Набор реагентов "Тест-система иммуноферментная для количественного определения общего простатического специфического антигена (ПСА)" "ИФА-общий ПСА" ТУ 9398-186-70423725-2014 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2015/2753 от 29.06.2015 · класс риска 2б

Производитель: АО "ЭКОлаб" (Россия)

Вид изделия: Общий простатический специфический антиген (ПСА) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 50 контрактов, медианная цена за единицу 6 180 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
"УТВЕРЖДАЮ"
шректор
В.Ю.Борисов 
2021 г.
и н стр у 1 Й й ^;;
по применению набора реагентов
«Тест- система иммуноферментная для количественного определения 
общего простатического специфического антигена (ПСА)»
"ИФА-общий ПСА"
Регистрационное удостоверение №РЗН 2015/2753 от 01.02.2018г.
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «Тест-система иммуноферментная для количественного 
определения общего простатического специфического антигена (ПСА)» "ИФА-общий 
ПСА" предназначен для количественного определения общего простатического 
специфического антигена (ПСА) в сыворотке крови человека с помощью 
иммуноферментного анализа (ИФА) на твердофазном носителе.
Функциональное назначение: диагностика заболеваний предстательной железы. 
Применение изделия не имеет популяционных и демографических ограничений.
Для однократного применения набора по назначению.
Для клинической лабораторной диагностики in vitro.
Показания и противопоказания к применению изделия
Измерение концентрации ПСА в сыворотке крови в динамике используется в 
мониторинге эффективности хирургического или иного лечения, для раннего 
обнаружения рецидива опухоли после радикальной простатэктомии или лучевой терапии, 
а также при скрининге в группах риска.
Противопоказаний не существует.
Потенциальные потребители изделия
Лабораторные подразделения лечебно-профилактических учреждений. 
Профессиональный уровень потенциальных пользователей 
Врач клинической лабораторной диагностики, медицинский лабораторный техник. 
Описание целевого аналита, сведения о его научной обоснованности.
Простатический специфический антиген является полипептидом, состоящим из 237 
остатков аминокислот, имеет несколько дисульфидных мостиков. Белок гликозилирован и 
вырабатывается как нормальными, так и опухолевыми клетками выводных протоков 
желёз простаты. В норме обнаруживается в сыворотке крови в низких концентрациях. 
Содержание ПСА в сыворотке крови значительно повыщается при онкологических 
заболеваниях предстательной железы. Существует корреляция между содержанием ПСА в 
сыворотке крови и степенью злокачественности и распространения опухолевых процессов.


--- стр. 2 ---
СОСТАВ И КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
Иммуносорбент моноклональные антитела к ПСА, 
сорбированные в лунках стрипов 96- 
луночного разборного полистиролового 
планшета для иммунологических реакций с 
плоским дном
12 стрипов
допускается раздельная упаковка стрипов (по 1-4 стрипа в пакете)
Калибровочные 
пробы (КПм; 
КП 40)
буферные растворы, содержащие известную 
концентрацию ПСА. В KHi - 0 нг/мл, в КПг 
- 1,56 нг/мл; в КП з - 3,1 нг/мл; в КП 4 - 6,25 
нг/мл; в КП5- 12,5 нг/мл; в КПб - 25 нг/мл; 
КП40 - 40 нг/мл (значения концентраций 
указываются на этикетках флаконов); 
прозрачные жидкости красного цвета
(КП1) - 1 фл. (10 мл) 
(КП2-б;КП4о) - .
6 фл. (по 0,5 мл)
Контрольный 
положительный 
образец (К"^)
сыворотка крови человека, содержащая ПСА 
в известном диапазоне концентраций 
(указывается на этикетке флакона для каждой 
серии набора); прозрачная или слегка 
опалесцирующая жидкость красного цвета
1 фл. ( 0,5 мл)
Конъюгат мышиные моноклональные антитела к ПСА, 
меченные пероксидазой; прозрачная 
жидкость синего цвета
1 фл. (15,0 мл)
Раствор
индикаторный
(РИ)
раствор, содержащий тетраметилбензидин и 
перекись водорода; прозрачная бесцветная 
жидкость
1 фл. (15,0 мл)
Стоп-реагент прозрачная бесцветная жидкость 1 фл. (15,0 мл)
Одноразовые наконечники для автоматических пипеток 16 шт.
Примечания.
1. Набор включает все реагенты, необходимые для постановки ИФА, кроме очищенной  
(дистиллированной или деионизированной) воды.
2. Все реагенты готовы к использованию.
3. В составе изделия отсутствуют материалы, вступающие в непосредственный или  
опосредованный контакт с организмом пациента и персонала, использующего изделие,  
при выполнении требований эксплуатационной документации (инструкции по  
применению).
4. В составе изделия отсутствуют лекарственные средства и фармацевтические  
субстанции.
Набор укомплектован принадлежностями:
- вспомогательными пластиковыми емкостями (4 шт.),
- клейкой пленкой для планшетов (4 шт.).
Компоненты набора упакованы в коробку, в коробку вложена инструкция по применению 
и бланк калибровочного графика.
ОСНОВНЫЕ ПОТРЕБИТЕЛЬСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Базовый вариант комплектации позволяет одномоментное дублированное 
исследование 48 образцов, включая калибровочные и контрольные (на каждый образец 
используется 2 лунки, при этом на калибровочные и контрольные образцы используется 
14 лунок). Предусмотрена возможность проведения раздельных исследований с 
использованием необходимого количества стрипов:


--- стр. 3 ---
Число стрипов 2 4 6 8 10 12
Число иссл. обр. 1 2-9 10-17 18-25 26-33 34-41
Методы стерилизации изделия
Изделие не требует стерилизации.
Программное обеспечение работы изделия
Отсутствует.
Техническое обслуживание и ремонт изделия
Изделие не требует технического, обслуживания и не подлежит ремонту.
ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Используется «сэндвич» вариант ИФА с двумя видами моноклональных антител , 
полученных к разным эпитопам ПСА. Моноклональные антитела к одному эпитопу 
антигена нанесены на поверхность лунок иммуносорбента, антитела к другому эпитопу 
связаны с ферментом (пероксидазой) и входят в состав конъюгата. При внесении в лунки 
иммуносорбента исследуемого образна сыворотки и конъюгата при наличии в образце 
ПСА происходит образование комплекса /антитело иммуносорбента/-/ПСА/-/антитело 
конъюгата/. Его наличие выявляется по цветной реакции с ТМБ, интенсивность 
окрашивания реакционной смеси пропорциональна концентрации ПСА в образце.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Чувствительность (минимальная определяемая концентрация ПСА) - не более 0,1
нг/мл.
Коэффициент вариации -8 %.
Процент открытия составляет 90-110%
Линейность: зависимость концентрации ПСА в образцах сыворотки крови при 
разведении их калибровочной пробой №1 имеет линейный характер в диапазоне от 1,56 
нг/мл до 25 нг/мл; отклонение от линейности в указанном диапазоне составляет 90-110%
Интерсепт, в пределах 20%: 3,2-5,5
50%: 9,5-13,5 
80%: 17,5-21,5
"Ноок-эффект" (обратно пропорциональная зависимость ОП от концентрации 
аналита, возникающая при высоких его концентрациях) не наблюдается до концентрации 
ПСА 1000 нг/мл.
При исследовании образцов с содержанием гемоглобина 200 г/л, триглицеридов 5,0 
мг/дл; билирубина -7,0 мг/дл; интерференция не наблюдалась.
Коэффициент корреляции результатов составил > 0,95 при постановке
испытуемого набора в ручном режиме и при автоматической постановке.
ИССЛЕДУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Сыворотка крови человека объемом не менее 25 мкл.
Сбор образцов крови должен производиться в соответствии с надлежащей 
практикой методом венепункции (ГОСТ Р 53079.4-2008 «Обеспечение качества 
клинических лабораторных исследований»).
Образцы сыворотки до исследования хранить при температуре от 2 до 8 °С. При 
необходимости хранения образцов более 7 дней рекомендуется разделить их на аликвоты 
и хранить при температуре от минус 20 до минус 70 °С. Размороженные образцы перед 
исследованием нужно тщательно перемешать. При работе с размороженными образцами 
следует учитывать, что каждый цикл оттаивания-замораживания, снижает качество


--- стр. 4 ---
исследуемого материала. С целью получения достоверных результатов исследования 
рекомендуется использовать только однократное замораживание-оттаивание образцов.
Не допускается использование для исследования образцов с повышенным 
содержанием липидов и (или) с признаками гемолиза, и (или) с видимым микробным 
проростом.
Образцы, содержащие осадок, перед анализом отцентрифугировать в течение 10- 
15 мин при 2500-3000 об/мин.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Потенциальный риск применения набора - класс 26 (Приказ М3 РФ №4н от 6 июня 
2012 г.).
Меры предосторожности при работе с набором - соблюдение правил "Инструкции 
по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в 
клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений" (Утв. 
Минздравом СССР 17 января 1991 г.), ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003).
Набор биологически безопасен, однако с исследуемыми образцами необходимо 
обращаться как с потенциально инфицированным материалом.
Контрольный положительный образец (К"^) содержит проклин в концентрации 
0,1 %. Данная концентрация является безопасной.
Стоп-реагент при попадании на незащищенную кожу и слизистые может вызывать 
химические ожоги. В случае попадания на кожу - немедленно промойте пораженный 
участок водой.
Набор реагентов, в соответствие с СанПиН 2.1.3684-21 "Санитарно- 
эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских 
поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, 
атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, 
общественных помещений, организации и проведению санитарно- противоэпидемических 
(профилактических) мероприятий" относится к классу А - отходы, не имеющие контакта 
с биологическими жидкостями пациентов, инфекционными больными и классу Б 
(эпидемиологически опасные отходы) -  инфицированные и потенциально 
инфицированные отходы, материалы и инструменты, предметы, загрязненные кровью 
и/или другими биологическими жидкостями.
Утилизацию или уничтожение, дезинфекцию наборов реагентов следует проводить 
в соответствии с СанПиН 2.1.3684-21 "Санитарно-эпидемиологические требования к 
содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой 
воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, 
эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению 
санитарно- противоэпидемических (профилактических) мероприятий" и МУ-287-113 
"Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации 
изделий медицинского назначения".
СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ
Оборудование и материалы (для "ручной'* постановки)
Дозаторы пипеточные (пипетки полуавтоматические одноканальные на 25 мкл и 
100 мкл и многоканальные на 100 мкл) для внесения реагентов в лунки планшета с 
погрешностью дозирования не более 5 % с наконечниками полипропиленовыми 
одноразовыми.
Ручные, или автоматические промыватели, или восьми- и двенадцатиканальные 
пипеточные дозаторы для промывания лунок планшета.


