Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического материала "НК-Экстра" по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2021/15428 от 24.09.2021 · класс риска 2а

Производитель: ООО "ТЕСТГЕН" (Россия)

Вид изделия: Набор для экстракции/изоляции нуклеиновых кислот ИВД

Назначение: Набор реагентов «НК-Экстра» предназначен для выделения ДНК/РНК из клинического материала человека (венозная кровь, плазма венозной крови, мокрота, мазки из носоглотки, мазки из ротоглотки, мазки со слизистой оболочки влагалища, соскоб из цервикального канала, соскоб из уретры, клеточный осадок мочи, секрет предстательной железы) методом, основанном на обратимом связывании нуклеиновых кислот с поверхностью магнитных частиц, для последующего проведения анализов в клинической лабораторной диагностике методом обратной транскрипции (РНК), полимеразной цепной реакции (ДНК).

В госконтрактах 44-ФЗ: 40 контрактов, медианная цена за единицу 15 898 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

"УТВЕРЖДАЮ"
Генеральный директор ООО "ТестГен"
юповский А.Н.
ЮНЯ 2021 г.
1
Макет этикеток упаковки изделия медицинског
Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического материала «НК-Экстра»
по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
Макет этикеток первичной упаковки компонентов набора реагентов
Набор реагентов «НК-Экстра», Форма комплектации 1: Комплект реагентов «НК-Экстра-М» для
ручного выделения и выделения с использованием автоматизированных станций
пробоподготовки.
T^li^ «НК-Эистра» |IVD| Tcprla «НК-Экстра» |fVD| ТкгЩ «НК-Экстра» «НК-Экстра» [Щ
-----------Форма комплектации 1 Форма комплектации 1 —— Форма комплектации 1 -jii » Форма комплектации i
Раствор для промывки №1 Буфер для связывания Раствор для промывки №2 Раствор для промывки №2
68 мл 48 мл 68 мл 68 мл
202104-9б22022-04 ОТ 2 ДО 30°С 202104-9eS2022-04 от 2 до 30% 202104-9б22022-04^ от 2 до 30% 202104-9б22022-04^ ОТ 2 ДО 30%
ХкгЩ «НК-Экстра» |1УР|
Форма комплектации 1
Элюент
21 мл
||-ОТ| 7n?1fUI.Qfi27n??.fld-i^ от2доЗО^
т "НК-Экстра" kv
J Магнитные частицы
№
с 960 мкл
2 Лот: 202104-96
Набор реагентов «НК-Экстра», Форма комплектации 2: Комплект реагентов «НК-Экстра-KF-
п» (нераскапанный) для автоматизированного выделения с использованием процессора маг­
нитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков Kingfisher Flex
l№f{^ «НК-Экстра» Тк71Ь «НК-Экстра» 1^^)| IjpriEH «НК-Экстра» (i^l «НК-Экстра» [Ш
Форма комплектации 2' ~] Форма комплектации 2 Форма комплектации 2 Форма комплектации 2
Растеор для промывки №1 Буфер для связывания Раствор для промывки №2 Раствор для промывки №2
68 мл 48 мл 68 мл 68 мл
5^202104-97S2022-04'i' от2доЗО% [к^и 202104-97&022-04^ от 2 ДО 30% [к?и202104-97S2022-04\ от2до30% 1к21| 202104-97^2022-04-1^ ОТ 2 ДО 30%
1^|Г^ «НК-Экстра» |1У0| TEpibi «НК-Экстра» 1>УР| Т(рГ^ «НК-Экстра» |1УР| Ткг^ «НК-Экстра»
Форма комплектации 2-j|j Форма комплектации 2 -----------Форам комплектации 2 ’-дц __ Форма комплектации 2 --Д|
Элюент Глубокий планшет 96 Планшет (200 мкл} для Гребенка наконечников
21 мл для KingFisher, 5 шт. KingFisher 96,1 шт. для магнитов
OW цля KF 96,1 шт
it®lJ
202104-97^^022-04-1 от 2 ДО 30% lk£Il 202104-9732022-04-1^ от2до 30% 1к®1] 202104-9722022-04-1^ ОТ2доЗО% (^202104-9722022-04-1^ от 2 до 30%
т
''НК-Экстра" Lc'
J Магнитные частицы
2 960 мкл
Лот: 202104-97
Я
Набор реагентов «НК-Экстра», Форма комплектации 3: Комплект реагентов «НК-Экстра-KF-
г» (раскапанный) для автоматизированного выделения с использованием процессора магнит­
ных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков KingFisher Flex
«НК-Экстра» 1>УР| «НК-Экстра» 1^1 «НК-Экстра» «НК-Экстра» 1УР|
Форма комплектации 3 _ _ _ Форма комплектации 3 Форма комплектации 3 ' Форма комплектации 3-Д||
Планшет 1 - Магнитные Планшет 2 - Буфер для'" Планшет 3 - Раствор для Планшет 4 - Раствор для
частицы связывания промывки №1 промывки N22
98-луночный планшет, по 100 мкл 96-луночный планшет, по SO0 мил 96-луночный планшет, по 700 мкл 96-луночный планшет, по 700 мкл
рестеора а каждой лунке раствора а каждой лунке раствора в каждой тине раствора в каждой лунке
202009-134 22022-О1^От2до ЭОЧ: [т] 202009-134 22022-01 4' от2доЗО°С 1^211 202009-134 22022-01 Л от2до30< 202009-134 22022-01 4^ от 2 до 30°С
Т[рГ& «НК-Экстра» Ткт1% «НК-Экстра» Ttprlot «НК-Экстра» ТютЛц «НК-Экстра» 1*УО|
-----------Форма комплектации 3 др —а..— Форма комплектации 3 Форма комплектации 3-Д|| Форма комплектации 3
Планшет 5 - Раствор для Планшет 6 - Элюент Планшет (200 мкл) для Гребенка наконечников
промывки №2 96-луночныЙ планшет. гк> 200 мкл KingFisher 96,1 шт. для магнитов
96-луночный планшет, по 700 мкл раствора 9 каждой лунке DW для KF 96,1 шт
растеора а каждой лунке
202009-134 S2022-OI ОТ 2 ДО 30^ |Щ] 202009-134 2г022-01 4" от 2 ДО ЗОЧ: 1Ч>Т| 202009-134 22022.01 4"от2доЗО^ [1211 202009-134 22022-01 4 от2доЗОЧ:
Макет этикетки вторичной (потребительской) упаковки
Набор реагентов «НК-Экстра», Форма комплектации 1: Комплект реагентов «НК-
Экстра-М» для ручного выделения и выделения с использованием автоматизирован­
ных станций пробоподготовки.
На потребительскую упаковку (картонная коробка по ГОСТ 33781-2016 размером
250x100x99 мм) наклеивают этикетку из бумаги по ГОСТ 7625 размером 80x80 мм.
Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из
к«1ИНИческого материала «НК-Экстра»
по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
Форма комплектации 1: Комплект реагентов «НК-
Экстра-М» для ручного выделения и выделения с
исполыованием автоматашрованиых станций
пробоподготовки
Состав набора;
LOT 202104-96
Буфер для
V.4 i флакон, 48 мл
2021-04 связывания
Магнитные частицы.
т 2022-04 1 пробирка, 960 мкл
МЧ
96 Раствор для
1 флакон, 68 мл
промывки №1
От 2 до 30”С
X Раствор для
2 флакона по 68 мл
промывки К°2
ОЕ IVD
Элюент 1 флакон, 21 мл
РУ У.
Только для in vitro диагностики
Только для профессионального применения
Набор реагентов «НК-Экстра», Форма комплектации 2: Комплект реагентов «НК-
Экстра-KF-u» (нераскапанный) для автоматизированного выделения с использованием
процессора магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков
Kingfisher Flex
На потребительскую упаковку, картонную коробку по ГОСТ 33781-2016 размером
250x100x99 мм и картонную коробку по ГОСТ 33781-2016 размером 350x135x95 мм, наклеи­
вают этикетки из бумаги по ГОСТ 7625 размером 80x80 мм и 105x74 мм соответственно.
Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из
клинического материала «НК-Экстра»
по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
Форма комтектаиии 2: Комплект реагентов «НК-Экстоа-КР-ин
(нераскапанный) для автоматизированного выделения с
использование.н нооиессооа магнитных частии для очистки
нуклеиновых кислот, клеток и белков KineFisher Flex
Состав набора:
202104-97 Буфер для
1 флакон, 48 мл
связывания
2021- 04
Магнитные частицы,
1 пробирка, 960 мкл
2022- 04 МЧ
Раствор для
96 1 флакон, 68 мл
поомывки №1
От 2 до 30°С Раствор для
\ 2 флакона по 68 мл
поомывки №2
□г llVD Элюент 1 Флакон. 21 мл
РУ___/.
Только для /л vitro диагностики
Только для профессионального применения
Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического
материала «НК-Экстра» по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
Форма комплектации 2; Комплект реагентов «НК-Экстоа-КР-и»
(нераскапанный) для авпишатилиооеанного выделения с использованием
проиессооа магнитных частии для очистки нуклеиновых кислот,
клеток и белков Kina Fisher Flex
LOT 202104-97 Состав набора;
Ч'.Ч 2021-04 Глубокий планшет 96 для
5 шт.
KinsFisher
2022-04
■ Г ребенка наконечников для
I шт.
магнитов DW для KF 96
96
Планшет (200 мкл) для
1 шт.
1 От 2 до ЗОТ KinaFisher 96
lE IVD
РУ___/____
Только для in vitro диагностики
Только для профессионального применения
Набор реагентов «НК-Экстра», Форма комплектации 3: Комплект реагентов «НК-
Экстра-KF-r» (раскапанный) для автоматизированного выделения с использованием
процессора магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков
KingFisher Flex
На потребительскую упаковку (картонная коробка по ГОСТ 33781-2016 размером
350x135x95 мм) наклеивают этикетку из бумаги по ГОСТ 7625 размером 105x74 мм.
Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического
материала «НК-Экстра» по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
Фоо.ча кан/иектаиии 3: Комп.ект реа^'еитои нИК-Укстоа-KF-r» (pacKanuHHhtui
1
> авникчатиш1юшаши)г4> шыде.чения с испо: 1 ьи>ванием япоиессопа Miu'iiuniHbix
частии d.tn очистки нукгеииойых кис.ют, кгеток и 6e:iKoe KineFisher Flex
Состав набора;
Планшет 1 -Магнитные 9б-луиоч11ый планшет, по 100
LOT202009-134
частицы мкл раствора в каждой лунке
2021-01 Планшет 2 - Буфер для 96-луночный планшет, по 500
связывания мкл раствора в каждой лунке
2022-01 Планшет 3 • Раствор для 96-луночный планшет, по 700
промывки №1 мкл раствора в каждой лунке
W 96 Планшеты 4 и 5 -Раствор для два 96-луночных планшета, по
Or 2 до зоч: промывки №2 7 9 0 6 0 -л м ун к. о '1 ч р н а ы ст й в Ш ор 1 а а н в ш к е а т ж . д п о о й 2 л 0 у 0 н ке
Планшез 6 - Элюеи г
мкл раствора в каждой лунке
as IVD Планшет (200 мкл) для 1 шт.
KiaaFisher 96
Гребенка наконечников для
1 шт.
магниюв DW для KF 96
py
Только для in vitro диагностики
Только для профессионального применения
Макет вторичной (потребительской) упаковки
www.mfOiMjiu
ООО «ТеоГеи»
432072. Россн£ская Федеоация
г улкйнааск. 44-й инменерн»1к пвое1д.дом9. в4«с1Э
Макет этикетки транспортной тары
Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клини­
ческого материала «НК-Экстра» по ТУ 21.20.23-013-
97638376-2019, Форма комплектации 1
ГЕШШ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ
Наименование и адрес производителя ООО «ТестГен», г. Ульяновск, 44-й Инженер­
ный проезд, д. 9, офис 13
Срок годности комплекта реагентов Годен до: год месяц
Дата изготовления набора реагентов год месяц
Хранение.
