Набор реагентов для выделения ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов из биологического материала человека и культур микроорганизмов (ПРОБА-ОПТИМА) по ТУ 21.20.23-124-46482062-2021 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас 2 закупки, где это изделие полностью проходит по требованиям хотя бы в одной позиции.
| Закупка | Окончание подачи | Нач. цена |
|---|---|---|
| Поставка медицинских расходных материалов
№ 0387200002826001046 · БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ХАНТЫ-МАНСИЙСКОГО АВТОНОМНОГО ОКРУГА - ЮГРЫ "ОКРУЖНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА" · Ханты-Мансийский автономный округ — Югра |
09.11.2026 | 1 481 664 ₽ |
| Поставка реагентов для проведения исследований клинического материала методом ПЦР (лот № 8 СЦБЛ)
№ 0372200026226000291 · САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ "ДЕТСКАЯ ГОРОДСКАЯ БОЛЬНИЦА № 22" · г. Санкт-Петербург |
10.11.2026 | 1 499 000 ₽ |
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 3 --- ^ ЛИК-ТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 3 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 1 ПРЕДНАЗНАЧЕННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ 1.1 Полное наименование набора реагентов: Набор реагентов для выделения ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов из биологического материала человека и культур микроорганизмов (ПРОБА-ОПТИМА), далее по тексту - набор реагентов. 1.2 Назначение: набор реагентов предназначен для выделения ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов из биологического материала человека (кровь; буккальный эпителий, мазки/соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального трактов; моча; фекалии; биоптаты; амниотическая жидкость; эякулят; ликвор; молоко), а также культур микроорганизмов (бактерий и грибов), полученных из этого биоматериала, с целью последующего анализа методом ПЦР. 1.3 Функциональное назначение: вспомогательное средство для диагностики in vitro. 1.4 Показания к проведению анализа: выделение ДНК человека, бактерий, вирусов и грибов для последующего анализа методом ПЦР. 1.5 Противопоказания к применению: Противопоказаний к применению нет. 1.6 Популяционные и демографические аспекты: применение набора реагентов не зависит от популяционных и демографических аспектов. 1.7 Область применения: набор реагентов может быть использован в клинико- диагностических лабораториях медицинских учреждений. 1.8 Потенциальные пользователи: квалифицированный персонал, осуществляющий взятие и предобработку клинического материала, а также специалисты, обученные методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико- диагностической лаборатории в установленном порядке. 1.9 Применять набор реагентов строго по назначению согласно данной инструкции по применению. --- стр. 4 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 4 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ 2.1 Состав набора реагентов Набор реагентов выпускается в следующих вариантах исполнения: ПРОБА-ОПТИМА МАКС выпускается в фасовке для ручного дозирования (маркируется «Фасовка N») и включает следующие компоненты: P-015-N/2, фасовка N Компоненты набора реагентов Внешний вид Количество флаконов\ пробирок Номинальный объем Лизирующий раствор Прозрачная бесцветная жидкость 1 флакон 20 мл Нейтрализующий раствор Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 400 мкл Промывочный раствор СК Прозрачная бесцветная пенящаяся жидкость 1 флакон 35 мл Промывочный раствор Р Прозрачная бесцветная жидкость 2 флакона по 35 мл Отрицательный контрольный образец Прозрачная бесцветная жидкость 1 флакон 12,5 мл ПРОБА-ОПТИМА выпускается в фасовке для ручного дозирования (маркируется «Фасовка N» и «Фасовка S») и включает следующие компоненты: Р-016-1/2, фасовка S Компоненты Внешний Количество флаконов\ пробирок Номинальный набора реагентов вид объем Лизирующий раствор прозрачная бесцветная жидкость 50 пробирок по 400 мкл Нейтрализующий раствор Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 400 мкл --- стр. 5 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 5 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 P-016-N/2, фасовка N Компоненты Внешний Количество флаконов\ пробирок Номинальный набора реагентов вид объем Лизирующий раствор Прозрачная бесцветная жидкость 1 флакон 20 мл Нейтрализующий раствор Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 400 мкл II Все компоненты набора реагентов готовы к применению и не требуют дополнительной подготовки к работе. 2.2 Количество анализируемых образцов Набор реагентов предназначен для однократного применения и рассчитан на выделение ДНК из 50 анализируемых образцов (включая отрицательные контрольные образцы). 