Набор реагентов для количественного иммуноферментного определения аллерген-специфических IgE в сыворотке крови человека («АллергоИФА-специфические IgE») по ТУ 9398-207-98539446-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас 6 закупок, где это изделие полностью проходит по требованиям хотя бы в одной позиции.
| Закупка | Окончание подачи | Нач. цена |
|---|---|---|
| Поставка реагентов для КДЛ для нужд Учреждения в 2027 году
№ 0372200186926000365 · САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ "ГОРОДСКОЙ КОНСУЛЬТАТИВНО-ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ ЦЕНТР № 1" · г. Санкт-Петербург |
09.11.2026 | 3 856 194 ₽ |
| Поставка реагентов для нужд КБ № 101 ФФГБУ СКФНКЦ ФМБА России в г. Лермонтове
№ 0321100017626000525 · ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "СЕВЕРО-КАВКАЗСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ НАУЧНО-КЛИНИЧЕСКИЙ ЦЕНТР ФЕДЕРАЛЬНОГО МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКОГО АГЕНТСТВА" · Ставропольский край |
10.11.2026 | 1 431 027 ₽ |
| Поставка реагентов для ИФА и для определения групп крови (14) для СПб ГБУЗ КДП № 1 в 2026 году
№ 0372200084826000268 · САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ "КОНСУЛЬТАТИВНО-ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ПОЛИКЛИНИКА № 1 ПРИМОРСКОГО РАЙОНА" · г. Санкт-Петербург |
10.11.2026 | 1 499 214 ₽ |
| Поставка аллергенов
№ 0360500000626000055 · ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ "САРАТОВСКАЯ ЦЕНТРАЛЬНАЯ ГОРОДСКАЯ ДЕТСКАЯ ПОЛИКЛИНИКА" · Саратовская область |
16.11.2026 | 99 966 ₽ |
| На 2027 г. Поставка медицинских изделий
№ 0139200000126013880 · ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ "КУЗБАССКАЯ ДЕТСКАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА ИМЕНИ ПРОФЕССОРА Ю.Е. МАЛАХОВСКОГО" · Кемеровская область |
17.11.2026 | 816 046 ₽ |
| Поставка медицинских расходных материалов
№ 0387200002826001131 · БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ХАНТЫ-МАНСИЙСКОГО АВТОНОМНОГО ОКРУГА - ЮГРЫ "ОКРУЖНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА" · Ханты-Мансийский автономный округ — Югра |
24.11.2026 | 1 485 729 ₽ |
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- 1 ф П р и к а зо м Р о с з д р а в н а д з о р а / / ^ / ^ Г о т ^ и ь п ы й д и р е к т о р o r « ___»______2 0 _ г № _____________ А л к о р Б и о » Ш в ы р е в М .В . ап р ел я 2011 г. «УТВЕРЖ ДЕНА» «УТВЕРЖ ДАЮ » И Н С Т Р У К Ц И Я П О П Р И М Е Н Е Н И Ю Н А Б О Р ? Д Л Я К О Л И Ч Е С Т В Е Н Н О Г О И М М У Н О Ф Е Р М Е Н Т Н О Г О О П Р Е Д Е Л Е Н И Я А Л Л Е Р Г Е Н - С П Е Ц И Ф И Ч Е С К И Х Ig E В С Ы В О Р О Т К Е К Р О В И Ч Е Л О В Е К А ) ( « А л л е р г о И Ф А - с п с ц и ф н ч е с к п с Ig E » ) 1. Н А З Н А Ч Е Н И Е 1.1. Н а б о р р е а г е н т о в « А л л е р г о И Ф А -с п е ц и ф и ч е с к и е Ig E » п р е д н а з н а ч е н д л я к о л и ч е с т в е н н о г о о п р е д е л е н и я а л л е р г е н -с п е ц и ф и ч е с к и х и м м у н о г л о б у л и н о в Е (д а л е е Ig E ) в с ы в о р о т к е к р о в и ч е л о в е к а м е т о д о м т в е р д о ф а з н о г о и м м у н о ф е р м е н т п о г о а н а л и за . 1.2. И м м у н о г л о б у л и н ы к л а с с а Е у ч а с т в у ю т в в о з н и к н о в е н и и и р а зв и т и и а л л е р г и ч е с к и х р е а к ц и й . Э т и а н т и т е л а, с в я зы в а я а л л ер ге н , п р и о б р е т а ю т с п о со б н о сть с т и м у л и р о в а т ь в ы д е л е н и е б а з о ф и л а м и р я д а в а зо а к т и в п ы х в е щ е с т в , к о т о р ы е о п р е д е л я ю т р а з в и т и е а л л е р г и ч е с к о й с и м п т о м а т и к и . В ы я в л е н и е и к о л и ч е с т в е н н о е о п р е д е л е н и е к о н ц е н т р а ц и и с в о б о д н ы х а л л е р г е н -с п е ц и ф и ч е с к и х Ig E и м е е т б о л ь п ю е з н а ч е н и е п ри д и а г н о с т и к е и и с с л е д о в а н и и а л л е р г и ч е с к и х з а б о л е в а н и й , д л я в ы б о р а а д е к в а т н о й т е р ап и и . 1.3. Н а б о р « А л л е р г о И Ф А -с п е ц и ф и ч е с к и е Ig E » р а с с ч и т а н н а п р о в е д е н и е а н а л и за 80 н е и з в е с т н ы х п р о б в м о н о п л и к а т а х , 6 к а л и б р о в о ч н ы х п р о б , о д н о й п р о б ы д л я о п р е д е л е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и р а с т в о р а Т М Б и о д н о й п р о б ы к о н т р о л ь н о й с ы в о р о т к и в д у б л и к а т а х п р и и с п о л ь з о в а н и и в с е х с т р и п о в о д н о в р е м е н н о (в с е г о 9 6 о п р е д е л е н и й ). Примечание: в случае дробного примепепия набор может быть использован только в течение двух месяцев после вскрытия компонентов набора. 2 . Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А Н А Б О Р А 2 .1 . Н р и п ц н и д е й с т в и я В н а б о р е « А л л е р г о И Ф А -с п е ц и ф и ч е с к и е Ig E » д л я в ы я в л е н и я IgE -а н т и т е л , с п е ц и ф и ч н ы х к к о н к р е т н ы м а л л е р г е н а м , и с п о л ь з о в а н ы д в а в а р и а н т а т в е р д о ф а з н о г о и м м у н о ф е р м е н т п о г о а н а л и з а (Р и с у н о к 1). В л у н к ах , п р е д н а зн а ч е н н ы х д л я к ал и б р о в о ч н ы х п р о б , р е а л и зо в а н « с э н д в и ч » -в а р и а н т а н ал и за. Д л я этого и сп ользова 1п> 1 д ва м оноклональны х а1ггитела с разли ч н ой эп ^ го п н о й сн еци ф и чн ослъю к им м утю глобулипам ю ш сса Е, а такж е кон ъю гат стр еп тави д и н а с п ерокси дазой хрена. Одаю из м оноклональны х а 1ггител им м об и ли зова 1ю н а твердой ф азе (внутренняя п о вср х н о с 1ъ лун ок ) (н а Р исунке 1: М А Т 1), второе кон ъю ги рован о с эф и ром б и о ти н а (на Р и сун ке 1: М А 'Г2). В о врем я п ервой инкубации в этих лунках о д н о вр ем ен н о п р о и сх о д ят и