Набор реагентов хранить при температуре от
+2 °С до +30 °С. Атмосферное давление не
контролируется, т.к. не влияет на качество из­
делия.
Набор реагентов, хранившийся с нарушением
регламентированного режима, применению не
подлежит.
Транспортирование. Транспортировать
Условия хранения и транспортировки
набор реагентов «НК-Экстра» следует транс­
портом всех видов в крытых транспортных
средствах в соответствии с правилами перево­
зок. действуюшими на транспорте данного
вида. Набор реагентов транспортировать при
температуре от +2 °С до +30 °С. Атмосферное
давление не контролируется, т.к. не влияет на
качество, изделия. Наборы реагентов, транс­
портированные с нарушением температурного
режима, применению не подлежат.
Особые инструкции изготовителя в Инструкция по применению набора реагентов
отношении изделия находится внутри транспортной тары
Номер серии (лот)
Предупреяздения и меры предосто­ 11 f
¥
рожности в отношении набора реа­
гентов
Число единиц набора реагентов в
транспортной таре
Масса нетто/брутто на транспортной 0,05 кг / 0,15 кг
таре
0,35 кг
Масса нетто набора реагентов
\ Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клини­
ческого материала «НК-Экстра» по ТУ 21,20.23-013-
97638376-2019, Форма комплектации 2
ГЕШМа нового ПОКОЛЕШ1Й
ООО «ТестГен», г. Ульяновск, 44-й Инженер-
Наименование и адрес производителя
ный проезд, д. 9, офис 13__________________
Срок годности комплекта реагентов Годен до: год месяц
Дата изготовления набора реагентов год месяц
Хранение.
Набор реагентов хранить при температуре от
+2 °С до +30 °С. Атмосферное давление не
контролируется, т.к. не влияет на качество из­
делия.
Набор реагентов, хранившийся с нарушением
регламентированного режима, применению не
подлежит.
Транспортирование. Транспортировать
Условия хранения и транспортировки
набор реагентов «НК-Экстра» следует транс­
портом всех видов в крытых транспортных
средствах в соответствии с правилами перево­
зок, действующими на транспорте данного
вида. Набор реагентов транспортировать при
температуре от +2 °С до +30 °С. Атмосферное
давление не контролируется, т.к. не влияет на
качество изделия. Наборы реагентов, транс­
портированные с нарушением температурного
режима, применению не подлежат.__________
Особые инструкции изготовителя в Инструкция по применению набора реагентов
отношении изделия находится внутри транспортной тары_______
Номер серии (лот)
т
Предупреждения и меры предосто­
рожности в отношении набора реа­
гентов
Число единиц набора реагентов в
транспортной таре
Масса нетто/брутто на транспортной 0,05 кг / 0,15 кг
таре_____________________________
0,6 кг
Масса нетто набора реагентов
Набор реагентов для выделения ДНК/РНК ш кли­
нического материала «НК-Экстра» по ТУ 21.20.23-
ГЕШШНиОбОГОПОКОЛВНи
013-97638376-2019, Форма комплектации 3________
ООО «ТестГен», г. Ульяновск, 44-й Инженер-
Наименование и адрес производителя
ный проезд, д. 9, офис 13_________________
Срок годности комплекта реагентов Годен до: год месяц
Дата изготовления набора реагентов год месяц
Хранение.
Набор реагентов хранить при температуре от
+2 °С до +30 °С. Атмосферное давление не
контролируется, т.к. не влияет на качество из­
делия.
Набор реагентов, хранившийся с нарушением
регламентированного режима, применению не
подлежит.
Транспортирование. Транспортировать
Условия хранения и транспортировки набор реагентов «НК-Экстра» следует транс­
портом всех видов в крытых транспортных
средствах в соответствии с правилами перево­
зок, действуюшими на транспорте данного
вида. Набор реагентов транспортировать при
температуре от +2 °С до +30 °С. Атмосферное
давление не контролируется, т.к. не влияет на
качество изделия. Наборы реагентов, транс­
портированные с нарушением температурного
режима, применению не подлежат.__________
Особые инструкции изготовителя в Инструкция по применению набора реагентов
отношении изделия находится внутри транспортной тары_______
Номер серии (лот)
Предупреждения и меры предосто­
рожности в отношении набора реа­
гентов
Число единиц набора реагентов в
транспортной таре
Масса нетто/брутто на транспортной 0,05 кг / 0,15 кг
таре_____________________________
Масса нетто набора реагентов 0,5 кг
jE frlir
УТВЕРЖДАЮ
ГЕШЖЙМВОППОМРЛЕММ
^^енеральный директор
ООО «ТестГен»
А. Н. Тороповский
«17» мая 2021 г.
по
ИНСТРУКЦИЯ ПРИМЕНЕНИЮ
Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клиничеекого
материала «НК-Экстра»
по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
Версия 3 от 17.05.2021
I
Содержание
•2
Введение..........................................................................................................
1. Назначение...................................................................................................
2. Принцип метода...........................................................................................^
3. Состав набора реагентов.............................................................................^
4. Характеристики набора реагентов...........................................................Ю
5. Перечень рисков, связанных с применением набора реагентов «НК-
Экстра»..............................................................................................................................
6. Меры предосторожности при работе с набором....................................16
7. Оборудование и материалы, необходимые при работе с набором.......!9
8. Анализируемые пробы..........................................................................................
*9. Подготовка компонентов набора для исследования..............................33
10. Проведение исследования......................................................................
И. Возможные проблемы и их решение....................................................42
12. Условия хранения, транспортировки и эксплуатации набора.............43
13. Утилизация..............................................................................................
14. Гарантийные обязательства, контакты..................................................46
Приложение А...............................................................................................
Введение
Целевой аналит. Набор реагентов «НК-Экстра»
используется на этапе пробоподготовки к последующему анализу.
Определение получаемой ДНКУРНК в качестве целевого аналита не
предусмотрено.
Научная обоснованность.
Выделение ДНК/РНК - важный шаг подготовки проб.
Многие методики, такие как амплификация, проведение обратной
транскрипции, детектирование накопления продуктов
^плификации методом ГЩР в реальном времени и др., не могут
быть выполнены непосредственно на клинических образцах без
предварительной очистки нуклеиновых кислот.
Выделение ДНК/РНК является преаналитическим этапом
при выполнении генетического анализа, который используется для
научных, медицинских целей, таких как диагностика
наследственных заболеваний, выявление различных молекулярно­
генетических маркеров, риска развития различных наследственных
болезней, инфекций и т.д.
Область применения набора реагентов - клиническая
лабораторная диагностика.
Показания и противопоказания к применению.
Показания к применению: Набор реагентов «НК-Экстра»
рекомендуется использовать для обеспечения преаналитической
стадии проведения анализов в клинической лабораторной
диагностике. Выделенная тотальная ДНК/РНК человека пригодна
для проведения исследований методом обратной транскрипции
^РНК), полимеразной пепной реакции (ДНК).
Противопоказания к применению: при использовании
специально обученным персоналом и с учетом применения по
назначению противопоказания не выявлены.
1. Назначение
Назначение; Набор реагентов «НК-Экстра» предназначен
для выделения ДНК/РНК из клинического материала человека
(венозная кровь, плазма венозной крови, мокрота, мазки из
носоглотки, мазки из ротоглотки, мазки со слизистой оболочки
влагалища, соскоб из цервикального канала, соскоб из уретры,
клеточный осадок мочи, секрет предстательной железы) методом,
основанном на обратимом связывании нуклеиновых кислот с
поверхностью магнитных частиц, для последующего проведения
анализов в клинической лабораторной диагностике методом
обратной транскрипции (РНК), полимеразной цепной реакции
(ДНК).
Функциональное назначение: набор реагентов «НК-
Экстра» предназначен для обеспечения преаналитической стадии
молекулярно-генетического анализа. Выделенная из клинического
материала человека ДНК/РНК не является основой для постановки
диагноза, однако может использоваться для последующего
проведения анализов в клинической лабораторной диагностике при
исследованиях методом обратной транскрипции (РЬЖ),
полимеразной цепной реакции (ДНК), в частности при диагностике
новой коронавирусной инфекции SARS-CoV-2 и прочих инфекций, а
также в области онкологии, риска развития различных
наследственных болезней, экспрессии генов и пр.
Например, при последующем проведении анализов
выделенной РНК могут совместно применяться следующие
медицинские изделия:
А - Набор реагентов для выявления мРНК гена РСАЗ и
определения уровня его экспрессии методом двустадийнои ОТ-
ПЦР-РВ (Проста-Тест) по ТУ 9398-003-97638376-2015,
производства ООО «ТестГен» (регистрационное удостоверение №
РЗН 2017/6537 от 04 декабря 2017 года);
- Набор реагентов для качественного выявления РНК
коронавируса (SARS-CoV-2) методом ОТ-ПЦР в реальном времени
«CoV-2-Тест» по ТУ 21.20.23-015-97638376-2020. производства
ООО «ТестГен» (регистрационное удостоверение № РЗН
2020/10364 от 15 мая 2020 года).
Потенциальные потребители медицинского изделия
Набор предназначен для профессионального применения в
медицинских учреждениях и клинико-диагностических
лабораториях. Профессиональный уровень потенциальных
пользователей — врач клинической лабораторной диагностики,
медицинский лабораторный техник.
2, Принцип метода
Тип анализируемого образца
Материалом для проведения процедуры выделения
нуклеиновых кислот служат венозная кровь, плазма венозной крови,
мокрота, мазки из носоглотки, мазки из ротоглотки, мазки со
слизистой оболочки влагалища, соскоб из цервикального канала,
соскоб из уретры, клеточный осадок мочи, секрет предстательной
железы.
Принцип метода
Принцип используемого в наборе метода основан на
обратимом связывании ДНК/РНК с поверхностью магнитных
частиц. После лизиса образца содержащиеся в нем нуклеиновые
кислоты связываются с магнитными частицами. Затем они должны
быть отмыты растворами для промывки №1 и №2, входящими в
состав набора. После нескольких циклов отмывки осадок магнитных
частиц должен быть высушен, затем нуклеиновые кислоты можно
элюировать. Протокол выделения допускается модифицировать для
масштабирования в случае, когда требуется получение большего
^количества конечного материала. Для масштабирования
Необходимо пропорционально изменить объемы используемых
реактивов.
Функциональные возможности набора позволяют
использовать его для процесса выделения ДН1С/РНК на
автоматических станциях.
Ограничения метода
Возможна контаминация клинического материала на этапе
пробоподготовки либо на этапе выделения ДНК/РНК.
Нарушение целостности упаковки при транспортировании.
Использование набора с истекшим сроком годности или
условий хранения набора.
5
Нарушение условий хранения и транспортирования
збразцов.
Общее время проведения процедуры выделения
ЩК/РНК:
- набором реагентов в форме комплектации 1 («НК-Экстра-
М») при ручном выделении из 1 образца составляет 40 минут;
- набором реагентов в форме комплектации 1 («НК-Экстра-
М») при выделении с использованием автоматизированных станций
пробоподготовки из 36 образцов единовременно за цикл составляет
40 минут;
набором реагентов всех форм комплектации при
автоматизированном вьщелении на процессоре магнитных частиц
для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков KingFisher Flex из
96 образцов единовременно за цикл составляет 40 минут.