2.3 Принцип метода Принцип метода заключается в щелочном лизисе клеток, происходящем в ходе термического инкубирования. Эффективность такого выделения ДНК из биологического материала приближается к максимально возможному в связи с тем, что используется высокотемпературная обработка образцов в лизирующем растворе, а потери минимизированы. 2.4 Время проведения выделения нуклеиновых кислот: от 25 минут. Время зависит от исследуемого материала, количества образцов в одновременном выделении ДНК, используемого оборудования. --- стр. 6 --- ^ ^ ДНКТЕХНОЛОГНЯ Инструкция по применению Лист 6 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 3 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1 Рекомендуемое количество биоматериала, из которого может быть получен препарат ДНК: от 5,0 до 1000 мкл К Выход ДНК (эффективность) составляет 440 - 680 нг Объём получаемого препарата ДНК: от 100 до 450 мкл. 3.2 Интерферирующие вещества Наличие в образцах биологического материала интерферирующих веществ может влиять на пробоподготовку, снижая качество и количество выделенной ДНК; являться причиной сомнительных (недостоверных) и/или ложноотрицательных результатов; а также ингибировать ПЦР. Для изучения влияния некоторых веществ на пробоподготовку и тем самым способными искажать результаты ПЦР-анализа проведено одновременное выделение ДНК из биологического материала без и с добавлением тестируемых интерферентов в концентрациях, превыщающих потенциально возможные для данных образцов. Максимальные концентрации интерферирующих веществ, при которых не наблюдалось ингибирование ПЦР, представлены в таблице ниже. Вид биоматериала Интерферирующее вещество Исследованная концентрация в образце Эндогенные вещества Кровь, фекалии, моча, мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта, амниотическая жидкость Билирубин 171 мкмоль/л Кровь, фекалии, мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта, амниотическая жидкость Холестерин 13 ммоль/л Мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта и дыхательных путей, фекалии, моча, биоптаты, амниотическая жидкость Гемоглобин* 1 % Буккальный эпителий, биоптаты, эякулят, мазки/соскобы из урогенитального тракта и дыхательных путей Слизь (муцин) 5% Экзогенные вещества Кровь ЭДТА до 2,0 мг/мл ^ Мазки/соскобы из дыхательных путей. Назонекс 5% ' функциональные показатели зависят от вида и количества биоматериала; ^ выход ДНК приведен для выделения из крови объемом 100 мкл с содержанием лейкоцитов от 5,5 х Ю’/л до 7,8 хЮ’/л. ^ Согласно ГОСТ Р 53079.4-2008 (Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа) калия ЭДТА используют в концентрации от 1,2 до 2,0 мг/мл. *для образцов биоматериала, выделяемых с использованием набора реагентов в варианте исполнения ПРОБА- ОПТИМА --- стр. 7 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГНЯ Инструкция по применению Лист? ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 Вид биоматериала Интерферирующее вещество Исследованная концентрация в образце бухкальный эпителий Мазки/соскобы из дыхательных путей, бухкальный эпителий Пиносол 5% Мазки/соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального трактов, моча, фекалии, биоптаты, амниотическая жидкость, эякулят, ликвор, молоко, бухкальный эпителий Хлоргексидина биглюконат 5% Буккальный эпителий, мазки/соскобы из дыхательных путей, желудочно- кишечного и урогенитального трактов; моча, молоко Октенисепт 5% при добавлении гепарина в образцы биоматериала (кровь) ингибирование ПЦР наблюдалось при минимально исследованной концентрации интерферента равной 110 МЕ/дл. Для снижения количества биологических образцов с ИВ необходимо выполнять правила их взятия. В связи с тем, что в методике, лежащей в основе пробоподготовки ПРОБА-ОПТИМА, для некоторых видов биологического материала рекомендовано его взятие непосредственно в лизирующий раствор, важно соблюдать их соотношение. Если объём осадка составляет больше трети всего объёма образца в лизирующем растворе, эффективность выделения ДНК может снижаться. В каждом наборе реагентов для амплификации для оценки качества экстракции ДНК и возможного ингибирования ПЦР предусмотрен внутренний контроль. Признаком полного ингибирования ПЦР является одновременное отсутствие амплификации ВК и специфических продуктов. 