м м об и ли зац и я н а твер д о й ф азе и связы вание с конъю гатом aHTH-IgE- 6H0THH м олекул IgE (на Рисун ке 1: о б щ и й IgE), со д ер ж ащ и х ся в кали бровощ 1ЫХ пробах. В лунках, п р е д н а з н а ч е н н ы х д л я о б р а з ц о в с ы в о р о т к и к р о в и , р е а л и зо в а н «cap tu re «-вариант и м м у1ю ф е р м е н т н о го ан ал и за. Д л я в ы я в л ен и я IgE к к о н к р е тн ы м ал л ер ген ам (па Р и сун ке I; специ ф и чески й IgE ) и с п о л ь з у ю т с я о д н о м о н о к л о н а л ь н о е ан ти т е;ю , с п е ц и ф и ч н о е к и м м у н о гл о б у л и н а м к л а с с а Е и и м м о б и л и зо в а н н о е п а т в е р д о й ф азе (вн утрен н яя поверх 1Юсгь --- стр. 2 --- л ун ок ) (н а Р и су н к е 1: М А Т 1 ), а т а к ж е б и о т и н и л и р о в а н н ы е а л л ер ге н ы п о вы б о р у л еч ащ его в р ач а в м е с то к о н ъ ю г и р о в а н н о г о с эф и р о м б и о т и н а а н т и т е л а и к о н ъ ю га т с т р ен та в и д и н а с п ер о к си д азо й х р е н а . В л у н к а х с и с с л е д у е м ы м и о б р азц а м и во в р е м я п ер во й и н к у б ац и и п р о и с х о д и т и м м о б и л и за ц и я р а зн ы х м о л е к у л IgE , с о д е р ж а щ и х с я в с ы в о р о тк е кр о ви , на тв ер д о й ф азе. Е с л и с р е д и н и х и м е ю т с я Ig E , с п е ц и ф и ч н ы е к в ы б р ан н ы м ал л ер ген ам , то о д н о в р е м е н н о п р о и с х о д и т и х с в я зы в а н и е с б и о т и н и л и р о в а н н ы м а л л ер ген о м . общ ий Ig E М А Т 2 'к а л и б р о в о ч н а я ' п р о б а 1 1 М АЛ > -Б и о т и н = = С т р е п т а в и д и н -# ^ (о б р а з е ц ) Биотинилированный аллерген Пероксидаза хрена специфический Ig E -Б и о т и н = = С т р е п т а в и д и н -# г П ерок'сидаза хрена Р и с у н о к 1. С х е м а а н а л и за П ри п р о м ы в к е п лан ш е'га из лу 1ю к с к ал и б р о во ч н ы м и п р о б ам и уд аляется избы ток ко н ъ ю гата ан ти-1§Е -биотип, и з л у н о к с об р азц ам и сьгеорогки крови - избьп-ок б и о ти н и ;ш р о ван н ы х алл ер ген о в. В о вр ем я второй и н ку б ац и и к о н ъ ю гат стреп тави ди н- п ер о к си д аза связы вается с б и о т и н и л и р о в а г т ы м и а н т и т е л а м и в л у н к а х с к ал и б р о в о ч н ы м и п р о б ам и и с б и о т и н и л и р о в а н н ы м а л л ер ге н о м в л у н к а х с и с с л е д у е м ы м и о б р азц ам и . Н е с в я за в щ и е с я к о м п о н е н т ы у д а л я ю т с я п р о м ы в к о й . К о л и ч е с т в о с в я за в ш е го с я а л л ер ге н а и к о н ъ ю га т а с т р е н т а в и д и н -п е р о к с и д а з а п р я м о н р о п о р ц и о н а л ь н о к о л и ч е с т в у с п ец и ф и ч еск и х IgE в и с с л е д у е м ы х о б р а з ц а х (Р и с у н о к 1). В о в р е м я и н к у б а ц и и с Т М Б п р о и с х о д и т о к р а ш и в а н и е р а с т в о р а в л у н к ах . С теп ен ь о к р аск и п р я м о п р о п о р ц и о н а л ь н а к о л и ч е с т в у с в я за н н о го к о н ъ ю г а т а стр еп тав и д и н - п ер о к си д аза. П о с л е и зм е р е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и р а с т в о р а в л у н к а х н а о сн о ван и и к а л и б р о в о ч н ы х гр а ф и к о в , п о с т р о е н н ы х с и с п о л ь з о в а н и е м зн а ч е н и й о п т и ч е с к и х п л о тн о стей , п о л у ч е н н ы х п р и д л и н а х в о л н 4 5 0 н м и 4 0 5 н м , р а с с ч и т ы в а е т с я к о н ц е н т р а ц и я сп ец и ф и ч еск и х IgE в и с с л е д у е м ы х о б р азц а х . 2.2. С остав набора - к о м п л е к т и з д в е н а д ц а т и в о с ь м и л у п о ч н ы х с т р и гю в в р а м к е с и м м о б и л и з о в а н н ы м и н а в н у т р е 1П1е й п о в е р х н о с т и л у н о к м о н о к л о н а л ь н ы м и а н т и т е л а м и к IgE ч ел о в е к а, м а р к и р о в а н « С т р и п ы с м о н о к л о н а л ь н ы м и а н т и т е л а м и к Ig E » — 1 у п а к о в к а ; - к а л и б р о в о ч н ы е п р о б ы (К П ), а т т е с т о в а н н ы е п о В т о р о м у м е ж д у н а р о д н о м у с т а н д а р т у (T h e 2 n d In te rn a tio n a l R e fe re n c e P re p a ra tio n H u m a n S e ru m Im m u n o g lo b u lin E, 7 5 /5 0 2 ), с о д е р ж а щ и е и з в е с т н ы е к о л и ч е с т в а Ig E . Ф л а к о н ы м а р к и р о в а н ы « К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 1 » , « К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 2 » , « К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 3 » , « K a Jш б p o в o ч н a я п р о б а № 4 » , « К а ;ш б р о в о ч н а я п р о б а № 5 » , « К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 6»; т о ч н ы е зн а ч е н и я к о н ц е н т р а ц и й Ig E в к а л и б р о в о ч н ы х п р о б а х у к а з а н ы н а э т и к е т к а х ф л а к о н о в , о р и е н т и р о в о ч н ы е - 0; 0 ,5 ; 1; 5; 2 5 ; 100 М Е /м л - 6 ф л а к о н о в (л и о ф и л и з о в а н н ы е п р е п а р а т ы и л и ж и д к о с т и п о 0 ,5 м л ); - к о н ъ ю г а т а н т и -Ig E - б и о т и н , м а р к и р о в а н « К о н ъ ю г а т Е - 1 » ^ — 1 ф л а к о н (7 м л); - к о н ъ ю г а т с т р е н т а в и д и н -п е р о к с и д а з а , м а р к и р о в а н « К о н ъ ю г а т Е -2 » - 1 ф л а к о н (18 м л ); - к о н ц е н т р и р о в а н н ы й в о д н о -с о л е в о й р а с т в о р д л я п р о м ы в к и л у н о к , м а р к и р о в ан « Б у ф е р Р » — 2 ф л а к о н а (1 4 м л ); - р а с т в о р т е т р а м е т и л б е н з и д и п а , м а р к и р о в а н « Р а с т в о р Т М Б » — 1 ф л а к о н (1 4 м л); --- стр. 3 --- - сто п -p e a re irr (1 Н со л ян ая ки слота), м ар к и р о ван « С то п -р еаген т» — 1 ф лак он (14 мл); - к о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а с и з в е с т н ы м с о д е р ж а н и е м Ig E , м а р к и р о в а н а « К о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а » — 1 ф л а к о н (л и о ф и л и з о в а н н ы й п р е п а р а т и л и ж и д к о с ть , 0,5 м л ); - п р о з р а ч н ы й п л а с т и к о в ы й п а к е т с з а м к о м (п р и у п а к о в к е с т р и п о в в п а к е т из 2- с л о й н о г о п о л и э т и л е н а ) - 1 ш т у к а ; - б и о т и н и л и р о в а н н ы е а л л е р г е н ы (д а л е е а л л е р г е н ы ) - л и о ф и л и з о в а н н ы е п р е п а р а т ы и л и ж и д к о с т и н о 3 м л в о ф л а к о н е . Н а э т и к е т к а х ф л а к о н о в у к а з а н ы к о д о в ы е н о м е р а и н а з в а н и я а л л е р г е н о в . С о д е р ж и м о г о о д н о г о ф л а к о н а д о с т а т о ч н о д л я 2 6 -т и о п р е д е л е н и й . Поставляются отдельно. 