Набор реагентов для выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2 методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени (РеалБест РНК SARS-CoV-2), ТУ 21.20.23-106-23548172-2020 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2020/9896 от 27.03.2020 · класс риска 3

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: SARS Коронавирус нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 172 контракта, медианная цена за единицу 17 675 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Генеральный директор 
АО^«Ве1стор-Бест »
;_М.Д. Хусаинов 
2020 г.
■'ИОО о<
. I я ш ш и
И Н С Т Р У К Щ Щ ^^
по применению набора реагентов для выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2 
методом ОТ-ПЦР в режиме реального времени 
«РеалБест РНК SARS-CoV-2»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для выявления РНК коронавируса SARS-CoV‘2 методом ОТ-ПЦР в 
режиме реального времени «РеалБест РНК SARS-CoV-2» предназначен для качественного 
определения РНК коронавируса SARS-CoV-2 в клинических образцах (мазки со слизистой 
носа и задней стенки глотки, мокрота, бронхоальвеолярный лаваж) методом, основанным на 
обратной транскрипции вирусной РНК с последующей амплификацией кДНК в полимераз­
ной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с гибри/шзационно-флуорссцентной детекцией продуктов 
ПЦР в режиме реального времени. Область применения: Набор реагентов используется для 
выявления РНК SARS-CoV-2 у лиц с симптомами ОРВИ и контактировавших с заболевшим 
COVID-19, не зависимо от их возраста, лицам всех возрастов без признаков ОРВИ (в очагах 
инфекции/ в условиях распространения инфекции) с целью раннего выявления коронавируса 
для предотвращения дальнейшего распространения инфекции.
Выделение РНК из клинических образцов (мазки со слизистой носа и задней стенки 
глотки, мокрота, бронхоальверлярный лаваж) проводится с помощью наборов «РеалБест экс­
тракция 100» и «РеалБест УниМаг».
Набор применяется с регистрирующими амплификаторами планшетного типа: 
«CFX96» (фирма Bio-Rad, США); «ДТпрайм» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия).
Набор рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные образцы.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного спе­
цифического фрагмента кДНК (полученной методом обратной транскрипции из РНК коро-
Иист рукция сост авлена сот рудникаш  А О  «Вект ор-Бест »: Д ирект ором  
по производству Ткачевым В.К. и нач. от деления производст ва П Ц Р наборов Трухиной А.В.
/


--- стр. 2 ---
навируса SARS-CoV-2), заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денату­
рация, отжиг праймеров на комплементарные последовательности, достройка полинуклео- 
тидных последовательностей с этих праймеров Taq-полимераэой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение уровня флуоресценции 
в каждом цикле ПЦР. Увеличение уровня флуоресценции происходит благодаря использова­
нию специфичного для данной кДНК гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе реак­
ции связывается с одной из цепей кДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность 
метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный краситель, а на З'-конце -  гаситель 
флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимераз­
ного синтеза комплементарной цепи зонд расщепляется с 5'-конца, благодаря 5’-3- 
нуклеазной активности Taq ДНК-полимеразы и происходит разобщение красителя и гасите­
ля, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию уровня флуоресценции. 
При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся 
специфических а.мпликонов и динамика нарастания уровня флуоресценции определяется ис­
ходным количеством РНК SARS-CoV-2 в образце.
Учёт эффективности выделения РНК из образцов обеспечивается выделением РНК 
коронавируса SARS-CoV-2 из клинического материала совместно с внутренним контроль­
ным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора: •
Компонент набора (сокращение) 
Описание.
Количество
Положительный контрольный образец (ПКО) 
Бесцвет ная ж идкость, содерж ит  нат рия азид (0,05% )
1  пробирка, 1  мл
Готовая реакционная смесь для ОТ-ПЦР (ГРС) 
Лиоф илизированная
96 пробирок
Оптическая пленка 1,5 листа
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2, определяемая по 
стандартному образцу предприятия (СОП 05-2-860), составляег 25 копий в ПЦР-пробе (что 
соответствует 1x10^ копий/мл исходного образца при использовании для вьщеления РНК 
наборов «РеалБест экстракция 100» или «РеалБест УниМаг»).
3.2. Диагностическая чувствительность выявления РНК коронавируса человека SARS- 
CoV-2: клинические испытания, проведенные на 100 положительных образцах, показали 
100 ® /о  чувствительность (интервал 97 %  -100 с доверительной вероятностью 95 ® /о ).
3.3. Диагностическая специфичность выявления РНК коронавируса человека SARS- 
CoV-2: клинические испытания, проведенные на 100 отрицательных образцах, показали 
100 %  специфичность (интервал 97 % • 100 % , с доверительной вероятностью 95 %).