3.3 Эффективность набора реагентов Эффективность набора реагентов ПРОБА-ОПТИМА установлена в ходе проведения клинических испытаний с использованием дополнительных наборов реагентов для амплификации при исследовании образцов биологического материала. Вид биоматериал Количество исследованных образцов, щт. Набор реагентов для амплификации (сокращенное наименование) Эффективность набора реагентов ПРОБА-ОПТИМА Амниотическая жидкость 16 квм' 100 % (Ркст = 86,6) Биоптаты 12 Streptococcus agalactiae 100 % (Р„сг = 82,54) Буккальный эпителий 30 КВМ* 100 %(Р„ст = 92,61) Кровь 36 ЦМВ-ГЕН 100 % (Р„сг = 93,8) 40 КВМ* 100 %(Р„„ = 94,41) Ликвор 16 Streptococcus aealactiae 100 % (Р„сг = 86,6) Мазки/соскобы из дыхательных путей 23 КАНД-ГЕН 100 % (Р„ст = 90,47) Мазки/соскобы из желудочно-кишечного тракта 27 КАНД-ГЕН 100 %(Рисг = 91,83) --- стр. 15 --- ^ ^ ЛИК-ТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 15 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 Извлеките зонд из раствора и, вращательным движением прижимая его к внутренней стенке пробирки выше уровня раствора, отожмите избыток жидкости. Полностью удалите зонд из пробирки и утилизируйте. Плотно закройте крышку пробирки и промаркируйте пробирку. 6.3.3 Мазки\соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального тракта ВНИМАНИЕ! Взятие материала осуществляется сухим зондом! Необходимо исключить контакт растворов с кожей, глазами и слизистыми оболочками. При контакте немедленно промыть пораженное место водой и обратиться за медицинской помощью. Взятие материала осуществляется с помощью специальных стерильных одноразовых инструментов — зондов, цитощеток или тампонов, в зависимости от источника биологического материала согласно установленной процедуре. Взятие материала проводится в одноразовые пробирки объёмом 1,5 мл, в которые предварительно внесено по 400 мкл лизирующего раствора. Примечание - Взятие материала при необходимости возможно проводить в одноразовые пробирки объёмом 1,5 мл, в которые предварительно внесено по 500 мкл стерильного физиологического раствора или транспортной среды (Транспортная среда для биопроб СТОР-Ф по ТУ 21.20.23-101-46482062-2019, производства ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, РУ№РЗН 2020/9640). После взятия материала перенесите зонд в пробирку с лизирующим раствором или транспортной средой и тщательно промойте его в жидкости в течение 10-15 с, избегая её разбрызгивания. Извлеките зонд из раствора и, вращательным движением прижимая его к внутренней стенке пробирки выше уровня раствора, отожмите избыток жидкости. Полностью удалите зонд из пробирки и утилизируйте. Плотно закройте крышку пробирки и промаркируйте пробирку. г Примечание - Взятие материала при необходимости возможно проводить в транспортную среду для жидкостной цитологии PreservCyt ThinPrep (Hologic Inc, США, РУ № ФСЗ 2012/11750). Взятие биологического материала проводят согласно инструкции производителя. 15 --- стр. 16 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 16 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 ( I 6.3.4 Моча Для анализа отбирают первую порцию утренней мочи в количестве не меньше 20- 30 мл. Отбор мочи проводят в сухой стерильный контейнер объёмом до 60 мл, снабженный герметично завинчивающейся крышкой. После сбора мочи контейнер плотно закрывают и маркируют. 6.3.5 Фекалии Для анализа используют пробы фекалий массой (объёмом) примерно 1-3 г (1-3 мл). Пробу переносят отдельным наконечником с фильтром или одноразовыми лопатками в специальный стерильный сухой флакон в количестве 1,0 г (примерно). После сбора фекалий флакон плотно закрывают и маркируют. 6.3.6 Биоптаты Взятие материала осуществляют согласно утвержденной процедуре в одноразовую пробирку объёмом 1,5 мл, в которую предварительно внесено 400 мкл лизирующего раствора. ВНИМАНИЕ! Максимальный размер фрагмента ткани - 5,0 мм по длине большей стороны или в диаметре. 6.3.7 Амниотическая жидкость Взятие амниотической жидкости производят согласно утвержденной процедуре в ходе процедуры амниоцентеза. Отбор материала проводят в сухой стерильный контейнер, снабженный герметично завинчивающейся крышкой, в количестве не менее 1,0-2,0 мл. После сбора контейнер плотно закрывают и маркируют. 6.3.8 Эякулят Сбор эякулята проводят согласно утвержденной процедуре в специальный сухой стерильный контейнер объёмом до 60 мл, снабженный герметично завинчивающейся крышкой. После сбора контейнер плотно закрывают и маркируют. 6.3.9 Ликвор Взятие спинномозговой жидкости (ликвора) осуществляется согласно установленной процедуре одноразовыми иглами в одноразовые пробирки объёмом 1,5 мл в количестве не менее 500-1000 мкл. После взятия материала пробирку плотно закрывают и маркируют. 6.3.10 Молоко Сбор грудного молока проводят согласно утвержденной процедуре в специальный 16 --- стр. 17 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГНЯ Инструкция по применению Лист 17 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 сухой cтq5ильный контейнер объёмом до 60 мл, снабженный герметично завинчивающейся крышкой. После сбора контейнер плотно закрывают и маркируют. 