3. Л П Л Л И Т И Ч Е С К И Е И Д И А Г Н О С Т И Ч Е С К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И 3.1. С п е ц и ф и ч н о с т ь . Н е о б н а р у ж е н о п е р е к р е с т н о й р е а к ц и и м о н о к л о н а л ь н ы х а н т и т е л к Ig E с Ig A , Ig G , Ig M и Ig D . 3.2 . К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и р е зу л ь т а т о в о п р е д е л е н и я ал л ер ге п -с п е ц и ф и ч е ск и х и м м у н о гл о б у л и н о в Е в о д н о м и т о м ж е о б р а з ц е с ы в о р о т к и к р о в и ч е л о в е к а с и сп о л ьзо в ан и ем н а б о р а « А л л е р го И Ф А -с н е ц и ф и ч е с к и е Ig E » н е п р е в ы ш а е т 8% . 3 .3 . Л и н е й н о с т ь . З а в и с и м о с т ь к о н ц е н т р а ц и и а л л е р г е н -с п е ц и ф и ч е с к и х и м м у н о г л о б у л и н о в Е в о б р а з ц а х с ы в о р о т к и к р о в и п р и р а з в е д е н и и и х к а л и б р о в о ч н о й п р о б о й №1 и м е е т л и н е й н ы й х а р а к т е р в д и а п а з о н е к о н ц е н т р а ц и й к а л и б р о в о ч н ы х п р о б № 2 - № 6 и с о с т а в л я е т 9 0 -1 1 0 % . 3 .4 . Т о ч н о с т ь . Д а н н ы й а н а л и т и ч е с к и й п а р а м е т р п р о в е р я е т с я т е с т о м п а « о т к р ы т и е » Ig E — п р о в е р к а с о о т в е т с т в и я з н а ч е н и я о п р е д е л я е м о й к о н ц е н т р а ц и и о б щ е го Ig E р а с ч е т н о й в е л и ч и н е , н о л у ч е н н о й п у т е м с м е ш и в а н и я р а в н ы х о б ъ е м о в к о н т р о л ь н о й с ы в о р о т к и и к а л и б р о в о ч н о й п р о б ы № 3 . П р о ц е н т о т к р ы т и я с о с т а в л я е т 9 0 -1 1 0 % . 3 .5 . Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь . М и н и м а л ь н а я д о с т о в е р н о о п р е д е л я е м а я н а б о р о м к о н ц е н т р а ц и я Ig E в с ы в о р о т к е к р о в и ч е л о в е к а н е п р е в ы ш а е т 0 ,1 5 М Е /м л . 4. М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И 4 .1 . П о т е н ц и а л ь н ы й р и с к п р и м е н е н и я н а б о р а — к л а с с 1. 4 .2 . В се к о м п о н е н т ы н а б о р а в и с п о л ь зу ем ы х к о н ц е т р а ц и я х я в л яю т ся п ето к си щ 1ыми. 4 .3 . П р и р а б о т е с н а б о р о м с л е д у е т с о б л ю д а т ь Г О С Т Р 5 2 9 0 5 -2 0 0 7 « Л а б о р а т о р и и м е д и ц и н с к и е . Т р е б о в а н и я б е з о п а с н о с т и » . 4 .4 . С т о п -р е а г е н т п р е д с т а в л я е т с о б о й 1 Н р а с т в о р с о л я н о й к и с л о т ы . И зб е га т ь р а з б р ы з г и в а н и я и п о п а д а н и я н а к о ж у и с л и з и с т ы е . В с л у ч а е п о п а д а н и я с т о п -р е а г е н т а п а к о ж у и с л и з и с т ы е н е о б х о д и м о п р о м ы т ь п о р а ж е н н ы й у ч а с т о к б о л ь ш и м к о ;ш ч е с т в о м п р о т о ч н о й в о д ы . 4 .5 . П р и р а б о т е с н а б о р о м с л е д у е т н а д е в а т ь о д н о р а з о в ы е р е з и н о в ы е и л и п л а с т и к о в ы е п е р ч а т к и , т .к . п р о и з в о д н ы е к р о в и , в х о д я п ш е в с о с т а в н а б о р а , и и с с л е д у е м ы е о б р а з ц ы я в л я ю т с я п о т е н ц и а л ь н о и н ф и ц и р о в а н н ы м м а т е р и а л о м , с п о с о б н ы м д л и т е л ь н о е в р е м я с о х р а н я т ь и п е р е д а в а т ь в о з б у д и т е л е й р а з л и ч н ы х в и р у с н ы х и н ф е к ц и й . 4.6. Х и м и ч е с к а я н о с у д а и о б о р у д о в а н и е , к о т о р ы е и с п о л ь з у ю т с я в р а б о те с н аб о р о м , д о л ж н ы б ы т ь с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м м а р к и р о в а н ы и х р а н и т ь с я о тд ел ь н о . 4 .7 . З а п р е щ а е т с я п р и е м гш щ и , и с п о л ь з о в а н и е к о с м е т и ч е с к и х с р е д с т в и к у р е н и е в п о м е щ е н и я х , п р е д н а з н а ч е н н ы х д л я р а б о т ы с н а б о р а м и . 5 . ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ - С п е к т р о ф о т о м е т р в е р т и к а л ь н о г о с к а н и р о в а н и я , п о з в о л я ю щ и й и зм е р я т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь р а с т в о р а в л у н к а х п р и д л и н а х в о л н 4 5 0 н м , 4 0 5 н м и 6 2 0 нм 3 --- стр. 4 --- (р е ф е р е н т н а я д л и н а в о л н ы ). П р и м е н е н и е д л и н ы в о л н ы 6 2 0 н м н е я в л я е т с я о б я з а т е л ь н ы м , н о п р е д п о ч т и т е л ь н е е , п о с к о л ь к у п о з в о л я е т о б н а р у ж и т ь и н т е р ф е р е н ц и ю п л а с т и к а ; - п р и б о р д л я в с т р я х и в а н и я р а м к и со с т р и н а м и (т е р м о с т а т и р у е м ы й ш е й к е р ), п о з в о л я ю щ и й п р о и з в о д и т ь в с т р я х и в а н и е со с к о р о с т ь ю 4 0 0 - 8 0 0 о б /м и н п р и т е м п е р а т у р е + 3 7 °С ; - п и п е т к и п о л у а в т о м а т и ч е с к и е о д н о к а н а л ь н ы е с о с м е н н ы м и н а к о н е ч н и к а м и с и з м е н я е м ы м о б ъ е м о м о т б о р а ж и д к о с т е й : н а 5 - 5 0 м к л ; н а 4 0 - 2 0 0 м к л ; н а 2 0 0 - 1 0 0 0 м к л ; н а 1 0 0 0 -5 0 0 0 м к л ; - п и п е т к а п о л у а в т о м а т и ч е с к а я в о с ь м и к а н а л ь п а я с о с м е н н ы м и н а к о н е ч н и к а м и , п о з в о л я ю щ а я о т б и р а т ь о б ъ е м ы ж и д к о с т и д о 3 0 0 м к л ; - ц и л и н д р м е р н ы й , п о з в о л я ю щ и й о т м е р я т ь 5 0 -5 0 0 м л ; - с т а к а н с т е к л я н н ы й п о д х о д я щ е г о о б ъ е м а ; - в о д а д и с т и л л и р о в а н н а я ; - б у м а г а ф и л ь т р о в а л ь н а я ; - п е р ч а т к и р е з и н о в ы е и л и п л а с т и к о в ы е ; - 1 % р а с т в о р г и п о х л о р и т а н а т р и я и л и 6% р а с т в о р п е р е к и с и в о д о р о д а ; - к о н т е й н е р д л я д е з и н ф е к ц и и ; - в а н н о ч к и д л я в н е с е н и я р е а г е н т о в в о с ь м и к а н а л ь н о й п и п е т к о й . 6. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О Б Р А З Ц Ы 6 .1 . З а б о р к р о в и и з в е н ы о с у щ е с т в л я ю т с с о б л ю д е н и е м п р а в и л а с е п т и к и . П о сл е ф о р м и р о в а н и я с г у с т к а с ы в о р о т к у о т д е л я ю т п у т е м ц е н т р и ф у г и р о в а н и я . П о сл е ц е н т р и ф у г и р о в а н и я с ы в о р о т к у п е р е н о с я т в о т д е л ь н у ю п р о б и р к у . 6 .2 . Д л я п р о в е д е н и я а н а л и з а н е р а з р е ш а е т с я и с п о л ь з о в а т ь п л а зм у к р о в и , г е м о л и з и р о в а п н у ю и л и м у т н у ю с ы в о р о т к у , а т а к ж е о б р а з ц ы с ы в о р о т к и , с о д е р ж а щ и е а зи д н а т р и я . 6 .3 . О б р а з ц ы с ы в о р о т к и к р о в и р а з р е ш а е т с я х р а н и т ь п р и т е м п е р а т у р е + 2 ...8 ° С не б о л е е 2 -х с у т о к ; п р и н е о б х о д и м о с т и б о л е е д л и т е л ы ю г о х р а н е н и я (д о 3 -х м е с я ц е в ) р е к о м е н д у е т с я а л и к в о т и р о в а т ь о б р а з е ц и х р а н и т ь в з а м о р о ж е н н о м в и д е п р и т е м п е р а т у р е - 2 0 ° С и н и ж е . 11е д о п у с к а е т с я п о в т о р н о е з а м о р а ж и в а н и е о б р а з ц а . 7. П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И З А 7 .1 . П о д г о т о в к а р е а г е н т о в 7 .1 .1 . С т р и п ы . П е р е д в с к р ы т и е м п а к е т с о с т р и н а м и н е о б х о д и м о в ы д е р ж а т ь п ри к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е (+ 1 8 ...2 5 ° С ) н е м е н е е 3 0 м и н у т . В с к р ы т ь п а к е т и п е р е с т а в и т ь п а с в о б о д н у ю р а м к у н е о б х о д и м о е к о л и ч е с т в о с т р и п о в . 7 .1 .2 . Ж и д к и е к а л и б р о в о ч н ы е п р о б ы и к о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а г о т о в ы к и с п о л ь з о в а н и ю . Д л я в о с с т а 1ю в л е н и я л и о ф и л и з о в а н н ы х к а л и б р о в о ч н ы х п р о б и к о н т р о л ь н о й с ы в о р о т к и п е р е д в с к р ы т и е м ф л а к о н о в л е г к и м п о с т у к и в а н и е м с т р я х н у т ь ч ас т и ц ы , п р и л и п ш и е к с т е н к а м ф л а к о н о в и л и к к р ы ш к а м . О т к р ы т ь ф л а к о н ы и п о л о ж и т ь к р ы ш к и п е р е в е р н у т ы м и н а с у х у ю п о в е р х н о с т ь . В к а ж д ы й ф л а к о н с к а л и б р о в о ч н о й п р о б о й и к о н т р о л ь н о й с ы в о р о т к о й в н е с т и п о 0,5 м л д и с т и л л и р о в а н н о й в о д ы и з а к р ы т ь к р ы ш к а м и . В ы д е р ж а т ь ф л а к о н ы в т е ч е н и е 10 м и н у т п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е б е з п е р е м е ш и в а н и я . З а т е м , а к к у р а т н о н а к л о н я я и в р а п щ я ф л а к о н ы , п е р е м е ш а т ь и х с о д е р ж и м о е д о п о л н о го р а с т в о р е н и я , и з б е г а я п е н о о б р а з о в а н и я . В т е ч е н и е с л е д у ю щ и х 10 м и н у т в ы д е р ж а т ь ф л а к о н ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е , п е р и о д и ч е с к и п е р е м е ш и в а я . 7 .1 .3 . К о н ъ ю г а т Е-1 г о т о в к и с п о л ь з о в а н и ю . Р а с х о д к о н ъ ю г а т а Е-1 н а о д и н стр и п с о с т а в л я е т 0 ,8 7 5 м л . 7 .1 .4 . К о н ъ ю г а т Е -2 г о т о в к и с п о л ь з о в а н и ю . Р а с х о д к о н ъ ю г а т а Е -2 н а о д и н стр и п --- стр. 5 --- с о с т а в л я е т 1,5 м л . 7 .1 .5 . П р о м ы в о ч н ы й р а с т в о р . Н е о б х о д и м о е к о л и ч е с т в о б у ф е р а ? р а зв е с т и д и с т и л л и р о в а н н о й в о д о й в 20 р аз. М ап р и м ер : 5 м л б у ф е р а Р + 95 м л д и с т и л л и р о в а н н о й в о д ы . Т щ а т е л ь н о н е р е м е н ш т ь , и з б е г а я н е н о о б р а з о в а н и я . 7 .1 .6 . Р а с т в о р т е т р а м е т и л б е н з и д и н а (Т М Б ) г о т о в к и с п о л ь з о в а н и ю . Р а с х о д Т М Б н а о д и н с т р и н с о с т а в л я е т 1,15 м л . 7 .1 .7 . С т о п -р е а г е н т г о т о в к и с п о л ь з о в а н и ю . Р а с х о д с т о п -р е а г е н т а н а о д и н с т р и н с о с т а в л я е т 1,15 м л . 7 .1 .8 . Р а с т в о р ы а л л е р г е н о в . Ж и д к и е а л л е р г е н ы г о т о в ы к и сп о льзо ван и ю . Д л я в о с с т а н о в л е н и я л и о ф и л и зо в а н н ы х ал л ер ген о в п е р е д в ск р ы т и ем ф л ак о н о в л егки м п о с т у к и в а н и е м с т р я х н у т ь ч а с т и ц ы , п р и л и п ш и е к с т е н к а м ф л а к о н о в и л и к п р о б к а м . О т к р ы т ь ф л а к о н ы и п о л о ж и т ь п р о б к и п е р е в е р н у т ы м и н а с у х у ю п о в е р х н о с т ь . В к а ж д ы й ф л а к о н с а л л е р г е н о м в н е с т и п о 3 ,0 м л д и с т и л л и р о в а н н о й в о д ы и з а к р ы т ь п р о б к о й . В ы д е р ж а т ь ф л а к о н ы в т е ч е н и е 10 м и н у т п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е ( + 1 8 ...2 5 ° С ) . Затем , ак к у р атн о н а к л о н я я и в р ащ ая ф л а к о н ы , п е р е м е щ ат ь и х со д е р ж и м о е д о п о л н о го растворен и я, изб егая н е н о о б р а зо в а н и я. В т е ч е н и е с л е д у ю п щ х 10 м и н у т вьщ ср ж ать ф л а к о н ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е , п е р и о д и ч е с к и п е р е м е ш и в а я . 