--- стр. 3 ---
3.4. Для оценки аналитической специфичности были проведены проверки с потенци­
ально перекрестно-реактивными вирусами (грипп А и В, парагрипп, аденовирусная инфек­
ция, респираторно-синцитиальная инфекция, метапневмовирусная инфекция, риновирусная 
инфекция и коронавирусная инфекция человека, вызванная hCov NL63, hCov ОС43, hCov 
229Е, hCov HK.UI) и микроорганизмами {Streptococcus pneum oniae, H aem ophilus influenzae.  
Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus).  Перекрестно реагирующих вирусов и микро­
организмов обнаружено не было.
3.5. В наборе для выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2 методом ОТ-ПЦР в ре­
жиме реального времени «РеалБест РНК SARS-CoV-2»2 используются зарегистрированные 
в установленном порядке набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из клиниче­
ских образцов (РеалБест экстракция 100) по ТУ 9398-464-23548172-2013 (РУ № РЗН 
2014/1423 от 25.03.2017) или набор реагентов для автоматического выделения нуклеиновых 
кислот из клинических образцов (РеалБест УниМаг) по ТУ 9398-545-23548172-2016 (РУ № 
РЗН 2017/5985 от 19.07.2017). Для наборов для выделения РНК «РеалБест экстракция 100» 
не ожидается интерференции.
3.6. Воспроизводимость результатов: клинические испытания, проведенные на 100 по­
ложительных и 100 отрицательных образцах с использованием двух серий набора реаг'ентов, 
показали 100 % межсерийную воспроиз*водимость результатов; исследование модельного 
образца, содержащего РНК SARS-CoV-2 в концентрации 1^10^ копий/мл, в 10 повторах дву­
мя разными операторами на двух сериях набора показ&ло 100 %  внутрисерийную, межпоста­
новочную и межсерийную воспроизводимость результатов.
4. МЕРЫ П№ДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 3 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
№ 4н).
4.2. SARS-CoV-2 (ранее 2019-nCoV) - новый вид коронавирусов, вызывающий опас­
ное инфекционное заболевание COVID-19, относится к II группе патогенности.
Лаборатории, выполняющие исследования по выявлению РНК SARS-CoV-2, обязаны 
обеспечить безопасность работы в соответствии с требованиями законодательства в сфере 
санитарно-эпидемиологического благополучия.
При работе всегда следует выполнять следующие требования:
- следует рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные;
- при удалении пробирок, содержащих продукты ПЦР, недопустимо их открывание и раз­
брызгивание содержимого, поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР 
лабораторной зоны, оборудования и реагентов;
- применять набор строго по назначению, согласно данной инструкции;