6.3.11 Культуры микроорганизмов Взятие материала с жидких и плотных сред осуществляется при помощи одноразовой микробиологической петли или пшателя. Поместите в одноразовую пробирку объёмом 1,5 мл, в которую предварительно внесено 400 мкл лизирующего раствора, от 5,0 мкл одиночной колонии клеток или до 50 мкл жидкой среды. Примечание - Взятие материала (одиночная колония клеток или 100 мкл жидкой среды) при необходимости производится в охщоразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5-2,0 мл, в которую предварительно внесено 500 мкл стерильного физиологического раствора. Плотно закройте крышку пробирки и промаркируйте пробирку. 6.4 Транспортирование и хранение исследуемых образцов 6.4.1 Цельная кровь Образцы крови допускается транспортировать и хранить: - при температуре от 2 ®С до 8 ®С - не более 6 часов с момента взятия материала для исследования на наличие ДНК микроорганизмов в крови; - при температуре от 2 °С до 8 °С - не более 30 дней с момента взятия материала для исследования генетических полиморфизмов человека. ВНИМАНИЕ! Цельную кровь нельзя замораживать. 6.4.2 Мазки/соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального тракта, буккальный эпителий, биоптаты, культуры микроорганизмов 6.4.2.1 При взятии буккального эпителия, мазков\соскобов из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального тракта, культур микроорганизмов, биоптатов в лизирующий раствор образцы допускается хранить и транспортировать: - при температуре от 20 ®С до 25 °С - не более 48 часов; - при температуре от 2 °С до 8 °С - не более 30 дней; - при температуре от минус 18 ®С до минус 20 °С - не более 90 дней. ВНИМАНИЕ! Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала. 6.4.2.2 При взятии мазков\соскобов из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального тракта, культур микроорганизмов в транспортную среду для биопроб 17 --- стр. 19 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГНЯ Инструкция по применению Лист 19 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 ПРОВЕДЕНИЕ ВЬЩЕЛЕНИЯ ДНК 7.1 Общие рекомендации 7.1.1 На этапах подготовки биоматериала и выделении из него ДНК используйте одноразовые наконечники с фильтром, свободные от РНКаз и ДНКаз. 7.1.2 Удалять надосадочную жидкость из каждой пробирки следует отдельным наконечником. 7.1.3 При добавлении реагентов в пробирку, содержащую биологический материал, вносите их аккуратно, не касаясь стенок пробирок. При касании стенки пробирки смените наконечник. 7.1.4 Для предотвращения контаминации всегда открывайте крышку только той пробирки, с которой идёт работа (внесение образца/реактива, удаление надосадочной жидкости), и закрывайте её после этого. Не допускается работать одновременно с несколькими пробирками с открытыми крышками. 7.1.5 Пробирки с исследуемыми образцами и отрицательным контрольным образцом (К-) необходимо обрабатывать по единой схеме одновременно. 7.2 Выделение ДНК ВНИМАНИЕ! Выделение ДНК из крови проводится только набором реагентов в варианте исполнения ПРОБА-ОПТИМА МАКС (7.2.5). Выделение ДНК из остальных биологических материалов и культур микроорганизмов проводится набором реагентов в любом варианте исполнения (ПРОБА-ОПТИМА МАКС, ПРОБА-ОПТИМА). ВНИМАНИЕ! Одновременно с выделением ДНК из биологического материала необходимо подготовить отрицательный контрольный образец и провести его через все этапы пробоподготовки. В качестве отрицательного контрольного образца рекомендуется использовать лизирующий раствор (Фасовка N, ПРОБА-ОПТИМА) или новую пробирку с лизирующим раствором (Фасовка S, ПРОБА-ОПТИМА) или отрицательный контрольный образец, входящий в состав набора реагентов (Фасовка N, ПРОБА-ОПТИМА МАКС). 7.2.1 Выделение ДНК из образцов, взятых в лизирующий раствор (мазки/соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального тракта, буккальный эпителий, биоптаты, культуры микроорганизмов) 7.2.1.1 Тщательно перемешайте содержимое пробирок с исследуемыми образцами и отрицательным контрольным образцом в течение 10-30 с на микроцентрифуге-вортексе. 7.2.1.2 Осадите капли с крышек пробирок в течение 10-30 с на микроцентрифуге- 19 --- стр. 20 --- ^ ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 20 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 вортексе. 7.2.1.3 Инкубируйте пробирки при температуре 90 °С в течение 20 минут. ВНИМАНИЕ! При прогревании пробирок возможно открывание крышек! Рекомендуется использовать пробирки с защёлкивающимися крышками (например, Eppendorf Safe-Lock Tubes) или программируемые термостаты с прижимной крышкой (например, термостат «Гном» производства ООО «НПО ДНК-Технология»). Рекомендуется использовать для термостата программу с активным финальным охлаждением пробирок или аккуратно извлечь пробирки из термостата и дать им остыть в вертикальном положении до комнатной температуры (от 18 ®С до 25 °С). 7.2.1.4 Центрифугируйте пробирки при 16000 х g в течение 1 минуты. ВНИМАНИЕ! Относительное ускорение центрифуги (RCF или g) зависит от частоты вращения и радиуса ротора. Для определения соответствия центрифуги заданным параметрам центрифугирования (см. раздел «Оборудование и материалы) обратитесь к руководству по эксплуатации. 