Набор реагентов для выявления ДНК аденовирусов и бокавируса человека, вызывающих ОРВИ, методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест-ОРВИ ДНК hAdV/hBoV) по ТУ 21.20.23-131-23548172-2020 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2022/18100 от 23.08.2022 · класс риска 2б

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Множественные вирусы связанные с респираторными заболеваниями нуклеиновые кислоты ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 50 контрактов, медианная цена за единицу 11 973 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 2 ---
исследования, высокой специфичностью и чувствительностью. Он может эффективно 
применяться для:
— раннего назначения специфических средств этиотропной терапии, в том числе для 
избегания неоправданного применения антибактериальных препаратов,
— дифференциальной диагностики с другими инфекционными болезнями,
— своевременной госпитализации больных, а также для контроля излеченности и 
коррекции проводимой терапии,
— прогнозирования тяжести течения заболевания, возможных осложнений и исходов 
болезни,
— рационального размещения больных по этиологическому принципу (во избежание 
перекрестного внутрибольничного инфицирования).
Аденовирусы человека (hAdV) это ДНК-содержащие вирусы, которые подразделяют по 
их морфологическим и патогенным свойствам на 7 видов: А, В, С, D, Е, F, G. Аденовирусы 
способны поражать дыхательную и пищеварительную системы, а также вызывают глазные 
инфекции. Виды В, С и Е являются причиной гриппоподобных заболеваний, бронхитов и 
пневмоний. Часто с ними связывают вспыщки ОРВИ в детских дошкольных учреждения, 
домах ребенка, домах престарелых, и в воинских частях.
Бокавирус человека (hBoV) - ДНК-содержащий вирус, принадлежащий к семейству 
Parvoviridae, вызывающий заболевания дыхательной системы преимущественно у детей до 5 
лет. Существует 4 генотипа, респираторные заболевания вызывает бокавирус 1 типа. 
Клинические симптомы инфекции типичны для ОРВИ, однако в ряде случаев она может 
приводить к развитию обструктивного синдрома и нередко характеризуется явлениями 
диспепсии. Наиболее тяжелое течение ОРВИ бокавирусной этиологии отмечается у детей до 
3 лет. Часто hBoV вьывляется в виде микст-инфекций с другими возбудителями 
респираторных заболеваний. У взрослых, тесно контактирующих с больными детьми, может 
вызывать легкие симптомы ОРВИ.
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для выявления ДНК аденовирусов и бокавируса человека, 
вызывающих ОРВИ, методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени 
«РеалБест-ОРВИ ДНК hAdV/hBoV» предназначен для качественного выявления Д1Ж 
аденовирусов (hAdV) и бокавируса (hBoV) человека, вызывающих ОРВИ, выделенной из 
клинических образцов (мазки со слизистой носа и задней стенки глотки, мокрота, 
бронхоальвеолярный лаваж), методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени. 
Набор реагентов используется при диагностике аденовирусной и бокавирусной инфекций у


--- стр. 3 ---
лиц с симптомами ОРВИ.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного 
специфического фрагмента ДНК hAdV и hBoV, заключающегося в повторяющихся циклах: 
температурная денатурация, отжиг праймеров на комплементарные последовательности, 
достройка полинуклеотидных последовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение уровня флуоресценции в 
каждом цикле ПЦР. Увеличение уровня флуоресценции происходит благодаря 
использованию специфичного для данной ДНК гибридизационного ДНК-зонда, который в 
ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную 
специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный краситель, а на 3- 
конце -  гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В 
ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи зонд расщепляется с 5'-конца, благодаря 
5-3'-нуклеазной активности Taq ДНК-полимеразы и происходит разобщение красителя и 
гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию уровня 
флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества 
образовавшихся специфических ампликонов, и динамика нарастания уровня флуоресценции 
определяется исходным количеством ДНК возбудителей инфекции в образце.
Учёт эффективности выделения НК возбудителей инфекции из образцов клинического 
материала обеспечивается внутренним контрольным образцом (ВКО), который входит в 
состав наборов для выделения НК.
2.2. Состав набора:
Компонент набора (сокращение) 
Описание.
Количество
Положительный контрольный образец (ПКО) 
Бесцветная жидкость, содержит натрия азид (0,05%)
1 пробирка, 1 мл
Готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС) 
Лиофилизированная
96 пробирок
Оптическая пленка 1,5 листа
2.3. Условия применения.
Аналитические и диагностические характеристики набора были валидированы при 
вьщелении ДНК из клинических образцов (мазки со слизистой носа и задней стенки глотки, 
мокрота, бронхоальвеолярный лаваж) с использованием наборов: «РеалБест экстракция 100», 
«РеалБест УниМаг» и «РеалБест Сорбитус» производства АО «Вектор-Бест».
Набор применяется с регистрирующими амплификаторами планшетного типа: 
«CFX96» (фирма Bio-Rad, США); «ДТпрайм» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия).