3. Состав набора реагентов
Набор реагентов выпускается в трех формах комплектации:
1) Форма комплектации 1: Комплект реагентов «НК-
Экстра-М» для ручного выделения и выделения с использованием
автоматизированных станций пробоподготовки.
2) Форма комплектации 2; Комплект реагентов «НК-
Экстра-KF-u» (нераскапанный) для автоматизированного
выделения с использованием процессора магнитных частиц для
очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков KingFisher Flex.
3) Форма комплектации 3: Комплект реагентов «НК-
Экстра-KF-r» (раскапанный) для автоматизированного выделения с
|1Спользованием процессора магнитных частиц для очистки
нуклеиновых кислот, клеток и белков KingFisher Flex.
Количество анализируемых проб
Fla6op реагентов в форме комплектации 1 («НК-Экстра-М»)
предназначен для многократного применения, количество реагентов
рассчитано на выделение ДНК/РНК из 96 анализируемых образцов.
Набор реагентов в форме комплектации 2 («НК-Экстра-KF-u»)
предназначен для многократного применения и рассчитан на
выделение ДНК/РНК из анализируемых образцов от 1 до 96 на
процессоре магнитных частиц KingFisher Flex единовременно за
цикл.
6
Набор реагентов в форме комплектации 3 («НК-Экстра-KF-r»)
предназначен для однократного применения и рассчитан на
выделение ДНК/РИК из 96 анализируемых образцов на процессоре
магнитных частиц KingFisher Flex единовременно за цикл.
Состав набора
Таблица 1 - Состав набора реагентов «НК-Экстра», Форма
комплектации 1: Комплект реагентов «НК-Экстра-М» для ручного
выделения и выделения с использованием автоматизированных
№ Названне
Описание Количество
пп реагента
Прозрачная
I флакон
1 Буфер для связывания бесцветная
(48 мл)
жидкость
Магнитные частицы, Коричневая 1 пробирка
2
МЧ суспензия (960 мкл)
Прозрачная
Раствор для промывки 1 флакон
3 бесцветная
№1 (68 мл)
жидкость
Прозрачная
Раствор для промывки 2 флакона
4 бесцветная
№2 (по 68 мл)
жидкость
Прозрачная
1 флакон
5 Элюент бесцветная
(21 мл)
жидкость
Таблица 2 - Состав набора реагентов «НК-Экстра», Форма
(омплектации 2: Комплект реагентов «НК-Экстра-KF-u»
нераскапанный) для автоматизированного выделения с
аспользованием процессора магнитных частиц для очистки
№ Название
Описание Количество
пп реагента
Прозрачная
Буфер для 1 флакон
! бесцветная
связывания (48 мл)
жидкость
Магнитные Коричневая 1 пробирка
2
частицы, МЧ . суспензия (960 мкл)
Прозрачная
Раствор для ] флакон
3 бесцветная
промывки №1 (68 мл)
жидкость
Прозрачная
Раствор для 2 флакона
4 бесцветная
промывки №2 (по 68 мл)
жидкость
Прозрачная
1 флакон
5 Элюент бесцветная
(21 мл)
жидкость
Пустой
бесцветный
Глубокий планшет полипропиленовый
6 5 шт.
96 для KingFisher 96-луночный
глубокий планшет
объемом 2200 мкл
Пустой
бесцветный
Планшет (200 мкл) полипропиленовый
7 1 шт.
для KingFisher 96 96-луночный
низкий планшет
объемом 200 мкл
Бесцветная
Г ребенка
полипропиленовая
наконечников для
8 гребенка 1 шт.
магнитов DW для
наконечников для
KF 96
1 магнитов DW
Таблица 3 - Состав набора реагентов «НК-Экстра», Форма
комплектации 3: Комплект реагентов «НК-Экстра-KF-r»
(раскапанный) для автоматизированного выделения с
использованием процессора магнитных частиц для очистки
№ Название
Описание Количество
пп компонента
96-луночный
Планшет 1 - Коричневая планшет, по 100
1
Магнитные частицы суспензия мкл раствора в
каждой лунке
96-луночный
Прозрачная
Планшет 2 - Буфер планшет, по 500
2 бесцветная
для связывания мкл раствора в
жидкость
каждой лунке
96-луночный
Прозрачная
Планшет 3 - Раствор планшет, по 700
3 бесцветная
для промывки №1 мкл раствора в
жидкость
каждой лунке
два 96-луночных
Планшеты 4 и 5 — Прозрачная
планшета, по 700
4 Раствор для бесцветная
мкл раствора в
промывки №2 жидкость
каждой лунке
96-луночный
Прозрачная
планшет, по 200
5 Планшет 6 - Элюент бесцветная
мкл раствора в
жидкость
каждой лунке
Пустой
бесцветный
Планшет (200 мкл) полипропиленовый
6 1 шт.
для KingFisher 96 96-луночный
низкий планшет
объемом 200 мкл
Бесцветная
Гребенка
полипропиленовая
наконечников для
7 гребенка 1 шт.
магнитов DW для KF
наконечников для
96
магнитов DW
в наборе для выделения не используются калибраторы и
контрольные материалы.
В составе набора отсутствуют лекарственные средства для
иедицинского применения, вещества человеческого или животного
происхождения.
Примечание: изделие не содержит другие ингредиенты,
которые могут оказать влияние на проведение процедуры.
4. Характеристики набора реагентов
4.1 Технические и функциональные характеристики
Таблица 4 - Технические и функциональные характеристики набора
Наименование показателя Характеристики и нормы
1. Технические характеристики
1.1. Внешний вид
1.1.1. Форма комплектации 1: Комплект реагентов «НК-Экстра-М» для
ручного выделения и выделения с использованием автоматизированных
станций пробоподготовки
Буфер для связывания Прозрачная бесцветная жидкость
Магнитные частицы, МЧ Коричневая суспензия
Раствор для промывки №1 Прозрачная бесцветная жидкость
Раствор для промывки №2 Прозрачная бесцветная жидкость
Элюент Прозрачная бесцветная жидкость
1.1.2. Форма комплектации 2: Комплект реагентов «НК-Экстра-КГ-и»
(нераскапанный) для автоматизированного выделения с использованием
процессора магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток
и белков ЮпгПвЬег Flex
Буфер для связывания Прозрачная бесцветная жидкость
Магнитные частицы, МЧ Коричневая суспензия
Раствор для промывки №1 Прозрачная бесцветная жидкость
Раствор для промывки №2 Прозрачная бесцветная жидкость
Элюент Прозрачная бесцветная жидкость
Пустой бесцветный
Глубокий планшет 96 для
полипропиленовый 96-луночный
KingFisher
глубокий планшет объемом 2200 мкл
Пустой бесцветный
Планшет (200 мкл) для KingFisher 96 полипропиленовый 96-луночный
низкий планшет объемом 200 мкл
10
Бесцветная полипропиленовая
Гребенка наконечников для
гребенка наконечников для магнитов
магнитов DW для KF 96
DW
1.1.3. Форма комплектации 3: Комплект реагентов «НК-Экстра-KF-r»
(раскапанный) для автоматизированного выделения с использованием
процессора магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток
и белков KinsFisher Flex
Планшет 1 - Магнитные частицы Коричневая суспензия
Планшет 2 - Буфер для связывания Прозрачная бесцветная жидкость
Планшет 3 - Раствор для промывки
Прозрачная бесцветная жидкость
№1
Планшеты 4 и 5 - Раствор для
Прозрачная бесцветная жидкость
промывки №2
Планшет 6 - Элюент Прозрачная бесцветная жидкость
Пустой бесцветный
Планшет (200 мкл) для KingFisher 96 полипропиленовый 96-луночный
низкий планшет объемом 200 мкл
Бесцветная полипропиленовая
Гребенка наконечников для
гребенка наконечников для магнитов
магнитов DW для KF 96
DW
1.2. Физико-химические показатели
Показатели концентрации ионов водорода, pH
Буфер для связывания min 6,0 pH, max 8,0 pH
Раствор для промывки №1 min 6,0 pH, max 8,0 pH
Раствор для промывки №2 min 6,0 pH, max 8,0 pH
1.3. Комплектность В соответствии с п. 1.4
ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
В соответствии с п. 4
1.4. Маркировка
ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
В соответствии с п. 5
' 1.5. Упаковка
ТУ 21.20.23-013-97638376-2019
2. функциональные характеристики
2.1 Чистота выделения ДНК/РНК,
1,7
А260/280, не менее
2.2. Отсутствие контаминации Отрицательный результат с ОКО в
компонентов набора посторонними контрольной ПЦР
ДНК/РНК
2.3. Эффективность выделения 25
ДНК/РНК, %, не менее
отрицательного контрольного образца (ОКО) используют
11
еионизованную стерильную воду, свободную от ДНКаз/РНКаз. В
|честве контрольного образца используют смесь плазмиды и РНК,
пакованной в капсид бактериофага.
4.2 Характеристики клинической эффективности
По результатам проведенных клинических испытаний
юдтверждена эффективность медицинского изделия при
юпользовании его в соответствии с назначением путем проведения
динико-лабораторных испытаний методом обратной транскрипции
РНК), полимеразной цепной реакции (ДНК) с образцами
аделенного препарата нуклеиновых кислот из 262 образцов
динического материала (венозная кровь, плазма венозной крови,
юкрота, мазки из носоглотки, мазки из ротоглотки, мазки со
УИЗИСТОЙ оболочки влагалища, соскоб из цервикального канала,
1
юскоб из уретры, клеточный осадок мочи, секрет предстательной
келезы) с использованием зарегистрированных медицинских
зделий для диагностики in vitro.
1
Для оценки межсерийной сходимости процедура выделения
(НК/РНК из образцов клинического материала была проведена в
(вух сериях каждой формы комплектации исследуемого
кдицинского изделия. Для формы комплектации 1 процедура
(ыделения ДНК/РНК была проведена тремя способами,
федусмотренными производителем в эксплуатационной
|окументации: ручным, с использованием автоматизированных
гганций пробоподготовки и с использованием процессора
|агнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и
|елков KingFisher Flex.
Процедура выделения ДНК/РНК с помощью набора реагентов
iHK-Экстра», формы комплектации 2 и 3 была проведена с
Юмощью процессора магнитных частиц для очистки нуклеиновых
сислот, клеток и белков KingFisher Flex.
Для статистической обработки данных клинико-лабораторных
кпытаний использовали метод Клоппера и Пирсона (Clopper-
?earson Confidience Interval; Clopper, C., & Pearson, E. (1934). The Use
)f Confidence or Fiducial Limits Illustrated in the Case of the Binomi-al.
Biometrika, 26(4), 404-413. doi: 10.2307/2331986).
12
Результаты изучения диагностических характеристик для всех
юрм комплектаций исследуемого медицинского изделия по
бразцам клинического материала приведены в таблице 5. Нижняя
раница доверительного интервала определена по методу Клонпера
(Пирсона.
