сыворотке (плазме) крови «CYFRA 21-1-ИФА» по ТУ 9398-236-18619450-2010 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2010/08050 от 22.06.2010 · класс риска 1

Производитель: ООО "ХЕМА" (Россия)

Вид изделия: Альфа-фетопротеин (АФП) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 2 контракта, медианная цена за единицу 24 178 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

УТВЕРЖДЕНА «УТВЕРЖДАЮ»
Приказом Росздравнадзора ООО «ХЕМА»
от_________________201 о г. ^ II Ю. С. Лебедин
№ января 2010 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению Набора реагентов для иммуноферментного определения
антигена CYFRA 21-1 в сыворотке (плазме) крови
«CYFRA 21-1-ИФА»
1. НАЗНАЧЕНИЕ.
1.1. Набор реагентов «CYFRA 21-1-ИФА» предназначен количественного определения
концентрации антигена CYFRA 21-1 в сыворотке (плазме) крови человека методом
твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Антиген CYFRA 21-1 представляет собой фрагмент цитокератина 19, образующийся
в результате протеолиза и, в отличии от основной цитокератиновой структуры, способный
переходить в растворимую форму и выходить в системный кровоток. Молекула-предшественник
антигена CYFRA 21-1 - цитокератин 19 - экспрессируется во всех нормальных тканях, но
особенно высокая степень экспрессии наблюдается в клетках опухолей легких или стенки
мочевого пузыря.
Повышенное содержание CYFRA 21-1 наблюдается в крови больных опухолями легких
(преимущественно плоскоклеточным раком, реже аденокарциномой и другими гистологическими
формами) и опухолями мочевого пузыря. Определение уровня антигена CYFRA 21-1 полезно для
контроля эффективности лечения и слежения за течением этих опухолей; вместе с тем,
результаты измерения антигена CYFRA 21-1 всегда следует интерпретировать в комплексе с
результатами других методов исследования и клиническими данными.
1.3. Диагностическая значимость определения. Определение CYFRA 21-1 в сыворотке
(плазме) крови используется обычно для клинической лабораторной диагностики опухолей
легких и опухолей мочевого пузыря различной этиологии.
1.4. Область применения - клиническая лабораторная диагностика.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА.
2.1. Принцип работы Набора. Определение антигена CYFRA 21-1 основано на
использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа. На внутренней
поверхности лунок иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к растворимому
цитокератину 8/19 (CYFRA 21-1). В лунках планшета,^при добавлении исследуемого образца,
.?АСу\оотью
происходит связывание CYFRA 21-1, с антит^. фазе. Образовавшийся комплекс
выявляю т® Е Jl\§(pщ£к^ ^ ^(Mb*Wrf'^k^ Ofi оно нтит^;ЛУк антигену CYFRA 21-1 с
ОТВЕТСГ0ЕИНОС1 ЬЮ
пероксидазой. В 4^^^фдт;ате образуется ом «сэндвич», содержащий
пероксидщуГЕНЕРАЛЬНЫЙ ДИРЕКТОР
/Гебедин Юр ийСтепанович
Во время инкубации с растворо лбензидина (ТМБ) происходит
'tr
окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации
CYFRA 21-1 в исследуемом образце. Концентрацию антигена CYFRA 21-1 в исследуемых
образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от
содержания антигена CYFRA 21-1 в калибровочных пробах.
2.2. Состав Набора:
планшет 96-луночный стрипированный с сорбированными на внутренней поверхности лунок
мышиными моноклональными антителами к CYFRA 21-1; готов к использованию - 1 шт.;
калибровочные пробы на основе фосфатного буфера, содержащие известные количества
антигена CYFRA 21-1 - 0; 3; 10; 25 и 50 нг/мл; концентрации антигена CYFRA 21-1 в
калибровочных пробах могут несколько отличаться от указанных величин, точные величины
указаны на этикетках пробирок (флаконов); готовы к использованию - 5 пробирок или флаконов
(по 0,8 мл каждая; калибровочная проба 0 нг/мл - 6,0 мл);
конъюгат; готов к использованию - 1 флакон (6,0 мл);
раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ); готов к использованию - 1 флакон (11 мл);
контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержанием
антигена CYFRA 21-1; готова к использованию - 1 пробирка или флакон (0,8 мл);
концентрат отмывочного раствора 21-кратный концентрат - 1 флакон (22 мл);
стоп-реагент; готов к использованию - 1 флакон (11 мл);
липкая лента с бумажной подложкой для заклеивания планшета; готова к использованию - 2
шт.;
аналитический паспорт;
Инструкция по применению Набора.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ.