7.2.1.5 Препарат ДНК готов к внесению в реакционную смесь для ПЦР- амплификации. Полученный препарат ДНК допускается хранить при температуре от минус 20 °С до плюс 8 не более 7 суток. 7.2.1.6 Если образец предполагается использовать более 7 суток, перенесите с помощью дозатора в соответствующим образом промаркированную новую микроцентрифужную пробирку объёмом 1,5 мл необходимое количество препарата ДНК. 7.2.1.7 Перемешайте содержимое пробирки с нейтрализующим раствором в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе. Осадите капли с крышки в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе. 7.2.1.8 Добавьте в каждую пробирку, не касаясь края пробирки, необходимое количество нейтрализующего раствора, исходя из соотношения: 2,0 мкл нейтрализующего раствора на 100 мкл образца (см таблицу ниже). Соотношение количества образца и нейтрализующего раствора. Образец, мкл 100 150 200 250 300 350 400 Нейтрализующий раствор, мкл 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 8,0 20 --- стр. 21 --- ^ ^ ЛНКТЕХНОЛОГНЯ Инструкция по применению Лист 21 ПРОБАЮПТИМА Листов 30 7.2.1.9 Тщательно перемешайте содержимое пробирок в течение 10 с на микроцентрифуге-вортексе. Полученный препарат ДНК допускается хранить при температуре от 2 °С до 8 °С не более месяца, от минус 18®С не более 6 месяцев. 7.2.1.10 Перед использованием препарата ДНК для постановки ПЦР, необходимо разморозить его при комнатной температуре (от 18 °С до 25 °С) или при температуре от 2 ®С до 8 °С, перемешать содержимое пробирки в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугировать пробирку при 16000 х g в течение 1 минуты. Препарат ДНК готов к внесению в реакционную смесь для ПЦР-амплификации. ВНИМАНИЕ! Необходимо соблюдать правила взятия биологических образцов. При несоблюдении рекомендаций по взятию биологических образцов, транспортировке и их хранению, технологических нарушениях при выделении ДНК, попадании ингибирующих компонентов в пробирки, а также в случае если объём осадка составлял больше трети всего объёма образца в лизирующем растворе, эффективность ПЦР может снижаться вплоть до полного ингибирования реакции. В этом случае, возможно, потребуется провести дополнительную обработку образца (7.2.2, 7.2.3). 7.2.2 Выделение ДНК из образцов, взятых в лизирующий раствор или транспортную среду с нарушениями на преаналитическом этапе 7.2.2.1 Промаркируйте по одной новой пробирке с 400 мкл лизирующего раствора для каждого исследуемого образца и отрицательного контрольного образца «К-». 1222 Центрифугируйте исследуемые образцы с осадком более трети всего объёма или с ингибированием ПЦР при 16000 х g в течение 30-60 с. 7.2.2.3 После центрифугирования перенесите в соответствующие новые пробирки для исследуемых образцов по 100 мкл средней фракции надосадочной жидкости. В пробирку «К-» образец не вносится. 7.2.2.4 Повторите выделение ДНК, начиная с 7.2.1.2 -7.2.1.10. 7.2.3 Выделение ДНК из образцов, взятых в лизирующий раствор с нарушениями на преаналитическом этапе, с использованием других наборов реагентов для выделения ДНК. При необходимости возможно проведение повторной обработки образцов с использованием других наборов реагентов, например, ПРОБА-ГС или ПРОБА-НК. Для этого: 21 --- стр. 23 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 23 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 12Л2.2 Перенесите в соответствующие пробирки по 1,0 мл исследуемого образца. В пробирку «К-» образцы не вносятся. 7.2.4.2.3 Внесите в пробирку «К-» 1,0 мл стерильного физиологического раствора или отрицательного контрольного образца. 7.2.4.2.4 Центрифугируйте все пробирки при 16000 х g в течение 10 минут. 7.2.4.2.5 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирках около 50 мкл или менее (осадок+жидкая фракция). 7.2.4.2.6 При наличии значительного количества осадка (более 50 мкл) добавьте в пробирки по 1,0 мл стерильного физиологического раствора, тщательно перемещайте содержимое в течение 10-30 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте пробирки при 16000 X g в течение 10 мин. 7.2.4.2.7 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл или менее (осадок+жидкая фракция). 7.2.4.2.8 Добавьте по 400 мкл лизирующего раствора. 12Л2.9 Проведите выделение ДНК, начиная с 7.2.1.2 -7.2.1.10. 7.2.4.3 Эякулят 7.2.4.3.1 Промаркируйте по одной одноразовой пробирке объёмом 1,5 мл для каждого исследуемого образца и отрицательного контрольного образца «К-». 7.2.4.3.2 Внесите в каждую пробирку по 1,0 мл стерильного физиологического раствора. 7.2.4.3.3 Перенесите в соответствующие пробирки для исследуемых образцов по 100 мкл эякулята. В пробирку «К-» эякулят не вносится. 7.2.4.3.4 Внесите в пробирку «К-» 100 мкл стерильного физиологического раствора или отрицательного контрольного образца. 