Набор реагентов для количественного иммуноферментного определения общего иммуноглобулина Е в сыворотке крови человека ("ИФА-общий IgE") по ТУ 9398-210-98539446-2010 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2011/10272 от 05.03.2011 · класс риска 1

Производитель: ООО "Компания Алкор Био" (Россия)

Вид изделия: Аллерген-специфические/общие антитела иммуноглобулин Е (IgE) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 195 контрактов, медианная цена за единицу 7 540 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
Приказом Росздравнадзора ,  Генеральны й директор
от «_» ________ 20__г. № О О О  «К ом0Ш Й1^; к л к о р  Б ио»
^  ^  1^ ы р е в  м .в.
-  2010 г.
«УТВЕРЖДЕНА» ,  «УТВЕРЖДАЮ»
И Н С Т РУ К Ц И Я  п о  П РИ М ЕН ЕН И Ю  Н А БО РА  РЕА ГЕ Н ТО В  
Д Л Я К О Л И Ч Е С Т В Е Н Н О ГО  И М М У Н О Ф ЕРМ ЕН ТН О Г'О  О П РЕ Д Е Л Е Н И Я  
СЕКС-СТЕРОИДСВЯЗЫВАЮ ЩЕГО ГЛОБУЛИНА 
В С Ы В О РО Т К Е  К РО В И  Ч ЕЛ О В ЕК А  
(«ИФА-ССГ»)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Н абор реагентов «И Ф А -С С Г» предназначен для количественного 
определения секс-стероидсвязы ваю щ его глобулина (ССГ) в сы воротке крови человека 
методом твердоф азного им муиоф ерментного анализа.
1.2. ССГ —  белок сы воротки крови, связы ваю щ ий половы е стероидны е 
гормоны. Это дим ерны й гликопротеин, синтезируемы й в печени, его м олекулярная масса 
варьирует от 80 до 100 кД а в зависим ости от степени гликозилирования.
В крови стероидны е горм оны  частично находятся в свободном  состоянии, а 
частично ~ в связанном  с альбумином  и со специф ическим  белком  (для половы х стерои­
дов это ССГ). Ф ракция полового стероидного гормона, которая не связана с ССГ (так 
называемый биодоступны й гормон), м ож ет вы полнять свою  регуляторную  ф ункцию  в 
клетках-миш енях. Биодоступны м и являю тся и те стероиды , которы е связаны  с 
альбумином, так как слабая связь с альбумином не препятствует диф ф узии гормона в 
клетки-миш ени.
М аксим альную  аф ф инность ССГ проявляет к андрогенам , м еньш ую  - - к 
эстрогенам. П оловы е стероиды  влияю т на синтез ССГ: эстрогены  обладаю т стим ули­
рующим эф ф ектом , а андрогены  —  ингибирую щ им .
У здоровы х лю дей содерж ание ССГ в крови варьирует в ш ироких пределах. У 
женщ ин значения ССГ в среднем выш е, чем у м уж чин. У ровень ССГ повы ш ается при 
гипертироидизм е, гиперэстрогении (беременность, приём эстрогенов в составе оратьны х 
контрацептивов и т. п., цирроз печени, лю теиновая ф аза цикла). У взрослы х мужчим с 
возрастом за счет повы ш ения концентрации ССГ количество биодоступного тестостерона 
постепенно уменьш ается. У ж енщ ин пониж ение уровня ССГ коррелирует с наитичием 
гиперандрогенны х состояний (синдром поликистозны х яичников, врож денная 
дисфункция коры  надпочечников, гирсутизм). У меренное сниж ение уровня ССГ 
наблю дается такж е при гипотироидизм е, болезни К уш инга, гиперпролактинемии, 
акромегалии, после терапии андрогенами (или прогестинам и, оказы ваю щ им и 
андрогенны й эффект).
Значение С С Г используется при определении индекса свободны х андрогенов, 
который вы числяется как отнош ение концентрации общ его тестостерона к ССГ.
1.3. Н абор «И Ф А -С С Г » рассчитан на проведение анализа в дубликатах 
40 неизвестны х, 6 ка;ш бровочны х проб, одной пробы  контрольной сы воротки и одной 
пробы для определения оптической плотности раствора ТМ Б при использовании всех 
стрипов одноврем енно (всего 96 определений).
П р и м е ч а н и е : в случае дробного прим енения набор м ож ет  бы т ь использован 
только в т ечение м есяца после вскры т ия компонент ов набора.
1


