Набор реагентов для иммуноферментного определения антигена СА 125 в сыворотке (плазме) крови "СА 125-ИФА" по ТУ 9398-222-18619450-2010 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2010/07151 от 17.03.2010 · класс риска 1

Производитель: ООО "ХЕМА" (Россия)

Вид изделия: Раковый антиген 125 (СА125) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 54 контракта, медианная цена за единицу 7 262 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

УТВЕРЖДАЮ
Руководитель Департамента государственного
контроля лекар;2твенных средств и медицин­
ской те:^н4^ ^ 1у1^нздрава РФ
________В ^ . А^^очкин
/^О 2002 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для иммуноферментного
определения антигена СА 125 в сыворотке и плазме крови
(СА 125-ИФА)
Рекомендована к утверждению экспертной комиссией
по наборам реагентов для иммуноферментного
(неинфекционные), радиоиммунологического и других
видов иммунохимического анализа Комитета по новой
медицинской технике Минздрава РФ
(Протокол № 7 от 19 августа 2002 г.)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов СА 125-ИФА предназначен для количественного оп­
ределения содержания антигена СА 125 в сыворотке или плазме крови человека
методом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. СА 125 представляет собой эпитоп, ассоциированный с раком яични­
ков. Эпитоп СА 125 обнаруживается на гетерогенной группе гликопротеинов с вы­
сокой молекулярной массой (ММ от 200.000 до 1.000.000 Да). Определение уров­
ня СА 125 в крови используется для контроля эффективности лечения и слежения
Инструкция составлена: начальником исследовательского отдела ООО
“Хема - Медика”, к. м. н. Ю.С. Лебединым; руководителем лаборатории иммуноло­
гии и регуляторных механизмов в хирургии РНЦХ РАМН, д. м, н., профессором,
Л. И. Винницким.
ОВЩВСТВО с ОГРАНИЧЕННОЙ
01ЬЕгстзптстью
ГВНЕРАЛЬ/--Ш ДИРЕКТОР v ,
Л!^Б£:днн 1См;й Степанович
за течением злокачественных опухолей яичников, однако данные по содержанию
СА 125 всегда следует интерпретировать в комплексе с результатами других
методов исследования и клиническими данными.
2. ПРИНЦИП РАБОТЫ НАБОРА
Определение СА 125 основано на использовании ‘‘сэндвич’-варианта твер­
дофазного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок
планшета иммобилизованы моноклональные антитела к СА 125 человека. В лун­
ках планшета при добавлении анализируемого образца во время инкубации про­
исходит связывание СА 125, содержащего в образце, с антителами на твердой
фазе. Количество связавшегося СА 125 пропорционально его концентрации в
анализируемой пробе. Образовавшийся комплекс выявляют с помощью конъюга­
та моноклональных антител к СА 125 с пероксидазой. В результате образуется
связанный с пластиком “сэндвич”, содержащий пероксидазу. Во время инкубации
с раствором тетраметилбензидина происходит окрашивание растворов в лунках.
Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации СА 125 в анализи­
руемом образце. Концентрацию СА 125 в анализируемых образцах определяют
по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания СА
125 в калибровочных пробах.
3. СОСТАВ НАБОРА;
- Планшет 96-луночный полистироловый стрипированный, с сорбирован­
ными на внутренней поверхности лунок моноклональными анти-СА 125-анти­
телами -1 пакет;
4
- калибровочные пробы на основе фосфатного буфера, содержащие извес­
тные количества СА 125 - 0; 25; 50; 100; 200 и 400 Ед/мл; концентрации СА 125 в
калибровочных пробах могут несколько отличаться от указанных величин, точные
величины указаны на этикетках флаконов, готовы к использованию - 6 флаконов
(О Ед/мл - 6,0 мл, остальные - по 0,6 мл каждая);
- конъюгат анти-СА 125-пероксидаза, готов к использованию -1 флакон
(5,2 мл);
- раствор тетраметилбензидина (ТМБ), готов к использованию -1 флакон
(11 мл); , . ч
- контрольная сыворотка на основе сыворот1# 1фови человёка с известным
Опшество с ОГРАНИЧЕННОЙ Я:: /
01ЕЕ1СГа1?;1Н00ТЬЮ
<> X !. ^ L ^
ГЕНЕРАЛЫ'Ш Д:'!РЕКТ0Р
Л^ВГДИН |СП(14 СТЕПАНОВИЧ
содержанием СА 125, готова к использованию - 1 флакон (0,6 мл); >
- концентрат отмывочного раствора -1 флакон (22 мл);
- стоп-реагент (5% серная кислота), готов к использованию -1 флакон
(11 мл);
- бумага для заклеивания планшета - 1 шт.