7.2.4.3.5 Перемещайте содержимое пробирок в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе. 7.2.4.3.6 Центрифугируйте все пробирки при 16000 х g в течение 10 минут. 7.2.4.3.7 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирках примерно 50 мкл или менее (осадок+жидкая фракция). 7.2.4.3.8 При наличии значительного количества осадка (более 50 мкл) добавьте в пробирки по 1,0 мл стерильного физиологического раствора, тщательно перемешайте содержимое в течение 10-30 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте пробирки при 16000 X g в течение 10 мин. 23 --- стр. 24 --- ^>^ДНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 24 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 7.2.4.3.9 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл или менее (осадок+жидкая фракция). 7.2.4.3.1 о Добавьте по 400 мкл лизирующего раствора. 7.2.4.3.11 Проведите выделение ДНК, начиная с 7.2.1.2 -7.2.1.10. 7.2.4.4 Фекалии 7.2.4.4.1 Промаркируйте по одной одноразовой пробирке объёмом 1,5 мл для каждого исследуемого образца и отрицательного контрольного образца «К-». 7.2.4.4.2 Внесите в каждую пробирку по 1,0 мл стерильного физиологического раствора. 7.2.4.4.3 Перенесите в соответствующие пробирки для исследуемых образцов фекалии размером с горощину диаметром около 0,5 см. В пробирку «К-» фекалии не вносятся. 7.2.4.4.4 Тщательно перемещайте содержимое пробирок в течение 10-30 секунд на микроцентрифуге-вортексе и центрифугируйте пробирки при 900 х g в течение 15 мин. 7.2.4.4.5 Промаркируйте по одной пробирке объёмом 1,5 мл с 400 мкл лизирующего раствора для каждого исследуемого образца и отрицательного контрольного образца «К-». 7.2.4.4.6 Перенесите в соответствующие пробирки по 50 мкл средней фракции надосадочной жидкости. 7.2.4.4.7 Добавьте по 400 мкл лизирующего раствора. 7.2.4.4.8 Проведите выделение ДНК, начиная с 7.2.1.2 -7.2.1.10. ВНИМАНИЕ! Выделение ДНК из фекалий по данной методике не рекомендуется для изучения состава микробиоты толстого кишечника. 7.2.4.5 Молоко 7.2.4.5.1 Промаркируйте по одной одноразовой пробирке объёмом 1,5 мл для каждого исследуемого образца и отрицательного контрольного образца «К-». 7.2.4.5.2 Перенесите в соответствующие пробирки по 1,0 мл исследуемого образца. В пробирку «К-» образцы не вносятся. 7.2.4.5.3 Внесите в пробирку «К-» 1,0 мл стерильного физиологического раствора или отрицательного контрольного образца. 7.2.4.5.4 Перемещайте содержимое пробирок в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе. 24 --- стр. 25 --- ^ ДНК ТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 25 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 7.2.4.5.5 Центрифугируйте все пробирки при 16000 х g в течение 10 минут. 7.2.4.5.6 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирках примерно 50 мкл или менее (осадок+жидкая фракция). 7.2.4.5.7 Добавьте к осадку 400 мкл лизирующего раствора, ресуспендируйте осадок при помощи пипетирования, не захватывая верхний слой молочного жира, остающийся на стенках пробирки. 7.2.4.5.5 Промаркируйте по одной новой одноразовой пробирке объёмом 1,5 мл для каждого исследуемого образца. 7.2.4.5.9 Перенесите в соответствующие пробирки всю суспензию, не захватывая верхний слой молочного жира, остающийся на стенке. 7.2.4.5.10 Добавьте в пробирку «К-» 400 мкл лизирующего раствора. 7.2.4.5.11 Проведите выделение ДНК, начиная с 7.2.1.2 -7.2.1.10. 7.2.5 Выделение ДНК из крови (только е использованием набора реагентов ПРОБА-ОПТИМА МАКС) 7.2.5.1 Промаркируйте по одной новой одноразовой пробирке для каждого исследуемого образца и отрицательного контрольного образца «К-». 1.2.52 Внесите в соответствующие пробирки по 100 мкл крови при выделении Д1Ж человека для последующего исследования генетических полиморфизмов или по 100-500 мкл крови при вьщелении ДНК микроорганизмов. При вьщелении ДНК микроорганизмов рекомендуется использовать 500 мкл крови, так как при наличии в образце микроорганизмов увеличение объёма крови для исследования приводит к возрастанию концентрации их ДНК в конечном препарате. В пробирку «К-» кровь не вносится. 7.2.5.3 Внесите в пробирку «К-» отрицательный контрольный образец в объёме, равном объёму крови в пробирках для исследуемых образцов. 7.2.5.4 Добавьте во все пробирки промывочный раствор СК в объёме, равном объёму крови/отрицательного контрольного образца. 7.2.5.5 Тщательно перемешайте содержимое пробирок в течение 10-30 с на микроцентрифуге-вортексе до его равномерного окрашивания. В пробирке «К-» содержимое остаётся бесцветным. 12.5.6 Инкубируйте пробирки в вертикальном положении при комнатной температуре (от 18 °С до 25 °С) в течение 5 мин. За время инкубации перемешайте содержимое пробирок 2-3 раза в течение 20-30 с на микроцентрифуге-вортексе. 