Тип Форма Способ Диагнос Количе ДИ
исследуем комплекта выделения тические ство с доверительной
ого ции РНК характер проб вероятностью
материала истики 95%
Венозная Форма Ручной способ 100% 24 100% (95%
кровь комплекта ДИ:96%-100%)
ции 1 Тесап cepirti 100% 24 100% (95%
Freedom EVO® ДИ:96%-100%)
KingFisher Flex 100% 28 100% (95%
ДИ:96%-100%)
Форма KingFisher Flex 100% 28 100% (95%
комплекта ДИ;96%-100%)
ции 2
Форма KingFisher Flex 100% 28 100% (95%
комплекта ДИ:96%-100%)
ции 3
Плазма Форма Ручной способ 100% 22 100% (95%
венозной комплекта ДИ:96%-100%)
крови ции 1 Тесап серии 100% 22 100% (95%
Freedom EVO® ДИ:96%-100%)
KingFisher Flex 100% 24 100% (95%
ДИ:96%-100%)
Форма KingFisher Flex 100% 24 100% (95%
комплекта ДИ:96%Д00%)
ции 2
Форма KingFisher Flex 100% 24 100% (95%
ДИ:96%-100%)
комплекта
ции 3
Мокрота Форма Ручной способ 100% 36 100% (95%
комплекта ДИ:96%-100%)
ции Тесап серии 100% 36 100% (95%
Freedom EVO® ДИ:96%-100%)
KingFisher Flex 100% 40 100% (95%
ДИ:96%-100%)
Форма KingFisher Flex 100% 40 100% (95%
комплекта ДИ;96%-100%)
ции 2
13
|  | Форма | KingFisher | Flex | 100% | 40 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 3 |  |  |  |  |  |
| Мазки из | Форма | Ручной спо | соб | 100% | 42 | 100% (95% |
| носоглотк | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
| и | ции 1 | Тесап сери | и | 100% | 42 | 100% (95% |
|  |  | Freedom E | VO® |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  |  | KingFisher | Flex | 100% | 44 | 100% (95% |
|  |  |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | Форма | KingFisher | Flex | 100% | 44 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 2 |  |  |  |  |  |
|  | Форма | KingFisher | Flex | 100% | 44 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 3 |  |  |  |  |  |
| Мазки из | Форма | Ручной спо | соб | 100% | 32 | 100% (95% |
| ротоглотк | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
| и | ции 1 | Тесап сери | и | 100% | 32 | 100% (95% |
|  |  | Freedom E | VO® |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  |  | KingFisher | Flex | 100% | 32 | 100% (95% |
|  |  |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | Форма | KingFisher | Flex | 100% | 32 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 2 |  |  |  |  |  |
|  | Форма | KingFisher | Flex | 100% | 32 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 3 |  |  |  |  |  |
| Мазки со | Форма | Ручной спо | соб | 100% | 22 | 100% (95% |
| слизистой | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
| оболочки | ции 1 | Тесап сери | и | 100% | 22 | 100% (95% |
| влагалища |  | Freedom E | VO® |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  |  | KingFisher | Flex | 100% | 24 | 100% (95% |
|  |  |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | Форма | KingFisher | Flex | 100% | 24 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 2 |  |  |  |  |  |
|  | Форма | KingFisher | Flex | 100% | 24 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ;96%-100%) |
|  | ции 3 |  |  |  |  |  |
| Соскоб из | Форма | Ручной спо | соб | 100% | 18 | 100% (95% |
| цервикаль | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
| ного | ции 1 | Тесап сери | и | 100% | 18 | 100% (95% |
| канала |  | Freedom EV | O® |  |  | ДИ:96%-100%) |
.
ДИ:96%-100%)
14
|  |  | Kingfisher | Flex | 100% | 20 | 100% (95% |
|  |  |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | Форма | Kingfisher | Flex | 100% | 20 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | иии 2 |  |  |  |  |  |
|  | Форма | Kingfisher | Flex | 100% | 20 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 3 |  |  |  |  |  |
| Соскоб из | Форма | Ручной спо | соб | 100% | 20 | 100% (95% |
| уретры | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 1 | Tecan сери | и | 100% | 20 | 100% (95% |
|  |  | Freedom E | VO® |  |  | ДИ:96%-!00%) |
|  |  | Kingfisher | Flex | 100% | 24 | 100% (95% |
|  |  |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | Форма | Kingfisher | Flex | 100% | 24 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 2 |  |  |  |  |  |
|  | Форма | Kingfisher | Flex | 100% | 24 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 3 |  |  |  |  |  |
| Клеточны | Форма | Ручной спо | соб | 100% | 18 | 100% (95% |
| й осадок | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-Ю0%) |
| мочи | ции 1 | Tecan сери | и | 100% | 18 | 100% (95% |
|  |  | Freedom E | VO® |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  |  | Kingfisher | Flex | 100% | 20 | 100% (95% |
|  |  |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | Форма | Kingfisher | Flex | 100% | 20 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 2 |  |  |  |  |  |
|  | Форма | Kingfisher | Flex | 100% | 20 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 3 |  |  |  |  |  |
| Секрет | Форма | Ручной спо | соб | 100% | 16 | 100% (95% |
| предстате | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
| льной | ции 1 | Tecan сери | и | 100% | 16 | 100% (95% |
| железы |  | Freedom EV | O® |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  |  | Kingfisher | Flex | 100% | 18 | 100% (95% |
|  |  |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | Форма | Kingfisher | Flex | 100% | 18 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 2 |  |  |  |  |  |
|  | Форма | Kingfisher | Flex | 100% | 18 | 100% (95% |
|  | комплекта |  |  |  |  | ДИ:96%-100%) |
|  | ции 3 |  |  |  |  |  |
15
5. Перечень рисков, связанных с применением набора
реагентов «НК-Экстра»
В пограничную зону риска вошли опасности:
- потеря функциональных свойств реагентов, входящих в
зстав набора, из-за транспортирования, хранения или эксплуатации
несоответствующих условиях,
- наличие загрязняющих примесей в ДНК/РНК,
- проведение процедуры выделения ДНК/РНК из
Едостаточного количества клинического материала,
невыполнение требований по пробоподготовке,
роведению анализов и утилизации, вследствие рабогы с набором
Еквалифицированным персоналом,
- использование непригодного для применения набора
использование по истечении срока годности или при нарушении
Паковки).
В области недопустимой зоны риски не выявлены.
Совокупный остаточный риск применения медицинского
зделия «Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из
пинического материала «НК-Экстра» по ТУ 21.20.23-013-
7638376-20 1 9», производства ООО «ТестГен», является
опустимым, польза от его применения превышает риск.
I 6. Меры предосторожности при работе с набором
Класс в зависимости от потенциального риска применения -
Ь в соответствии с номенклатурной классификацией медицинских
■зделий, утверждаемой приказом Министерства здравоохранения
российской Федерации от 06.06.2012 N 4н.
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей
юлекулярно-биологические (ПЦР) исследования клинического
«атериала, с соблюдением санитарно-эпидемических правил СП
1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп
итогенности (опасности) и возбудителями паразитарньк
злезней», СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические
требования к содержанию территорий городских и сельских
роселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому
Ьодоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым
16
мещениям, эксплуатации производственных, общественных
1
>мещений. организации и проведению санитарно-
ютивоэп идем и ческих (профилактических) мероприятий» и
етодических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы
|бораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых
■слот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы 1-
/ групп патогенности».
При работе всегда следует выполнять следующие
^ования:
• следует рассматривать исследуемые образцы как
Нфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в
оотвстствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с
шкроорганизмами 11I-1V групп патогенности (опасности) и
рзбудителями паразитарных болезней» или СП 1.3.3118-13
безопасность работы с микроорганизмами I-IT групп патогенности
рпасности)» в зависимости от выполняемого анализа;
■ убирать и дезинфицировать разлитые образцы или
активы, используя дезинфицирующие средства в соответствии с
П 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV
упп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных
лезней»;
■ лабораторный процесс должен быть однонаправленным.
tнaлиз проводится в отдельных помещениях (зонах). Работу
едует начинать в Зоне Выделения, продолжать в Зоне
1
Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы, оборудование
i реактивы в зону, в которой была проведена предыдущая стадия
ipouecca;
• неиспользованные реактивы, реактивы с истекшим сроком
^дности, а также использованные реактивы следует удалять в
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-
эпидемиологические требования к содержанию территорий
уродских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде
н питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам,
(жилым помещениям, эксплуатации производственных,
юбшественных помещений, организации и проведению санитарно­
противоэпидемических (профилактических) мероприятий»;
17
■ использовать и менять при каждой операции одноразовые
сонечники для автоматических дозаторов с фильтром,
(норазовую пластиковую посуду необходимо сбрасывать в
сциальный контейнер, содержащий дезинфицирующее средство,
горое может быть использовано для обеззараживания
дицинских отходов;
■ поверхности столов, а также помещения, в которых
юводится постановка ПЦР, до начала и после заверщения работ
|обходимо подвергать ультрафиолетовому облучению в
ютветствии с принятыми нормами;
■ применять набор строго по назначению, согласно данной
Кструкции;
■ допускать к работе с набором только специально обученный
ррсонал;
■ не использовать набор по истечении срока годности;
■ не использовать набор реагентов, если нарущена
Еутренняя упаковка, или внещний вид реагента не соответствует
исанию;
' ■ использовать одноразовые перчатки, лабораторные халаты,
^ищать глаза во время работы с образцами и реактивами,
[щательно мыть руки по окончании работы;
• все компоненты набора нетоксичны для человека в
кпользуемых концентрациях. При попадании на кожу или
клизистые оболочки компонентов набора место контакта
кеобходимо промыть больщим количеством воды.
Необходимых мер предосторожности в отнощении влияния
магнитных полей, внещних электрических воздействий,
электростатических разрядов, давления или перепадов давления,
керегрузки, источников термического воспламенения не
Предусмотрено.
В составе набора отсутствуют вещества человеческого или
животного происхождения, обладающие потенциальной
инфекционной природой, поэтому меры предосторожности против
любых специальных, несвойственных рисков при использовании
или реализации изделия не предусмотрены.
18
7, Оборудование и материалы, необходимые при работе с
набором
Оборудование:
1. Стерильный ламинарный бокс биологической
вкробиологической) безопасности II класс;
2. Термостат для пробирок типа «Эппендорф»,
ддерживаюший температуру от 25°С до 100°С;
3. Микроцентрифуга-вортекс для пробирок типа
Эппендорф» 1,5/2 мл;
4. Центрифуга для микропробирок, с RCF не ниже 16 000 g;
5. Дозаторы переменного объема, позволяющие
[бирать объёмы жидкости 20-200 мкл, 200-1000 мкл;
6. Холодильник от +2°С до +8°С,
7. Морозильная камера от -2 °С до -40 °С,
8. При использовании любой из форм комплектации
^бора («НК-Экстра-М», «НК-Экстра-KF-u» или «НК-Экстра-KF-
^): процессор магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот,
(леток и белков KingFisher Flex, (Thermo Fisher Scientifie,
Финляндия),
9. При использовании формы комплектации 1 («НК-
Йкстра-М») возможно применение автоматизированных станций
иобоподготовки (TECAN, Швейцария, Австрия),
10. При использовании формы комплектации 2 («НК-
Ькстра-KF-u») для внесения реагентов в глубокие планшеты 96 для
kcingFisher могут быть использованы многоканальные
ввтоматические дозаторы переменного объема (например,
feppendorf», Германия) или роботизированная станция
^робоподготовки Тесап серии Freedom EVO® (TECAN, Швейцария,
|Австрия),
j 11. При использовании формы комплектации 2 («НК-
(Экстра-KF-u») для внесения реагентов в глубокие планшеты
[объемом 2200 мкл могут быть использованы Ванночки-резервуары
■ на 100 мл (например, Biologix, Китай),
Дополнительно могут быть использованы:
12. Электрический лабораторный аспиратор с колбой-
ловушкой.
19
Материалы и реагенты, не входящие в состав изделия:
1. Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся
и плотно закрывающиеся микропробирки объемом 1,5 мл.