--- стр. 5 ---
Термостатируемый шейкер орбитального типа, позволяющий проводить 
встряхивание при 400-800 об/мин и температуре 37±1 °С.
Спектрофотометр вертикального сканирования для измерения оптической 
плотности в лунках планшета при 450 нм и/или в двухволновом режиме при основной 
длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620-650 нм.
Центрифуга лабораторная на 2,5-3,0 тыс. об/мин, холодильник бытовой, 
фильтровальная бумага.
Вода очищенная (ФС.2.2.0020Л5).
70 %-ный раствор спирта этилового и 6 %-ный раствор перекиси водорода 
(дез.растворы) или растворы иных дезинфектантов, разрешенных к применению СП 
1.32322-08, кроме хлорсодержащих.
Анализатор иммуноферментный автоматический. «Еволис» (Evolis).
ПРОВЕДЕНИЕ ИФА ("ручная" постановка)
Перед работой извлечь набор из холодильника, вскрыть упаковку и вьщержать все 
реагенты перед проведением анализа не менее 30 мин при температуре от 18 до 25 °С 
(пакет с иммуносорбентом выдерживать при указанной температуре до вскрытия!). 
Жидкие реагенты тщательно перемешать. Извлечь из пакета планшет, вскрыв выше замка 
«zip-lock», и установить на рамку необходимое для проведения ИФА количество стрипов. 
Неиспользованные стрипы немедленно поместить обратно в пакет с влагопоглотителем, 
удалить из него воздух, плотно закрыть «zip-lock» и поместить в холодильник.
Сохранность иммуносорбента между операциями 15 мин.
Исследуемые образцы с концентрацией ПСА, выходящей за пределы калибровки, 
предварительно развести КП| таким образом, чтобы измеряемая концентрация ПСА 
находилась в пределах от 1,56 нг/мл до 25 нг/мл)
Внимание! Соблюдение указанных ниже температуры и времени инкубации  
планшетов на каждой стадии постановки крайне важно для получения достоверных  
результатов.
Рекомендуемая схема внесения образцов при использовании 12 стрипов
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
А КП1 КП1 И02 И02 иою иою иои ИОИ И026 И026 И034 И034
В КП2 КП2 ИОЗ ИОЗ иои ион иою ИОЮ И027 И027 И035 И035
С КПЗ КПЗ И04 И04 И012 иою ИО20 ИО20 И028 И028 И036 И036
D КП4 КП4 И05 И05 И013 И013 И021 И021 И029 И029 И037 И037
Е КП5 КП5 И06 И06 ИОИ иои И022 И022 иозо ИОЗО ИОЗ 8 И038
F КП6 КП6 И07 И07 иои иои И023 И023 И031 И031 И039 И039
G к+ к+ И08 И08 иои иои И024 И024 И032 И032 ИО40 ИО40
Н И01 И01 И09 И09 И017 И017 И025 И025 ИОЗЗ ИОЗЗ И041 И041
При необходимости расширения диапазона калибровки дополнительно  
используется калибровочная проба КП 40>  В таком случае КП40 вносят в лунки G1, G2,  
К'*' вносят в лунки HI, Н2.
1. Внести в лунки планшета (как можно ближе ко дну каждой лунки) по 25 мкл 
контрольных проб и исследуемых образцов в соответствии со схемой их внесения и 
добавить в каждую лунку по 100 мкл конъюгата.
Внимание! Максимальная воспроизводимость результатов обеспечивается  
соблюдением одного и того же порядка внесения реагентов. Общее время внесения  
образцов на должно превышать 15 мин. В противном случае калибраторы следует  
вносить в отведенные для них лунки после пипетирования первой половины проб.  
Если для анализа используется больше одного планшета, калибровку следует  
выполнять для каждого планшета.


