Набор реагентов «ДС-ИФА-АФП». Тест-система иммуноферментная для количественного определения альфа-фетопротеина по ТУ 9398-126-05941003-2007 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2008/02919 от 04.07.2008 · класс риска 2а

Производитель: ООО "НПО "Диагностические системы" (Россия)

Вид изделия: Альфа-фетопротеин (АФП) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 136 контрактов, медианная цена за единицу 5 419 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДАЮ
Заместитель генеральной директора  
ООО «Научно-произв/адственное  
объед| 1нёнЙ1е «Диагностические системы»
О.Н. Шлюндин  
2012  г.
по применению набора реагентов  
«ДС-И Ф А-АФ П »
Тест-система иммуноферментная для количественного определения
альфа-фетопротеина
1. Назначение
1.1. Набор реагентов «ДС-ИФА-АФП» предназначен для количественного определения 
альфа-фетопротеина в сыворотке крови человека методом твёрдофазного иммуноферментного 
анализа (ИФА).
1.2. Альфа-фетопротеин (АФП) - гликопротеин с молекулярной массой 70000 Да. 
АФП синтезируется во время эмбрионального развития, в основном, висцеральной энтодермой
^  желточного мешка и печенью плода. На отдельных стадиях внутриутробного развития он в 
некоторой степени может синтезироваться эмбриональной почкой, поджелудочной железой и 
энтодермой желудочно-кишечного тракта. После рождения, концентрация АФП в сыворотке 
резко падает, а ко второму году жизни и в дальнейшем, в норме сохраняется лишь 
незначительное его количество (от 0 до 10МЕ/мл).
Повышение его концентрации связано с беременностью и некоторыми онкологическими 
заболеваниями. Определение АФП в сыворотке крови беременных в настоящее время 
рассматривается как основа скринирующих программ для обнаружения пороков развития 
плода. При наличии у плода таких пороков, как дефект нервной трубки, тератома, 
эмбриональная грыжа, отмечается резкое повышение концентрации АФП в крови матери. 
Низкое содержание АФП в материнской сыворотке связано с синдромом Дауна и другими 
хромосомными аберрациями.
АФП является онкологическим маркером. Повышение уровня АФП наблюдается при 
ji.nepBHHHOM раке и метастазах злокачественных опухолей в печень, раке яичника, яичка, 
елудка, толстой кишки, поджелудочной железы, молочной железы, а также бронхиальных 
опухолях. Определение уровня АФП может использоваться для контроля эффективности 
проведенной терапии.
Незначительное повышение уровня АФП наблюдается при заболеваниях печени 
нераковой природы, сопровождающихся интенсивной регенерацией ее тканей (цирроз печени, 
вирусные гепатиты).
1.3. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах: 40 неизвестных проб, одна 
проба контрольной сыворотки, шесть стандартных калибровочных проб и одна проба для 
определения оптической плотности ТМБ-Субстратного раствора при одновременном 
^^^пользовании всех стрипов планшета (всего 96 определений).
В случае дробного применения набора необходимо обязательное использование всех 
стандартных калибровочных проб при каждой постановке.
1