7 .1 .9 . В с е р е а г е н т ы п е р е д п р о в е д е н и е м а н а л и з а д о л ж н ы б ы т ь т щ а т е л ь н о п е р е м е ш а н ы и д о в е д е н ы д о к о м н а т н о й т е м п е р а т у р ы . Н а с т р а н и ц е 12 п р и в е д е н а с х е м а п р о в е д е н и я а н а л и за . 7 .2 . П о с т а н о в к а а н а л и з а 7 .2 .1 . С о с т а в и т ь п р о т о к о л м а р к и р о в к и л у н о к . Л у н к и п р о м а р к и р о в а т ь с л е д у ю н щ м о б р а з о м : Л 1 , А 2 - № 1 - д л я и з м е р е н и я в е л и ч и н ы о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и р а с т в о р а Т М Б ; В 1, В 2 - № 2 - д л я и з м е р е н и я в е л и ч и н ы о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и К П № 1 ; С 1, С 2 - № 3 - д л я и з м е р е н и я в е л и ч и н ы о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и К П № 2 ; D 1 , D 2 - № 4 - д л я и з м е р е н и я в е л и ч и н ы о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и К П № 3 ; Е 1 , Е 2 - № 5 - д л я и з м е р е н и я в е л и ч и н ы о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и K I I № 4 ; F 1, F 2 - № 6 - д л я и з м е р е н и я в е л и ч и н ы о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и K I I № 5 ; G 1 , G 2 - № 7 - д л я и з м е р е н и я в е л и ч и н ы о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и К П № 6; Н 1, Н 2 - № 8 - д л я и з м е р е н и я в е л и ч и н ы о п т и ч е с к о й п ;ю т н о с т и к о н т р о л ь н о й с ы в о р о т к и . 7 .2 .2 . В н е с т и в с о о т в е т с т в у ю щ и е л у н к и п о 50 м к л K ajm 6p0B 04H bix п р о б и к о н т р о л ь н о й с ы в о р о т к и , в о с т а в ш и е с я л у н к и - п о 5 0 м к л и с с л е д у е м о й с ы в о р о т к и к р о в и . К о л и ч е с т в о л у н о к , з а п о л н я е м ы х к а ж д о й и з и с с л е д у е м ы х с ы в о р о т о к , о п р е д е л я е т с я к о л и ч е с т в о м а л л е р г е н о в , н а н а л и ч и е с п е ц и ф и ч е с к и х Ig E к к о т о р ы м и с с л е д у е т с я о б р азец . П р и э т о м о п р е д е л е н и е а л л е р г е н -с п е ц и ф и ч е с к и х Ig E п р о и з в о д и т с я и з р а с ч е т а 1 л у н к а д л я к а ж д о г о а л л е р г е н а . 7 .2 .3 . В л у н к и , с о д е р ж а щ и е к а л и б р о в о ч н ы е п р о б ы и к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о т к у , в н е с т и п о 100 м к л к о н ъ ю г а т а Е - 1. 7 .2 .4 . В л у н к и с и с с л е д у е м ы м и с ы в о р о т к а м и к р о в и в н е с т и п о 100 м к л р а с тв о р о в т р е б у е м ы х а л л е р г е н о в в с о о т в е т с т в и и с н а м е ч е н н о й с х е м о й . 7 .2 .5 . И н к у б и р о в а т ь с т р и н ы п р и в с т р я х и в а н и и в т е ч е н и е 6 0 м и н у т в т е р м о с т а т н р у е м о м н ю й к е р с н р п т е м п е р а т у р е + 3 7 ° С со с к о р о с т ь ю 5 0 0 - 8 0 0 о б /м и н . Примечание: общее время внесения калибровочных проб, контрольной сыворотки и исследуемых сывороток крови не должно превышать 15 минут, а общее время внесения --- стр. 6 --- аллергенов не должно превышать К) минут, иначе время инкубации разных образцов будет значительно отличаться, что приведет к неправильным результатам. 7 .2 .6 . И о о к о н ч а н и и и н к у б а ц и и у д а л и т ь с о д е р ж и м о е л у н о к в к о н т е й н е р с д е з и н ф и ц и р у ю щ и м р а с т в о р о м ( 1% р а с т в о р о м г и п о х л о р и т а н а т р и я и л и 6% р а с т в о р о м п е р е к и с и в о д о р о д а ) и п р о м ы т ь л у н к и п я т ь р а з. П р и к а ж д о й п р о м ы в к е в о в с е л у н к и д о б а в л я т ь п о 3 0 0 м к л п р о м ы в о ч н о г о р а с т в о р а , п р и г о т о в л е н н о г о н о п . 7 .1 .5 , в с т р я х н у т ь р а м к у н а ш е й к е р е в т е ч е н и е 5 - 1 0 с е к у н д с п о с л е д у ю щ и м д е к а н т и р о в а н и е м . П о сл е п о с л е д н е г о д е к а н т и р о в а н и я т щ а т е л ь н о у д а л и т ь о с т а т к и ж и д к о с т и и з л у н о к п о с т у к и в а н и е м р а м к и со С т р и п ам и в п е р е в е р н у т о м п о л о ж е н и и п о ф и л ь т р о в а л ь н о й б у м а ге . Д о п у с к а е т с я п р о м ы в к а л у н о к п р и п о м о н щ а в т о м а т и ч е с к о г о п р о м ы в о ч н о г о у с т р о й с т в а . 7 .2 .7 . В о в с е л у н к и , к р о м е л у н о к А1 и А 2 , в н е с т и п о 150 м к л к о н ъ ю г а т а Е -2. 7 .2 .8 . И н к у б и р о в а т ь с т р и п ы в т е ч е н и е 3 0 м и н у т в т е р м о с ! а г н р у е м о м ш е н к е р с п р и т е м п е р а т у р е + 3 7 ° С с о с к о р о с т ь ю 5 0 0 - 8 0 0 о б /м п и . 7 .2 .9 . П о о к о н ч а н и и в т о р о й и н к у б а ц и и у д а л и т ь с о д е р ж и м о е л у н о к д е к а н т и р о в а н и е м и п р о м ы т ь л у н к и с о г л а с н о п . 7 .2 .6 . 7 .2 .1 0 . Н е м е д л е н н о в н е с т и в о в с е л у н к и п о 100 м к л р а с т в о р а Т М Б . И н к у б и р о в а т ь с т р и п ы в т е м н о т е в т е ч е н и е 15 м и н у т в т с р м о с т а г п р у с м о м u ic n K c p c п р и т е м п е р а т у р е + 3 7 ° С со с к о р о с т ь ю 5 0 0 - 8 0 0 о б /м н п . 7 .2 .1 1 . Д о б а в и т ь в о в с е л у н к и с т о й л<е с к о р о с т ь ю и в т о й ж е п о с л е д о в а т е л ь н о с т и , к а к и р а с т в о р 1’М Б , п о 100 м к л с т о н -р е а г е н т а д л я о с т а н о в к и ф е р м е н т н о й р е а к ц и и , п е р е м е ш а т ь п а ш е й к с р с в т е ч е п п е 1 -2 м п п у т п р п к о м п а т п о п т е м п е р а т у р е ( + 1 8 ...2 5 ° С ) . 