--- стр. 7 ---
{
2 стадия; 94 ® С  -  I минута;
3 стадия: 50 циклов (94 °С -  10 секунд, 60 °С -  20 секунд)*.
•Измерение флуоресценции проводить при 60 ® С.
7.6. Выбрать каналы детекции результатов амплификации кДНК ВКО и кДНК возбу­
дителя инфекции:
«ЯОХ»-для регистрации сигнала кДНК SARS-CoV-2;
«РАМ» “ для регистрации сигнала кДНК ВКО.
7.7. Запрограммировать положение пробирок с исследуемыми образцами и контроль­
ными образцами, согласно инструкции к используемому прибору.
7.8. Запустить программу и провести реакцию амплификации с регистрацией флуо­
ресценции в режиме реального времени.
8. АНАЛИЗ И УЧЁТ РЕЗУЛЬТАТОВ
8Л. Условия анализа и учёта результатов.
8.1.1. В ПКО программа должна фиксировать:
-  нарастание сигнала амплификации кДНК ВКО (канал «РАМ») и определять значе­
ние порогового цикла Ct ВКО;
-  нарастание сигнала амплификации кДНК SARS-CoV-2 (канал «ROX») и определять 
значение порогового цикла Ct ПКО. *
8.1.2. В ОКО программа должна фиксировать нарастание сигнала амплификации 
кДНК ВКО (канал «РАМ») и определять Ct ВКО, npfti этом программа не должна регистри­
ровать нарастания сигнала специфического продукта амплификации по каналу «ROX».
Если для ОКО определяется значение Cl по каналу «ROX», то это свидетельствует о 
наличии контаминации (см. п. 8.2.4).
8.1.3. В каждом исследуемом образце программа должна фиксировать нарастание 
сигнала амплификации кДНК ВКО (канал «РАМ») и определять Ct ВКО.
8.2. Учёт результатов.
8.2.1 Вычислить (Ct ВКО)ср как среднее значение Ct ВКО всех анализируемых образ­
цов (включая ПКО и ОКО). Отбраковке подлежат значения Ct ВКО, отличающиеся более 
чем на 2 от значения (Ct ВКО)ср. После отбраковки пересчитать (Ct ВКО)ср для оставшихся 
значений.
8.2.2. Анализируемый обр>азец считается отрицательным (не содержащим РНК SARS- 
CoV-2), если для этого образца значение Ct по каналу «ROX» не определяется.
Если для такого образца значение Ct ВКО превышает значение (Ct ВКО)ср более чем 
на 2, то результат по данному образцу не подлежит анализу и учету как отрицательный. 
Необходимо провести повторный анализ данного образца, начиная с этапа выделения РНК.
8.2.3. Анализируемый образец считается положительным, если для этого образца зна-


--- стр. 8 ---
0
i
чсние Ct по каналу «ROX» меньше или равно 40.
Если для анализируемого образца определяется Ct больше 40, рекомендуется прове­
дение дополнительных исследований (исследование вновь забранного материала или иссле­
дование с использованием другого набора реагентов).
8.2.4. В случае контаминации все положительные результаты по данной индивидуаль­
ной постановке ПЦР считаются недостоверными. Требуется предпринять меры по выявле­
нию и ликвидации источника контаминации и повторить анализ всех образцов данной по­
становки, для которых получен положительный результат. Образцы данной постановки, ана­
лиз которых дал отрицательный результат, следует учитывать, как отрицательные.
9. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
9.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспорт­
ных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного 
вида, при температуре (2-8) ® С. Допускается транспортирование при температуре до 26 ® С  не 
более 10 суток.
9.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться
при температуре (2-8) ® С  в течение всего срока годности в холодильных камерах или холо­
дильниках, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной ре­
гистрацией температуры. •
9.3. Срок годности набора -  12 месяцев’ со дня выпуска. Не допускается применение
наборов по истечении срока их годности. •
9.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструк­
ции по применению набора. •
9.5. Изделие не требует технического обслуживания и не подлежит ремонту.
10. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
10.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям 
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
10.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, воз­
никших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, 
либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
10.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функци­
ональные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют норматив­
ной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого 
дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
Ht мрифишромно диныии иеслсдцннм ■  (мжине реального |(им<нн


--- стр. 9 ---
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест РНК SARS*CoV-2», следует об­
ращаться в АО «Вектор-Бест» по адресу: 630117, г. Новосибирск-! 17, а/я 492, 
тел. (383) 332-92-49, 227-60-30; тел./факс (383), 332-94-47, 332-94-44.
E-mail: olkobtk(a)vector-best. ru
Начальник отделения 
производства ПЦР-наборов 
АО «Вектор-Бсст»
Директор по производству 
АО «Всктор-Бест»
Генеральный директор 
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор»
А.В. Трухина
В.К. Ткачев 
.А. Максютов