--- стр. 2 ---
1
2. Характеристика набора
2.1. Принцип действия.
В наборе «ДС-ИФА-АФП» применен «сэндвич«-вариант твердофазного ИФА. Для 
реализации его использованы два моноклональных антитела с разной специфичностью к двум 
доменам молекулы АФП: первые антитела иммобилизованы на твердой фазе, вторые (меченные 
пероксидазой хрена) входят в состав конъюгата. В лунках планшета во время инкубации 
происходит одновременное связывание содержащегося в исследуемом образце АФП с 
антителами, иммобилизованными на твердой фазе, и антителами, конъюгированными с 
пероксидазой хрена.
Количество связанного антителами конъюгата прямо пропорционально количеству АФП 
в образце сыворотки крови.
Во время инкубации с ТМБ-Субстратным раствором происходит окрашивание раствора 
в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна количеству АФП в образце сыворотки 
крови. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного 
графика рассчитывается концентрация АФП в исследуемых образцах.
2.2. Состав набора реагентов «ДС-ИФА-АФП>>
Таблица 1
Характеристики реагентов Форма выпуска
Иммуносорбент - планшет полистироловый разборный (12 стрипов по 8 
лунок каждый, разборность до 1  лунки) с иммобилизованными на 
внутренней поверхности лунок моноклональными антителами к АФП.
1 щт.
Конъюгат - моноклональные антитела к АФП, конъюгированные с 
пероксидазой хрена; прозрачная или опалесцирующая розового цвета 
жидкость. В качестве консервантов содержит: 0,05% проклин 300, 
0,004% гентамицина сульфат, 0,1% фенол.
1 флакон 
12,0 мл
Калибратор 0, Калибратор 1, Калибратор 2, Калибратор 3, Калибратор 4, 
Калибратор 5 -  стандартные калибровочные пробы, содержащие 
известные концентрации АФП, аттестованные в соответствии с первым 
международным стандартом 72/225. Прозрачные или опалесцирующие 
светло-желтого цвета жидкости. Значения концентраций АФП указаны 
на этикетках флаконов и в аналитическом паспорте качества.
В качестве консервантов содержат: 0,05% проклин 300, 0,004% 
гентамицина сульфат, 0,1% фенол.
6 флаконов 
по 0,5 мл 
(Калибратор 0 -  
2,0 мл)
Контрольная сыворотка - сыворотка с известным содержанием АФП. 
Прозрачная или опалеецирующая светло-желтого цвета жидкоеть. 
^Значение концентрации АФП в сыворотке указано на этикетке флакона и 
^  аналитическом паспорте качества.
В качестве конеервантов содержит: 0,05% проклин 300, 0,004% 
гентамицина сульфат, 0,1% фенол.
1 флакон 
0,5 мл
ПР (концентрат х 25) -  промывочный раствор, концентрат. Прозрачная 
или слегка опалесцирующая, бесцветная или светло-жёлтого цвета 
жидкость.
1 флакон 
50,0 мл
ТМБ-Субстратный раствор - прозрачная бесцветная жидкость. 1 флакон 
14,0 мл
Стоп-реагент/0,2М - серная кислота в концентрации 0,2 моль/л. 
л^^розрачная бесцветная жидкость.
1 флакон 
25,0 мл
?ланк для построения калибровочной кривой 1 щт.
Инструкция по применению 1 шт.


--- стр. 3 ---
Дополнительно в комплект поставки могут быть включены:
- крышка к полистироловым 96-луночным планшетам или защитная пленка для ИФА 
планшетов;
- одноразовые наконечники;
- пластиковые ванночки для жидких реагентов;
- пластиковая скрепка для закрывания пакета с иммуносорбентом или полиэтиленовый 
пакет с замком.
3. Аналитические и диагностические характеристики набора
3.1. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая набором концентрация 
АФП в сыворотке крови человека составляет 1  МЕ/мл.
3.2. Специфичность. Для выявления кросс-реактивности в анализе тестировался 
человеческий сывороточный альбумин.
Таблица 2
Человеческий сывороточный альбумин Получена интенсивность окраски, 
соответствующая содержанию АФП в 
сыворотке (МЕ/мл)
12,5 мг/мл <1,0
25,0 мг/мл <1,0
50,0 мг/мл <1,0
100,0 мг/мл <1,0
1
Не обнаружено перекрестной реакции компонентов системы с ниже перечисленными 
реагентами, при их добавлении в больших количествах в образец сыворотки с известной 
концентрацией АФП: ЛГ -  10 МЕ/мл, пролактин -  1  мкг/мл.
3.3. Коэффициент вариации результатов определения АФП в одном и том же образце с 
использованием набора не превышает 8%.
3.4. Линейность. Зависимость концентрации АФП имеет линейный характер в диапазоне 
концентраций калибровочных проб №1-№5 Значение «линейности» должно находиться в 
пределах от 90 до 110%.
3.5. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» АФП 
- соответствие измеренной концентрации АФП предписанной в пробе, полученной путем 
смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы №2. Процент 
открытия составляет от 90 до 110%.
3.6. Хук-эффект высоких концентраций. В иммуноферментном анализе, основанном на 
«сэндвич »-принципе, при высоких концентрациях аналита зависимость величины оптической 
плотности от концентрации становится обратно пропорциональной. При использовании набора 
«ДС-ИФА-АФП» хук-эффект не обнаружен вплоть до концентрации 2000 МЕ/мл.
3.7. Клиническая проверка. Верхний предел содержания АФП в сыворотке здоровых 
доноров около ЮМЕ/мл. В таблице 3 приведены ожидаемые медианные значения 
^^)нцентраций АФП у женщин с нормально протекающей беременностью на сроках с 14 по 21 
Ччеделю.
Таблица 3
Срок беременности, недель 
после зачатия Медиана, МЕ/мл Нормальные пределы, 
МЕ/мл
14 25,24 13-63
15 32,59 16-81
16 36,78 18-92
17 37,47 19-94
18 38,25 19-96
19 50,70 25-127
20 58,19 29 - 145
21 53,51 27-134