4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИК!^
4.1. Специфичность. Не обнаружено перекрестной реакции моноклональ­
ных антител к СА 125 с раковоэмбриональным антигеном, с антигенами СА 19.9 и
СА15.3.
4.2. Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определения
содержания СА 125 в одном и том же образце сыворотки (плазмы) с использова­
нием набора СА 125-ИФА не превышает 8%.
4.3. Линейность. Зависимость концентрации СА 125 в образцах сыворотки
(плазмы) крови при разведении их сывороткой (плазмой) крови, не содержащей
СА 125, имеет линейный характер в диапазоне концентраций 25 - 400 Ед/мл и со­
ставляет “ 10%.
4.4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на “от­
крытие" СА 125 - соответствие измеренной концентрации СА 125 предписанной,
полученной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калиб­
ровочной пробы 50 Ед/мл. Процент “открытия" составляет 90 -110%.
4.5. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая набором
f
концентрация СА 125 не превышает 10 Ед/мл.
4.6. Клиническая проверка. Концентрация СА 125 в сыворотке (плазме) кро­
ви у здоровых людей составляет до 35 Ед/мл. У беременных женщин, в особенно­
сти, во время последних двух триместров, может наблюдаться повышение кон­
центрации СА 125 до 65 Ед/мл и выше.
4.7. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточ­
нить значения концентрации СА125, соответствующие нормальным у обследуе­
мого контингента людей.
5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
5.1. Потенциальный риск применения на^0ф1'^ тв т2 а .
\.
5.2. Все компоненты набора, за исключ)^н^ем бшп-рёагёнта (раствор сер-
ОБШЕСТВО с ОГРАНИЧЕННОЙ // V ( ' М \
01EElCT3tilHOGTbO / n
TEHEPAiUf L'i? ДИРЕКТОР
Лг:е?:д!^н Степанович
ной кислоты), в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Раствор серной кислоты обладает раздражающим действием. Избегать
разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. При попадании на кожу и сли­
зистые следует смыть кислоту большим количеством проточной воды.
5.3. При работе с набором следует соблюдать “Правила устройства, техни­
ки безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и
личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-
эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР"
(Москва, 1981 г.).
5.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или
пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать
как потенциально инфицированный материал, способный длительное время со­
хранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирус­
ной инфекции.
6. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ,
НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ:
ч
- Фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптиче­
скую плотность раствора в лунках при длине волны 450 нм;
- прибор для встряхивания планшетов (шейкер);
- пипетки полуавтоматические одноканальные со сменяемыми наконечни­
ками, позволяющие отбирать объемы жидкости 50; 100 и 250 мкл;
- пипетки полуавтоматические многоканальные со сменяемыми нако­
нечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости 50; 100 и 250 мкл;
- насос водоструйный:
- цилиндр мерный вместимостью 500 мл;
- вода бидистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
7. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА
7.1. Перед проведением анализа компоненты набора и исследуемые об­
разцы сыворотки (плазмы) крови следует выдержа,^ при комнатной температуре
(+18-25 °С) в течение времени не менее 30 мин. У' /
ОБЩЕСТВО с ОГРАНИМЕНИОЙ j/ ; , и
GIEElCT^GiHlCryiO /'W \
<< А . . > ^
FEHEPAJib» W;f ДИРЕКТОР
7.2. Приготовление планшета. >
Вскрыть пакет с планшетом и установить на рамку необходимое количество
стрипов. Оставшиеся неиспользованными стрипы следует тщательно заклеить
бумагой для заклеивания планшета и хранить в упаковке при температуре +2-
8Х в течение всего срока годности набора.