--- стр. 2 ---
2, ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. П ринцип действия
В наборе «И Ф А -С С Г » использован «сэндвич »-вариаит твердоф азного 
им муноф ерментного анализа. Д ля реализации этого варианта использованы  два 
моноклональны х антитела с различной эпитопной специф ичностью  к ССГ. Одно из них 
иммобилизовано на твердой фазе (внутренняя поверхность лунок), второе конъю гировано 
с пероксидазой хрена. В лунках, при добавлении исследуемого образца и конъю гата анти- 
СС Г-пероксидаза, во время инкубации одноврем енно происходит им мобилизация ССГ, 
содерж ащ егося в исследуемом  образце, и связы вание его с конъю гатом . При удалении 
содерж имого из лунок и промывке происходит удаление избы тка конъю гата анти-С С Г- 
пероксидаза, не связавш егося с им м обилизованны м  в ходе инкубации ССГ. Количество 
связавш егося конъю гата прямо пропорционально количеству С С Г в исследуем ом  образце 
(см. Рис.1).
С  а н т и т е л а м и  к С С Г
Рисунок 1. Схем а анализа
Во время инкубации с раствором  ТМ Б происходит окраш ивание раствора в лунках. 
Степень окраски прямо пропорциональна концентрации ССГ в анализируем ы х пробах. 
После изм ерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного 
графика рассчиты вается концентрация ССГ в исследуемы х образцах.
2.2. С остав набора
ком плект из двенадцати восьм илуночны х стрипов в рам ке с им м обилизованны м и на 
внутренней поверхности лунок м оноклональны м и антителам и к ССГ, маркирован 
«Стрипы с м оноклональны м и антителам и к С С Г » —  1  упаковка;
калибровочны е пробы  (КП), содерж ащ ие известны е количества ССГ. Точные 
значения концентраций ССГ в калибровочны х пробах указаны  н а этикетках флаконов, 
ориентировочны е -  0; 5; 20; 50; 100; 200 нм оль/л -  6 ф лаконов (лиоф илизованны е 
препараты или ж идкости по 0,5 мл);
- конъю гат анти-С С Г-пероксидаза, м аркирован «К онъю гат Е» —  1  ф лакон (14 мл);
- водно-солевой раствор для разведения образцов сы воротки крови, маркирован 
«Буфер Д» —  1  ф лакон (20 мл);
концентрированны й водно-солевой раствор для пром ы вки лунок, м аркирован 
«Буфер Р» —  I ф лакон (14 мл);
■ *  раствор тетрам етилбензидина, маркирован «Раствор Т М Б» —  1  ф лакон (14 мл);
стоп-реагент (1 Н соляная кислота), маркирован «С топ-реагент» —  1  флакон 
(14 мл);
- контрольная сы воротка с известны м  содерж анием  ССГ, м аркирована «К онтрольная 
сыворотка» —  1  ф лакон (лиоф илизованны й препарат или ж идкость 0,5 мл);
- прозрачны й пластиковы й пакет с замком (при упаковке стрипов в пакет из 2 - 
слойного полиэтилена).


--- стр. 3 ---
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. С пециф ичность. Не обнаруж ено перекрестной реакции обоих 
моноклональны х антител к ССГ с тироксин-связы ваю щ им  глобулином  (ТСГ) и корги- 
костероид-связы ваю щ им  глобулином (транскортином ).
3.2. К оэф ф ици ент вариации результатов определения ССГ в одном и том же 
образце с использованием  набора «И Ф Л ^С С Г» не превы ш ает 8%.
3.3. Л инейность. Зависим ость концентрации ССГ в образцах сы воротки крови 
при разведении их буфером Д  им еет линейны й характер в диапазоне концентраций 
калибровочны х проб № 2 - Хеб и составляет 90-110% ,
3.4. Точность. Д анны й аналитический параметр проверяется тестом на 
«открытие» ССГ —  проверка соответствия значения определяем ой концентрации ССГ 
расчетной величине, полученной путем смеш ивания равны х объемов контрольной 
сыворотки и КП  № 4. П роцент откры тия составляет 90-110% .
3.5. Ч увствительность. М инимальная достоверно определяем ая набором 
концентрация ССГ в сы воротке крови человека не превы ш ает 2 нмоль/л.
3.6. Х ук-эф ф ект вы соких концентраций. В наборах реагентов, основанны х на 
«сэндвич»-принципе анализа, при вы соких концентрациях аналита зависим ость величины  
оптической плотности от концентрации становится обратно пропорциональной (так 
называемый хук-эф ф ект вы соких концентраций). При использовании набора «ИФА-ССГ'» 
хук-эфф ект не обнаруж ен вплоть до концентрации ССГ 10 О О О  нмоль/л.
3.7. Д иапазон ож идаемы х значений. С одерж ание ССГ изм еряли у 70 здоровы х 
мужчин и 85 здоровы х неберем енны х женщ ин. Д иапазон изм еренны х концентраций 
составил; у м уж чин 12,4-78,4 нм оль/л (медиана 38,5 нм оль/л), у ж енщ ин 14,1-129 нмоль/л 
(медиана 67 нмоль/л).
Д иапазон ож идаем ы х значений зависит от м ногих ф акторов: специф ичности 
метода, особенностей исследуемой популяции, точности м етода в конкретной 
лаборатории. По этой причине каж дой лаборатории реком ендуется использовать 
предоставленные изготовителем  значения только до тех пор, пока специалистам и 
лаборатории не будут определены  диапазоны  ож идаем ы х значений, характерны х для 
конкретной популяции в месте располож ения лаборатории.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. П отенциальны й риск прим енения набора — класс I .
4.2. Все ком поненты  набора в используемы х концентрациях являю тся 
нетоксичными.
4.3. При работе с набором следует соблю дать требования ГО С Т  Р 52905-2007 
Л аборатории медицинские. Требования безопасности.
4.4. С топ-реагент представляет собой 1  И  раствор соляной кислоты . Избегать 
разбры згивания и попадания н а кожу и слизистые. В случае попадания раствора стоп- 
реагента на кож у и слизисты е необходим о пром ы ть пораж енны й участок болы пим  
количеством проточной воды.
4.5. П ри работе с набором  следует надевать одноразовы е резиновы е или 
пластиковы е перчатки, т.к. производны е крови, входящ ие в состав набора, и исследуемы е 
образцы являю тся потенциально инф ицированны м  м атериалом , способны м  длительное 
время сохранять и передавать возбудителей различны х вирусны х инф екций.
4.6. Х им ическая посуда и оборудование, которы е использую тся в работе с 
набором, долж ны  бы ть соответствую щ им  образом м аркированы  и храниться отдельно.
4.7. Запрещ ается прием пищ и, использование косм етических средств и курение 
в пом ещ ениях, предназначенны х для работы  с наборами.