ободные от посторонней ДНК/РНК и ДНКаз/РНКаз,
2. 96-луночные глубокие планщеты объемом 2200 мкл
ободные от посторонней ДНК/РЫК и ДНКаз/РНКаз,
3. 96-луночный низкий планщет объемом 200 мкл
юбодные от посторонней ДНК/РНК и ДНКаз/РНКаз,
4. Гребенка наконечников для магнитов DW для
IngFisher 96,
5. Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся
ри плотно закрывающиеся пробирки объемом 15 мл, свободные от
рсторонней ДНК/РНК и ДНКаз/РНКаз,
6. Штативы для пробирок объемом 15 мл и 1,5 мл и
^(онечников,
7. Магнитный щтатив для пробирок типа «Эппендорф»
|а 1,5-2 мл,
I 8. Одноразовые наконечники для дозаторов
кременного объема с аэрозольным барьером 100 мкл, 1000 мкл и 5
^ свободные от посторонней ДНК/РНК и ДНКаз/РНКаз,
' 9. Одноразовые наконечники для дозаторов
временного объема 100 мкл и 1000 мкл, свободные от посторонней
рК/РНК и ДНКаз/РНКаз,
10. Одноразовые или отдельные халаты и одноразовые
|1ерчатки,
11. Емкости с дезинфицирующим раствором для сброса
Еспользованных наконечников, пробирок и других расходных
атериалов.
Дополнительно могут быть использованы:
12. Набор реагентов для стабилизации РНК в биопробах
СТОР-ЭКС по ТУ 9398-099-46482062-2017 производства ООО
•«ДНК-Технология ТС» (Регистрационное удостоверение № РЗН
2018/7775 от 08.11.2018) или аналогичный, предназначенный для
сохранения и транспортировки биоматериала с одновременной
стабилизацией РНК.
13. Стерильный физиологический раствор (0,9% NaCl).
20
14. Деионизованная стерильная вода, свободная от
<аз/РНКаз.
При выделении из мокроты:
15. 10% раствор трехзамещенного фосфорнокислого
рия,
16. 1М раствор НС1,
17. 5% раствор хлорамина,
18. Муколизин.
Использование других материалов и реагентов, не входящие в
^ав изделия, не предусмотрено.
Измерительное оборудование при эксплуатации набора не
|^уется.
[
8. Анализируемые пробы
Перед началом работы следует ознакомиться с методическими
комендациями «Взятие, транспортировка, хранение клинического
гериала для ПЦР-диагностики», разработанными ФГУН ЦНИИЭ
щотребнадзора, Москва, 2012г.
Условия транспортирования и хранения исходного
1инического материала.
Таблица 6 - Условия хранения и транспортировки
нического материала___________
Требования к сбору Условия хранения и
материала_________ транспортирования материала
Кровь отбирают в пробирку с Транспортирование:
добавленной в качестве При использовании пробирок с
антикоагулянта CPDA или CPDA в качестве антикоагулянта
EDTA-K2. - 24 часа при температуре от +2
до +8 ^С.
При использовании пробирок с
EDTA-K2 в качестве
антикоагулянта, кровь
необходимо доставить в
лабораторию в течение 24 часов.
ВНИМАНИЕ! Важно исключить
замораживание и прогрев
пробирки с кровью выше 25 ®С.
21
Условия хранения:
Цельная кровь, собранная в
пробирки, содержащие EDTA-K2
(этилендиаминтетрауксусную
кислоту) или CPDA в качестве
антикоагулянтов, хранится при
температуре от +2 до +8°С - не
более 24 часов.
В случае невозможности
доставки материала в
лабораторию в течение суток
допускается однократное
замораживание материала.
Допускается хранение
замороженного материала при
температуре от минус 18 °С до
минус 22 °С в течение 6 месяцев.
1лазма Для получения плазмы При использовании пробирок с
|енозной периферическую венозную CPDA в качестве антикоагулянта
крови кровь отбирают в пробирку с с момента взятия крови и
добавленной в качестве получения плазмы, должно
антикоагулянта CPDA или пройти не более 48 часов.
При использовании пробирок с
EDTA-K2.
EDTA-K2 в качестве
антикоагулянта с момента взятия
крови и до получения плазмы
должно пройти не более 2-3
часов.
Условия хранения:
- при температуре 2-8 °С - в
течение 5 суток;
- при температуре минус 20 °С --
в течение месяца;
- при температуре минус 70 -
длительно.
ВНИМАНИЕ! Допускается
только однократное
замораживание-оттаивание
материала.____________________
При комнатной температуре - в
Мокрота Взятие материала
осуществляют в количестве течение 6 часов;
не менее 1,0 мл в одноразовые - при температуре 2-8 °С - в
градуированные стерильные течение 3 суток;_______________
22
флаконы с широким горлом и - при температуре минус 20 °С -
завинчивающимися в течение 1 недели;
крышками объемом не менее - при температуре минус 70 °С -
50 мл длительно.
Допускается лишь однократное
замораживание-оттаивание
материала.
Требуется предварительная
обработка проб.______________
[азки из Мазки (слизь) берут сухими - при комнатной температуре - в
осоглотки стерильными ватными течение 6 ч;
тампонами на пластиковой - при температуре 2-8°С - в
основе. Тампон вводят легким течение 3 суток;
движением по наружной - при температуре минус 20®С в
стенке носа на глубину 2-3 см течение 1 месяца;
до нижней раковины. Затем - при температуре минус 70®С -
тампон слегка опускают длительно.
книзу, вводят в нижний Допускается лишь однократное
носовой ход под нижнюю замораживание-оттаивание
носовую раковину, делают материала
вращательное движение и
удаляют вдоль наружной
стенки носа. После взятия
материала тампон (рабочую
часть зонда с ватным
тампоном) помещают в
стерильную одноразовую
пробирку со специальной
транспортной средой (или 500
мл стерильного
физиологического раствора) и
аккуратно обламывают
пластиковый стержень на
расстоянии не более 0,5 см от
рабочей части, оставляя
рабочую часть зонда с
материалом в транспортной
среде. Пробирку плотно
закрывают крышкой.________
Мазки из Мазки берут сухими - при комнатной температуре - в
ротоглотки стерильными ватными течение 6 ч;
тампонами на пластиковой - при температуре 2-8°С - в
основе вращательными течение 3 суток;
движениями с поверхности
23
миндалин, небных дужек и - при температуре минус 20°С - в
задней стенки ротоглотки. течение 1 месяца;
После взятия материала - при температуре минус 10°С -
тампон (рабочую часть зонда длительно.
с ватным тампоном) Допускается лишь однократное
помешают в стерильную замораживание-оттаивание
одноразовую пробирку со материала
специальной транспортной
средой (или 500 мл
стерильного
физиологического раствора) и
аккуратно обламывают
пластиковый стержень на
расстоянии не более 0,5 .см от
рабочей части, оставляя
рабочую часть зонда с
материалом в транспортной
среде. Пробирку плотно
закрывают крышкой.
Мазки со Материал должен быть взят Транспортирование:
слизистой до проведения мануального 24 часа при температуре от +2 до
оболочки исследования. Зеркало перед +8 °С. В случае невозможности
влагалища манипуляцией можно смочить доставки материала в
горячей водой, применение лабораторию в течение суток
антисептиков для обработки допускается однократное
зеркала противопоказано. замораживание материала.
Мазок берут с заднебокового Условия хранения:
свода влагалиша. У девочек - при +2 ... +8 ®С - не более 24 ч.
взятие материала производят - при -18 ... -22 °С- не более
со слизистой оболочки месяца.
преддверия влагалища, а в
отдельных случаях ~ из
заднего свода влагалиша
через гименальные кольца.
Соскоб из Переа взятием материала Транспортирование:
цервикальн необходимо удалить ватным 24 часа при температуре от +2 до
ого канала тампоном слизь и затем +8 °С. В случае невозможности
обработать шейку матки доставки материала в
стерильным физиологическим лабораторию в течение суток
раствором. Зонд вводят в допускается однократное
цервикальный канал на замораживание материала.
глубину 0,5-1,5 см. При Условия хранения:
извлечении зонда необходимо - при +2 ... +8 °С - не более 24 ч.
24
полностью исключить его - при -18 ... -22 ®С - не более
касание стенок влагалища. месяца.
!оскоб из Женщины накануне Транспортирование:
ретры обследования не должны 24 часа при температуре от +2 до
проводить туалет половых +8 °С. В случае невозможности
органов и спринцевание. доставки материала в
Перед взятием клинического лабораторию в течение суток
материала пациенту допускается однократное
рекомендуется воздержаться замораживание материала.
от мочеиспускания в течение Условия хранения:
1,5-2 ч. Непосредственно - при +2 ... +8 °С - не более 24 ч.
перед взятием клинического - при -18 ... -22 ®С - не более
материала необходимо месяца.
обработать наружное •
отверстие уретры тампоном,
который можно смочить
стерильным физиологическим
раствором.
При наличии гнойных
выделений соскоб
рекомендуется брать через 15-
20 мин. после
мочеиспускания, при
отсутствии выделений
необходимо провести массаж
уретры с помощью зонда для
взятия клинического
материала. В уретру у
женщин зонд вводится на
глубину 1,0-1,5 см, у детей
материал для исследования
берут только с наружного
отверстия уретры.___________
' Клеточный Взятие первых струй мочи Т ранспортирование:
осадок объемом 20-50 мл в Транспортировка образцов
мочи стерильную цельной мочи и полученного из
промаркированную емкость нее клеточного осадка без
проводится в течение 1 часа раствора для стабилизации и
после массажа сохранения РНК при +2...+8
предстательной железы. до 3 суток.
Условия хранения:
- Без раствора для стабилизации
и сохранения РНК при +2...Ч 8 °С
до 3 суток.____________________
25
Замораживание образцов
цельной мочи категорически не
допускается.
- Осадки мочи в растворе для
стабилизации и сохранения РНК
- до 10 суток при +2...+8 °С.
- Длительное хранение образцов
(от I о суток до года)
рекомендуется проводить при
температуре не выше минус 18
°С в растворе для стабилизации и
сохранения РНК.
Секрет Перед взятием секрета - при комнатной температуре -
предстатель простаты головка полового в течение 6 часов;
ной железы члена обрабатывается - при температуре 2-8®С — в
стерильным ватным течение 1 суток;
тампоном, смоченным - при температуре минус 20°С
физиологическим раствором. в течение 1 недели;
Секрет простаты берется - при температуре минус 70°С
после предварительного длительно.
массажа простаты через
прямую кишку. Врач
проводит массаж с
надавливанием несколькими
энергичными движениями от
основания к верхушке. Затем
из кавернозной части
выдавливается
простатический секрет,
который собирается в
стерильную емкость {сосуды с
широким горлом, пробирки).
Для увеличения сроков хранения исследуемого материала в
целях последующего выделения РНК, рекомендуется использовать
набор реагентов для стабилизации РНК в биопробах СТОР-ЭКС по
ТУ 9398-099-46482062-2017 производства ООО «ДНК-Технология
ТС» (регистрационное удостоверение № РЗН 2018/7775 от
08.11.2018) или аналогичный, предназначенный для сохранения и
транспортировки биоматериала с одновременной стабилизацией
РНК. Образцы с реагентом для стабилизации РНК могут храниться
в течение 48 часов при температуре +18...+25°С и в течение 7 суток
26
И температуре +2...+8°С. Следует избегать многократного
1
ораживания-оттаивания образцов в процессе хранения. Реагент
стабилизации не рекомендуется использовать для сохранения
К в цельной крови, плазме или сыворотке, поскольку эти
дкости содержат высокую концентрацию белков.
Процедура подготовки клинического материала к
елению нуклеиновых кислот.
8.1. Венозная кровь.
8.1.1. Взятие крови проводится в пластиковые пробирки
ъемом 2,5 мл с добавленной в качестве антикоагулянта
натриевой солью этилендиам'интетраацетата (EDTA) в конечной
«центрации 2,0 мг/мл. В качестве антикоагулянта допускается
же использование цитрата натрия (CPDA).
ВНИМАНИЕ! Не допускается использование гепарина в
лестве антикоагулянта.