7.3. Приготовление отмывочного раствора.
Содержимое флакона с концентратом отмывочного раствора перенести в
мерный цилиндр вместимостью 500 мл, добавить 198 мл бидистиллированной
воды и тщательно перемешать.
В случае дробного использования набора следует отобрать необходимое
количество концентрата отмывочного раствора и развести бидистиллированной
водой в 10 раз (1 объем концентрата + 9 объемов бидистиллированной воды).
Полученный отмывочный раствор можно хранить при комнатно11 темпера­
туре (+18-25°С) не более 2 дней или при температуре +2-8Х не более 10 дней.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
8.1. Внести в соответствующие лунки в дубликатах по 50 мкл каждой ка­
либровочной пробы и контрольной сыворотки. В остальные лунки внести в дубли­
катах по 50 мкл анализируемых образцов сыворотки (плазмы)’ крови.
8.2. Внести во все лунки по 50 мкл конъюгата. Заклеить планшет бумагой
для заклеивания и инкубировать планшет при постоянном встряхивании на шей-
кере при скорости 600 об/мин в течение 60 мин при комнатной температуре.
t
Внесение калибровочных проб, контрольной сыворотки, анализируемых
проб и конъюгата необходимо проводить быстро, в течение 10-15 мин.
8.3. По окончании инкубации удалить содержимое лунок отсасыванием (с
помощью водоструйного насоса) или декантированием и промыть лунки 5 раз.
При каждой промывке добавить во все лунки по 250 мкл отмывочного раствора
(см п. 7.3.), встряхнуть планшет круговыми движениями по горизонтальной по­
верхности с последующим отсасыванием или декантированием. При каждом де­
кантировании необходимо тщательно удалять остатки жидкости из лунок постуки­
ванием планшета в перевернутом положении по фильтровальной бумаге.
8.4. Внести во все лунки возможно быстро (желательно с помощью много­
канальной пипетки) по 100 мкл раствора ТМБ и и>:{^^мровать планшет в темноте
при комнатной температуре в течение 10-15 м1^ 0 завйойМостй, от: степени разви-
ОБЩЕСТВО с ОГРАНИЧЕННОЙ j I ; ' / Vh
01[;Е1СК^г-,игугыо /Л'л Д . ' 'Т-" .., /
А i » f \ / : у
ГЕИЕРЛЛЬ^:ЬМ il i^'EKTOP
ЛГЕгД;,И }СИ',Й СГ^:ПЛИСВ11Ч
I
i
ТИЯ синего окрашивания.
8.5. Внести во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности,
как и раствор ТМБ, по 100 мкл стоп-реагента; при этом содержимое лунок окра­
шивается в ярко-желтый цвет. Перемешать содержимое лунок легким покачива­
нием в течение 3-5 сек и сразу перейти к п, 8,6,
8.6. Измерить (по возможности быстрее) величину оптической плотности
(ОП) в лунках планшета на фотометре вертикального сканирования при длине
волны 450 нм. В случае невозможности своевременного измерения ОП растворов
в лунках на фотометре, планшет можно хранить в темном месте при температуре
+2-8 °С не более 4 ч.
Если программа фотометра позволяет вычитать величину ОП в лунках с
калибровочной пробой О Ед/мл из значений ОП всех остальных лунок, то для
дальнейших расчетов необходимо использовать величину В - среднее арифмети­
ческое значение величины ОП в лунках, содержащих калибровочные или анали­
зируемые пробы. Если же фотометр не позволяет вычитать величину ОП лунок с
калибровочной пробой О Ед/мл, то необходимо пользоваться формулой В-Во, где
Во - среднее арифметическое значение величины ОП в лунках с калибровочной
пробой О Ед/мл.