3.1. Специфичность Перекрестная реакция мышиных моноклональных антител к
растворимому антигену цитокератина 8-19 (CYFRA 21-1) с другими аналитами приведена в
Таблице.
Аналит Перекрестная реакция %
Антиген СА 125 <0,1
Антиген СА 19-9 <0,1
Антиген СА 15-3 <0,1
а-фетопротеин (АФП) <0,1
Простатаспецифический антиген (ПСА) <0,1
3.2. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая Набором реагентов
«CYFRA 21-ПИФА» концентрация CYFRA 21^-.ж^-сь|^оротке (плазме) крови не превышает 1,0
нг/мл.
Общество с огр^м и енной
коэф льтатов определения содержания
CYFRA М-1 в оЛм^й том же образц! крови с использованием Набора
Генеральный директор
peareH-^pg^'^lflR|0(21|^ |ГРЙ4ТА ТО BV'
3.4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» -
соответствие измеренной концентрации CYFRA 21-1 предписанной, полученной путем
смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 10,0 нг/мл
Процент «открытия» составляет 90-110%.
3.5. Линейность. Зависимость концентрации CYFRA 21-1 в образцах сыворотки (плазмы)
крови при разведении их сывороткой (плазмой) крови, не содержащей CYFRA 21-1, имеет
линейный характер в диапазоне концентраций 3,0-50 нг/мл и составляет - 10,0%.
3.6. Хук-эффект {hook-effect) высоких концентраций. При использовании Набора
«CYFRA 21-ПИФА» хук-эффект не обнаружен до концентрации CYFRA 21-1 1000 нг/мл.
3.7. Клиническая проверка. Нормальные значения.
Исследуемая Единицы
группа
нг/мл
. V Нижний предел Верхний
предел
Здоровые
0,3 3,0
доноры
В соответствии с требованиями GLP {Good Laboratory Practice, Хорошая Лабораторная
Практика) рекомендуется в каждой клинико-диагностической лаборатории при использовании
Набора реагентов «CYFRA 21-ПИФА» уточнить значения концентрации CYFRA 21-1,
соответствующие нормальным у обследуемого контингента.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
4.1. Потенциальный риск применения Набора - класс 1 (ГОСТ Р 51609-2000).
4.2. Меры предосторожности-соблюдение еПравш устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР» {ЬЛоскш, 1981 г.).
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую
плотность раствора в лунках при длине волны 450 нм;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости
в диапазоне 25-250 мкл;
- термостат, поддерживающий температуру +37±0,1°С;
- цилиндр мерный вместимостью 500 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые^
- буа&м ‘генной
ОТВЕТСГВЕНИОС! ЫО
-хема*
Генеральный директор
Лебедин Юр ийСтепанов
n - i
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА.
6.1. Перед проведением анализа компоненты Набора и исследуемые образцы сыворотки
(плазмы) крови следует выдержать при комнатной температуре (+18-25®С) не менее 30 мин.
6.2. Образцы сыворотки (плазмы) крови, используемые для анализа, допускается хранить
при температуре +2-8°С не более 24 ч или при температуре минус 20“С не более 2 недель.
6.3. Для проведения анализа не следует использовать гемолизированные, мутные образцы
сыворотки (плазмы) крови, а также исследуемые образцы, содержащие азид натрия в качестве
консерванта.
6.4. Исключается использование для анализа образцов сыворотки (плазмы) крови людей,
получавших для диагностики или терапии препараты, в состав которых входят мышиные
антитела.
6.5. При использовании Набора реагентов «CYFRA 21-ПИФА» для проведения
несКолькиК'независимых серий анализов следует иметь в виду, что для каждого независимого
определения необходимо построение нового калибровочного графика; кроме этого,
рекомендуется определение концентрации CYFRA 21-1 в контрольной сыворотке.
6.6. Приготовление планшета.
Вскрыть пакет с планшетом и установить на рамку необходимое количество стрипов.
Вскрытые стрипы следует использовать в течение 1 ч, длительному хранению не подлежат.
Оставшиеся неиспользованными стрипы, чтобы предотвратить воздействие на них влаги,
необходимо тшательно заклеить липкой лентой для заклеивания планшета и хранить в упаковке
при температуре +2-8°С в течение всего срока годности Набора.