7 .2 .1 2 . Е с л и н е в о з м о ж н о и з м е р и т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь в л у н к а х п л а н ш е т а н е п о с р е д с т в е н н о п о с л е в ы п о л н е н и я п . 7 .2 .1 1 ., т о с л е д у е т и м е т ь в в и д у , ч то о к р а с к а в л у н к а х п л а н ш е т а с т а б и л ь н а н е б о л е е 2 0 м и н у т п р и т е м п е р а т у р е + 1 8 ...2 5 ° С . 8. Р Е Г И С Т Р А Ц И Я Р Е З У Л Ь Т А Т О В И з м е р и т ь н а ф о т о м е т р е в е р т и к а л ь н о г о с к а н и р о в а н и я о п т и ч е с к у ю п ;ю г н о с т ь р а с т в о р а в л у н к а х п р и д л и н а х в о л н ;4 5 0 н м и 4 0 5 н м . П р и р е г и с т р а ц и и р е з у л ь т а т о в н е о б х о д и м о в ы ч и т а т ь в е л и ч и н у о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и в л у н к а х А 1 и А 2 и з з н а ч е н и й о п т и ч е с к и х п л о т н о с т е й в с е х о с т а л ь н ы х л у н о к . Примечание: среднее арифметическое значение оптической плотности в лунках А1 и А2 не долоюно превышать 0,09 ед. ОП при 450 нм. 9. У Ч Е Т Р Е З У Л Ь Т А Т О В 9 .1 . П о с т р о и т ь д в а к а ;ш б р о в о ч н ы х г р а ф и к а з а в и с и м о с т и о п т и ч е с к и х п л о т н о с т е й (В , е д .о п т . п л о т п .) о т к о н ц е н т р а ц и и Ig E (М Е /м л ) в к а л и б р о в о ч н ы х п р о б а х : д л я п о с т р о е н и я к а л и б р о в о ч н о г о г р а ф и к а № 1 и с п о л ь з у ю т р е з у л ь т а т ы и з м е р е н и я п р о б В 1.. . В 5 п р и д л и н е в о л н ы 4 5 0 н м (Р и с у н о к 2 А ), д л я п о с т р о е н и я к а ;ш б р о в о ч н о г о г р а ф и к а № 2 - р е зу л ь т а т ы и з м е р е н и я п р о б В ^ -.В б п р и д л и н е в о л н ы 4 0 5 н м (Р и с у н о к 2 Б ). Примечание 1: для построения калибровочных графиков рекомендуется использовать Программное обеспечение «ИФА Мастер». --- стр. 7 --- Примечание 2: Е с л и п р о г р а м м а ф о т о м е т р а н е п о з в о л я е т в ы ч и т а т ь с р е д н е е а р и ф м е т и ч е с к о е з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и л у н о к Л 1 и А 2 , т о н е о б х о д и м о п о л ь з о в а т ь с я ф о р м у л о й : В - В т , (1) где В - среднее арифметическое значение оптической плотности в лунках, содержащих калибровочные или исследуемые пробы, В т - среднее арифметическое значение оптической плотности лунок АI и А2. 2 . 0 с ; = 1.5 I - С О ш 0,5 2 0кон ц ., М Е /м л Р исун ок 2А . Т и п и в д ы й кал и б р о в о ч н ы й гр а ф и к п р и д л и н е в о л н ы 4 5 0 нм Р и су н о к 2Б. Т и п и ч н ы й кали бровоч н ы й граф и к п р и д л и н е в о л н ы 405 нм Запрещается использовать для оценки реальных экспериментальных данных! 9 .2 . О п р е д е л е н и е к о н ц е н т р а ц и и а н а л и т а в к а л и б р о в о ч н ы х и и с с л е д у е м ы х п р о б а х п р о и з в о д и т ь с л е д у ю щ и м о б р а з о м : е с л и з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и п р о б ы , и з м е р е н н о й п р и 4 5 0 н м , с о с т а в л я е т м е н е е 2,3 е д .о п т .п л ., т о д л я в ы ч и с л е н и й с л е д у е т и с п о л ь з о в а т ь к а л и б р о в о ч н ы й г р а ф и к № 1; е с л и з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и п р о б ы п р и д л и н е в о л н ы 4 5 0 н м б о л ь ш е 2,3 е д .о п т .п л ., в ы ч и с л е н и я п р о и з в о д я т н о к а л и б р о в о ч н о м у г р а ф и к у № 2 . Примечание: при применении референтной длины волны 620 нм оптическую плотность каждой калибровочной пробы, полученную при референтной длине, вычитают из оптической плотности, полученной при основной длине волны. Для построения калибровочных графиков №1 и № 2 пользуются оптическилш плотностями, полученными в результате вычитания: Л=(450 нм — 620 нм) или Л=(405 нм - 620 нм), соответственно. 9 .3 . К р и т е р и и д о с т о в е р н о с т и а н а л и з а Р е з у л ь т а т ы а н а л и з а с ч и т а ю т д о с т о в е р н ы м и п р и с о б л ю д е н и и с л е д у ю щ и х у с л о в и й : - О п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь к а ж д о г о и з у к а з а н н ы х в Т а б л и ц е 1 о б р а з ц о в н а х о д и т с я в у к а з а н н о м и н т е р в а л е з н а ч е н и й . --- стр. 8 --- Таблица 1 Н а и м е н о в а н и е о б р а з ц а Д л и н а в о л н ы Д о п у с т и м ы й и н т е р в а л з н а ч е н и й О П (е д .о н т .н л .) Т М Б 4 5 0 н м < 0 ,0 9 0 К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 1 4 5 0 и м < 0 ,0 3 К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 2 4 5 0 п м 0 ,0 7 9 0 ,2 0 9 К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 3 4 5 0 н м 0 ,1 6 5 0 ,3 7 8 К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 4 4 5 0 н м 0 ,6 1 5 1,665 К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 5 4 5 0 н м > 2 ,3 0 0 К а л и б р о в о ч н а я п р о б а № 6 4 0 5 н м > 1,018 - К о н ц е н т р а ц и я к о н т р о л ь н о й с ы в о р о т к и н а х о д и т с я в д и а п а з о н е , у к а за н н о м н а э т и к е т к е с о о т в е т с т в у ю щ е г о ф л а к о н а . Е с л и п о л у ч е н н ы е д а н н ы е в ы х о д я т з а п р е д е л ы у к а з а н н ы х зн а ч е н и й , р е зу л ь т а т ы а н а л и з а с ч и т а ю т н е д о с т о в е р н ы м и и а н а л и з п о в т о р я ю т . 9 .4 . И н т е р п р е т а ц и я р е з у л ь т а т о в Д л я к л и н и ч е с к и х ц е л е й к о н ц е н т р а ц и и с п е ц и ф и ч е с к и х Ig E о ц е н и в а ю т с л е д у ю щ и м о б р а з о м : Т а б л и ц а 2 К о н ц е н т р а ц и я Ig E , М Е /м л К л а с с У р о в е н ь с п е ц и ф и ч е с к о г о IgE < 0 ,3 5 0 К л и н и ч е с к и н е з н а ч и м ы й 0 ,3 6 0,5 0 — 1 О ч е н ь н и зк и й 0,51 1,0 1 Н и з к и й 1, 1— 5 ,0 2 С р е д н и й 5 , 1 — 25 3 В ы с о к и й 25,1 75 4 О ч е н ь в ы с о к и й > 7 5 5 И с ю п о ч и т е л ь н о в ы с о к и й --- стр. 9 --- 10.1. Н а б о р « А л л е р г о И Ф А -с п е ц и ф и ч е с к и е Ig E » д о л ж е н х р а н и т ь с я в у п а к о в к е п р е д п р и я т и я -и з г о т о в и т е л я п р и т е м п е р а т у р е + 2 ...8 ° С в т е ч е н и е в с е г о с р о к а го д н о с т и . Д о п у с к а е т с я х р а н е н и е н а б о р а п р и т е м п е р а т у р е д о + 2 5 °С н е б о л е е 15 с у т о к . С р о к г о д н о с т и н а б о р а — 12 м е с я ц е в . 