8.1.2. Пробирку закрывают крышкой и аккуратно
ереворачивают 2-3 раза вверх дном, чтобы кровь в пробирке
дтельно перемешалась с антикоагулянтом (в противном случае
кровь свернется, и выделение ДНК/РНК станет невозможным).
8.2. Плазма венозной крови.
8.2.1. Пробирки с кровью, полученной в п. 8.1,
центрифугировать при 2 500 g в течение 15 минут при комнатной
температуре (18-25°С).
8.2.2. Отобрать автоматическим дозатором верхнюю фракцию
(плазму) и перенести в отдельную пластиковую пробирку объемом
1,5 мл. Полученная плазма готова для выделения ДНК/РНК.
8.3. Мокрота.
Способ 1
8.3.1. Примерно 500 мкл образца клинического материала
перенести в стерильную посуду и плотно закрыть крышкой.
8.3.2. К пробе добавить равный объем 10% трехзамещенного
фосфорнокислого натрия, интенсивно встряхнуть.
8.3.3. Смесь инкубировать в течение 18-24 ч при температуре
37°С, затем нейтрализовать 1М НС1 до pH 6,8-7,4.
8.3.4. Центрифугировать в течение 20 минут при 1 000 g.
27
8.3.5. Надосадочную жидкость слить в 5% раствор хлорамина
обеззараживания.
8.3.6. Добавить к осадку 500 мкл дистиллированной воды,
юмешать пипетированием и перенести й пластиковую пробирку
ьемом 1,5 мл.
8.3.7. Центрифугировать пробирку при 13 000 g в течение 10
lyr.
8.3.8. Удалить надосадочную жидкость, оставив в пробирке
шмерно 100 мкл (осадок + жидкая фракция). Полученный
иериал готов для выделения НК.
Способ 2
В контейнер с образцом добавить муколизин в соотношении
(5 частей муколизина к 1 части образца клинического
нериала), ориентируясь по градуировке контейнера. Закрутить
)ышку контейнера, встряхнуть содержимое и инкубировать 20-30
нут при комнатной температуре (18-25 ‘^С), каждые 2-3 минуты
1
:тряхивая контейнер. Полученный материал готов для выделения
Обработанную образец допускается хранить в контейнере в
гечение суток при температуре +2...+8°С или длительно при
[емпературе не выше минус 16 °С (в случае необходимости
[повторного выделения РНК/ДНК).
8.4. Мазки из носоглотки, мазки из ротоглотки.
8.4.1. Центрифугировать пробирку, содержащую
анализируемый материал, при 13 000 g в течение 10 минут.
8.4.2. Удалить надосадочную жидкость, оставив в пробирке
примерно 100 мкл (осадок + жидкая фракция).
8.5. Мазки со слизистой оболочки влагалища, соскоб из
'цервикального канала, соскоб из уретры.
8.5.1. Соскобы эпителиальных клеток с помощью одноразовых
стерильных зондов перенести в пластиковые пробирки объемом 1,5
мл, содержащие 500 мкл физиологического раствора (в случае
вьщеления ДНК) или 500 мкл консерванта для РНК (в случае
вьщеления РНК), например, набор реагентов для стабилизации РНК
в биопробах СТОР-ЭКС по ТУ 9398-099-46482062-2017
производства ООО «ДНК-Технология ТС» (регистрационное
удостоверение Хч РЗН 2018/7775 от 08.11.2018) или аналогичных.
28
едназначенных для сохранения и транспортировки с
[новременной стабилизацией РНК; аккуратно перемешать.
8.5.2. Зонд извлечь, прижимая его к стенке пробирки и
[жимая избыток жидкости. Пробирку плотно закрыть,
олученный материал готов для выделения НК.
Примечание. Перед взятием соскоба из цервикального канала
еобходимо удалить слизь стерильным ватным тампоном.
8.6. Клеточный осадок мочи.
8.6.1. Порцию мочи (примерно 50 мл) следует собрать в
герильную посуду и плотно закрыть крышкой.
8.6.2. Стерильные, свободные от РНКаз промаркированные
[ластиковые центрифужные пробирки объемом 50, 15, 10 или 2 мл
шолняют отобранными образцами мочи отдельными стерильными
[аконечниками.
8.6.3. Пробирки на 50,15 или 10 мл центрифугируют при 3 000
g в течение 20 минут или при 5 000 g в течение 15 минут; пробирки
на 2 мл допускается центрифугировать при 10 000 g в течение 5
шут.
8.6.4. Не задевая осадков, отдельными стерильными
наконечниками удаляют надосадочную жидкость.
8.6.5. При использовании пробирок на 15, 10 или 2 мл, поверх
осадков аккуратно наслаивают следующие порции мочи тех же
образцов отдельными стерильными наконечниками, не допуская
кросс-контаминации, повторяют пункты 2-4 до полного
использования объемов мочи.
8.6.6. При необходимости хранения осадков более 3 суток в
^елях дальнейшего выделения РНК, отдельными стерильными
жнаконечниками добавляют к осадкам (объемом 50-300 мкл) 1,0 мл
I раствора для стабилизации и сохранения РНК, аккуратно
I
ресуспендируют осадки пипетированием,
I
8.6.7. При центрифугировании образцов в пробирках на 50, 15
или 10 мл, переносят полученные суспензии в промаркированные
стерильные пластиковые пробирки объемом 1,5-2 мл отдельными
стерильными наконечниками.
8.6.8. Помещают пробирки в холодильную камеру с
температурой +2...+8°С (не допуская замораживания).
29
«* .? Л .Р К У о6«"«" '.5 ““ «»“ Р“ "’“ <“ ' *
,физиологического раствора стерильного) ^
8 7.2. Центрифугировать пробирку при g
I 8.7.3. Удалить надосадочную жидкость, оставив в пробирке
ршерно 50 мкл (осадок+жидкая фракция).
Интерферирующие вещества.
Влияние потенциально интерферирующих веществ на работу
Lena реагентов «НК-Экстра» было проверено в отношении
ициально интерферирующих веществ, которые могут
.речаться при процедуре забора клинического материала и при
оцедуре выделения ДНК/РНК из клинического материала.
К ингибиторам ПЦР, которые могут встречаться при
процедуре выделения ДНК/РНК из клинического материала, по
результатам анализа рисков и проведения НИОКР отнесены
следующие вещества: натрий додецилсульфат и мочевина
(входящие в состав буфера для связывания), а также изопропанол
(входящий в состав раствора для промывки №1 и раствора для
промывки №2), которые могут присутствовать в элюате с ДНК/РНК
в результате неполного удаления в ходе проведения процедуры
выделения ДНК/РНК.
Максимальные концентрации интерферирующих веществ,
которые могут встречаться при процедуре выделения ДНК/РНК из
|клинического материала, при которых не наблюдалось влияние на
амплификацию лабораторного контрольного образца составляют;
натрий додецилсульфат - 0,007мкг/мл образца кДНК, мочевина - 20
мМ/мл образца кДНК, изопропанол - 5 мкл/мл образца кДНК.
Потенциально интерферирующие вещества, которые могут
встречаться при процедуре забора клинического материала
представлены в таблице 7.
30
Таблица 7 - Потенциально интерферирующие вещества,
Ьторые могут встречаться при процедуре забора клинического
Г Интерферирующие вещества Максимальная
концентрация
1 Эндогенные интерферирующие вещества и антикоагулянты
ГГепарин (антикоагулянт) >0.15 ед/мл
[Цитрат натрия (антикоагулянт) >1 ммоль/л
|эДТК 2К (антикоагулянт) > 3,4 мкМ
[Гемоглобин (гемолиз) > 1 мг/мл
] Триглицериды (хилез) >0,5 ммоль/л
1 Муцин 5%
1 Биотин 100 мкг/мл
1 Билирубин > 342 мкМ
1 Экзогенные интерферирующие вещества
Противовоспалительные средства
Ацетаминофен 200 мкМ
Ацетилсалициловая кислота 3,7 мМ
Ибупрофен 2,5 мМ
Антибиотики
Эритромицин 81,6 мкМ
Ципрофлоксацин 31 мкМ
Тобрамицин 5 мкг/мл
Назальный спрей и капли
Неосинефрин (Фенилэфрин) 10%
Африн (Оксиметазолин) 10%
Соляной назальный спрей 10%
Лекарственные препараты для приема внутрь
«Амбробене» (амброксола гидрохлорид) 0,003 мг/ мл
«Бромгексин» (бромгексин) 0,016 мг/мл
«Калетра» (лопинавир, ритонавир) 0.02 мг/ мл
«Интерферон» (интерферон альфа) 0,2ед /мл
«Терафлю» (парацетамол, фенирамин, 0,071 мг/мл
фенилэфрин)
Лекарственные препараты вагинальные
31
Полижинакс» (неомицин, нистатин, 34 МЕ/ мл
шшмиксин В)
Гиналгин» (метронидазол, хлорхинальдол) 0,07 мг/ мл
Цшоюпрокс» (Циклопирокс) 0.02 мг/ мл
Клотримазол» (клотримазол) 0.02 мг / мл
«Флуомизин» (деквалиния хлорид) 0,002 мг/ мл
Юльжина» (орнидазол, неомицин, 0.12 мг/ мл
Ьеднизолон, эконазол)
Г Средства для наружного применения
Иубрикант 10%
■Тальк 10%
По результатам серии ГЩР-реакций с препаратами
киновых кислот, выделенными из контрольного образца и
гворов с добавлением в контрольный образец потенциального
фферирующих веществ в концентрации, которая, как
ается, будут встречаться при нормальном использовании
5
абора реагентов «НК-Экстра», к ингибиторам ПЦР при процедуре
аеления ДНК/РНК из клинического материала отнесены тальк (в
онцентрации 10%) и лубрикант (в концентрации 10%). На
сновании результатов исследования, данные вещества,
опадающие в образцы ДНК/РНК, не оказывают влияние на чистоту
аеления ДНК/РНК, но приводят к ингибированию ПЦР при
онцентрациях, превышающих допустимые.
Для снижения количества ингибиторов ПЦР необходимо
элюдать правила взятия клинического материала.
Ограничения по использованию анализируемого
(шериала:
- после окончания процедуры выделения ДНК/РНК следует
{сразу приступать к проведению последующего анализа;
- анализируемый материал не подлежит использованию при
[нарушении условий хранения и транспортировки (температура,
|фодолжительность, многократное замораживание-оттаивание);
1
- не допускается использование образцов, загрязненных
|посторонним биологическим материалом.
32
Условия возможного хранения выделенной ДНК:
- при +4 °С - не более суток,
- при -18 ... -22 °С - не более месяца,
- при - 80 °С - длительно.
Условия возможного хранения выделенной РНК:
- при +2 ...+8 °С не более 4 ч (рекомендуется),
- при -18... -22 °С не более недели,
- при температуре не выше -80 °С не более года.
9. Подготовка компонентов набора для исследования
Установка, монтаж, настройка, калибровка медицинского
делия для ввода в эксплуатацию не требуется.
При использовании Формы комплектации 1 для ручного
деления:
1) Расслоение или выпадение осадка не влияет на
^чество растворов. Если образовался осадок или расслоение
ипонентов одного из флаконов, необходимо прогреть его при
и тщательно перемешать до полного растворения осадка и
|омогенизации растворов.
2) Перед началом работы и перед каждой манипуляцией
раствором магнитных частиц его следует полностью
суспендировать на вортексе или пипетированием, т.к. суспензия
[(агнитных частиц является двухфазной, легко и быстро образует
разделяемые фазы.
ГКО
3) Все компоненты набора перед началом работы
«обходимо тщательно перемешать.
4) При большом количестве анализируемых проб
||Опускается перед работой перенести все содержимое пробирки с
Шагнитными частицами» (960 мкл) во флакон с «Буфером для
[связывания». Данная смесь может храниться в течение 7 суток,
[следует тщательно перемешивать приготовленную суспензию
[магнитных частиц в «Буфере для связывания» перед каждым
Iиспользованием.