6.7. Приготовление отмывочного раствора.
Содержимое флакона с концентратом отмывочного раствора перенести в мерный цилиндр
вместимостью 500 мл, добавить 440 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать.
В случае дробного использования Набора следует отобрать необходимое количество
концентрата отмывочного раствора и развести дистиллированной водой в 21 раз (1 объем
концентрата + 20 объемов дистиллированной воды).
Приготовленный отмывочный раствор допускается хранить при комнатной температуре
(+18-25°С) не более 2 сут. или при температуре +2-8°С не более 10 сут.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА.
7.1. Если предполагаемая концентрация CYFRA 21-1 в исследуемом образце превышает
50 нг/мл, его следует дополнительно развести, используя калибровочную пробу 0 нг/мл.
Использование других буферов и реагент(^^^-:Лш^^)азбавления может искажать
результаты определения.
7.2. ВнеА&*^Ч Q;b&VB/TC%yi6u|ti'l; кл каждой калибровочной
OTBETCTSeHFQCl Ш
пробы и контрольной сывар(1|Г^1Д.уВ остальные некхи.. ах по 50 мкл исследуемых
XEMfl
образцов сыворотк(з^й.^1АЛк]^1^ 1^ РЕКТОР
Л ебедин Юр йиТ тепанов
Внесение образцов в лунки планшета течение 5-10 мин.
7.2. Внести во все лунки планшета по 50 мкл конъюгата.
Внесение конъюгата в лунки планшета необходимо произвести в течение 5-10 мин.
7.3. Заклеить планшет липкой лентой для заклеивания планшета и инкубировать его в
течение 30 мин при температуре +37 ± 0,1°С .
7.4. По окончании инкубации удалить содержимое лунок аспирацией (например, с
помощью водоструйного насоса) или декантированием и промыть лунки планшета 5 раз путем
добавления во все лунки по 250 мкл отмывочного раствора. Перемешать содержимое планшета
круговыми движениями по горизонтальной поверхности с последующей аспирацией или
декантированием. При каждом декантировании необходимо тщательно удалять остатки жидкости
из лунок постукиванием планщета в перевернутом положении по фильтровальной бумаге.
7.5. Внести во все лунки планщета по 100 мкл раствора субстрата тетраметилбензидина
(ТМБ).
Внесение раствора субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) в лунки планщета необходимо
произвести в-течение 1-2 мин.
Инкубировать планшет в темноте при комнатной температуре (+18-25^С) в течение 15-25
мин. в зависимости от степени развития синего окрашивания.
7.6. Внести во все лунки планшета с той же скоростью и в той же последовательности, как
и раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ), по 100 мкл стоп-реагента; при этом содержимое
лунок окрашивается в ярко-желтый цвет.
Внесение стоп-реагента в лунки планшета необходимо произвести в течение 1-2 мин.
8. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ.
8.1. Измерить величину оптической плотности (ОП) в лунках планшета на фотометре
вертикального сканирования при длине волны 450 нм. Измерение ОП растворов в лунках
планшета необходимо произвести в течение 15 мин после внесения стоп-реагента.
В случае невозможности своевременного измерения ОП растворов в лунках на фотометре,
планшет допускается хранить при температуре +2-8°С не более 4 ч.
9. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ РЕАКЦИИ.
9.1. Построить в линейных координатах калибровочный график: ось абсцисс -
концентрация антигена CYFRA 21-1 в калибровочных пробах (нг/мл), ось ординат - оптическая
плотность калибровочных проб (ОП450). Для алгоритма обсчета (аппроксимации) калибровочного
графика используйте интервальный (кусочно-линейный, «от точки к точке») метод.
9.2. Определить по калибровочному графику содержание CYFRA 21-1 в исследуемых
образцах. Если исследуемый образец предразводили (см. п. 7.1.), следует умножить полученный
результат на фактор разведения ___
10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И НАБОРА.
10.1. Наб(()№|Я£^1гёй1Ъ^ «<ОУМА‘12Р1ЕЙЬа '%^%паковке предприятия-
изготовителя при температуде|да*8. С в течение всег
ДопускаетсяГ£|1Шн^У1Ь ltW^aFMifop)ltJ|ftjfeKa) Н ■атурй'до +25 С не более 5
Лебедин Юр ийСтепановичТ {
сут. 1