--- стр. 6 ---
2. Инкубировать планшет при температуре 37°С на шейкере при 500 об/мин в 
течение 1  ч.
3. По окончании инкубации удалить содержимое лунок в контейнер для сбора 
жидких отходов и промыть лунки 5 раз водой очищенной, заполняя лунки до краев и 
выдерживая их с водой каждый раз по 30 с.
4. Внести во все лунки по 100 мкл РИ и выдержать стрипы 15-20  мин в 
защищенном от света месте при температуре от 18 до 25®С или 15 мин в термошейкере 
при температуре 37°С.
5. Добавить по 100 мкл стоп-реагента в кавдую лунку, соблюдая 
последовательность и скорость внесения в них РИ и не более чем через 15 мин 
приступить к учету результатов.
Регистрация и учет результатов
Результаты ИФА регистрировать спектрофотометрически, измеряя оптическую 
плотность (ОП) при двух длинах волн - 450 нм и 620-650 нм. При отсутствии референс- 
фильтра на 620-650 нм оптическую плотность (ОП) измерять при длине волны 450 нм, а 
выведение спектрофотометра на нулевой уровень ("бланк") осуществлять по воздуху. 
Результаты ИФА учитывать при следующих условиях:
ОП450Н М  КП| - менее 0,150.
ОП450Н М  КПб - более 0,700.
В противном случае исследование необходимо повторить.
Построить калибровочную кривую по точкам, ординатами которых являются 
полученные в ИФА значения ОП КП, а абсциссами - концентрации ПСА в этих пробах, 
указанные на этикетках флаконов, и определить по данной кривой концентрации ПСА в 
и исследованных образцах (для разведенных образцов полученную по графику 
концентрацию ПСА необходимо умножить на степень разведения образца).
При наличии соответствующих компьютерных программ расчета концентрации 
ПСА по результатам ИФА использовать эти программы. Для построения калибровочной 
кривой рекомендуется использовать метод линейной регрессии (при использовании 
калибратора КП 40 рекомендуется использовать метод кусочно-линейной аппроксимации).
Полученные значения концентраций ПСА в исследуемых образцах учитывать 
только при условии попадания полученного значения концентрации ПСА в в диапазон 
концентраций на этикетке флакона.
Интерпретация результатов
Содержание ПСА в норме 0,2-4,0 нг/мл.
Допустимые нормальные значения ПСА зависят от возраста:
мужчины от 40 до 49 лет - 2,5 нг/мл;
мужчины от 50 до 59 лет - 3,5 нг/мл;
мужчины от 60 до 69 лет - 4,5 нг/мл;
мужчины от 70 до 79 лет - 6,5 нг/мл.
Более высокие концентрации указывают на возможность наличия 
доброкачественной гиперплазии простаты или рака простаты.
Примечание: Каждой лаборатории рекомендуется самостоятельно
определять диапазон нормальных концентраций ПСА с учетом используемого 
оборудования, способа взятия крови и методики анализа.
ПОСТАНОВКА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИФА-АНАЛИЗАТОРОВ
Подготовить прибор в соответствии с инструкцией по эксплуатации, ввести 
программу анализа, соответствующую используемому набору, и провести анализ.


--- стр. 7 ---
СРОК годности
срок годности набора - 18 месяцев. Набор с истекшим сроком годности 
применению не подлежит.
ХРАНЕНИЕ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ
Хранение
Замораживание не допускается.
Хранение наборов дол^о осуществляться в холодильных камерах или 
холодильниках, обеспечивающих регламентируемый температурный режим, в упаковке 
предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности.
После вскрытия упаковок неиспользованные реагенты допускается хранить в 
плотно закрытых упаковках в холодильных камерах или холодильниках, обеспечивающих 
регламентируемый температурный режим, при температуре от 2 до 8 °С до 6 мес.
Транспортирование
Транспортирование наборов - при температуре от 2 до 8°С транспортом всех 
видов в крытых транспортных средствах в соответствии с правилами перевозок, 
действующими на транспорте данного вида. Допускается транспортирование при 
температуре от 9 до 25®С в течение 15 суток.
УСЛОВИЯ ОТПУСКА
Для учреждений здравоохранения.
ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Набор реагентов «Тест-система иммуноферментная для количественного 
определения общего простатического специфического антигена (ПСА)» "ИФА-общий 
ПСА" соответствует ТУ 9398-186-70423725-2014 с изм. №,1 № 2 национальным 
стандартам РФ и нормативным документам в части требований безопасности и 
эффективности.
По вопросам, касающимся качества и обращения набора реагентов "ИФА-общий 
ПСА" следует обращаться по адресу: 142530 Московская обл., г. Электрогорск, ул.  
Буденного, д. 1-1 а. Закрытое Акционерное Общество «ЭКОлаб» (ЗАО "ЭКОлаб");  
8(49643) 3-23-11: 3-30-93; тел./ факс (49643)3-30-85; тел. 8-800-333-33-47, ekolab-  
sekretar(^.mail. ru.
При предъявлении рекламации по поводу несоответствия физических и 
специфических характеристик набора реагентов заявленным для проведения 
объективного расследования производителем причин несоответствия потребитель должен 
предоставить:
1. набор реагентов той серии, на которую предъявляется рекламация; 
все спорные исследуемые образцы пациентов;2.
3.
4.
протоколы анализа с указанием наименования, с^ри^^ррков годности 
использованного набора реагентов.
протоколы исследования с использованием 
указанием серии, сроков годности, произво;
Директор ЗАО "ЭКОлаб" по научной работе 
"СОГЛАСОВАНО"
Генеральный директор ООО «ВЫМПЕЛ-МЕД
О У 2021г.
оров реагентов с 
it;^ наборов реагентов.
^ С.Г. Марданлы
/ П.К. Варнавичус