--- стр. 4 ---
1
Правила пересчета результатов; МЕ/мл х 1,205 = нг/мл; нг/мл х 0,83 = МЕ/мл.
3.8. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значения 
концентраций АФП, соответствующие нормальным значениям для конкретной территории.
4. Меры предосторожности
Достоверность результатов зависит от правильного выполнения следующих правил 
лабораторной практики;
4.1. Постановку ИФА следует проводить в помещении с комнатной температурой от 
18 до 24 °С.
4.2. Нельзя использовать реагенты из наборов разных серий или смешивать их при 
приготовлении растворов, кроме;
- неспецифических компонентов (ПР (концентрат х 25), ТМБ-Субстратный раствор. 
Стоп-реагент), которые взаимозаменяемы во всех наборах для исследования гормонов и 
онкомаркеров, производства ООО «НПО «Диагностические системы».
4.3. Нельзя использовать реагенты после истечения срока годности, указанного на 
упаковке.
4.4. Растворы готовить осторожно, исключая какое-либо загрязнение.
4.5. Нельзя проводить ферментную реакцию в присутствии реактивных паров 
(кислота, щелочь, альдегиды) или пыли, которые могут повлиять на активность конъюгата.
4.6. Лабораторная посуда должна быть тщательно промыта; предпочтительно 
применение материалов одноразового использования.
4.7. Ферментная реакция особо чувствительна к ионам металлов. Нельзя допускать 
контакта металлических предметов с растворами конъюгата или субстрата.
4.8. Необходимо использовать чистый наконечник для каждого образца или реагента.
4.9. Промывка лунок - важный этап проведения анализа; необходимо соблюдать 
рекомендованное количество циклов промывки и убедиться, что лунки полностью заполняются 
раствором. Не следует допускать остатка жидкости в лунках после промывки. Неправильно 
проведенный этап промывки может привести к неточным результатам.
4.10. Нельзя использовать одну и ту же ванночку для внесения конъюгата и ТМБ- 
Субстратного раствора.
4.11. Необходимо использовать только валидированные дозаторы и оборудование.
4.12. Нельзя изменять процедуру проведения анализа.
4.13. Нельзя подвергать реагенты воздействию высокой температуры или прямого 
солнечного евета.
I 5. Инструкция по безопасности
5.1. Все реагенты набора предназначены для лабораторной диагностики.
5.2. Сыворотки крови человека, используемые при приготовлении Калибраторов и 
Контрольной сыворотки, не содержат антитела к вирусу гепатита С, антитела к ВИЧ-1,2, 
антиген вируса гепатита В (HBsAg), р24 ВИЧ-1 и антитела к возбудителю сифилиса.
5.3. В помещении с иммунодиагностическими материалами нельзя употреблять пищу, 
пить, курить, применять косметику.
5.4. Нельзя пипетировать ртом.
5.5. При работе е иееледуемыми образцами необходимо обращаться как с потенциально 
/фасными материалами, т.к. ни один известный метод тестирования не может гарантировать
отсутствие инфекционных агентов.
5.6. При работе с любым оборудованием, которое контактирует с исследуемыми 
образцами и реагентами, необходимо обращаться как с инфекционными материалами.
4