8.7. Построить в линейных координатах калибровочный график: ось абс­
цисс - концентрация СА 125 в калибровочных пробах (Ед/мл), ось ординат - опти­
ческая плотность калибровочных проб (ОП ).
450
8.8. Определить по калибровочному графику содержание СА 125 в анали­
зируемых пробах. Если концентрация СА 125 в анализируемой пробе превышает
400 Ед/мл, следует развести анализируемый образец калибровочной пробой О
Ед/мл в 10 раз, повторить определение и полученный результат умножить на 10.
9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
9.1. Набор реагентов СА 125-ИФА должен храниться в упаковке предпри-
ятия-изготовителя при температуре +2-8‘’С в течение всего срока годности (12
мес). Допускается хранение набора при температуре до +25 ‘'С не более 5 сут.
9.2. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 неизвестного
образца, 6 калибровочных проб и 1 пробы контрольного образца (всего 96 опре-
Т ■ ^
делений).
9.3. В с л у ч а е и ^ с п о л ь ^ о а а н и с л е д у е т хранить
OIBElCr--i
<* Л . /' >>
следующим образом:
- вскрытые стрипы следует использовать в течение 1 ч, длительному хра­
нению не подлежат;
- оставшиеся неиспользованными стрипы, чтобы предотвратить воздейст­
вие на них влаги, необходимо тщательно заклеить бумагой для заклеивания
планшета и хранить в упаковке при температуре +2-8 °С в течение всего срока
годности набора:
- конъюгат после вскрытия флакона можно хранить при температуре +2-
8 °С не более 1 мес;
- раствор ТМБ и стоп-реагент после вскрытия флаконов можно хранить
при температуре +2-8 °С в течение всего срока годности набора;
- калибровочные пробы и контрольную сыворотку после вскрытия флако­
нов можно хранить при температуре +2-8 °С не более 1 мес; при необходимости
более длительного хранения - при температуре минус 20 '’С в течение всего сро­
ка годности набора;
- приготовленный отмывочный раствор можно хранить при комнатной тем­
пературе (+18-25 °С) не более 2 дней или при температуре +2-8 °С не более 10
дней; ^
- оставшийся неиспользованным концентрат отмывочного раствора можно
хранить при температуре +2-8 “С в течение всего срока годности набора.
9.4. Для проведения анализа не следует использовать гемолизированную,
/
мутную сыворотку (плазму) крови, а также сыворотку (плазму) крови, содержащую
азид натрия.
9.5. Исключается использование для анализа образцов крови людей, полу­
чавших для диагностики или терапии препараты, в состав которых входят мыши­
ные антитела.
9.6. При использовании набора для проведения нескольких независимых
серий анализов следует иметь в виду, что для каждого независимого определения
необходимо построение новой калибровочной кривой; кроме этого, рекомендуется
определение концентрации СА 125 в контрольной сыворотке.
9.7. Запрещается использовать стоп-реагеуты из наборов других фирм-
производителей. / v
9.8. Для noj(!iMj®ews с<адэшш^б1|эзульу^т^в необходимо строгое соблюдение
ОТРЕТСТЗПННЗСТЬО
<< А U :-i I.
Генерллькш директор
Л^Б^ДНН СТЕПАНОВИЧ
инструкции по применению набора.
По вопросам, касающимся качества набора СА 125-ИФА, следует обра­
щаться в ООО "Хема-Медика” по адресу; 125319, Москва, 4-я ул. 8 Марта, д. 3,
тел./факс (095) 152-31-60; 152-37-31, и в Институт государственного контроля ле­
карственных средств ФГУ «НЦ ЭСМП» М3 РФ по адресу; 117246, Москва, Науч­
ный проезд, д. 14 а, тел. (095) 120-60-95; 120-60-96.
Начальник исследовательского
отдела ООО “Хема - Медика”, к. м. н. Ю. С. Лебедин
Руководитель лаборатории иммунологии Л. Винницкий
и регуляторных механизмов в хирургии
РНЦХ РАМН д. м. н., профессор
ОПЩЕСТВО с ОГРАНИЧГИНОМ
<'А ■■ J ’>
Директор
С1^пА!;ович