--- стр. 8 ---
КРАТКАЯ СХЕМА ПОСТАНОВКИ ИФА 
(ИФА-общий ПСА)
Использовать только после тщательного ознакомления с инстоукнией!
Внести в соответствии со схемой постановки по 25 мкл KHi^, КП 40, 
исследуемых образцов и по 100 мкл конъюгата
Инкубация 1 ч, 37 на шейкере при 500 об/мин
Промыть 5 раз водой очищенной
Внести по 100 мкл РИ в каждую лунку
Инкубация 15-20 мин, 18-25*^С в защищенном от света месте или 15 мин в 
термощейкере при температуре 37^С
Внести по 100 мкл стоп-реагента в каждую лунку
Измерить ОП при 450 нм (референс 620-650 нм), «бланк» - по воздуху


--- стр. 10 ---
о
p S n J b. ПСА
ОнкоИФА-о6и|ИЙ ПСА В-12.2015-02
«УТВЕРЖДЕНА»
Приказом Росздравнадэора 
от «18» апреля 2012г. № 1820-Пр/12
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ 
НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО 
ИММУНОФЕРМЕНТНОГО 
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ОБЩЕГО ПРОСТАТ-СПЕЦИФИЧЕСКОГО АНТИГЕНА 
В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА 
(«ОнкоИФА-общий ПСА»)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов «ОнкоИФА-общий ПСА»
предназначен для количественного определения общего 
простат-специфического антигена (ПСА) в сыворотке крови 
человека методом твердофазного иммуноферментного 
анализа.
1.2. ПСА представляет собой гликопротеин с молеку­
лярной массой около 32 000 Да, состоящий из одной 
полипептидной цепи. ПСА является сериновой протеазой, 
продуцируемой эпителием человеческой простаты. В норме


--- стр. 11 ---
се1фетируется в семенную жидкость в высоких 
юнцентраииях. где он является ферментативно активным, и 
нэфямую вовлечен в разжижение семенного сгустка. В 
фовото1№ ПСА присутствует в низких концентрациях. 
Увеге^^ение от^енграции ПСА в сыворотке крови 
свидетельствует о патологиях простаты, таких как 
доброкачественная гиперплазия и злокачественное 
перерождечие ткам 1 простаты. Определение ПСА широко 
используется для о6каружем4Я и мониторинга пациентов с 
раком простаты.
Показано, что ПСА образует стабильные комплексы с 
различными t»CM6HropeNM протеаз. Основная часть ПСА в 
съаорсгпсе крови человека присутствует в виде комплекса с 
о>-акткхииотртсмном (ПСА-АХТ). Однако существует 
больиая раэ»мца а соотуюшивы свобсдного ПСА и ПСА-АХТ 
комплекса средни различных naiamnoe. Доля свободного ПСА 
выше в случае ^уэброкэчеспюпюй г>В 1ерллазии в сравнении с 
раком простаты.
1Л. Набор сОнюИФА-общий ПСА» рассчитан на 
проведение анализа в дубликатах 40 неизвестных. 
6 калибровочных проб, одной пробы контрольной сыворотки и 
одной пробы для определения оптической плотности 
раствора ТМБ при использовании всех стрипов 
одновременно (всего 96 определений).
Примечание: в  случае дробного применения набор может  
быть использован только в течение месяца после  
вскрытия компонентов набора.
ПСА B-12.2015-Q2
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
ОнкоИФА-оби«« ПСА B-12.201S-02
2.1.Принцип действия
В наборе «ОнкоИФА-общий ПСА» использован «сэндвич»- 
вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Для 
реализации этого варианта использованы два 
моноклональных антитела с различной эпитопной 
специфичностью к ПСА. Одно из них иммобилизовано на 
твердой фазе (внутренняя поверхность лунок), второе 
конъюгировано с пероксидаэой хрена. В лунках, при 
добавлении исследуемого образца и конъюгата анти-ПСА- 
пероксидаза. во время инкубации одновременно происходит 
иммобилизация ПСА. содержащегося в исследуемом 
образце, и связывание образовавшегося комплекса с 
конъюгатом.
Несвяэавшиеся компоненты удаляются промывкой. 
Количество связавиюгося конъюгата прямо пропорционально 
количеству ПСА в исследуемом образце (Рисунок 1).
[— <о:
I  ПСА
Планшет с антителами 
к ПСА
анти-ПСА-пероксидаэа
Рисунок 1. Схема анализа
Во время инкубации с раствором ТМБ происходит 
окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо 
пропорциональна концентрации ПСА в анализируемых 
пробах. После измерения оптической плотности раствора в