--- стр. 4 ---
Набор рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные образцы.
Показания к применению.
Набор реагентов используется при дифференциальной диагностике аденовирусной и 
бокавирусной инфекций у лиц с симптомами ОРВИ.
Противопоказаний к применению медицинского изделия нет (не применимо).
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая чувствительность:
За аналитическую чувствительность принята величина концентрации целевой НК, для 
которой при экспериментальной проверке на двух сериях набора на 32 повторах для каждой 
серии и каждого из заявленных амплификаторов и наборов для выделения НК был получен 
положительный результат в 100% случаев.
Набор гарантированно выявляет ДНК hAdV и hBoV, в концентрации 25 копий в ПЦР- 
пробе (соответствует 1x10^ копий/мл исходного образца при использовании для выделения 
ДНК наборов «РеалБест экстракция 100», «РеалБест УниМаг» или «РеалБест Сорбитус»), 
что подтверждается при выпуске каждой серии набора реагентов тестированием образцов, 
приготовленных из стандартного образца предприятия с соответствующим содержанием 
вирусной НК.
3.2. Аналитическая специфичность:
Был проведен in silico анализ последовательностей праймеров и зондов по базам 
последовательностей вирусов (грипп А и В, парагрипп 1, 2, 3 и 4 типов, метапневмовирусы, 
респираторно-синцитиальные вирусы, риновирусы и коронавирусы hCoV NL63, hCoV ОС43, 
hCoV 229Е, hCoV HKUl, SARS-CoV-2) и микроорганизмов {Chlamydophila pneumoniae,  
Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila. Streptococcus pneumoniae, Haemophilus  
influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae. Staphylococcus aureus,  
Staphylococcus spp, Streptococcus spp, Prevotella spp, Leptotrichia spp, Corynebacterium spp.  
Neisseria spp),  которые могут присутствовать в респираторном тракте человека. Возможность 
перекрестных реакций исключена.
Аналитическая специфичность выявления ДНК аденовирусов (hAdV) и бокавируса 
(hBoV) человека была подтверждена отсутствием перекрестных ложноположительных 
сигналов при анализе образцов от больных с острыми респираторными инфекциями иной 
этиологии (вирусы гриппа типа А и В, респираторно-синцитиальный вирус (Human 
respiratory syncytial virus), метапневмовирус (Human metapneumovirus), 4 вида вирусов 
парагриппа (Human parainfluenza virus 1 -4), коронавирусы (Human coronavirus 229E, Human 
coronavirus OC43, Human coronavirus NL63, Human coronavirus HKUl, SARS-CoV-2), 
риновирусы (Rhinovirus)).


--- стр. 5 ---
в рамках международной системы контроля качества QCMD (Quality Control for 
Molecular Diagnostics, Великобритания) при анализе респираторных панелей (QCMD 2021 
Respiratory I EQA Programme, QCMD 2021 Respiratory II EQA Programme, QCMD 2021 
Respiratory III EQA Programme) показано наличие специфических сигналов в образцах, 
содержащих аденовирус и отсутствие неспецифических реакций в образцах содержащих 
прочие респираторные патогены (грипп А и В, респираторный синцитиальный вирус, вирус 
парагриппа, коронавирус, метапневмовирус, риновирус, энтеровирус, Legionella pneumophila, 
Streptococcus pneumonia, Haemophilus influenza, Mycoplasma pneumonia, Bordetella pertussis), 
что подтверждено Сертификатом QCMD (Quality Control for Molecular Diagnostics, 
Великобритания).
3.3. Диагностическая чувствительность выявления ДНК аденовирусов (hAdV) человека: 
клинические испытания, проведенные на 54 положительных образцах (мазки со слизистой 
носа и задней стенки глотки, мокрота, бронхоальвеолярный лаваж), содержащих ДНК hAdV, 
показали 100 % чувствительность (интервал 93,4 % - 100 %, с доверительной вероятностью
95 %);
Диагностическая чувствительность выявления ДНК бокавируса (hBoV) человека: 
клинические испытания, проведенные на 56 положительных образцах (мазки со слизистой 
носа и задней стенки глотки, мокрота, бронхоальвеолярный лаваж), содержащих ДНК hBoV, 
показали 100 % чувствительность (интервал 93,6 % - 100 %, с доверительной вероятностью
95 %);
3.4. Диагностическая специфичность выявления ДНК аденовирусов (hAdV) человека: 
клинические испытания, проведенные на 173 отрицательных образцах (мазки со слизистой 
носа и задней стенки глотки, мокрота, бронхоальвеолярный лаваж), не содержащих ДНК 
hAdV, показали 100 % специфичность (интервал 97,9 % - 100 %, с доверительной 
вероятностью 95 %);
Диагностическая специфичность выявления ДНК бокавируса (hBoV) человека: 
клинические испытания, проведенные на 171 отрицательном образце (мазки со слизистой 
носа и задней стенки глотки, мокрота, бронхоальвеолярный лаваж), не содержащем ДНК 
hBoV, показали 100 % специфичность (интервал 97,9 % - 100 %, с доверительной 
вероятностью 95 %;
3.5. Воспроизводимость результатов:
При тестировании в двух независимых постановках двумя разными операторами на 
двух сериях набора образцов в 8 повторах каждый внутрипостановочная, межпостановочная, 
внутрисерийная и межсерийная воспроизводимость, межлабораторная воспроизводимость 
результатов составила 100 %. Коэффициент вариации Ct не более 4 %.