7.2.5.7 Центрифугируйте все пробирки при 16000 х g в течение 10 минут. 25 --- стр. 26 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГНЯ Инструкция по применению Лист 26 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 ВНИМАНИЕ! Относительное ускорение центрифуги (RCF или g) зависит от частоты вращения и радиуса ротора. Для определения соответствия центрифуги заданным параметрам центрифугирования (см. раздел «Оборудование и материалы») обратитесь к руководству по эксплуатации. 7.2.5.8 Удалите надосадочную жидкость (отдельным наконечником для каждой пробирки), не задевая расположенный в конусной части пробирки рыхлый пристеночный сгусток, оставив в пробирках примерно 10-20 мкл (осадок+жидкая фракция). ВНИМАНИЕ! Сгусток может неплотно держаться на стенке пробирки. 7.2.5.9 Добавьте в каждую пробирку по 1400 мкл промывочного раствора Р. ^ 7.2.5.10 Тщательно перемешайте содержимое пробирок в течение 20-30 с на микроцентрифуге-вортексе, стараясь разбить осадок при его наличии. 7.2.5.11 Центрифугируйте пробирки при 16000 х g в течение 5 минут. 7.2.5.12 Удалите надосадочную жидкость (отдельным наконечником для каждой пробирки), не задевая расположенный в конусной части пробирки рыхлый пристеночный сгусток, оставив в пробирках примерно 10 мкл (осадок+жидкая фракция). ВНИМАНИЕ! Сгусток может неплотно держаться на стенке пробирки. 7.2.5.13 Добавьте в пробирки по 100 мкл лизирующего раствора при выделении ДНК микроорганизмов или по 300 мкл лизирующего раствора при выделении ДНК человека для последующего исследования генетических полиморфизмов. ф 7.2.5.14 Тщательно перемешайте содержимое пробирок в течение 10-30 с на микроцентрифуге-вортексе, стараясь разбить осадок. 7.2.5.15 Осадите капли с крышек пробирок в течение 10-30 с на микроцентрифуге-вортексе. 7.2.5.16 Инкубируйте пробирки при температуре 90 ®С в течение 20 минут. ВНИМАНИЕ! При прогревании пробирок возможно открывание крышек! Рекомендуется использовать пробирки с защёлкивающимися крышками (например, Eppendorf Safe-Lock Tubes) или программируемые термостаты с прижимной крышкой (например, термостат «Гном» производства ООО «НПО ДНК-Технология»). Рекомендуется использовать для термостата программу с активным финальным охлаждением пробирок или аккуратно извлечь пробирки из термостата и дать им остыть в вертикальном положении до комнатной температуры (от 18 ®С до 25 ®С). 26 --- стр. 27 --- ЛИК-ТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 27 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 7.2.5.17 Центрифугируйте пробирки при 16000 х g в течение 1 минуты. Препарат ДНК готов к внесению в реакционную смесь для ПЦР-амплификации. Полученный препарат ДНК допускается хранить при температуре от минус 20 °С до 8°С не более 7 суток. 7.2.5.18 Если образец предполагается использовать более 7 суток, перемешайте содержимое пробирки с нейтрализующим раствором в течение 1-3 с на микроцентрифуге- вортексе. Осадите капли с крышки в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе. 7.2.5.19 Добавьте в каждую пробирку, не касаясь края пробирки, необходимое количество нейтрализующего раствора, исходя из соотношения: 2,0 мкл нейтрализующего раствора на 100 мкл образца или 6,0 мкл нейтрализующего раствора на 300 мкл образца. 7.2.5.20 Тщательно перемешайте содержимое пробирок в течение 10 с на микроцентрифуге-вортексе. Полученный препарат ДНК допускается хранить при температуре от 2 ®С до 8 °С не более месяца, от минус 18®С не более 6 месяцев. Перед использованием препарата ДНК для постановки ПЦР необходимо разморозить его при комнатной температуре (от 18 ®С до 25 ®С) или при температуре от 2 ®С до 8 ®С, перемешать содержимое пробирки в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе и центрифугировать пробирку при 16000 х g в течение 1 минуты. Препарат ДНК готов к внесению в реакционную смесь для ПЦР-амплификации. 8 ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ, ХРАНЕНИЕ И ЭКСПЛУАТАЦИЯ 8.1 Транспортирование 8.1.1 Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при температуре внутри контейнера, соответствующей условиям хранения компонентов, входящих в состав набора реагентов, в течение всего срока годности. 8.1.2 Допускается транспортирование набора реагентов в термоконтейнерах с хладоэлементами при температуре внутри контейнера от 2 ®С до 25 °С не более 5 суток. 8.1.3 Наборы реагентов, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не подлежат. 8.2 Хранение 8.2.1 Набор реагентов следует хранить в холодильнике или холодильной камере 27 --- стр. 28 --- ^»^ДНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 28 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 при температуре от 2 ®С до 8 °С в течение всего срока годности набора реагентов. 8.2.2 Наборы реагентов, хранившиеся с нарушением регламентированного режима, применению не подлежат. 