--- стр. 12 ---
» A 4 A if« n C A B-12^1S42
/jTHKax на основании калибровочного графика 
грассчитывается концентрация ПСА в исследуемых образцах.
2.2. Состав набора
• комплект из двенадцати восьмилукочных стрипов в 
рамке с иммобилизованными на внутренней поверхности 
лунок моноклональными антителами к ПСА, маркирован 
сСтрипы с моноклональными антителами к ПСА» — 
1 упаковка;
• калибровочные г^>обы (КП), содержащие известные 
количества ПСА. Флаконы маркированы «Калибровочная 
проба №1». «Калибровочная проба №2». «Калибровочная 
проба №3». <Ка;и<бровочиая проба №4», «Калибровочная 
г^юба №5». <Кат«брово^«ая проба Ыв6>; точные значения 
концентратам ПСА в калибровочных пробах указаны на 
этикетках флаконов, ориентировочные - 0; 1; 2.5; 5; 10; 
30 нг/мл - 6 флаконов (лиофилюованные препараты или 
жидкости по 0,5 мл);
• конъюгат антн-ЛСА-лероксидаза, маркирован «Конъю­
гат Е» — 1 флакон (14 мл);
• водно-солевой раствор для разведения образцов 
сыворотки крови, маркирован «Буфер Д» — 1 флакон 
(3.0 мл);
• концентрированный водно-солевой раствор для 
промывки лунок, маркирован «Буфер Р» — 1 флакон (14 мл);
• раствор тетраметилбенэидина, маркирован «Раствор 
ТМБ» — 1 флакон (14 мл);
• стоп-реагент (1 Н соляная кислота), маркирован «Стоп- 
реагент» — 1 флакон (14 мл);
• контрольная сыворотка с известным содержанием ПСА,
маркирована «Контрольная сыворотка» — 1 флакон
(лиофилизованный препарат или жидкость 0,5 мл);
• прозрачный пластиковый пакет с замком (при упаковке 
стрипов в пакет из 2-слойного полиэтилена).
ОмюИФА-общиА ПСА В-12.2015Ч12


--- стр. 13 ---
ОнкоИФА-общий ПСА B-ia.2015-02
ОнкоИФА-обший ПСА
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ 
ХАРАКТЕРИСТИКИ
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ
3.1. Специфичность. Оба моноклональных антитела, 
использованные в наборе, демонстрируют эквимолярное 
взаимодействие, как со свободным ПСА, так и с ПСА-АХТ 
комплексом.
3.2. Коэффициент вариации результатов определения ПСА 
в одном и том же образце сыворотки крови человека с 
использованием набора «ОнкоИФА-общий ПСА» не 
превышает 8%.
3.3. Линейность. Зависимость концентрации ПСА в 
образцах сыворотки крови при разведении их буфером Д 
имеет линейный характер в диапазоне концентраций 
калиброеочньос проб Ns2 - №6 и составляет 90-110%.
3.4. Точность. Данный » 1алитический параметр прове­
ряется тестом на «открытие» ПСА — проверка соответствия 
значения определяемой концентрации ПСА расчетной 
величине, полученной путем смешивания равных объемов 
контрольной сыворотки и калибровочной пробы №3. Процент 
открытия составляет 90-110%.
3.5. Чувствительность. Минимальная достоверно опре­
деляемая набором концентрация ПСА в сыворотке крови 
человека не превышает 0,2 нг/мл.
3.6. Хук-эффект высоких концентраций. В наборах реа­
гентов, основанных на «сэндвич»-принципе анализа, при 
высоких концентрациях аналита зависимость величины оп­
тической плотности от концентрации становится обратно 
пропорциональной (так называемый хук-эффект высою 1х 
концентраций). При использовании набора «ОнкоИФА-общий
ПСА» хук-эффект не обнаружен вплоть до концентрации 
ПСА 1200 нг/мл.
3.7. Диапазон ожидаемых значений. Диапазон значений 
концентраций ПСА до 4 нг/мл был определен как нормаль­
ный. Концентрация ПСА от 4 нг/мл до 10 нг/мл характерна 
для незлокачественных урологических заболеваний; выше — 
для злокачественных опухолей простаты.
Диапазон ожидаемых значений зависит от многих 
факторов: специфичности метода, особенностей
исследуемой популяции, точности метода в конкретной 
лаборатории. По этой причине каждой лаборатории 
рекомендуется использовать предоставленные
изготовителем значения только' до тех пор, пока 
специалистами лаборатории не будут определены диапазоны 
ожидаемых значений, характерных для конкретной популяции 
в месте расположения лаборатории.


