Набор реагентов для качественного иммуноферментного определения поверхностного антигена вируса гепатита В в сыворотке, плазме и препаратах крови человека "ГепатитИФА-HBsAg сенс" по ТУ 21.20.23-278-98539446-2018 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2021/13359 от 08.02.2021 · класс риска 3

Производитель: ООО "Компания Алкор Био" (Россия)

Вид изделия: Вирус гепатита В поверхностный антиген ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 66 контрактов, медианная цена за единицу 25 552 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 2 ---
в|^атитИФА-НВзАд сенс В-1.2018-12
/ некоторых людей гепатит В переходит в хроническую форму, 
/  которая впоследствии может развиться в цирроз или 
/  первичный рак печени.
[ Возбудителем гепатита В является ДНК-содержащий 
вирус, относящийся к семейству Hepadnaviridae,  род 
Orthohepadnavirus.  Выделяют 10 генотипов вируса с 
различными биологическими свойствами. Один из четырех 
генов генома вируса гепатита В (ВГВ) кодирует 
поверхностный антиген (HBsAg), представляющий собой 
гликозилированный белок оболочки. HBsAg содержит 
детерминанту «а», общую для всех субтипов вируса, и 
дополнительные субдетерминанты (d и у), определяющие 
иммунологические различия подгрупп (ad и ау). 
Инкубационный период составляет от 45 до 180 дней, в 
среднем -  75 дней. Основные источники ВГВ -  носители 
вируса, больные острой и хронической формой вируса (ВГВ 
содержится в крови, слюне, желчи, половых секретах и др.). 
Возможные пути заражения: перинатальное инфицирование, 
при половых контактах и парентеральным путем.
Главным средством для профилактики гепатита В 
является высокоэффективная вакцина.
1.3. Функциональное назначение набора «ГепатитИФА- 
HBsAg сенс» -  скрининг поверхностного антигена вируса 
гепатита В в сыворотке и плазме крови человека, в том числе 
при обследовании доноров крови, и препаратах крови 
человека ^.(иммуноглобулин, альбумин, лейкоцитарный 
интерферон, криопреципитат).
1.4. Набор «ГепатитИФА-HBsAg сенс»^ предназначен для 
однократного применения.
1.5. Набор «ГепатитИФА-HBsAg сенс» предназначен для 
клинической лабораторной диагностики in vitro  сотрудниками
94796
26.11.2020


--- стр. 3 ---
медицинских/  /слинико-диагностических лабораторий
/  учреждений и лабораторий службы крови.
I 1.6.Набор «ГепатитИФА-HBsAg сенс» предназначен для 
обследования всех групп населения без градации по 
демографическому или популяционному признаку.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
В наборе «ГепатитИФА-HBsAg сенс» использован 
«сэндвич»-вариант твердофазного иммуноферментного 
анализа. Для реализации этого варианта использованы два 
моноклональных антитела с различной эпитопной 
специфичностью к HBsAg, а также конъюгат стрептавидина с 
пероксидазой хрена (конъюгат 2). Одно из моноклональных 
антител иммобилизовано на твердой фазе (внутренняя 
поверхность лунок), второе - конъюгировано с эфиром 
биотина (конъюгат 1). Во время первой инкубации 
одновременно происходит иммобилизация HBsAg, 
содержащегося в исследуемом образце, и связывание 
образовавшегося комплекса с конъюгатом 1. Во время второй 
инкубации конъюгат 2 связывается с биотинилированными 
антителами. Несвязавшиеся компоненты удаляются 
промывкой (Рисунок 1).
Во время инкубации с раствором ТМБ происходит 
окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо 
пропорциональна количеству HBsAg в исследуемых пробах. 
Наличие HBsAg оценивается относительно значения ОПкрит.
94796
26.11.2020