--- стр. 10 ---
8. АНАЛИЗ И УЧЁТ РЕЗУЛЬТАТОВ
8Л. Условия анализа и учёта результатов.
8.1.1. В ПКО программа должна фиксировать:
-  нарастание сигнала амплификации ДНК ВКО (канал «РАМ») и определять значение 
порогового цикла Ct ВКО;
-  нарастание сигнала амплификации ДНК hBoV (канал «КОХ») и ДНК hAdV (канал 
«НЕХ») и определять значение порогового цикла Ct ПКО.
8.1.2. В ОКО программа должна фиксировать нарастание сигнала амплификации ДНК 
ВКО (канал «РАМ») и определять Ct ВКО, при этом программа не должна регистрировать 
нарастания сигнала специфического продукта амплификации по каналам «КОХ» и «НЕХ» с 
Ct меньше или равно 40.
Если для ОКО определяется значение Ct по каналу «КОХ» или «НЕХ» с Ct меньше 40, 
то это свидетельствует о наличии контаминации (см. п. 8.2.4).
8.1.3. В каждом исследуемом образце программа должна фиксировать нарастание 
сигнала амплификации ДНК ВКО (канал «РАМ») и определять Ct ВКО.
8.2. Учёт результатов.
8.2.1 Вычислить (Ct ВКО)ср как среднее значение Ct ВКО всех анализируемых 
образцов (включая ПКО и ОКО). Отбраковке подлежат значения Ct ВКО, отличающиеся 
более чем на 2 от значения (Ct ВКО)ср. После отбраковки пересчитать (Ct ВКО)ср для 
оставшихся значений.
8.2.2. Анализируемый образец считается отрицательным (не содержащим ДНК hAdV и 
hBoV), если для этого образца значения Ct по каналам «КОХ» и «НЕХ» не определяются.
Если для такого образца значение Ct ВКО превышает значение (Ct ВКО)ср более чем 
на 2, то результат по данному образцу не подлежит анализу и учету как отрицательный. 
Необходимо провести повторный анализ данного образца, начиная с этапа выделения ДНК.
8.2.3. Анализируемый образец считается положительным, т.е. содержащим ДНК hBoV, 
если для этого образца значение Ct по каналу «КОХ» меньше или равно 40. Анализируемый 
образец считается положительным, т.е. содержащим ДНК hAdV, если для этого образца 
значение Ct по каналу «НЕХ» меньше или равно 40.
Если для анализируемого образца определяется Ct больше 40, результат следует 
считать неопределенным, рекомендуется проведение дополнительных исследований 
(исследование вновь забранного материала или исследование с использованием другого 
набора реагентов).
8.2.4. В случае контаминации все положительные результаты по данной 
индивидуальной постановке ПЦР считаются недостоверными. Требуется предпринять меры
10


--- стр. 11 ---
по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить анализ всех образцов 
данной постановки, для которых получен положительный результат. Образцы данной 
постановки, анализ которых дал отрицательный результат, следует учитывать, как 
отрицательные.
9. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕ1ШЯ НАБОРА
9.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых 
транспортных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на 
транспорте данного вида, при температуре (2-8) °С. Допускается транспортирование при 
температуре до 26 ®С не более 10 суток.
9.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться 
при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или 
холодильниках, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной 
регистрацией температуры.
9.3. Срок годности набора -  12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение 
наборов по истечении срока их годности.
9.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции 
по применению набора.
9.5. Изделие не требует технического обслуживания и не подлежит ремонту.
10. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
10.1. производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям 
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
10.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, 
возникших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и 
хранения, либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
10.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и 
функциональные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют 
нормативной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием 
скрытого дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест-ОРВИ ДНК hAdV/hBoV», 
следует обращаться в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630117, г. Новосибирск-117, а/я 492,
тел.: (383) 252-51-62, 227-60-30; тел./факс: (383) 252-51-81, 252-51-77;
E-mail: Dlkobtk(a>.vector-hest. ru
11


--- стр. 12 ---
Консультацию специалиста по работе с набором можно получить по тел.: (383) 252-51-75.
Начальник отделения 
производства ПЦР-наборов 
АО «Вектор-Бест»
А.В. Трухина
Директор по производству 
АО «Вектор-Бест» В.К. Ткачев
Директор клинических исследований 
и дополнительных сервисов Дирекции 
ООО «Независимая лаборатория ИНВИТРО»
м.п.
Я.Э. Новикова
12