33
При использовании Формы комплектации 1 совместно с
тизированной станцией иробоподготовки Тесап серии
от EVO®:
1) Расслоение или выпадение осадка не влияет на
во растворов. Если образовался осадок или расслоение
понентов в лунках планшета, необходимо прогреть его при 70°С
перемешать до полного растворения осадка и гомогенизации
оров.
2) Все компоненты набора перед использованием
ходимо перемешать.
3) Перенести все содержимое пробирки с «Магнитными
ицами» (960 мкл) во флакон с «Буфером для связывания»,
ная смесь может храниться в течение 7 суток. Следует
рельно перемешивать приготовленную суспензию магнитных
иц в «Буфере для связывания» перед каждым использованием.
4) Подготовить роботизированную станцию
боподготовки Тесап серии Freedom EVO® в соответствии с
струкцией по ее применению.
5) Перелить подготовленные растворы из флаконов в
веты и загрузить их на станцию в порядке, описанном в
токоле работы станции.
6) Загрузить специальные наконечники, пробирки для
шполнения реакций выделения ДНК/РНК и пробирок для
вьщеленной ДНК/РНК на станцию в порядке, описанном в
оротоколе работы станции.
При использовании Формы комплектации 1 совместно с
роцессором магнитных частиц для очистки нуклеиновых
кислот, клеток и белков KingFisher Flex
1) Расслоение или выпадение осадка не влияет на
качество растворов. Если образовался осадок или расслоение
компонентов в лунках планшета, необходимо прогреть его при 70°С
и перемешать до полного растворения осадка и гомогенизации
растворов.
2) Все компоненты набора перед использованием
необходимо перемешать.
3) Перенести все содержимое пробирки с «Магнитными
частицами» (960 мкл) во флакон с «Буфером для связывания».
34
ная смесь может храниться в течение 7 суток. Следует
ельно перемешивать приготовленную суспензию магнитных
Ц в «Буфере для связывания» перед каждым использованием.
1
4) Промаркировать глубокие планшеты 96 для
“isher и внести в них реагенты согласно схеме (таблица 8);
.лица 8 - Схема внесения реагентов в планшеты при
пользовании формы комплектации 2: Комплект реагентов «НК-
ра*М» для автоматизированного выделения с использованием
оцессора магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот.
Количество, вносимое в
f t № Вносимый компонент
планшета каждую лунку планшета
Смесь Магнитных частиц
Планшет 1 по 510 мкл
и Буфера для связывания
Планшет 2 Раствор для промывки №1 по 700 мкл
Планшет 3 Раствор для промывки №2 по 700 мкл
Планшет 4 Раствор для промьЕвки №2 по 700 мкл
Планшет 5 Элюент по 200 мкл
Для внесения реагентов может быть использован
вдноканальный или многоканальный автоматический дозатор
переменного объема. Внесение реагентов может быть также
вьшолнено с помощью автоматической станции пробоподготовки
(например, Тесап серии Freedom EVO®). Внимание: каждый реагент
вносится отдельным наконечником, не допускается попадание
[остатков одного реагента в другой.
\ 5) Подготовить оборудование в соответствии с
инструкцией по его применению.
6) Загрузить в прибор протокол из файла KingFisher Flex-
НК-Экстра-ККш (файл прилагается), соответствующий ниже
приведенной схеме:
- лизис (Планшет 1): продолжительность — 5 минут, нагрев —
быстрый, температура - 80 '"С, перемешивание, повтор через 2 и 4
минуты.
35
- экстракция (Планшет 1): продолжительность ~ 10 минут,
пература - 25 °С, перемешивание, повтор на 2-4-6-S минутах,
I магнитных частиц - 15 секунд.
- промыв 1 (Планшет 2): продолжительность - 120 секунд,
кратура “ 25 ‘^С, перемешивание, сбор магнитных частиц — 10
гнд
- промыв 2 (Планшет 3): продолжительность - 120 секунд,
ипература - 25 перемешивание, сбор магнитных частиц — 10
^'нд
- промыв 3 (Планшет 4): продолжительность - 120 секунд,
шература - 25 ^’С, перемешивание, сбор магнитных частиц - 10
)'НД
- элюция (Планшет 5): продолжительность — 10 минут,
шература - 80 перемешивание - медленное, повтор через 2-4-
1-8 минут, сбор магнитных частиц - 10 секунд.
При использовании Формы комплектации 2 совместно с
)цессором магнитных частиц для очистки нуклеиновых
клеток и белков Kingfisher Flex :
1СЛОТ,
1) Расслоение или выпадение осадка не влияет на
ачество растворов. Если образовался осадок или расслоение
компонентов одного из флаконов, необходимо прогреть его при
WC и тщательно перемешать до полного растворения осадка и
змогенизации растворов.
2) Перенести все содержимое пробирки с «Магнитными
[частицами» (960 мкл) во флакон с «Буфером для связывания».
1анная смесь может храниться в течение 7 суток. Следует
[тщательно перемешивать приготовленную суспензию магнитных
[частиц в «Буфере для связывания» перед каждым использованием.
3) Промаркировать глубокие планшеты 96 для
iKingFisher и внести в них реагенты согласно схеме (таблица 9):
36
блица 9 - Схема внесения реагентов в планшеты при
пользовании формы комплектации 2: Комплект реагентов «НК-
стра-КР-и» (нераскапанный) для автоматизированного
целения с использованием процессора магнитных частиц для
Количество, вносимое в
Вносимый компонент
планшета каждую лунку планшета
Смесь Магнитных частиц
Планшет 1 по 510 мкл
и Буфера для связьЕвания
Планшет 2 Раствор для промывки №1 по 700 мкл
Планшет 3 Раствор для промывки №2 по 700 мкл
Планшет 4 Раствор для промыЬки №2 по 700 мкл
Планшет 5 Элюент по 200 мкл
t Для внесения реагентов может быть использован
ноканальный или многоканальный автоматический дозатор
ременного объема. Внесение реагентов может быть также
ыполнено с помощью автоматической станции пробоподготовки
например, Тесал серии Freedom EVO®). Внимание: каждый реагент
носится отдельным наконечником, не допускается попадание
ттков одного реагента в другой.
4) Подготовить оборудование в соответствии с
щструкцией по его применению.
5) Загрузить в прибор протокол из файла Kingfisher Flex-
Ж-Экстра-KF-u (файл прилагается), соответствующий ниже
приведенной схеме:
- лизис (Планшет 1): продолжительность - 5 минут, нагрев —
'быстрый, температура - 80 "С, перемешивание, повтор через 2 и 4
минуты.
- экстракция (Планшет 1): продолжительность - 10 минут,
температура - 25 °С, перемешивание, повтор на 2-4-6-S минутах,
сбор магнитных частиц - 15 секунд.
- промыв 1 (Планшет 2): продолжительность - 120 секунд,
температура - 25 °С, перемешивание, сбор магнитных частиц - 10
секунд
37
- промыв 2 (Планшет 3); продолжительность - 120 секунд,
ипература - 25 °С. перемешивание, сбор магнитных частиц - 10
^НД
- промыв 3 (Планшет 4): продолжительность - 120 секунд,
шература - 25 °С, перемешивание, сбор магнитных частиц - 10
^'НД
- элюция (Планшет 5): продолжительность - 10 минут,
шература - 80 °С, перемешивание - медленное, повтор через 2-4-
1 минут, сбор магнитных частиц - 10 секунд.
При использовании Формы комплектации 3 совместно с
оцессором магнитных частиц для очистки нуклеиновых
слот, клеток и белков KingFisher Flex:
1) Расслоение или выпадение осадка не влияет на
чество растворов. Если образовался осадок или расслоение
мпонентов в лунках планшета, необходимо прогреть его при 70°С
перемешать до полного растворения осадка и гомогенизации
IpacTBopoB.
2) Подготовить оборудование в соответствии с
йнструкцией по его применению.
3) Загрузить в прибор протокол из файла KingFisher Flex-
НК-Экстра-KF-r (файл прилагается), соответствуюший ниже
приведенной схеме:
- лизис (Планшет 2): продолжительность - 5 минут, нагрев -
быстрый, температура - 80 °С, перемешивание, повтор через 2 и 4
минуты,
- сбор МЧ и перенос из планшета 1 в планшет 2: сбор
магнитных частиц 60 секунд, скорость медленная, температура 25
”С.
- экстракция (Планшет 2): продолжительность - 10 минут,
температура - 25 ”С, перемешивание, повтор на 2-4-6-8 минутах,
сбор магнитных частиц - 15 секунд,
- промыв 1 (Планшет 3): продолжительность - 120 секунд,
температура — 25 ®С, перемешивание, сбор магнитных частиц — 10
секунд.
38
J
- промыв 2 (Планшет 4): продолжительность - 120 секунд,
мпература - 25 оС, перемешивание, сбор магнитных частиц - 10
жунд,
- промыв 3 (Планшет 5): продолжительность - 120 секунд,
мпература - 25 оС, перемешивание, сбор магнитных частиц - 10
екунд,
- элюция (Планшет 6): продолжительность - 10 минут,
емпература - 80 °С, перемешивание - медленное, повтор через 2-4-
к8 минут, сбор магнитных частиц - 10 секунд.
10. Проведение исследования
К работе с набором допускается только специально
обученный персонал с навыками проведения ПЦР-анализов.
Процедура выделения ДНК/РНК набором реагентов «НК-
Экстра» в форме комплектации 1 при ручном выделении.
Для каждого исследуемого образца приготовить и
промаркировать по одной пробирке объемом 1,5-2 мл.
1. Добавить в каждую пробирку по 500 мкл буфера для
связывания и по 10 мкл раствора магнитных частиц. В случае
предварительного смешивания магнитных частиц с буфером для
связывания, следует перенести в каждую пробирку по 510 мкл смеси
буфера для связывания с магнитными частицами.
2. Внести по 100 мкл образца клинического материала в
каждую пробирку, перемешать на вортексе 3-5 секунд.
3. Для лизиса инкубировать пробирки при 70°С в течение 5
минут, перемешивая раствор за время инкубации 1-2 раза на
вортексе.
4. По завершении лизиса перенести пробирки в
лабораторный штатив и инкубировать смесь для связывания
ДНК/РНК при комнатной температуре в течение 10 минут,
перемешивая раствор во время инкубации 2-3 раза путем
переворачивания пробирок.
5. Поместить пробирки в магнитный штатив, подождать, пока
частицы полностью соберутся на стенке пробирок (обычно
39
J
дуется 1 -2 минуты) и удалить супернатант с помощью дозатора
й аспиратора.
6. Внести в пробирки по 700 мкл раствора для промывки №1,
отно закрыть крышки, ресуспендировать магнитные частицы на
ртексе, сбросить капли коротким центрифугированием.
7. Поместить пробирки в магнитный штатив, подождать, пока
стицы полностью соберутся на стенке пробирок и удалить
шернатант.
I 8. Внести в пробирки по 700 мкл раствора для промывки №2,
шотно закрыть крышки, ресуспендировать магнитные частицы на
)ртексе, сбросить капли коротким центрифугированием.
9. Поместить пробирки в магнитный штатив, подождать, пока
астицы полностью соберутся на стенке пробирки и удалить
упернатант.
10. Повторить пункты 8 и 9.
11. Поместить пробирки с открытыми крышками в термостат
инкубировать при 70°С в течение 5 минут для просушки
магнитных частиц и удаления остаточного спирта.
12. Внести в пробирки по 50 мкл элюента, используя
ядельный наконечник с фильтром. Тщательно ресуспендировать
нагнитные частицы пипетированием, плотно закрыть крышки.