10.2. Н а б о р с л е д у е т в ы н и м а т ь и з х о л о д и л ь н и к а н е б о л е е ч е м з а 1 ч ас д о н а ч а л а а н а л и за , н о н е п о з ж е , ч е м з а 3 0 м и н у т д о п р о в е д е н и я а н а л и з а . 10.3. В с л у ч а е д р о б н о г о и с п о л ь з о в а н и я к о м п о н е н т ы н а б о р а н е о б х о д и м о х р а н и т ь с л е д у ю щ и м о б р а з о м : - с т р и п ы п о м е с т и т ь с н а ч а л а в п а к е т с э т и к е т к о й , з а т е м в п л а с т и к о в ы й п а к е т с за м к о м и г е р м е т и ч н о з а к р ы т ь . Х р а н и т ь в г е р м е т и ч н о з а к р ы т о м п а к е т е п р и т е м п е р а т у р е + 2 ...8 °С в т е ч е н и е в с е г о с р о к а г о д н о с т и ; - ж и д к и е , г о т о в ы е к и с п о л ь з о в а н и ю , к а л и б р о в о ч н ы е п р о б ы и к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о т к у п о с л е в с к р ы т и я ф л а к о н о в х р а н и т ь п р и т е м п е р а т у р е + 2 ...8 °С н е б о л е е д в у х м е с я ц е в ; - в о с с т а н о в л е н н ы е (р а с т в о р е н н ы е ) и з л и о ф и л и з о в а п н ы х п р е п а р а т о в к а л и б р о в о ч н ы е п р о б ы и к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о т к у х р а н и т ь п р и т е м п е р а т у р е +2... 8°С н е б о л е е д в у х м е с я ц е в ; - к о н ъ ю г а т ы Е -1 , Е -2 и р а с т в о р 1’М Б п о с л е в с к р ы т и я ф л а к о н о в х р а н и т ь п р и т е м п е р а т у р е + 2 ...8 ° С н е б о л е е д в у х м е с я ц е в ; - п р о м ы в о ч н ы й р а с т в о р , п о д г о т о в л е н н ы й к и с г ю л ь з о в а н и ю , х р а н и т ь за к р ы т ы м п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е ( + 1 8 ...2 5 ° С ) н е б о л е е 5 с у т о к ; - б у ф е р Р и с т о п -р е а г е н т п о с л е в с к р ы т и я ф л а к о н о в х р а н и т ь п р и т е м п е р а т у р е + 2 ...8 °С в т е ч е н и е в с е г о с р о к а г о д н о с т и . 10.4. С р о к г о д н о с т и к а ж д о г о а л л е р г е н а у к а з а н н а э т и к е т к е ф л а к о н а . С т а б и л ь н о с т ь ж и д к и х и л и о ф и л и з о в а н н ы х а л л е р г е н о в п о с л е в с к р ы т и я ф л а к о н о в р а зл и ч н а : - в с к р ы т ы е а л л е р г е н ы х р а н и т ь п л о т н о з а к р ы т ы м и п р и т е м п е р а т у р е + 2 ...8 ° С . П ри у с л о в и и п р а в и л ь н о г о х р а н е н и я ж и д к и е а л л е р г е н ы с т а б и л ь н ы в т е ч е н и е в с е г о с р о к а го д н о с т и ; - в о с с т а н о в л е н н ы е (р а с т в о р е н н ы е ) и з л и о ф и л и з о в а п н ы х п р е п а р а т о в а л л е р ге н ы х р а н и т ь п л о т н о з а к р ы т ы м и п р и т е м п е р а т у р е + 2 ...8 ° С н е б о л е е 2 -х м е с я ц е в . П р и н е о б х о д и м о с т и б о л е е д л и т е л ь н о г о х р а н е н и я р е к о м е н д у е т с я х р а н и т ь п р и т е м п е р а т у р е - 2 0 °С д о и с т е ч е н и я с р о к а г о д н о с т и . Д о п у с к а е т с я н е б о л е е 4 -х ц и к л о в з а м о р а ж и в а н и я - р а з м о р а ж и в а н и я б е з п о т е р и с в я з у ю щ е й с п о с о б н о с т и . 10.5. П р и и с п о л ь з о в а н и и н а б о р а д л я п р о в е д е н и я н е с к о л ь к и х н е за в и с и м ы х а н а л и з о в н е о б х о д и м о и м е т ь в в и д у с л е д у ю п1се: - к о л и ч е с т в о н е з а в и с и м ы х э к с п е р и м е н т о в , к о т о р о е м о ж н о п р о в е с т и с п о м о щ ь ю д а н н о г о н а б о р а (4 э к с п е р и м е н т а ), о г р а н и ч е н о о б ъ е м о м к а л и б р о в о ч н ы х п р о б ; - д л я к а ж д о г о н е з а в и с и м о г о э к с п е р и м е н т а н е о б х о д и м о п о с т р о е н и е н о в о го к а л и б р о в о ч н о г о г р а ф и к а и р е к о м е н д у е т с я о п р е д е л е н и е к о н ц е н т р а ц и и Ig E в к о н т р о л ь н о й с ы в о р о т к е ; - з а п р е щ а е т с я в о з в р а щ а т ь и з б ы т о к к о н ъ ю г а т о в , Г М Б и с т о п -р е а г е н т а и з в а н н о ч е к во ф л а к о н ы ; 10. УСЛОВИЯ ХРАПЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА --- стр. 10 --- - и з ф л а к о н о в с о т к р ы т ы м и к р ы ш к а м и п р о и с х о д и т и с п а р е н и е , к о т о р о е м о ж е т п р и в е ст и к п о л у ч е н и ю н е к о р р е к т н ы х р е з у л ь т а т о в п р и п о в т о р н о м и с п о л ь з о в а н и и р е а ге н то в . П о сл е о к о н ч а н и я в н е с е н и я р е а г е н т о в в л у н к и п л а н ш е т а н а к а ж д о й ставш и а н а л и за н е о б х о д и м о п л о т н о з а к р ы в а т ь к р ы ш к и ф л а к о н о в и п о м е щ а т ь в р е к о м е н д у е м ы е у сл о в и я х р ан ен и я . 10.6. Н е д о п у с к а е т с я с м е ш и в а н и е и л и о д н о в р е м е н н о е и с п о л ь з о в а н и е р е а г е н т о в и з р а з н ы х п а р т и й , з а и с к л ю ч е н и е м Т М Б , с т о п -р е а г е н т а и к о н ц е н т р и р о в а н н о г о п р о м ы в о ч н о г о р а с т в о р а , в х о д я щ е г о в с о с т а в д а н н о г о н а б о р а р е а г е н т о в . 10.7. З а п р е щ а е т с я и с п о л ь з о в а т ь к о н ц е н т р и р о в а н н ы й п р о м ы в о ч н ы й р а с т в о р , с т о п - р е а г е н т и Т М Б и з н а б о р о в р е а г е н т о в д р у г и х ф и р м -п р о и з в о д и т е л е й . 10.8. К р а б о т е с н а б о р о м д о п у с к а е т с я т о л ь к о с п е ц и а л ь н о о б у ч е н н ы й п е р с о н а л . 