8.3 Указания по эксплуатации 8.3.1 Набор реагентов должен применяться согласно действующей версии утвержденной инструкции по применению. 8.3.2 Для получения достоверных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора реагентов. 8.3.3 После вскрытия упаковки компоненты набора реагентов следует хранить при следующих условиях: компоненты набора реагентов следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 ®С до 8 ®С в течение всего срока годности набора реагентов. 8.3.4 Наборы реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежат 9 УКАЗАНИЯ ПО УТИЛИЗАЦИИ 9.1 При использовании набора реагентов в клинико-диагностической лаборатории образуются отходы класса В, которые утилизируются в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 и МУ 1.3.2569-09. 9.2 Наборы реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе в связи с истечением срока годности, подлежат утилизации в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21. 10 ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ 10.1 Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора реагентов требованиям технических условий при соблюдении условий транспортирования, хранения и эксплуатации, установленных техническими условиями. 10.2 Срок годности набора реагентов - 12 месяцев при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и эксплуатации. 11 РЕМОНТ И ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ Набор реагентов предназначен для однократного использования и не подлежит техническому обслуживанию и текущему ремонту. 28 --- стр. 29 --- ^ ЛИК-ТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 29 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 12 символы, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ МАРКИРОВКЕ НАБОРА РЕАГЕНТОВ | ivd | Медицинское изделие для диагностики in vitro □а Обратитесь к инструкции по применению 1 Температурный диапазон [REF] Каталожный номер V Количество тестов t d Адрес изготовителя Годен до А Не стерильно [lotI Серия набора реагентов А Осторожно! Обратитесь к инструкции по применениюДата изготовления 13 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ ГОСТ Р 2.105-2019 Единая система конструкторской документации. Общие требования к текстовым документам. ГОСТ ISO 14971-2011 Изделия медицинские. Гфименение менеджмента риска к медицинским изделиям. ГОСТ Р 15.013-2016 Система разработки и постановки продукции на производство (СРПП). Медицинские изделия. ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации. ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний. ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования. ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения. ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro. ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании медицинских изделий, на этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные требования. ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) Лаборатории медицинские. Требования безопасности. Примечание - Указанные выше стандарты являлись действующими на момент утверждения инструкции по применению. В дальнейшем, при пользовании документом, целесообразно проверить действие ссылочных нормативных документов на текущий момент. Если ссылочный документ заменён или изменён, то при применении настоящего документа следует пользоваться заменённым (изменённым) документом. 29 --- стр. 30 --- ^ ДНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 30 ПРОБА-ОПТИМА Листов 30 14 АДРЕС для ОБРАЩЕНИЯ Производство наборов реагентов имеет сертифицированную систему менеджмента качества и соответствует требованиям стандарта систем менеджмента качества ISO 9001 в области разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для молекулярно генетической диагностики и другого лабораторного применения и EN ISO 13485 в области разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для медицинской молекулярно-генетической диагностики. Производитель: Общество с ограниченной ответственностью «ДНК-Технология ТС»; ООО «ДНК-Технология ТС», Россия. Адрес производителя: ООО «ДНК-Технология ТС», 117246, Россия, г. Москва, проезд Научный, д. 20, строение 4. Место производства: ООО «ДНК-Технология ТС», 117246, Россия, г. Москва, проезд Научный, д. 20, строение 4. По вопросам, касающимся качества набора реагентов ПРОБА-ОПТИМА, следует обращаться в службу клиентской поддержки. Служба клиентской поддержки: 8-800-200-75-15 (для России, звонок бесплатный), +7 (495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный). E-mail: hotline@dna-technology.ru , www.dna-technology.ru Старший научный сотрудник ООО «НПФ ДНК-Технология» к.б.н. СОГЛАСОВАНО Директор ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России академик РАН, профессор Л.В. Артемова « y / f S ' 2022г. Г.Т. Сухих 2022 г. 30