13. Инкубировать пробирки при 70°С в течение 10 минут. Во
время инкубации 2-3 раза перемешать содержимое пробирок путем
осторожного взбалтывания осадка.
i 14. Поместить пробирки в магнитный штатив, подождать,
'пока частицы полностью соберутся на стенке пробирок.
15. Перенести супернатант, содержащий вьщеленную
ДНК/РНК, в новый пробирки. ВНИМАНИЕ! Отбор очищенной
ДНК/РНК осуществляется без снятия пробирок с магнитного
штатива.
Если целью выделения было получение препарата РНК, то
его рекомендуется сразу использовать для постановки реакции
обратной транскрипции.
40
процедура выделения ДНК/РНК набором реагентов «НК-
1кстра» в форме комплектации 1 совместно с
оботизированной станцией пробоподготовки Тесан серии
reedom EVO®:
1. В программном обеспечении станции TECAN серии Freedom
iVO® загрузить соответствующий протокол выделения для работы
набором «НК-Экстра» в форме комплектации 1.
2. Запустить станцию.
3. По завершении процедуры выделения ДНК/РНК, забрать из
станции пробирки с выделенной ДНК/РНК.
4. Если целью выделения было получение препарата РНК, то
его рекомендуется сразу использовать для постановки реакции
'обратной транскрипции.
I 5. Убрать из станции использованные расходные материалы,
провести уборку в соответствии с инструкцией.\
Процедура выделения ДНК/РНК набором реагентов «НК-
Экстра» в форме комплектации 1 совместно с процессором
магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и
белков KingFisher Flex :
1. В лунки планшета 1 внести по 100 мкл анализируемого
образца клинического материала, перемешать пипетированием.
2. Расставить планшеты в соответствии с указаниями прибора и
запустить процедуру выделения ДНК/РНК по загруженному
протоколу работы процессора магнитных частиц для очистки
нуклеиновых кислот, клеток и белков KingFisher Flex.
3. По окончании работы прибора, в лунках планшета 5
находится супернатант, содержащий выделенную ДН1С/РНК.
Процедура выделения ДНК/РНК набором реагентов «НК-
Экстра» в форме комплектации 2 совместно с процессором
магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и
белков KingFisher Flex :
4. В лунки планшета 1 внести по 100 мкл анализируемого
образца клинического материала, перемешать пипетированием.
5. Расставить планшеты в соответствии с указаниями прибора и
запустить процедуру выделения ДНК/РНК по загруженному
41
ютоколу работы процессора магнитных частиц для очистки
клеиновых кислот, клеток и белков KingFisher Flex.
6. По окончании работы прибора, в лунках планшета 5
супернатант, содержащий вьщеленную ДНК/РНК.
1Х0ДИТСЯ
Процедура выделения ДНК/РНК набором реагентов «НК-
кстра» в форме комплектации 3 совместно с процессором
агнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и
И1КОВ KingFisher Flex:
1. В лунки планшета 2 внести по 100 мкл анализируемого
бразца клинического материала, перемешать пипетированием.
2. Расставить планшеты в соответствии с указаниями прибора и
шустить процедуру выделения ДНК/РНК по загруженному
ротоколу работы процессора магнитных частиц для очистки
уклеиновых кислот, клеток и белков KingFisher Flex.
i 3. По окончании работы прибора, в лунках планшета 6
находится супернатант, содержащий выделенную ДНК/РНК.
И. Возможные проблемы и их решение
1. Низкий ДНК/РНК. причина и возможное решение:
ВЫХОД
• состояние образца (в образце содержится недостаточное
количество ДНК/РНК; образец долго хранился, или неправильно
хранился, или несколько раз подвергался процедуре
замораживания-оттаивания) - возможные решения: брать больше
исходного материала или проводить элюцию в меньшем количестве
буфера; повторить сбор материала;
1 • неполное высушивание частиц перед добавлением элюента
- увеличить время сушки после удаления раствора для промывки
2
№ ;
■ неполный лизис - после внесения лизирующего раствора
как можно тщательнее суспендировать образец;
■ большой объем буфера для элюирования - подберите
оптимальный объем буфера для получения нужной концентрации
ДНК/РНК.
2. Примеси белка - нужно добиваться максимально
тщательного суспендирования магнитных частиц.
42
3. Вочможная деградация ДНК/РНК, причина и возможное
4шение - старый образец, либо образец подвергался
Ьмораживанию-оттаиванию - необходимо провести сбор
(атериала повторно. Избегать замораживания образца в процессе
)ранспортировки и хранения. Выделенный препарат РНК не
юдлежит хранению, т.к. РНКазы, вызывающие деградацию РНК,
сличаются многообразием, чрезвычайно активны, присутствуют
повсеместно, их инактивация весьма трудоемка. Для
идотвращения деградации ДНК/РНК следует использовать
Средства для деконтаминации от РНКаз для обработки рабочих
юверхностей лаборатории, оборудования и расходного материала
для ПЦР Поверхности рабочих столов, а также помещения, в
которых проводится выделение ДНК/РНК, следует обязательно до и
после проведения работ облучать бактерицидными лампами в
течение 1 часа.
12. Условия хранения, транспортировки и эксплуатации
набора
Хранение. Набор реагентов в упаковке предприятия-
изготовителя хранить при температуре от +2 °С до +30 °С.
Атмосферное давление не контролируется, т.к. не влияет на
качество изделия.
Набор реагентов, хранившийся с нарушением
регламентированного режима, применению не подлежит.
Срок годности вскрытых компонентов набора в форме
% комплектации 1 и 2 - 12 месяцев со дня приемки ОТК предприятия^
изготовителя при условии хранения при температуре от +2 С до +3U
°С. Срок хранения смеси «Магнитных частиц» и «Буфера для
связывания» — не более 7 суток.
Набор реагентов в форме комплектации 3 предназначен для
однократного применения и рассчитан на выделение ДНК/РНК из
96 анализируемых образцов на процессоре магнитных частиц
KingFisher Flex единовременно за цикл. В связи с этим оценка
стабильности в процессе использования данной формы
; комплектации набора реагентов не проводилась.
43
j Набор реагентов, хранившийся с нарушением
вгламентированного режима, применению не подлежит.
I Транспортирование. Транспортировать набор реагентов
ЕК-Экстра» следует транспортом всех видов в крытых
нспортных средствах в соответствии с правилами перевозок,
действующими на транспорте данного вида. Набор реагентов
(ранспортировать при температуре от +2 °С до +30 °С. Атмосферное
йвление не контролируется, т.к. не влияет на качество изделия.
Наборы реагентов, транспортированные с нарушением
температурного режима, применению не подлежат,
f Срок годности. Срок годности набора «НК-Экстра» 12
месяцев со дня приемки ОТК предприятия-изготовителя при
соблюдении всех условий транспортирования, хранения и
жсплуатации. Набор реагентов с истекшим сроком годности
применению не подлежит.
13. Утилизация
Наборы реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе в
связи с истечением срока годности, подлежат утилизации в
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-
эпидемиологические требования к содержанию территорий
городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде
и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам,
жилым помещениям, эксплуатации производственных,
общественных помещений, организации и проведению санитарно­
противоэпидемических (профилактических) мероприятий».
В соответствии с классификацией медицинских отходов
наборы относятся к классу А (эпидемиологически безопасные
отходы, приближенные по составу к твердым бытовым отходам).
Неиспользованные реактивы в соответствии с п. 170 СанПиН
2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические требования к
содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным
объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению,
атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации
производственных, общественных помещений, организации и
проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических)
44
|^роприятий» собираются в многоразовые емкости или
цноразовые пакеты любого цвета (кроме жёлтого и красного).
Оставшиеся после выполнения работ пробирки и материалы
иилизируют в соответствии с МУ 287-113 (Методические указания
дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации
вделий медицинского назначения).
Жидкие компоненты (реагенты, реактивы) уничтожаются
ЛИВОМ в канализацию с предварительным разбавлением реагента
юдопроводной водой 1:100 и вывозом остатка упаковок как
производственный или бытовой мусор.
( Потребительская упаковка набора реагентов «НК-Экстра»
подлежит механическому разрушению с вывозом остатков как
лроизводственного или бытового мусора.
Персонал, осуществляющий уничтожение набора реагентов,
должен соблюдать правила безопасности проведения того или иного
способа уничтожения.
45
14. Гарантийные обязательства, контакты
Предприятие-изготовитель гарантирует качество и
безопасность набора реагентов «НК-Экстра» в течение срока
годности при соблюдении требований транспортирования и
фанения продукции, а также при соблюдении правил эксплуатации.
При возникновении претензий по качеству наборов,
нежелательных событий, которые имеют признаки
неблагоприятного события (инцидента), направлять информацию
по адресу:
'Общество с ограниченной ответственностью «ТестГен» (ООО
«ТестГен»),
432072 г. Ульяновск, 44-й Инженерный проезд, дом 9, офис 13
Тел.: +7 (499) 705-03-75
www.testgen.ru
Служба технической поддержки:
Тел.:+7 927 981 58 81
E-mail: help@testgen.ru
Инструкция по применению соответствует требованиям
Приказа Минздрава России от 09.01.2014 №2н. Приказа Минздрава
России от 19.01.2017 № 11н, ГОСТ 51088-2013.
46
Приложение А
ГОСТ ISO 14971- Изделия медицинские. Применение
7011 менеджмента риска к медицинским
изделиям.
|ГОСТ 15.309-98 Системы разработки и постановки
продукции на производство. Испытания и
приемка выпускаемой продукции. Основные
положения
ГОСТ Р 51088-2013 Наборы реагентов для клинической
лабораторной диагностики. Общие
технические условия.
ГОСТ Р 51352-2013 Наборы реагентов для клинической
лабораторной диагностики. Методы
испытаний.
ГОСТ РЕН 13612- Оценка функциональных характеристик
2010 медицинских изделий для диагностики in
vitro
ГОСТ Р 56894-2016 Сводный комплект технической
документации для демонстрации
соответствия общим принципам обеспечения
безопасности и основных функциональных
характеристик медицинских изделий для
диагностики in vitro
ГОСТРИСО 18113- Медицинские изделия для диагностики in
1-2015 vitro. Информация, предоставляемая
изготовителем (маркировка). Часть 1.
1 ермины, определения и общие требования.
ГОСТРИСО 18113- Медицинские изделия для диагностики in
2-2015 vitro. Информация, предоставляемая
изготовителем(маркировка). Часть 2.
Реагенты для диагностики in vitro для
профессионального применения
ГОСТ Р ИСО 23640- Изделия медицинские для диагностики in
2015 vitro. Оценка стабильности реагентов для
диагностики in vitro.
47
ГОСТРИСО 15223- Изделия медицинские. Символы,
1-2014 применяемые при маркировании на
медицинских изделиях, этикетках и в
сопроводительной документации. Ч. 1.
Основные требования.
ГОСТ ISO 13485- Изделия медицинские. Системы
2017 менеджмента качества. Требования для
целей регулирования
ГОСТ 2.114-2016 Единая система конструкторской
документации. Технические условия.
ГОСТ 2.104-2006 Единая Система конструкторской
документации (ЕСКД). Основные надписи
ГОСТ Р 1.3-2018 Стандартизация в Российской Федерации.
Технические условия на продукцию. Общие
требования к содержанию, оформлению,
обозначению и обновлению.
примечание - Указанные выше стандарты были действующими
на момент утверждения инструкции по применению. В дальнейшем,
при пользовании документом, целесообразно проверить действие
ссылочных нормативных документов на текущий момент. Если
ссылочный документ заменен или изменен, то при применении
настоящего документа следует пользоваться замененным
(измененным) документом.
48