--- стр. 8 ---
12.3. Для разведения образцов сывороток с высоким содержанием АФП следует 
использовать «Калибратор О». Применение других реагентов может привести к ложным 
)езультатам.
12.4. Заключение о клиническом диагнозе не может быть основано только на 
)езультатах данного теста. В диагностических целях результаты должны обязательно 
использоваться в сочетании с другими данными: симптомами, общей клинической картиной, 
результатами исследования другими тестами.
12.5. Наличие гетерофильных антител у пациентов, имеющих дело с животными или 
получавших моноклональные антитела в качестве лечения, может оказывать влияние на 
результаты иммунологических тестов.
12.6. Хук-эффект в данном тесте до 2000 МЕ/мл не наблюдался.
J
12.7. Набор не предназначен для тестирования образцов сывороток крови 
новорожденных.
13. Условия хранения и эксплуатации набора
13.1. Набор реагентов должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при 
температуре от 2 до 8 °С в защищённом от света месте в течение всего срока годности. Срок 
годности набора -  18 месяцев.
13.2. Транспортирование набора реагентов проводить при температуре от 2 до 8 °С. 
Допустимо транспортирование при температуре от 9 до 20 “С не более 10 суток.
13.3. В случае дробного использования компоненты набора необходимо хранить 
следующим образом:
- Иммуносорбент - пакет с неиспользованными стрипами и силикагелем тщательно 
герметизировать. После первого вскрытия пакета иммуносорбент стабилен на протяжении 
срока годности набора при температуре от 2 до 8 °С;
- ПР (концентрат х 25) - после вскрытия флакона оставшийся неиспользованным ПР 
(концентрат х 25) хранить во флаконе, плотно закрытом винтовой крышкой, на протяжении 
срока годности набора при температуре от 2 до 8 °С;
- Рабочий промывочный раствор, подготовленный к использованию, хранить в чистой 
плотно закрытой емкости в течение 14 сут. при комнатной температуре или 28 сут. при 
температуре от 2 до 8 °С.
- Конъюгат -  после вскрытия флакона, оставшийся неиспользованным конъюгат хранитъ 
во флаконе, плотно закрытом винтовой крышкой, на протяжении двух месяцев при температуре 
от 2 до 8 °С.
- Стандартные калибровочные пробы - после вскрытия флакона оставшиеся 
^ неиспользованными калибровочные пробы хранить во флаконах, плотно закрытых винтовыми 
^крышками, на протяжении двух месяцев при температуре от 2 до 8 °С.
- Контрольная сыворотка - после вскрытия флакона оставшуюся неиспользованной 
контрольную сыворотку хранить во флаконе, плотно закрытом винтовой крышкой, на 
протяжении двух месяцев при температуре от 2 до 8 °С.
- ТМБ-Субстратный раствор -  после вскрытия флакона оставшийся неиспользованным 
ТМБ-Субстратный раствор хранить во флаконе, плотно закрытом винтовой крышкой, на 
протяжении двух месяцев при температуре от 2 до 8 °С.
- Стоп-реагент - после вскрытия флакона, оставшийся неиспользованным стоп-реагент 
анить во флаконе, плотно закрытом винтовой крышкой, на протяжении срока годности 
бора при температуре от 2 до 8 °С.
13.4. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение 
инструкции.
8


--- стр. 9 ---
Рекламации на специфические и физические свойства набора направлять в адрес 
предприятия-изготовителя - ООО «Научно-производственное объединение «Диагностические 
системы» 603093, Россия, г. Нижний Новгород, ул. Яблоневая, 22, тел./факс: (831) 434-86-83 
или тел.: (831) 434-97-12.
14. Объяснение символов
С€
ЕС Маркировка (Европейская директива 98/79/СЕ по in vitro 
диагностическим МУ)
IVD Только для лабораторного использования (in vitro diagnostic)
iJ
Производитель
Каталожный номер
I Количество определений
LOT Номер партии (серии)
+2°С
г
+8“С
Температурные пределы хранения
Срок годности дата/месяц/год
ЕХР.
Смотрите инструкцию по применению
XI
Содержит раздражающее вещество
Директор по производству
ООО «Научно-производственное объединение
«Диагностические системы»
СОГЛАСОВАНО  
Зав.кафедрой клинической  
лабораторной диагностики  
ГБОУ ДНО РМАПО  
Минздравсоцразвития России  
д.м.н, профессор
удостояерякт
В.К. Пименов
В.В. Долгов
А / .  л


--- стр. 10 ---