--- стр. 4 ---
HBsAg
Конъюгат StrAv
тротидаза
Планшет с  
моноклональными  
антителами к  
HBsAg
Конъюгат анти-  
HBsAg-биотин
Рисунок 1. Схема анализа
2.2. Состав и комплектации набора
Набор «ГепатитИФА-HBsAg сенс» выпускается в четырех 
комплектациях:
Комплектация №1: на 96 определений при проведении 
анализа вручную или на автоматическом анализаторе
«Alisei Q.S.»\ SEAC/Next Level, Италия (далее «Alisei»).
Комплектация №2: на 192 определения при проведении 
анализа вручную или на автоматическом анализаторе
«Alisei».
Комплектация №3: на 480 определений при проведении 
анализа вручную или на автоматическом анализаторе
«Alisei».
Комплектация №4: на 960 определений при проведении 
анализа вручную или на автоматическом анализаторе
«Alisei».
^Допускается постановка анализа на других автоматических анализаторах для ИФА 
открытого типа, за информацией о необходимой комплектации набора и программе 
проведения анализа обращайтесь к производителю набора «ГепатитИФА-HBsAg сенс» в 
ООО «Компания Алкор Био», тел/факс: 8(812) 677-8779.
94796
26.11.2020


--- стр. 5 ---
Обратите внимание, при каждой постановке анализа на 
/каждом планшете обязательно нужно определять: 
оптические плотности (ОП) отрицательной контрольной 
пробы (ОКП), слабоположительной контрольной пробы (СКП), 
положительной контрольной пробы (ПКП) и раствора ТМБ в 
соответствии со схемой маркировки лунок (п.7.2.1.1.)-
Примечание: в случае дробного применения набор  
может бы ть использован только в течение ш ести месяцев  
после вскрытия компонентов набора.
В состав набора входят следующие компоненты:
• комплект из двенадцати 8-луночных стрипов в рамке с 
иммобилизованными на внутренней поверхности лунок 
моноклональными антителами к HBsAg, маркирован «Стрипы 
с моноклональными антителами к HBsAg» -  1, 2, 5 или 
10 упаковок в зависимости от варианта комплектации 
(Таблица 1);
• отрицательная контрольная проба на основе водно­
солевого раствора, не содержащая рекомбинантный HBsAg. 
Флаконы маркированы «Отрицательная контрольная 
проба» -  1, 2, 5 или 10 флаконов (по 2 мл) в зависимости от 
варианта комплектации (Таблица 1);
• слабоположительная контрольная проба на основе 
водно-солевого раствора, содержащая рекомбинантный 
HBsAg в низкой концентрации. Флаконы маркированы 
«Слабоположительная контрольная проба» -  1, 2, 5 или 
Юфлаконо! (по 1,5 мл) в зависимости от варианта 
комплектации (Таблица 1);
94796
26.11.2020


--- стр. 6 ---
• положительная контрольная проба на основе
Г^одно-солевого раствора, содержащая рекомбинантный 
HBsAg в высокой концентрации. Флаконы маркированы 
«Положительная контрольная проба» -  1, 2, 5 или
10 флаконов (по 1,5 мл) в зависимости от варианта 
комплектации (Таблица 1);
• конъюгат моноклональных антител к HBsAg с биотином, 
маркирован «Конъюгат Е1» -  1, 2, 5 или 10 флаконов (по 
6 мл) в зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
• концентрированный конъюгат стрептавидина с 
пероксидазой хрена, маркирован «Конъюгат Е2 (10Х)» -  1, 2, 5 
или 10 флаконов (по 1  мл) в зависимости от варианта 
комплектации (Таблица 1);
• водно-солевой раствор для разведения Конъюгата Е2, 
маркирован «Буфер Е2» -1,3  или 5 флаконов (по 15 мл) в 
зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
• водно-солевой раствор для разведения препаратов 
крови, маркирован «Буфер Д сенс» -  1  флакон (6мл) или 1, 2 
флакона (по 15 мл) в зависимости от варианта комплектации 
(Таблица 1);
• концентрированный водно-солевой раствор для 
промывки лунок, маркирован «Буфер Н (20Х)» -1,2  флакона 
(по 50 мл) или 3, 5 флаконов (по 100 мл) в зависимости от 
варианта комплектации (Таблица 1);
• раствор тетраметилбензидина, содержащий 
тетраметил^нзидин, перекись водорода и стабилизаторы, 
маркирован «Раствор ТМБ» -  1, 2, 5 или 10 флаконов 
(по 14 мл) в зависимости от варианта комплектации 
(Таблица 1);
• стоп-реагент, 3,59% раствор соляной кислоты, 
маркирован «Стоп-реагент» -2,3  (по 50 мл) или 3, 6 флаконов
6
 94796
26.11.2020