--- стр. 14 ---
ВАобщ ийПСА В-12.201
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора — класс 26.
4.2. Все компоненты набора в используемых 
концентрациях являются нетоксичными.
4.3. При работе с набором следует соблюдать ГОСТ Р 
52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования 
безопасности».
4.4. Стоп-реагент представляет собой 1 Н раствор соляной 
кислоты. Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и 
слизистые. В случае попадания стоп-реагента на кожу и 
слизистые необходимо промыть пораженный участок 
большим количеством проточной воды.
4.5. При работе с набором следует надевать одноразовые 
резиновые или пластиковые перчатки, т.к. производные 
крови, входящие в состав набора, и исследуемые образцы 
являются потенциально инфицированным материалом, 
способным длительное время сохранять и передавать 
возбудителей различных вирусных инфекций.
4.6. Химическая посуда и оборудование, которые 
используются в работе с набором, должны быть 
соответствующим образом маркированы и храниться 
отдельно.
4.7. Запрещается прием пищи. использование 
косметических средств и курение в помещениях, 
предназначенных для работы с наборами.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
• Спектрофотометр вертикального сканирования, 
позволяющий измерять оптическую плотность раствора в 
лунках при длине волны 450 нм;
• прибор для встряхивания рамки со стрипами 
(термостатируемый шейкер), позволяющий производить 
встряхивание со скоростью 400-800 об/мин при температуре 
+37"С;
• пипетки полуавтоматические одноканальные со
сменными наконечниками с изменяемым объемом отбора 
жидкостей; на 5-50 мкл; на 40-200 мкл; на 200-1000 мкл; на 
1000-5000 мкл;
• пипетка полуавтоматическая восьмиканальная со 
сменными наконечниками, позволяющая отбирать объемы 
жидкост до 300 мкл;
• цилиндр мерный, позволяющий отмерять объемы 50- 
500 мл;
• стакан стеклянный подходящего объема;
• вода дистиллированная:
• бумага фильтровальная;
• перчатки резиновые или пластиковые;
• 1% раствор гипохлорита натрия или 6% раствор перекиси 
водорода;
• контейнер для дезинфекции:
• ванночки для внесения реагентов восьмиканальной 
пипеткой.
ОмаИФА-общий ПСА B-12.201S42


--- стр. 15 ---
б. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
в. 1. Забор крови и9 вены осуществляют с соблюдением 
^фавил асептики. После формирования сгустка сыворотку 
отделяют путем центрифугирования. После центрифуги­
рования сыворотку переносят в отдельную пробирку.
6.2. Для проведения анализа не следует использовать 
плазму крови, гемолиэированную или мугн^ сыворотку, а 
также образцы сыворотки, содержащие азид натрия.
6.3. Образцы сыворотки крови разрешается хранить при 
температуре +2...8*С не более 2-х суток; при необходимости 
более длительного хранения (до 3-х месяцев) рекомендуется 
аликвотировать образец и хранить в замороженном виде при 
температуре -20*С и ниже. Не допускается повторное 
замораживание образца.
»Ач1ви|Ий ПСА В-12.2015-02
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Подготовка реагентов
7.1.1. Стрипы. Перед вскрытием пакет со стрипами 
необходимо выдержать при комнатной температуре 
(■«■18...25*С) не менее 30 минут. Вскрыть пакет и переставить 
на свободную рамку необходимое количество стрипов.
7.1.2. Жидкие калибровочные пробы и контрольная 
сыворотка готовы к использованию.
Для восстановления лиофилизованных калибровочных 
проб и контрольной сыворотки перед вскрытием флаконов 
легким постукиванием стряхнуть частицы, прилипшие к 
стенкам флаконов или к крышкам. Открыть флаконы и 
положить крышки перевернутыми на сухую поверхность. В 
каждый флакон с калибровочной пробой и контрольной 
сывороткой внести по 0.5 мл дистиллированной воды и 
закрыть крышками. Выдержать флаконы в течение 10 минут 
при комнатной температуре (-«■18...25*С) без перемешивания. 
Затем, аккуратно наклоняя и вращая флаконы, перемешать 
их содержимое до полного растворения, избегая 
пенообразования. В течение следующих 10 минут выдержать 
флаконы при комнатной температуре, периодически 
перемешивая.
7.1.3. Конъюгат готов к использованию. Расход конъюгата 
на один стрип составляет 1,15 мл.
7.1.4. Буфер Д готов к использованию.
7.1.5. Промывочный раствор. Необходимое количество 
буфера Р развести дистиллированной водой в 20 раз.
Например:
5 мл буфера Р 95 мл дистиллированной воды.
ОикоИФА-обший ПСА 3.12.2015.02