--- стр. 4 ---
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- С пектроф отом етр вертикального сканирования, позволяю щ ий изм ерять оптическую  
плотность раствора в лунках при длине волны  450 нм;
прибор для встряхивания рамки со стрипами (терм остатируем ы й ш ейкер), 
позволяю щ ий производить встряхивание со скоростью  4 0 0 -8 0 0  об/м ин при тем пературе 
+37°С;
пипетки полуавтом атические одноканальны е с изм еняем ы м  объем ом  отбора 
жидкостей: на 5 -5 0  мкл; 4 0 -2 0 0  мкл; 2 0 0 -1 0 0 0  мкл; 1000-5000 мкл с наконечникам и;
пипетка полуавтом атическая восьм иканальная, позволяю щ ая отбирать объемы 
ж идкости до 300 м кл, с наконечникам и;
- цилиндр м ерны й, позволяю щ ий отм ерять 50-500 мл;
стакан стеклянны й подходящ его объема;
“ вода дистиллированная;
- бумага ф ильтровальная;
перчатки резиновы е или пластиковы е;
1  %  раствор гипохлорита натрия или 6%  раствор перекиси водорода;
- контейнер для дезинф екции;
- ванночки для внесения реагентов восьм иканальной пипеткой.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
6.1. Забор крови из вены осущ ествляю т с соблю дением  правил асептики. После 
формирования сгустка сыворотку отделяю т путем центриф угирования. После 
центриф угирования сы воротку переносят в отдельную  пробирку. Д ля проведения анализа 
не разрещ ается использовать плазму крови, гем олизированную  или м утную  сы воротку, а 
такж е образцы  сы воротки, содерж ащ ие азид натрия.
6.2. О бразцы  сы воротки крови разреш ается хранить при тем пературе f-2... 8°С не 
более 2 суток; при необходим ости более длительного хранения реком ендуется 
аликвотировать образец и хранить в заморож енном виде при тем пературе -2 0 °С  или 
ниже. Не допускается повторное замораж ивание образца.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. П одготовка реагентов
7.1.1. Стрипы. Перед вскры тием  пакет со стрипам и необходим о вы держ ать при 
комнатной тем пературе (+18...25*^0) не менее 30 минут. В скры ть пакет и переставить на 
свободную  рамку необходим ое количество стрипов.
7Л.2. Ж идкие калибровочны е пробы  и контрольная сы воротка готовы  к 
использованию .
Для восстановления лиоф илизованны х калибровочны х проб и контрольной 
сыворотки перед вскры тием  флаконов легким  постукиванием  стряхнуть частицы, 
прилипш ие к стенкам  флаконов или к кры ш кам. О ткры ть ф лаконы  и полож ить крыш ки 
перевернуты ми н а сухую  поверхность. В каж дый ф лакон с калибровочной пробой и 
контрольной сы вороткой внести по 0,5 мл дистиллированной воды  и закры ть кры ш ками. 
Выдержать ф лаконы  в течение 10 м инут при комнатной тем пературе без перемеш ивания. 
Затем, аккуратно наклоняя и вращ ая ф лаконы , перем еш ать их содерж имое до полного 
растворения, избегая пенообразования. В течение следую щ их 10 м инут вы держ ать 
флаконы при ком натной тем пературе, периодически перемеш ивая.
7.1.3. К онъю гат Е готов к использованию . Расход конъю гата Е на один стрип 
составляет 1,15 мл.
7.1.4. Буф ер Д  готов к использованию .
7.1.5. П ром ы вочны й раствор. Н еобходимое количество буф ера Р развести