--- стр. 7 ---
100 мл) в зависимости от варианта комплектации 
^Габлица 1);
• одноразовая ванночка -  2 шт для комплектаций №1, 
№2 или 4 шт для комплектаций №3, №4 (Таблица 1);
• одноразовый наконечник -  16 шт для комплектаций 
№1, №2 или 32 шт для комплектаций №3, №4 (Таблица 1);
• пакет закрывающийся полиэтиленовый (при упаковке 
Стрипов в пакет из материала пленочного) -  1, 2, 5 или 10 шт 
в зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
2. Паспорт на набор реагентов -  1  шт;
3. Инструкция по применению -  1  шт.
Таблица 1
Кат. номер 200-68 200-69 200-70 200-71
Н азвание
ком понента
Ц ветовая
кодировка
ком понент
а
Комплектаци 
я № 1
Комплектаци 
я №2
Комплектаци 
я №3
Комплектаци 
я №4
Комплект 
Стрипов 
в рамке
- 1  шт 2 шт 5 шт 10 Ш Т
Отрицательная 
контрольная 
проба (ОКП)
Жидкость
желтого
цвета
1  фл -  2 мл 2 фл по 
2 мл
5 фл по 
2 мл
10 фл по 
2 мл
Слабоположи­
тельная 
контрольная 
проба (СКП)
Жидкость
розового
цвета
1  ф л - 
1,5 мл
2 фл по 
1,5 мл
5 фл по 
1,5 мл
10 фл по 
1,5 мл
Положительная 
контрольная 
проба (ПКП)
Жидкость
красного
цвета
1  ф л - 
1,5 мл
2 фл по 
1,5 мл
5 фл по 
1,5 мл
10 фл по 
1,5 мл
Конъюгат Е1
Жидкость
зеленого
цвета
1  фл -  6 мл 2 фл по 
6 мл
5 фл по 
6 мл
10 фл по 
6 мл
Конъюгат Е2 (10Х)
Жидкость
темно­
розового
цвета
1  фл -  1  мл 2 фл по 
1  мл
5 фл по 
1  мл
10 фл по 
1  мл
Водно-солевой 
раствор для 
разведения 
Конъюгата Е2 
(Буфер Е2)
Жидкость
темно­
розового
цвета
1  фл -  
15 мл
1  ф л - 
15 мл
3 фл по 
15 мл
5 фл по 
15 мл
94796
26.11.2020


--- стр. 8 ---
Л^дно-солевой 
ш раствор для 
ш( разведения 
Ч препаратов крови 
/ (Буфер Д сенс)
Жидкость
желтого
цвета
1  фл -  6 мл 1  фл -  6 мл 1  фл -  15 
мл
2 фл по 
15 мл
I Концентрированны 
й водно-солевой 
раствор для 
промывки лунок 
(Буфер Н (20Х))
Бесцветная
жидкость
1  фл -  
50 мл
2 фл по 
50 мл
3 фл по 
100 мл
5 фл по 
100 мл
Раствор
ТМБ
Бесцветная 
или бледно- 
желтого 
цвета, или 
светло- 
бурого 
цвета 
жидкость
1  фл -14 
мл
2 фл по 
14 мл
5 фл по 
14 мл
10 фл по 
14 мл
Стоп-реагент Бесцветная
жидкость
2 фл по 
50 мл
3 фл по 
50 мл
3 фл по 
100 мл
6 фл по 
100 мл
Одноразовая
ванночка - 2 шт 2 шт 4 шт 4 шт
Одноразовый
наконечник - 16 шт 16 шт 32 шт 32 шт
Пакет
закрывающийся
полиэтиленовый
- 1  шт 2 шт 5 шт 10 шт
Паспорт на набор 
реагентов - 1  шт 1  шт 1  шт 1  шт
Инструкция по 
применению - 1  шт 1  шт 1  шт 1  шт
и ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ  
ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая чувствительность набора 
«ГепатитИФА-HBsAg сенс» (порог обнаружения HBsAg) 
определяется как статус разведения Третьего 
международного стандарта «WHO International Standard. Third 
International Standard for HBsAg» производства NIBSC, c 
минимальной концентрацией HBsAg. Набор «ГепатитИФА- 
HBsAg сенс» определяет разведение международного
94796
26.11.2020