--- стр. 16 ---
Тщательно перемешать, избегая пенообразоеания.
7.1.6. Раствор тетраметилбензидина (ТМБ) готов к 
использованию. Расход ТМБ на один стрип составляет 
1,15 мл.
7.1.7. Стоп-реагент готов к использованию. Расход стоп- 
реагента на один стрип составляет 1,15 мл.
7.1.8. Все реагенты перед проведением анализа дол>№ы 
быть тщательно перемешаны и доведены до комнатной 
температуры.
7.1.9. Разведение исследуемых образцов сывороток крови. 
Если по предварительным данным или по результатам 
анализа (см. п. 9.3.) значения концентрации ПСА в 
исследуемых образцах выше КП №6, образцы следует 
последовательно развести буфером Д в 5 и в 25 раз;
Образец №1 (разведение в 5 раз); 
120 мкл буфера Д 30 мкл исследуемого образца.
Образец Ns2 (разведение в 25 раз); 
120 мкл буфера Д + 30 мкл Образца №1.
При каждом разведении необходимо тщательное пере­
мешивание.
Разводить образцы сыворотки крови следует только в день 
проведения анализа.
Если после измерения оптическая плотность Образца №2 
остается выше ОП КП №6, то следует продолжить 
разведение и приготовить следующие образцы:
Образец №3 (разведение в 50 раз);
50 мкл буфера Д + 50 мкл Образца №2
Образец №4 (разведение в 100 раз):
50 мкл буфера Д + 50 мкл Образца Ns3
/ф«0ИФАч1вши* ПСА 6-1^201542
Примечание: при разведении образцов необходимо  
ставить в анализ оба разведенных образца (е 5 и 25 раз или 
в 50 и 100 раз. соответственно).
Допускается использовать другие разведения. Если 
концентрация в образце определяется по разведениям, то 
сначала необходимо выбрать те образцы, для которых 
полученное значение ОП попадает в диапазон ОП КП №2 - 
ОП КП №6. Затем умножить концентрацию выбранного 
образца, полученную в анализе, на фактор разведения. Если 
разведений, отвечающих этому условию, несколько, 
необходимо взять среднее арифметическое полученных 
после умножения на соответств^щие факторы разведения 
концентраций.
На странице 22 приведена схема проведения анализа.
7.2. Постановка анализа
I 7.2.1. Составить протокол маркировки лунок. Лунки 
« промаркировать следующим образом;
А1.А2- №1 - для измерения величины оптической 
плотности раствора ТМБ;
В1,В2- №2 • для измерения величины оптической 
плотности КП №1:
С1, С2 - №3 - для измерения величины оптической
плотности КП №2;
D1, D2 -  №4 - для измерения величины оптической
плотности КП №3;
Е1. Е2- №5 - для измерения величины оптической 
плотности КП №4;
F1.F2- №6 - для измерения величины оптической
ОмюИОА-общий ПСА B -12i01542


--- стр. 17 ---
^ ПЛОТНОСТИ КП №5;
^ G1.G2 -  № 7 - для измерения величины оптической
плотности КП №6;
Н1, Н2 -  №6 - для измерения величины оптической
плотности контрольной сыворотки.
7.2.2. Во все лунки, кроме лунок А1 и А2. внести по 100 мкл 
конъюгата.
7.2.3. Внести в соответствующие лунки по 20 мкп 
калибровочных проб и контрольной сыворотки, в оставшиеся 
лунки -  по 20 мкл исследуемой сыворотки крови в 
дубликатах.
Примечание : общее время внесения калибровочных  
проб, контрольной сыворотки и исследуемых сывороток  
крови не должно превышать 15 минут, иначе время  
инкубации разных образцов будет значительно  
различаться, что приведет к неправильным результатам.
7.2.4. Инкубировать стрипы в течение 60 минут при 
встряхивании в термостатируемом шейкере при 
температуре +37**С со скоростью 500~800 об/мин.
7.2.5. По окончании инкубации удгшить содержимое лунок в 
контейнер с дезинфицирующим раствором (1% раствором 
гипохлорита натрия или 6% раствором перекиси водорода) и 
промыть лунки пять раз. При каждой промывке во все лунки 
добавлять по 300 мкп промывочного раствора, 
приготовленного по п. 7.1.S., встряхнуть рамку на шейкере в 
течение 5-10 секунд с последующим декантированием. 
После последнего декантирования тщательно удалить 
остатки жидкости из лунок постукиванием рамки со стрипами 
в перевернутом положении по фильтровальной б^аге.
ЗиоИ«А-о6|Д*«ПСА В-12.г015-02
Допускается промывка лунок при помощи автоматического 
промывочного устройства.
7.2.6. Немедленно внести во все лунки по 100 мкл раствора 
ТМБ. Инкубировать стрипы в темноте при комнатной 
температуре (+18...25'С) в течение 15-30 минут в 
зависимости от степени развития окраски.
7.2.7. Добавить во все лунки с той же скоростью и в той же 
последовательности, как и раствор ТМБ, по 100 мкл стоп- 
реагента для остановки ферментной реакции, перемешать на 
шейкере в течение 1-2 минут при комнатной температуре.
7.2.8. Если невозможно измерить оптическую плотность в 
лунках планшета непосредственно после выполнения 
п. 7.2.7., то следует иметь в виду, что окраска в лунках 
планшета стабильна не более 20 минут при комнатной 
температуре.
Примечание: максимальная оптическая плотность не  
должна превышать пределов линейного измерения  
спектрофотометра. Рабочий диапазон спектрофотометра 
необходимо уточнять в паспорте прибора. Рекомендуемая  
максимальная оптическая плотность не более 2,5 ед. 0/7.
ОнтоИФА-овщий ПСА B-12.201M2