10.9. Д л я п о л у ч е н и я н а д е ж н ы х р е з у л ь т а т о в н е о б х о д и м о с т р о г о е с о б л ю д е н и е и н с т р у к ц и и . 11. О Г Р А Н И Ч Е Н И Я П О И С П О Л Ь З О В Л П И Ю И Л Б О Р Л О т р и ц а т е л ь н ы й р е з у л ь т а т а н а л и з а н а с п е ц и ф и ч е с к и е Ig E п р о т и в а н т и б и о т и к о в п е н и ц и л л и н а G , п е н и ц и л л и н а V , ц е ф а л о с п о р и н а , а м п и ц и л л и н а и а м о к с и ц и л л и н а н е и с к л ю ч а е т н ал ш ч и я к л и н и ч е с к о й г и п е р ч у в с т в и т е л ь н о с т и к д а н н ы м а л л е р г е н а м . Т а к о й о т в е т м о ж е т о б ъ я с н я т ь с я в о з н и к н о в е н и е м а л л е р г и ч е с к о й р е а к ц и и , п р о и с х о д я щ е й б ез у ч а с т и я Ig E -а н т и т е л , и л и н е п р а в и л ь н ы м в ы б о р о м с р о к а з а б о р а о б р а з 1ю в к р о в и (до п о я в л е н и я с п е ц и ф и ч е с к и х Ig E в ц и р к у л я ц и и и л и п о с л е п а д е н и я и х к о н ц е н т р а ц и и ). О т р и ц а т е л ь н ы й р е з у л ь т а т а н а л и з а н а с п е ц и ф и ч е с к и е Ig E п р о т и в п и щ е в ы х а л л е р г е н о в и п р о т и в у к у с о в я д о в и т ы х н а с е к о м ы х н е и с к л ю ч а е т в о зм о ж н о с т и п о с л е д у ю щ е г о р а з в и т и я к л и н и ч е с к о й г и п е р ч у в с т в и т е л ь н о с т и п о о т н о ш е н и ю к эти м а л л е р г е н а м . В с л у ч а я х , к о г д а с о д е р ж а н и е o 6n ie ro Ig E в с ы в о р о т к е к р о в и п р е в ы ш а е т 1000 М Е /м л , и з м е р я е м ы е к о н ц е н т р а ц и и а л л е р г е н -с п е ц и ф и ч е с к и х Ig E м о г у т б ы т ь н е с к о л ь к о н и ж е р е а л ь н ы х з н а ч е н и й . С л е д у е т п о м н и т ь , ч т о Ig E , с п е ц и ф и ч н ы е к к о н к р е т н о м у а л л е р г е н у , м о г у т с в я зы в а т ь д р у ги е с х о ж и е гю с т р у к т у р е а л л е р г е н ы (н а п р и м е р , п ы л ь ц а б е р е з ы и о р е х и , л у г о в ы е т р а в ы и т о м а т , а м б р о з и я и д ы н я , и т .д .). Э т о о б у с л о в л е н о н а л и ч и е м о б щ и х а н т и г е н н ы х д е т е р м и н а н т в а л л е р г е н а х р а з л и ч н о г о п р о и с х о ж д е н и я . П р и п о с т а н о в к е д и а г н о з а эти о б с т о я т е л ь с т в а д о л ж н ы п р и н и м а т ь с я в о в н и м а н и е . 10 --- стр. 11 --- П о в о п р о с а м к а ч с с т н а н а б о р а « А л л е р г о И Ф Л -с п е ц и ф и ч е с к и е Ig E » с л е д у е т о б р а щ а т ь с я в О О О « К о м п а н и я А л к о р Б и о » п о а д р е с у : ^192Д 48, г. С а н к т -П е т е р б у р г , Ж е л е з н о д о р о ж н ы й п р о с п е к т , д . 4 0 , т е л /ф а к с : (8 1 2 ) 677787Т'* М - Г е н е р а л ь н ы й д и р е к т о р О О О « К о м п а н и я А л к о р Б и о » Р у к о в о д и т е л ь л а б о р а т о р и и р а з р а б о г к и И Ф А -с и с т е м О О О « К о м п а н и я А л к о р Б и о » ы р е в М .В . С у с о р о в а А .С . « С О Г Л А С О В А Н О » ^ - З ав. к а ф е д р о й к л и н и ч е с к о й л а б о р а т о р н о й д и а г н о с т и к и к е д и ц к и с и я а и д р '« Р М Л П О Р о с з д р а в а » < i S 'o6p8;:B aH > iflfi> fcepanbH oro • • • ujSS- 3 r c s tc t8 3 n 0 ,o;^ з й р з 1 0 ^ 1 р з ч е н « ю ^ и c o u n a . 'i M i O t t y 4 ? - ^ A . JV fO C K e ^ Д.М.П., п р о ф е с с о р Д о л го в В .В . / Г _ 2011г. Примечания к С х е м е и р о в е д е п и н а н а л и з а (стр . 12): К П — к а л и б р о в о ч н а я п р о б а ; К С — к о н т р о л ь н а я с ь п ю р о т к а ; К Т — к о м н а т н а я т е м п е р а т у р а ( + 1 8 ...2 5 ° С ) ; П О — п р о г р а м м н о е о б е с п е ч е н и е . 11 --- стр. 12 --- С Х Е М А П Р О В Е Д Е Н И Я А Н А Л И З А № С т а д и я (о п е р а ц и я ) Р е а г е н т ы Т е м п е р а - T voa В р е м я П р и м е ч а н и я 1 В н е с е н и е р е а г е н т о в 50 мкл КП , КС, и с с л е д у е м ы х о б о а з и о в КТ ( + 1 8 - + 2 5 °С ) В н е с е н и е КП, КС и и с с л е д у е м ы х о б р а з ц о в н е б о л е е 1 5 ’; в н е с е н и е а л л е р г е н о в н е б о л е е 10’ - К онъю гат Е-1 НЕ в н о с и т с я в лунки А 1,А 2 и в л у н к и д л я и с с л е д у е м ы х о б р а з ц о в . - Р а с т в о р аллергенов в н о си тся т о л ь к о в лунки д л я и с с л е д у е м ы х о б р а з ц о в . 2 1 0 0 м кл конъюгата Е-1 (в ЛУНКИ КП, КС) 3 100 м кл р а с т в о р а аллергенов 4 И н к у б а ц и я № 1 — + 3 7 °С 6 0 ’ Т е р м о с та т и р у е м ы й ш е й к е р , 5 0 0 - 8 0 0 о б /м и н 5 П р о м ы в к а 30 0 мкл в лунку VnpoMbi- вочного оаствооа (5 о аз) ^ [п р о м ы в о ч н ы й р а с т в о р = = 14 м л б у ф е р а Р + 2 6 6 м л Н ,0 6 В н е с е н и е к о н ъ ю га т а 150 м кл конъюгата Е-2 К онъю гат Е-2 НЕ в н о с и т с я в ЛУНКИ А 1.А 2. 7 И н к у б а ц и я № 2 — + 3 7 °С 3 0 ’ Т е р м о с та т и р у е м ы й ш е й к е р , 5 0 0 - 8 0 0 о б /м и н 8 П р о м ы в к а 3 0 0 мкл в лунку VnpoMbi- вочного раст вора (5 р аз) ^ [п р о м ы в о ч н ы й р а с т в о р = 5 14 М Л б у ф е р а Р + 2 6 6 м л НгО 9 В н е с е н и е х р о м о г е н а 1 00 мкл ТМБ 10 И н к у б а ц и я с Т М Б — + 3 7 °С 1 5 ’ Т е р м о с та т и р у е м ы й ш е й к е р , 5 0 0 -8 0 0 о б /м и н , в т е м н о т е 11 О с т а н о в к а ф е р м е н т н о й 100 мкл стоп-реагента 12 П е р е м е ш и в а н и е КТ 1 - 2’ Ш е й к е р 13 Р е г и с т р а ц и я р е з у л ь т а т о в --- В т е ч е н и е 2 0 ’ п о с л е о с т а н о в к и ф е р м е н т н о й р е а к ц и и 4 5 0 нм и 4 0 5 нм (6 2 0 нм) 14 О б р а б о т к а р е з у л ь т а т о в К ал ьк у л ято р и м а с ш т а б н а я б у м а га / с о о т в е т с т в у ю щ е е ПОК ) --- стр. 13 --- 1 IpoiiiHTO, п р о н у м ер о в а н о , ск р еп л ен о | н еч агы о / У ( л и с т ^ ^ | д и р е к т о р А л к о р Б и о » М .В . Ш в ы р е в