--- стр. 9 ---
}татитИФА-НВ5Ад сенс В-1.2018-12
Стандарта с концентрацией 0,01 МЕ/мл как положительный 
'образец.
3.2. Диагностическая чувствительность
Чувствительность набора «ГепатитИФА-HBsAg сенс» по 
Стандартной панели предприятия HBsAg (СПП HBsAg) из 
образцов сыворотки, плазмы и препаратов крови человека, 
содержащих и не содержащих HBsAg, определяется, как доля 
полученных положительных результатов к общему 
количеству положительных образцов в СПП HBsAg и 
составляет 100%.
Установлено, что Набор «ГепатитИФА-HBsAg сенс» 
определяет все образцы «HBsAg-стандартной панели 
сывороток», РУ № ФСЗ 2012/13718, производства 
АО «Вектор Бест» как положительные образцы.
Исследование диагностической чувствительности было 
проведено на выборке из 463 образцов сыворотки, плазмы с 
антикоагулянтами, полученных от пациентов с 
подтвержденным гепатитом В в острой и хронической формах 
и препаратов крови, котаминированных положительной 
сывороткой крови.
Из них:
- 427 образцов, с доказанным наличием HBsAg в т.ч. 
образцы последовательной сдачи крови,
слабоположительные образцы, образцы с известной высокой 
концентрацией аналита, образцы, содержащие разные 
генотипы ^ГВ (A-F,H), свежие образцы (взятые в день 
исследования) сыворотки и плазмы крови.
20 образцов, полученных от пациентов с 
подтвержденной микст-инфекцией (гепатит С + гепатит В) и 
(ВИЧ-инфекция + гепатит В).
94796
26.11.2020


--- стр. 12 ---
|^атитИФА-НВзАд сенс В-1.2018-12
^препаратов крови человека, не содержащих поверхностный 
антиген вируса гепатита В.
Из них:
- 157 потенциально перекрестно-реагирующих образца, 
полученных от беременных женщин, от пациентов с 
подтверждённым гепатитом А, гепатитом С, 
цитомегаловирусом, вирусом простого герпеса, вирусом 
ветряной оспы, сифилисом, вирусом Эпштейна-Барр, 
токсоплазмой (1дМ), вирусом краснухи (IgG), от ВИЧ- 
инфицированных пациентов, от пациентов с невирусной 
болезнью печени, с системной красной волчанкой и от 
пациентов, в чьих пробах обнаружен ревматоидный фактор);
- 4800 образцов, полученных от условно здоровых 
пациентов, подлежащих плановому профилактическому 
обследованию;
-181  образец, полученный от доноров крови;
- 426 образцов. Полученных от пациентов с 
неинфекционными заболеваниями и пациентов, проходящих 
процедуру гемодиализа;
35 образцов препаратов крови (альбумин, 
иммуноглобулин, лейкоцитарный интерферон,
криопреципитат).
Диагностическая специфичность набора «ГепатитИФА- 
HBsAg сенс» на данной выборке образцов составила 99,91%, 
дoвepитeльl;^ый интервал с 95% доверительной вероятностью 
составил 9^,87-99,92%.
Статистическая достоверность ^ диагностической 
специфичности для каждого вида биологического материала 
составила:
94796
26.11.2020


--- стр. 13 ---
//(линический материал
Диагностическая 
специфичность 
(с доверительной 
вероятностью 95%)
/ Сыворотка крови человека 99,89-99,99%
1  Плазма крови человека (К2ЭДТА, КЗЭДТА, 
цитрат натрия 3,2%, гепарин) 99,77-100%
Препараты крови (альбумин, иммуноглобулин, 
лейкоцитарный интерферон, криопреципитат) 91,9-100%
Статистическая достоверность диагностической 
специфичности для разных исследуемых групп составила:
Исследуемая группа
Диагностическая 
специфичность 
(с доверительной 
вероятностью 95%)
Условно здоровые пациенты пациенты, 
подлежащие плановому профилактическому 
обследованию
99,80-99,98%
Доноры крови 98,5-100%
Пациенты с неинфекционными заболеваниями 
и диализные пациенты 99,4-100%
Пациенты в крови которых обнаружен 
потенциально перекрестно-реагирующий 
фактор.
98,2-100%
в
с
не
не
не
3.5. Коэффициент вариации оптической плотности' 
одном и том же образце при определении HBsAg 
использованием набора «ГепатитИФА-HBsAg сенс» 
превышает 8%. Внутрисерийная воспроизводимость 
превышает 8%. Межсерийная воспроизводимость 
превышает 8%.
3.6. Хук-эффект высоких концентраций
В наббрах реагентов, основанных на «сэндвич»- 
принципе анализа, при высоких концентрациях аналита 
зависимость величины сигнала от концейтрации становится
2  При измерении на одном и том же оборудовании, либо оборудовании со схожими 
техническими характеристиками.
94796
26.11.2020


--- стр. 14 ---
иЛатитИФА-HBsAg сенс
Гбратно пропорциональной (так называемый хук-эффект 
высоких концентраций). При использовании набора 
«ГепатитИФА-HBsAg сенс» хук-эффект высоких концентрации 
HBsAg не обнаружен вплоть до концентрации HBsAg
1  000 000 МЕ/мл.
3.7. Ограничение теста
Пробы пациентов, принимавших накануне сдачи крови 
лекарственные средства, витамин Вт (биотин), 
употреблявших алкоголь, соленую, жирную и острую у, 
для анализа с помощью набора «ГепатитИФА-HBsAg сенс» 
использовать не рекомендуется.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора —  класс 3 
(согласно Приказу Министерства здравоохранения РФ № н 
ОТ 06.06.2012 г.).
4.2. Все компоненты набора в используемых 
концентрациях являются нетоксичными.
При работе с набором следует соблюдать ГОСТ Р 
2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности 
и СП 1.3.2333-08 «Безопасность работы с микроорганизмами 
III _ IV групп патогенности (опасности) и возбудителями 
паразитарных болезней».
4 3. Набор предназначен для профессионального
применения персоналом, имеющим 
выполнеря диагностических исследовании ,п 
специального образования и обучения. ^
выполнять специалисты не моложе 18 лет с ^Ь 1сшим 
средним медицинским, биологическим ^ или иным 
образованием (врач КДЛ, биолог, медицинскии технолог).
94796
26.11.2020


--- стр. 16 ---
/  В-1.2018-12
^'>агитИФА-НВ5Ад сенс
Т  4.9. Запрещается прием пищи, использование 
косметических средств и курение в помещениях, 
предназначенных для работы с наборами.
4.10. Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или 
реактивы, используя дезинфицирующие средства в 
соответствии с МУ-287-113 «Методические указания по 
дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации 
изделий медицинского назначения».
411. Удалять неиспользованные реактивы в 
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 
«Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с 
медицинскими отходами».
4.12. Все использованные одноразовые материалы и 
остатки ' образцов должны быть подвергнуты обработке 
дезинфицирующими средствами с последующей утилизацией 
в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790- 
«Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с 
медицинскими отходами» и МУ-287-113 «Методические 
указания по дезинфекции, предстерилизационнои очистке и 
стерилизации изделий медицинского назначения».
4.13. После использования стрипы, контрольные или 
калибровочные пробы, образцы и все расходные материалы, 
которые контактировали с образцами во время обработки, 
хранения или анализа (флаконы, перчатки, наконечники и 
т.д.) должны собираться отдельно и стерилизоваться в 
автоклаве ,^с последующей утилизацией в соответствии с 
требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10. Вместо 
автоклавирования наконечники могут быть стерилизованы 
дезинфицирующим средством, после утилизированы в 
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10.
94796
26.11.2020


--- стр. 17 ---
итИФ А-HBsAg сенс В-1.2018-12
4.14. Во время процедуры ручной промывки планшета 
/одержимое лунок необходимо выбрасывать в контейнер с 
г/^езинфицирующим раствором на основе третичных аминов, 
ЧАС или спиртов.
4.15. Не использовать набор по истечении срока 
годности.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
• спектрофотометр вертикального сканирования, 
позволяющий измерять оптическую плотность раствора в 
лунках при длинах волн 450 нм и 600-655 нм^;
• прибор для встряхивания рамки со стрипами 
(термостатируемый шейкер), позволяющий производить 
встряхивание со скоростью 400—800 об/мин при температуре 
+37...42°СЗ;
• автоматическое промывочное устройство (вошер) для 
иммунологических планшетов^’" ^ ;
• пипетки полуавтоматические одноканальные со 
сменными одноразовыми наконечниками^ с изменяемым 
объемом отбора жидкостей: на 5-50 мкл; на 20-200 мкл; на 
100-1000 мкл; на 1000-5000 мкл;
• пипетка полуавтоматическая восьмиканальная со 
сменными одноразовыми наконечниками^, позволяющая 
отбирать объемы жидкости до 300 мкл;
^Допускается использование автоматических анализаторов для ИФА открытого типа с 
аналогичными характеристиками, за информацией о необходимой комплектации набора и  
программе проведения анализа обращайтесь к производителю набора «ГепатитИФА-HBsAg 
сенс» в ООО «Компания Алкор Био», тел/факс; (812) 677-8779.
'‘При использовании автоматического промывочного устройства4 1еобходимо тщательно следить 
за его состоянием, периодически проверять емкости и соединительные шланги для 
промывочных буферов на наличие микробиологического зароста и других загрязнений, 
проводить техническое обслуживание в соответствии с рекомендациями производителя 
оборудования.
^Повторное использование наконечников не допускается. При внесении каждого ооразца 
необходимо использовать новый наконечник.
94796
26.11.2020


--- стр. 18 ---
в^тИ Ф А -HBsAg сенс
Т  • цилиндр мерный, позволяющий отмерять 100-1000 мл; 
/  • стакан стеклянный подходящего объема;
/  • вода дистиллированная или очищенная
/  деионизованная®;
I • бумага фильтровальная;
• перчатки резиновые или пластиковые;
• дезинфицирующий раствор на основе третичных 
аминов, ЧАС или спиртов;
• контейнер для дезинфекции;
• ванночки для внесения реагентов восьмиканальной 
пипеткой.
Дополнительно для проведения анализа в термостате:
• термостат®, поддерживающий температуру +37°С.
Дополнительно для проведения анализа на анализаторе
«Alisei»:
иммуноферментный анализатор• автоматический 
«Alisei»®;
• многоцелевые полипропиленовые пробирки^ 12x75 
вместимостью 5 мл;
• концентрированный водный раствор Триала, 
5000-кратный концентрат, маркирован «Триал»^.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
6.1. Эквивалентность образцов сыворотки и плазмы 
крови человека, содержащих антикоагулянты (цитрат натрия 
3,2%, литиевая соль гепарина, натриевая соль гепарина, 
КгЭДТА, КзЭДТА), подтверждена не менее чем на 25 
положительных и 25 отрицательных образцах каждого вида
соответствии с ГОСТ 6709-72 «Вода дистиллированная. Технические условия» необходимо 
периодически контролировать качество воды, используемой для приготовления растворов. 
^Компоненты, не входящие в состав набора, поставляются по отдельному заказу.
94796
26.11.2020


--- стр. 20 ---
атитИФА-HBsAg сенс В-1.2018-12
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Подготовка реагентов
7.1.1. Стрипы. Перед вскрытием пакет со стрипами 
необходимо выдержать при комнатной температуре 
(+18...25°С) (далее КТ) не менее 30 минут. Вскрыть пакет и 
переставить на свободную рамку необходимое количество 
Стрипов.
7.1.2. Контрольные пробы готовы к использованию.
7.1.3. Конъюгат Е1 готов к использованию.
7.1.4. Буфер Е2 готов к использованию.
7.1.5. Конъюгат Е2. Непосредственно перед анализом  
необходимое количество Конъюгата Е2 (10Х) развести 
Буфером Е2 в 10 раз.
Например: 200 мкл Конъюгата Е2 (10Х) + 1,8 мл Буфера 
Е2. Тщательно перемешать, избегая пенообразования.
7.1.6. Промывочный раствор. Необходимое количество 
буфера Н (20Х) развести дистиллированной или очищенной 
деионизованной водой в 20 раз.
Например: 50 мл буфера Н (20Х) + 950 мл воды. 
Тщательно перемешать, избегая пенообразования.
7.1.7. Раствор тетраметилбензидина (ТМБ) готов к 
использованию.
7.1.8. Стоп-реагент готов к использованию.
7.1.9. Рабочий раствор Триала. Необходимое количество 
концентрированного раствора Триала развести 
дистиллировэнной или очищенной деионизованной водой в 
5000 раз.
Например: 1  мл Триала + 4999 мл воды. Тщательно 
перемешать, избегая пенообразования.
7.1.10. Все реагенты перед проведением анализа должны 
быть тщательно перемешаны и доведены до КТ.
94796
26.11.2020


--- стр. 21 ---
игитИФА-НВзАд сенс В-1.2018-12
7.2. Постановка анализа
7.2.1. Ручная постановка
На странице 32 приведена схема проведения анализа.
7.2.1.1. Составить протокол маркировки лунок. Лунки 
промаркировать следующим образом®:
А1 -  № 1  - для измерения величины ОП раствора ТМБ^;
А2, В1, В2 -  № 2 - для измерения величины ОП ОКП;
С1,  С2 -  № 3 - для измерения величины ОП СКП;
D1, D2 -  № 4 - для измерения величины ОП ПКП.
Примечание: Рекомендовано проведение анализа в  
дубликатах, э т о  позволяет уменьшить вероятность  
ошибок и получить достоверные результаты . Допускается  
использование набора для анализа образцов в монопликатах  
при условии своевременной поверки и обслуживания  
измерительного и промывочного оборудования, что  
позволяет в случае неисправности свести к минимуму их  
негативное влияние на результат анализа.
7.2.1.2. Внести во все лунки, кроме А1, по 25 мкл 
конъюгата Е1.
7.2.1.3. Внести в соответствующие лунки по 100 мкл 
контрольных проб, в оставшиеся лунки -  по 100 мкл 
исследуемых образцов.
Примечание: В наборе «ГэпатитИФА-НВзАд сенс»  
общее время внесения контрольных проб и исследуемых  
образцов не должно превышать 15 минут, иначе время  
инкубации различных образцов будет значительно  
различаться, что  приведет к неправильным результатам.
7.2.1.4. Инкубировать стрипы. Возможны 2 варианта 
инкубации:
®  Допускается внесение ОКП в дубликатах, СКП и ПКП -  в монопликатах.
^  При настройке спектрофотометра «по воздуху» допускается не проводить измерение ОП 
раствора ТМБ.
94796
26.11.2020


--- стр. 22 ---
Инкубирование стрипов в течение 40 минут с  
/шейкированием в термостатируемом шейкере при  
температуре +37...42°С со скоростью 400-800 об/мин;
Инкубирование стрипов в течение 80 мин в  
термостате при температуре +37°С без шейкирования  
(предварительно встряхнуть рамку аккуратным 
простукиванием в течение 20-30 сек или на шейкере в 
течение 5-10 секунд при комнатной температуре);
7.2.1.5. ПО окончании первой инкубации без промывки и  
не удаляя содержимого лунок во все лунки, кроме А1, 
немедленно внести по 50 мкл рабочего раствора конъюгата 
Е2, приготовленного по п.7.1.5.
7.2.1.6. Инкубировать стрипы. Возможны 2 варианта 
инкубации:
• Инкубирование стрипов в течение 20 минут с  
шейкированием в термостатируемом шейкере при  
температуре +37...42°С со скоростью 400-800 об/мин;
• Инкубирование стрипов в течение 20 мин в  
термостате при температуре +37°С без шейкирования  
(предварительно встряхнуть рамку аккуратным 
простукиванием в течение 20-30 секунд или на шейкере в 
течение 5-10 секунд при комнатной температуре).
Примечание: Инкубацию №2 следует проводить в  
условиях аналогичных инкубации №1 (с шейкированием или  
без шейкирования).
7.2.1.7. ^0 окончании второй инкубации удалить 
содержимое лунок в контейнер с дезинфицирующим 
раствором на основе третичных аминов,.-ЧАС или спиртов и 
промыть лунки 8 раз. При каждой промывке во все лунки 
добавлять по 300 мкл промывочного раствора, 
приготовленного по п.7.1.6., выдержать в течение 30 секунд
94796
26.11.2020